期刊导航
期刊开放获取
上海教育软件发展有限公..
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
2
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶大亚单位DNA结合能力的测定
被引量：
2
1
作者
申晓冬
张克斌
+6 位作者
李明
周莹冰
蹇锐
胡晓梅
陈志瑾
饶贤才
胡福泉
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第22期2205-2208,共4页
目的检测铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶大亚单位与噬菌体基因组末端cos位点的结合能力。方法通过PCR扩增出末端酶大亚单位编码基因tls,经pMD-T18载体克隆至表达载体pQE31上,IPTG诱导表达,获得包涵体蛋白,用包涵体裂解液溶解包涵体,通过N...
目的检测铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶大亚单位与噬菌体基因组末端cos位点的结合能力。方法通过PCR扩增出末端酶大亚单位编码基因tls,经pMD-T18载体克隆至表达载体pQE31上,IPTG诱导表达,获得包涵体蛋白,用包涵体裂解液溶解包涵体,通过Ni-NTA亲和层析,分离出重组目的蛋白rTLS,透析复性后,与生物素标记的基因组末端cos片段进行结合反应,通过EMSA检测DNA滞后现象。结果成功构建了表达载体pQE-tls,获得了纯化的具有生物学活性的重组末端酶大亚单位rTLS,EMSA结果证实结合rTLS后的cos片段与无蛋白加入的对照组相比明显滞后。结论重组噬菌体PaP3末端酶大亚单位在体外可与基因组末端cos片段发生特异性结合,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。
展开更多
关键词
末端酶大亚单位
噬菌体PaP3
EMSA
蛋白表达
在线阅读
下载PDF
职称材料
噬菌体PaP3推定基因tls核酸内切酶活性的初步验证
被引量：
2
2
作者
申晓冬
胡福泉
+3 位作者
李明
胡晓梅
周莹冰
张克斌
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期196-198,共3页
目的对BLAST推定的铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的tls基因功能进行实验验证。方法采用PCR方法从噬菌体PaP3基因组扩增出tls基因,克隆至pMD18-T载体中,再经酶切纯化后将目的基因插入表达载体pQE31,转化入大肠杆菌JM109,IPTG诱导表达目的蛋白,...
目的对BLAST推定的铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的tls基因功能进行实验验证。方法采用PCR方法从噬菌体PaP3基因组扩增出tls基因,克隆至pMD18-T载体中,再经酶切纯化后将目的基因插入表达载体pQE31,转化入大肠杆菌JM109,IPTG诱导表达目的蛋白,超声裂菌后收集包涵体,并用裂解缓冲液溶解包涵体蛋白。然后利用Ni-NTA亲合层析纯化蛋白,通过透析使H6-TLS复性。最后构建含有末端酶大亚基酶切位点的底物质粒pMD-cos,检测复性蛋白活性。结果通过上述方法,成功构建了pQE-tls表达载体,融合蛋白H6-TLS表达量占菌体总量的30%。同时成功构建了目的蛋白的底物质粒pMD-cos。经由亲和层析初步纯化及透析复性后,H6-TLS可检测出核酸内切酶的活性,能将底物质粒部分线性化。结论成功地获得了具有内切酶活性的H6-TLS融合蛋白,为tls基因的认证提供了实验证据,为进一步鉴定和利用该基因奠定了基础。
展开更多
关键词
末端酶大亚单位
细菌噬菌体PaP3
基因表达
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶大亚单位DNA结合能力的测定
被引量：
2
1
作者
申晓冬
张克斌
李明
周莹冰
蹇锐
胡晓梅
陈志瑾
饶贤才
胡福泉
机构
第三军医大学基础医学部微生物学教研室
第三军医大学新桥医院医学实验技术中心
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第22期2205-2208,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30470082)~~
文摘
目的检测铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶大亚单位与噬菌体基因组末端cos位点的结合能力。方法通过PCR扩增出末端酶大亚单位编码基因tls,经pMD-T18载体克隆至表达载体pQE31上,IPTG诱导表达,获得包涵体蛋白,用包涵体裂解液溶解包涵体,通过Ni-NTA亲和层析,分离出重组目的蛋白rTLS,透析复性后,与生物素标记的基因组末端cos片段进行结合反应,通过EMSA检测DNA滞后现象。结果成功构建了表达载体pQE-tls,获得了纯化的具有生物学活性的重组末端酶大亚单位rTLS,EMSA结果证实结合rTLS后的cos片段与无蛋白加入的对照组相比明显滞后。结论重组噬菌体PaP3末端酶大亚单位在体外可与基因组末端cos片段发生特异性结合,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础。
关键词
末端酶大亚单位
噬菌体PaP3
EMSA
蛋白表达
Keywords
terminase large subunit
bacteriophage PAP3
EMSA
protein expression
分类号
Q55 [生物学—生物化学]
Q782 [生物学—分子生物学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
噬菌体PaP3推定基因tls核酸内切酶活性的初步验证
被引量：
2
2
作者
申晓冬
胡福泉
李明
胡晓梅
周莹冰
张克斌
机构
第三军医大学基础医学部微生物学教研室
新桥医院医学实验技术中心
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期196-198,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(30470082)
文摘
目的对BLAST推定的铜绿假单胞菌噬菌体PaP3的tls基因功能进行实验验证。方法采用PCR方法从噬菌体PaP3基因组扩增出tls基因,克隆至pMD18-T载体中,再经酶切纯化后将目的基因插入表达载体pQE31,转化入大肠杆菌JM109,IPTG诱导表达目的蛋白,超声裂菌后收集包涵体,并用裂解缓冲液溶解包涵体蛋白。然后利用Ni-NTA亲合层析纯化蛋白,通过透析使H6-TLS复性。最后构建含有末端酶大亚基酶切位点的底物质粒pMD-cos,检测复性蛋白活性。结果通过上述方法,成功构建了pQE-tls表达载体,融合蛋白H6-TLS表达量占菌体总量的30%。同时成功构建了目的蛋白的底物质粒pMD-cos。经由亲和层析初步纯化及透析复性后,H6-TLS可检测出核酸内切酶的活性,能将底物质粒部分线性化。结论成功地获得了具有内切酶活性的H6-TLS融合蛋白,为tls基因的认证提供了实验证据,为进一步鉴定和利用该基因奠定了基础。
关键词
末端酶大亚单位
细菌噬菌体PaP3
基因表达
Keywords
terminase large subunit
bacteriophage PaP3
gene expression
分类号
R394.8 [医药卫生—医学遗传学]
在线阅读
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
铜绿假单胞菌噬菌体PaP3末端酶大亚单位DNA结合能力的测定
申晓冬
张克斌
李明
周莹冰
蹇锐
胡晓梅
陈志瑾
饶贤才
胡福泉
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
噬菌体PaP3推定基因tls核酸内切酶活性的初步验证
申晓冬
胡福泉
李明
胡晓梅
周莹冰
张克斌
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
