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旋毛虫新生幼虫期特异性基因糖蛋白表达载体的构建 被引量:3
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作者 徐晓立 刘明远 +1 位作者 卢强 任瑞文 《塔里木农垦大学学报》 2002年第3期1-4,共4页
根据旋毛虫新生幼虫 (NBL)期特异性全长cDNASSC1基因序列 ,PCR扩增目的基因 ,克隆入pMD18T后 ,根据其读码框架 ,克隆入表达载体pET2 8b ,构建其原核表达载体pET2 8b -SSC1。分别用SalI和XhoI、SmaI和HindIII双酶切 ;XbaI单酶切鉴定重组... 根据旋毛虫新生幼虫 (NBL)期特异性全长cDNASSC1基因序列 ,PCR扩增目的基因 ,克隆入pMD18T后 ,根据其读码框架 ,克隆入表达载体pET2 8b ,构建其原核表达载体pET2 8b -SSC1。分别用SalI和XhoI、SmaI和HindIII双酶切 ;XbaI单酶切鉴定重组子 ,结果均与预期相符 ,进一步测序结果也表明重组载体读码框架正确 。 展开更多
关键词 糖蛋白表达载体 旋毛虫新生幼虫 期特异性基因 旋毛虫病
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旋毛虫期特异性基因的筛选与鉴定
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作者 姚春雨 汪明 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第10期68-70,共3页
对旋毛虫新生幼虫期特异性基因进行筛选与鉴定,结果表明:对新生幼虫cDNA文库进行核酸杂交筛选,获得7个阳性克隆,其大小在1.4 kb左右;用放射性同位素α-32P标记cDNA探针后,与旋毛虫成虫、肌幼虫、新生幼虫、成虫/新生幼虫cDNA文库质粒DN... 对旋毛虫新生幼虫期特异性基因进行筛选与鉴定,结果表明:对新生幼虫cDNA文库进行核酸杂交筛选,获得7个阳性克隆,其大小在1.4 kb左右;用放射性同位素α-32P标记cDNA探针后,与旋毛虫成虫、肌幼虫、新生幼虫、成虫/新生幼虫cDNA文库质粒DNA进行Southern印迹杂交,结果与成虫/新生幼虫、新生幼虫cDNA文库质粒DNA有杂交而与成虫、肌幼虫cDNA文库质粒DNA不杂交,因此该探针是新生幼虫期所特有的cDNA片段。 展开更多
关键词 旋毛虫 期特异性基因 筛选 鉴定
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旋毛虫新生幼虫cDNA文库构建及其特异性基因的筛选与鉴定
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作者 姚春雨 汪明 孙国权 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2008年第8期5-7,共3页
构建旋毛虫新生幼虫cDNA文库并对旋毛虫新生幼虫期特异性基因进行筛选与鉴定,筛选出期特异性的基因片段。用λZAPⅡ Express载体成功地构建了旋毛虫新生幼虫的cDNA文库,并用放射性同位素α-33P标记cDNA探针对筛选出的阳性克隆进行鉴... 构建旋毛虫新生幼虫cDNA文库并对旋毛虫新生幼虫期特异性基因进行筛选与鉴定,筛选出期特异性的基因片段。用λZAPⅡ Express载体成功地构建了旋毛虫新生幼虫的cDNA文库,并用放射性同位素α-33P标记cDNA探针对筛选出的阳性克隆进行鉴定。所构建的cDNA文库容量为1.92×10^6,重组效率为98.6%,所有的克隆片段都在0.5~2.0kb之间,筛选获得7个阳性克隆,其大小在1.4kb左右;用放射性同位素α-32P标记cDNA探针后,与旋毛虫成虫、肌幼虫、新生幼虫及成虫/新生幼虫cDNA文库质粒DNA进行Southern印迹杂交,结果与新生幼虫和成虫、新生幼虫cDNA文库质粒DNA有杂交而与成虫、肌幼虫cDNA文库质粒DNA不杂交。该基因是新生幼虫期所特有的cDNA片段。 展开更多
关键词 旋毛虫 CDNA文库 期特异性基因 筛选 鉴定
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