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Pichia stipitis木糖醇脱氢酶基因XYL2在酿酒酵母中的表达
被引量：
5
1
作者
陈叶福
王正祥
+1 位作者
方慧英
诸葛健
《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》
CSCD
北大核心
2003年第2期26-29,共4页
通过PCR方法克隆得到树干毕赤氏酵母木糖醇脱氢酶(XDH)基因XYL2.将该基因连入酵母表达载体pYX212的强启动子磷酸丙糖异构酶(TPI)启动子下,得到融合表达载体pYX-XYL2.通过电转化方法将pYX-XYL2转入酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae W303...
通过PCR方法克隆得到树干毕赤氏酵母木糖醇脱氢酶(XDH)基因XYL2.将该基因连入酵母表达载体pYX212的强启动子磷酸丙糖异构酶(TPI)启动子下,得到融合表达载体pYX-XYL2.通过电转化方法将pYX-XYL2转入酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae W303-1A中,酶活测定表明在酿酒酵母中树干毕赤氏酵母木糖醇脱氢酶基因XYL2得到活性表达,酿酒酵母转化子粗酶液中木糖醇脱氢酶比活为每毫克蛋白0.6 U左右,约为供体菌的2.4倍.与基因供体菌不同,木糖醇脱氢酶基因在酿酒酵母中表达不需木糖诱导,为组成型表达.
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关键词
树干毕赤氏酵母
木糖醇脱氢酶基因
XYL2
酿酒酵母
基因
表达
在线阅读
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职称材料
代谢木糖和葡萄糖的重组酿酒酵母的构建
被引量：
4
2
作者
刘继开
田沈
+2 位作者
张亚珍
张金鑫
杨秀山
《可再生能源》
CAS
2007年第1期13-16,共4页
采用RT-PCR的方法克隆得到Candida shehatae木糖还原酶基因xyl1,将该基因插入到含有强启动子ADH1的穿梭质粒pACT2中,用同样的方法克隆得到Pichia stipitis的木糖醇脱氢酶基因xyl2,将该基因插入到含有强启动子PMA1的穿梭质粒pDR195中,两...
采用RT-PCR的方法克隆得到Candida shehatae木糖还原酶基因xyl1,将该基因插入到含有强启动子ADH1的穿梭质粒pACT2中,用同样的方法克隆得到Pichia stipitis的木糖醇脱氢酶基因xyl2,将该基因插入到含有强启动子PMA1的穿梭质粒pDR195中,两套外源基因连同各自的启动子和终止子将连接到酵母整合质粒YIp5-kanR中,并预期整合到酿酒酵母的基因组当中,从而构建代谢木糖和葡萄糖的重组酿酒酵母。
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关键词
重组酵母菌
乙醇
木
糖
染色体整合
木
糖还原
酶
基因
木糖醇脱氢酶基因
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职称材料
代谢木糖重组酿酒酵母的初步构建
被引量：
1
3
作者
张金鑫
张亚珍
+3 位作者
杨忞
李颖
高文
杨秀山
《可再生能源》
CAS
2008年第2期35-39,共5页
为使酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)代谢木糖产乙醇,须要在酿酒酵母胞内表达木糖代谢途径的关键酶基因——木糖还原酶基因xyl1和木糖醇脱氢酶基因xyl2,这2种酶基因的相对表达水平对乙醇的产生和木糖醇的积累具有重要影响。该研究...
为使酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)代谢木糖产乙醇,须要在酿酒酵母胞内表达木糖代谢途径的关键酶基因——木糖还原酶基因xyl1和木糖醇脱氢酶基因xyl2,这2种酶基因的相对表达水平对乙醇的产生和木糖醇的积累具有重要影响。该研究初步构建了含有诱导型启动子控制的木糖还原酶基因xyl1的酵母表达载体pYes2-xyl1和含有组成型强启动子控制的木糖醇脱氢酶基因xyl2的酵母表达载体pDR195-xyl2,同时,在国内首次克隆出热带假丝酵母(Candida tropicalis)的木糖醇脱氢酶基因。这2个表达载体的构建为后续重组酵母的构建提供了重要基础。
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关键词
重组酿酒酵母
木
糖
乙醇
木
糖还原
酶
基因
木糖醇脱氢酶基因
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职称材料
题名
Pichia stipitis木糖醇脱氢酶基因XYL2在酿酒酵母中的表达
被引量：
5
1
作者
陈叶福
王正祥
方慧英
诸葛健
机构
江南大学生物工程学院
出处
《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》
CSCD
北大核心
2003年第2期26-29,共4页
文摘
通过PCR方法克隆得到树干毕赤氏酵母木糖醇脱氢酶(XDH)基因XYL2.将该基因连入酵母表达载体pYX212的强启动子磷酸丙糖异构酶(TPI)启动子下,得到融合表达载体pYX-XYL2.通过电转化方法将pYX-XYL2转入酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae W303-1A中,酶活测定表明在酿酒酵母中树干毕赤氏酵母木糖醇脱氢酶基因XYL2得到活性表达,酿酒酵母转化子粗酶液中木糖醇脱氢酶比活为每毫克蛋白0.6 U左右,约为供体菌的2.4倍.与基因供体菌不同,木糖醇脱氢酶基因在酿酒酵母中表达不需木糖诱导,为组成型表达.
关键词
树干毕赤氏酵母
木糖醇脱氢酶基因
XYL2
酿酒酵母
基因
表达
Keywords
Pichia stipitis
xylitol dehydrogenase gene XYL2
Saccharomyces cerevisiae
gene expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
代谢木糖和葡萄糖的重组酿酒酵母的构建
被引量：
4
2
作者
刘继开
田沈
张亚珍
张金鑫
杨秀山
机构
首都师范大学生命科学学院
出处
《可再生能源》
CAS
2007年第1期13-16,共4页
基金
国家863计划资助项目(2002AA514010
2001AA514024)
文摘
采用RT-PCR的方法克隆得到Candida shehatae木糖还原酶基因xyl1,将该基因插入到含有强启动子ADH1的穿梭质粒pACT2中,用同样的方法克隆得到Pichia stipitis的木糖醇脱氢酶基因xyl2,将该基因插入到含有强启动子PMA1的穿梭质粒pDR195中,两套外源基因连同各自的启动子和终止子将连接到酵母整合质粒YIp5-kanR中,并预期整合到酿酒酵母的基因组当中,从而构建代谢木糖和葡萄糖的重组酿酒酵母。
关键词
重组酵母菌
乙醇
木
糖
染色体整合
木
糖还原
酶
基因
木糖醇脱氢酶基因
Keywords
recombinant yeast
ethanol
xylose
chromosome integration
xyl1
xyl2
分类号
Q291 [生物学—细胞生物学]
Q933 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
代谢木糖重组酿酒酵母的初步构建
被引量：
1
3
作者
张金鑫
张亚珍
杨忞
李颖
高文
杨秀山
机构
首都师范大学生命科学学院
出处
《可再生能源》
CAS
2008年第2期35-39,共5页
基金
国家"863"计划资助项目(2002AA514010
2001AA514024)
文摘
为使酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)代谢木糖产乙醇,须要在酿酒酵母胞内表达木糖代谢途径的关键酶基因——木糖还原酶基因xyl1和木糖醇脱氢酶基因xyl2,这2种酶基因的相对表达水平对乙醇的产生和木糖醇的积累具有重要影响。该研究初步构建了含有诱导型启动子控制的木糖还原酶基因xyl1的酵母表达载体pYes2-xyl1和含有组成型强启动子控制的木糖醇脱氢酶基因xyl2的酵母表达载体pDR195-xyl2,同时,在国内首次克隆出热带假丝酵母(Candida tropicalis)的木糖醇脱氢酶基因。这2个表达载体的构建为后续重组酵母的构建提供了重要基础。
关键词
重组酿酒酵母
木
糖
乙醇
木
糖还原
酶
基因
木糖醇脱氢酶基因
Keywords
recombinant Saccharomyces cerevisiae
Xylose
ethanol
xyl1
xyl2
分类号
Q291 [生物学—细胞生物学]
Q933 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Pichia stipitis木糖醇脱氢酶基因XYL2在酿酒酵母中的表达
陈叶福
王正祥
方慧英
诸葛健
《无锡轻工大学学报（食品与生物技术）》
CSCD
北大核心
2003
5
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下载PDF
职称材料
2
代谢木糖和葡萄糖的重组酿酒酵母的构建
刘继开
田沈
张亚珍
张金鑫
杨秀山
《可再生能源》
CAS
2007
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
代谢木糖重组酿酒酵母的初步构建
张金鑫
张亚珍
杨忞
李颖
高文
杨秀山
《可再生能源》
CAS
2008
1
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