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题名发酵五碳糖和六碳糖产乙醇染色体整合大肠杆菌的构建
被引量:5
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作者
高文
田沈
张晶
刘继开
张亚珍
杨秀山
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机构
首都师范大学生命科学学院
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出处
《可再生能源》
CAS
2007年第2期21-25,共5页
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基金
国家"863"课题资助项目(2002AA514010)
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文摘
为了保证外源基因表达的稳定性,减少发酵副产物的生成,根据同源重组原理,将大肠杆菌丙酮酸甲酸裂解酶pfl基因两侧的基因片段作为同源片断,构建了带有运动发酵单胞菌丙酮酸脱羧酶基因pdc和乙醇脱氢酶基因adhB的整合重组质粒PA-pfl,用化学法转入大肠杆菌TOP10的感受态细胞,将经过氨苄青霉素筛选得到的重组子进行PCR扩增,证明pdc和adhB基因整合到了大肠杆菌的染色体基因组丙酮酸甲酸裂解酶基因pfl位点上。乙醇发酵结果表明,重组菌E.coli TOP10-pfl不但能稳定地利用葡萄糖产乙醇,也能稳定地利用木糖产乙醇,在大肠杆菌中建立了一条新的代谢糖生成乙醇的途径。
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关键词
大肠杆菌
整合质粒
同源重组
葡萄糖和木糖的乙醇发酵
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Keywords
escheirchia coli
integrative plasmid
homologous recombination
ethanol fermentation of glucose and xylose
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分类号
TK6
[动力工程及工程热物理—生物能]
Q784
[生物学—分子生物学]
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题名利用96孔板和酿酒酵母生长圈复合筛选高产管囊酵母
被引量:3
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作者
蔡万华
丁少鹏
叶蕊芳
耿丽云
倪琳
苏阳措
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机构
华东理工大学生物反应器国家重点实验室
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出处
《酿酒科技》
2011年第4期36-38,共3页
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文摘
野生酿酒酵母不能利用木糖作为碳源,但是可以利用乙醇作为碳源和能源。管囊酵母可以利用木糖生产乙醇。酿酒酵母可以利用管囊酵母生产的乙醇作为碳源。本研究将管囊酵母进行紫外诱变后,利用96孔板培养,选取OD值较高的孔进行酿酒酵母生长圈筛选。管囊酵母在木糖(5%)为唯一碳源的YNB培养基上生长并产生乙醇。产生的乙醇越多,指示菌酿酒酵母的生长圈相对越大。利用酿酒酵母生长圈法筛选的正变率为35.22%,筛出1株菌UV171,乙醇产量为10.7 g/L,比对照高25.9%,对菌株UV171进行稳定性实验,传至3代其产量稳定。
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关键词
微生物
管囊酵母
96孔板培养
酿酒酵母生长圈
木糖乙醇发酵
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Keywords
mincrobe
pachysolen tannophilus
96-well plates
growth cycle of Saccharomyces cerevisiae
alcoholic xylose fermentation
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分类号
TS261.1
[轻工技术与工程—发酵工程]
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