检索结果-维普期刊中文期刊服务平台

以木糖异构酶基因作为选择标记的花生遗传转化被引量：11: 1; 作者丁霄隋炯明 +1 位作者王晶珊乔利仙《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期444-448,483,共6页; 用木糖异构酶基因xylA替换掉pCAMBIA1301中的潮霉素磷酸转移酶基因(hygromycin-B-phosphotransferase,Hpt),构建了植物表达载体pCAMBIA1301-xylA。再利用农杆菌介导法将pCAMBIA1301-xylA导入花生,转移到添加蔗糖(5g/L)和不同浓度木糖(5,... 展开更多; 关键词花生木糖异构酶基因农杆菌介导法遗传转化; 在线阅读下载PDF 职称材料

启动子对木糖异构酶基因在谷氨酸棒杆菌中表达的影响被引量：3: 2; 作者杨柳许敬亮 +1 位作者陈小燕袁振宏《新能源进展》 2014年第5期353-357,共5页; 以大肠杆菌的强启动子Ptrc和谷氨酸棒杆菌ATCC 13032的内源强启动子Pgro作为大肠杆菌的木糖异构酶基因xylA在谷氨酸棒杆菌中表达的转录起始元件,通过实验表明谷氨酸棒杆菌自身的强启动子Pgro能有效促使外源基因xylA在谷氨酸棒杆菌ATCC 1... 展开更多; 关键词谷氨酸棒杆菌木糖异构酶基因穿梭表达载体启动子核糖体结合位点; 在线阅读下载PDF 职称材料

木糖异构酶基因xylA的克隆及其表达载体的构建被引量：1: 3; 作者孙磊张国军 +1 位作者闫爱玲徐海英《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期167-170,共4页; 木糖异构酶基因xylA是一种正向选择标记基因,在植物基因工程中使用该标记可以获得安全的转基因植物。构建了以xylA基因为选择标记的植物表达载体。从大肠杆菌Top10中扩增出xylA基因,插入到质粒pCAMBIA2301的XhoI位点,通过酶切和PCR检测... 展开更多; 关键词木糖异构酶基因标记基因植物表达载体克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

木糖异构酶基因xylA表达载体构建被引量：1: 4; 作者杨柳叶菁 +2 位作者陈小燕许敬亮袁振宏《微生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第3期9-13,共5页; 以大肠埃希菌MG1655的基因组为模板,通过PCR扩增获得木糖异构酶基因xylA。利用敲除编码对基因转录起负调控作用的lacIq基因的大肠埃希菌/谷氨酸棒杆菌穿梭质粒pEC-XK99E,酶连后转化大肠埃希菌BL21和谷氨酸棒杆菌ATCC 13032。成功构建出... 展开更多; 关键词谷氨酸棒杆菌木糖异构酶基因穿梭表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

木糖选择系统下xylA&BADH双价基因对二色胡枝子的遗传转化: 5; 作者杨晓红陈晓阳《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第6期74-84,共11页; 【目的】建立安全、无抗生素的二色胡枝子遗传转化体系,通过基因工程技术进一步提高二色胡枝子的抗逆性。【方法】采用PCR法从大肠杆菌DH5α菌株中克隆木糖异构酶基因(xylA);构建含有xylA和甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)的植物表达载体pBI12... 展开更多; 关键词二色胡枝子遗传转化甜菜碱醛脱氢酶基因木糖异构酶基因木糖选择; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名以木糖异构酶基因作为选择标记的花生遗传转化被引量：11: 1; 作者丁霄隋炯明王晶珊乔利仙; 机构青岛农业大学生命科学学院/山东省高校植物生物技术重点实验室; 出处《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期444-448,483,共6页; 基金山东省中青年科学家奖励基金(BS2009NY028) 国家自然科学基金(31101178 30871544); 文摘用木糖异构酶基因xylA替换掉pCAMBIA1301中的潮霉素磷酸转移酶基因(hygromycin-B-phosphotransferase,Hpt),构建了植物表达载体pCAMBIA1301-xylA。再利用农杆菌介导法将pCAMBIA1301-xylA导入花生,转移到添加蔗糖(5g/L)和不同浓度木糖(5,10,20,30g/L)的体胚诱导及体胚萌发培养基上培养。对外植体成苗率及转基因阳性率进行统计,结果表明,当木糖浓度为10g/L时,诱导成苗率为15.25%,再生植株生长健壮,且转基因阳性率高达77.27%,最终确定10g/L为最适木糖筛选浓度。该筛选方法利用木糖作为筛选剂,可以避免利用抗生素筛选可能造成的安全隐患,转化效率高,是一种安全、高效的筛选方法。; 关键词花生木糖异构酶基因农杆菌介导法遗传转化; Keywords peanut； xylose isomerase gene（xylA）； Agrobacterium-mediated method； genetic transformation；; 分类号 S565.2 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名启动子对木糖异构酶基因在谷氨酸棒杆菌中表达的影响被引量：3: 2; 作者杨柳许敬亮陈小燕袁振宏; 机构中国科学院广州能源研究所中国科学院大学; 出处《新能源进展》 2014年第5期353-357,共5页; 基金国家自然科学基金(2117623和21211140237) 国家高技术研究发展计划(863计划 +2 种基金 2013AA065803) 中科院院地合作项目广州市科技攻关项目(2013J4300026); 文摘以大肠杆菌的强启动子Ptrc和谷氨酸棒杆菌ATCC 13032的内源强启动子Pgro作为大肠杆菌的木糖异构酶基因xylA在谷氨酸棒杆菌中表达的转录起始元件,通过实验表明谷氨酸棒杆菌自身的强启动子Pgro能有效促使外源基因xylA在谷氨酸棒杆菌ATCC 13032中的表达,同时,核糖体结合位点RBS序列的优化对目的基因的表达水平有一定的影响。; 关键词谷氨酸棒杆菌木糖异构酶基因穿梭表达载体启动子核糖体结合位点; Keywords Corynebacterium glutamicum xylose isomerase gene shuttle vector promoter ribosome binding site; 分类号 TK6 [动力工程及工程热物理—生物能] Q503 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名木糖异构酶基因xylA的克隆及其表达载体的构建被引量：1: 3; 作者孙磊张国军闫爱玲徐海英; 机构北京市农林科学院林业果树研究所; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期167-170,共4页; 基金现代农业产业技术体系建设专项资金项目(nycytx-30) 北京市优秀人才培养资助项目(20104D002020000007); 文摘木糖异构酶基因xylA是一种正向选择标记基因,在植物基因工程中使用该标记可以获得安全的转基因植物。构建了以xylA基因为选择标记的植物表达载体。从大肠杆菌Top10中扩增出xylA基因,插入到质粒pCAMBIA2301的XhoI位点,通过酶切和PCR检测插入片段的正确性,得到载体pCAMBIA2301-xylA,将pBI121载体上的‘35S-GUS-Nos’表达框插入到pCAMBIA2301-xylA的EcoR I和Hind III位点。得到中间载体pCAMBIA2301-xylA-GUS,用SacI和SmaI切下克隆载体上的CBF1基因替代pCAMBIA2301-xylA-GUS中的GUS片段,用电转化法将获得的表达载体转化到农杆菌中,为将来获得安全的转基因抗寒植株奠定基础。; 关键词木糖异构酶基因标记基因植物表达载体克隆; Keywords Xylose isomerase gene Marker gene Plant expression vector Cloning; 分类号 Q943.2 [生物学—植物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名木糖异构酶基因xylA表达载体构建被引量：1: 4; 作者杨柳叶菁陈小燕许敬亮袁振宏; 机构中国科学院广州能源研究所中国科学院可再生能源重点实验室中国科学院大学华中科技大学环境科学与工程学院; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2014年第3期9-13,共5页; 基金国家自然科学基金(2117623 21211140237) +2 种基金 013AA065803) 中科院院地合作项目和广州市科技攻关项目(7411842653379); 文摘以大肠埃希菌MG1655的基因组为模板,通过PCR扩增获得木糖异构酶基因xylA。利用敲除编码对基因转录起负调控作用的lacIq基因的大肠埃希菌/谷氨酸棒杆菌穿梭质粒pEC-XK99E,酶连后转化大肠埃希菌BL21和谷氨酸棒杆菌ATCC 13032。成功构建出了具有大肠埃希菌BL21表达活性的木糖异构酶表达载体pEC(lacI-)-xylA。; 关键词谷氨酸棒杆菌木糖异构酶基因穿梭表达载体; Keywords Corynebacterium glutamicum xylose isomerase gene shuttle expression vector; 分类号 Q503 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名木糖选择系统下xylA&BADH双价基因对二色胡枝子的遗传转化: 5; 作者杨晓红陈晓阳; 机构北京农学院园林学院华南农业大学林学院; 出处《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第6期74-84,共11页; 基金北京市教委科技项目(SQKM201810020013) 北京市教委创新团队项目(IDHT20180509) “863”国家高技术研究发展计划(2002AA241111)。; 文摘【目的】建立安全、无抗生素的二色胡枝子遗传转化体系,通过基因工程技术进一步提高二色胡枝子的抗逆性。【方法】采用PCR法从大肠杆菌DH5α菌株中克隆木糖异构酶基因(xylA);构建含有xylA和甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)的植物表达载体pBI121-xylA-BADH;培养基中用木糖取代一定量的蔗糖建立二色胡枝子的木糖选择系统;以农杆菌介导法对二色胡枝子的子叶节进行遗传转化,通过PCR和Southern检测确定转基因植株;对转化植株及非转化植株进行0.5~2 g·L^(-1)NaCl胁迫,观测植株生长表现,测定1 g·L^(-1)NaCl胁迫下转化植株和非转化植株的甜菜碱醛脱氢酶活性、叶绿素、电导率。提取转化植株及非转化植株组培苗叶片中的可溶性总糖,用高效液相色谱仪分析糖成分。【结果】测序结果表明,克隆的木糖异构酶基因与GenBank公布的大肠杆菌xylA核苷酸序列的同源性达到100%,PCR及酶切检测表明正确构建了pBI121-xylA-BADH植物表达载体。在二色胡枝子遗传转化过程中,应在纯木糖培养基上筛选抗性芽,在抗性芽增殖和生根过程中,可以采用蔗糖5 g·L^(-1)、木糖25 g·L^(-1)的糖类混合剂进行进一步筛选。在农杆菌介导的遗传转化中,外植体预培养1天后,采用LBA4404菌株侵染20~30 min,共培养3天,可以获得相对较多的木糖抗性芽。对获得的部分抗性芽进行PCR及Southern检测,得到2个转基因株系,二色胡枝子遗传转化率低于4.7%。耐盐性观测表明,转基因植株能够在含有2 g·L^(-1)NaCl的培养基上生长并生根,而非转基因植株在相同培养基上则叶子变黄、脱落,且不能生根。无盐胁迫时,转基因和非转基因植株在甜菜碱醛脱氢酶活性、叶绿素含量和电导率方面无显著性差异;盐胁迫后,非转基因植株的甜菜碱醛脱氢酶活性无明显变化,而转基因植株的甜菜碱醛脱氢酶活性大幅度提升,且达到非转基因植株的8~10倍;盐胁迫后,转基因植株的叶绿素含量显著高于非转基因植株,而电导率则显著低于非转基因植株。高效液相色谱的分析结果显示,转基因植株叶片中测出了果糖和葡萄糖,而非转基因植株叶片中测出了葡萄糖和一种未标示的糖类。【结论】建立了二色胡枝子在木糖选择系统下的遗传转化体系,并获得稳定表达的转基因植株。外源甜菜碱醛脱氢酶基因可提高二色胡枝子的耐盐性;来源于大肠杆菌的木糖异构酶基因的导入会影响二色胡枝子的糖代谢。; 关键词二色胡枝子遗传转化甜菜碱醛脱氢酶基因木糖异构酶基因木糖选择; Keywords Lespedeza bicolor genetic transformation betaine aldehyde dehydrogenase gene xylose isomerase gene xylose selection; 分类号 S718.46 [农业科学—林学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	以木糖异构酶基因作为选择标记的花生遗传转化	丁霄隋炯明王晶珊乔利仙	《核农学报》 CAS CSCD 北大核心	2012	11	在线阅读下载PDF 职称材料
2	启动子对木糖异构酶基因在谷氨酸棒杆菌中表达的影响	杨柳许敬亮陈小燕袁振宏	《新能源进展》	2014	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	木糖异构酶基因xylA的克隆及其表达载体的构建	孙磊张国军闫爱玲徐海英	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2011	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	木糖异构酶基因xylA表达载体构建	杨柳叶菁陈小燕许敬亮袁振宏	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	木糖选择系统下xylA&BADH双价基因对二色胡枝子的遗传转化	杨晓红陈晓阳	《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2021	0	在线阅读下载PDF 职称材料