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端粒酶启动子肿瘤靶向TNF相关凋亡诱导配体基因抗大肠癌细胞HT-29的活性研究
被引量：
2
1
作者
陈斌
何超
+2 位作者
劳伟峰
黄学锋
方炳良
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
2006年第1期45-49,共5页
目的:探讨在端粒酶(hTERT)启动子驱动下TRA IL基因在大肠癌细胞HT-29的表达及其杀细胞作用。方法:通过腺病毒载体系统将hTERT启动子驱动的TNF相关凋亡诱导配体(TRA IL)基因转入大肠癌细胞HT-29,流式细胞仪检测GFP/TRA IL的表达和HT-29...
目的:探讨在端粒酶(hTERT)启动子驱动下TRA IL基因在大肠癌细胞HT-29的表达及其杀细胞作用。方法:通过腺病毒载体系统将hTERT启动子驱动的TNF相关凋亡诱导配体(TRA IL)基因转入大肠癌细胞HT-29,流式细胞仪检测GFP/TRA IL的表达和HT-29细胞凋亡率。结果:端粒酶启动子驱动的GFP/TRA IL基因和CMV启动子驱动的GFP(绿色荧光蛋白)基因在HT-29内的表达率分别达31.4%和67.0%;GFP/TRA IL基因对HT-29细胞的生长抑制率和凋亡率分别达74.2%和25.8%,与PBS和A d/CMV-GFP比差异都有显著性意义(P<0.05)。结论:端粒酶启动子驱动的GFP/TRA IL融合基因能在大肠癌细胞中有效表达;TRA IL基因对大肠癌细胞HT-29有明显的抑制生长和促凋亡作用。
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关键词
肿瘤坏死因子/分析
端粒
末端转移酶/遗传学
肿瘤细胞
培养的
蛋白质类/化学
结肠直肠肿瘤/病理学
基因疗法
细胞凋亡
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职称材料
hTERT核心启动子驱动的条件复制型腺病毒载体的构建及鉴定
被引量：
1
2
作者
倪芳
鲁茁壮
+3 位作者
瞿成奎
胡泽斌
王立生
汪思应
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2006年第1期19-22,共4页
目的构建并鉴定一种新型人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子驱动的条件复制型腺病毒载体。方法采用PCR的方法克隆腺病毒E1区基因(E1A,E1B55K)、E1B的启动子(E1Bp)以及人端粒酶逆转录酶亚基启动子(hTERTp),以及2个目的基因:人GM-CSF和GFP(Gre...
目的构建并鉴定一种新型人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子驱动的条件复制型腺病毒载体。方法采用PCR的方法克隆腺病毒E1区基因(E1A,E1B55K)、E1B的启动子(E1Bp)以及人端粒酶逆转录酶亚基启动子(hTERTp),以及2个目的基因:人GM-CSF和GFP(GreenFluorescenceProtein,GFP)。采用一系列分子生物学方法构建pShuttle-GFPSV55K穿梭质粒,应用此穿梭质粒与AdEasy-1腺病毒DNA在BJ5183细菌内重组得到重组腺病毒质粒,将其转染293细胞获得Ad-GFPSV55K重组腺病毒。PCR法鉴定重组腺病毒,噬斑形成实验测病毒滴度。结果经过酶切鉴定成功地构建了分别携带GM-CSF基因和GFP报告基因的腺病毒载体,病毒滴度为7×1010pfu/ml。结论成功获得由hTERT启动子驱动的条件复制型腺病毒载体,为肿瘤的基因治疗打下良好的基础。
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关键词
末端转移酶/遗传学
腺病毒科
发光蛋白质类
/遗传学
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职称材料
题名
端粒酶启动子肿瘤靶向TNF相关凋亡诱导配体基因抗大肠癌细胞HT-29的活性研究
被引量：
2
1
作者
陈斌
何超
劳伟峰
黄学锋
方炳良
机构
浙江大学医学院附属邵逸夫医院
美国MD Anderson癌症中心
出处
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
2006年第1期45-49,共5页
基金
国家自然科学基金(30271467)
文摘
目的:探讨在端粒酶(hTERT)启动子驱动下TRA IL基因在大肠癌细胞HT-29的表达及其杀细胞作用。方法:通过腺病毒载体系统将hTERT启动子驱动的TNF相关凋亡诱导配体(TRA IL)基因转入大肠癌细胞HT-29,流式细胞仪检测GFP/TRA IL的表达和HT-29细胞凋亡率。结果:端粒酶启动子驱动的GFP/TRA IL基因和CMV启动子驱动的GFP(绿色荧光蛋白)基因在HT-29内的表达率分别达31.4%和67.0%;GFP/TRA IL基因对HT-29细胞的生长抑制率和凋亡率分别达74.2%和25.8%,与PBS和A d/CMV-GFP比差异都有显著性意义(P<0.05)。结论:端粒酶启动子驱动的GFP/TRA IL融合基因能在大肠癌细胞中有效表达;TRA IL基因对大肠癌细胞HT-29有明显的抑制生长和促凋亡作用。
关键词
肿瘤坏死因子/分析
端粒
末端转移酶/遗传学
肿瘤细胞
培养的
蛋白质类/化学
结肠直肠肿瘤/病理学
基因疗法
细胞凋亡
Keywords
Tumor necrosis factor/anal
Telomerase/genet
Tumor cells,cultured
Proteins/chem
Colorectal neoplasms/pathol
Gene therapy
Apoptosis
分类号
R735.34 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
hTERT核心启动子驱动的条件复制型腺病毒载体的构建及鉴定
被引量：
1
2
作者
倪芳
鲁茁壮
瞿成奎
胡泽斌
王立生
汪思应
机构
安徽医科大学病理生理学教研室
军事医学科学院放射医学研究所
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2006年第1期19-22,共4页
基金
国家973课题(编号:2004CB518801)
国家自然科学基金资助(编号:30470735)
安徽省人才开发基金资助(编号:2002Z035)
文摘
目的构建并鉴定一种新型人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子驱动的条件复制型腺病毒载体。方法采用PCR的方法克隆腺病毒E1区基因(E1A,E1B55K)、E1B的启动子(E1Bp)以及人端粒酶逆转录酶亚基启动子(hTERTp),以及2个目的基因:人GM-CSF和GFP(GreenFluorescenceProtein,GFP)。采用一系列分子生物学方法构建pShuttle-GFPSV55K穿梭质粒,应用此穿梭质粒与AdEasy-1腺病毒DNA在BJ5183细菌内重组得到重组腺病毒质粒,将其转染293细胞获得Ad-GFPSV55K重组腺病毒。PCR法鉴定重组腺病毒,噬斑形成实验测病毒滴度。结果经过酶切鉴定成功地构建了分别携带GM-CSF基因和GFP报告基因的腺病毒载体,病毒滴度为7×1010pfu/ml。结论成功获得由hTERT启动子驱动的条件复制型腺病毒载体,为肿瘤的基因治疗打下良好的基础。
关键词
末端转移酶/遗传学
腺病毒科
发光蛋白质类
/遗传学
Keywords
telomerase/genetics
adenoviridae
luminescent proteins/genetics
分类号
R345.9 [医药卫生—基础医学]
R373.1 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
端粒酶启动子肿瘤靶向TNF相关凋亡诱导配体基因抗大肠癌细胞HT-29的活性研究
陈斌
何超
劳伟峰
黄学锋
方炳良
《浙江大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
2006
2
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职称材料
2
hTERT核心启动子驱动的条件复制型腺病毒载体的构建及鉴定
倪芳
鲁茁壮
瞿成奎
胡泽斌
王立生
汪思应
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2006
1
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职称材料
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