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两种方法纯化胎鼠脑室管膜下区神经干细胞的结果比较
被引量：
3
1
作者
周雪美
原慧萍
+3 位作者
周欣荣
曲巍
李鸿翼
邵正波
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2009年第2期90-93,共4页
目的利用有限稀释法和连续传代法纯化体外培养的神经干细胞(neural stem cells,NSCs),并对2种方法纯化后的细胞纯度及增生能力进行比较。方法机械分离孕龄14.5d的胎鼠脑室管膜下区细胞,利用有限稀释法和连续传代法纯化NSCs,通过免疫细...
目的利用有限稀释法和连续传代法纯化体外培养的神经干细胞(neural stem cells,NSCs),并对2种方法纯化后的细胞纯度及增生能力进行比较。方法机械分离孕龄14.5d的胎鼠脑室管膜下区细胞,利用有限稀释法和连续传代法纯化NSCs,通过免疫细胞化学法鉴定纯度(Nestin阳性率)及分化细胞的类型。将2种方法纯化后的第3代NSCs以相同的密度接种后连续培养6周,每周进行细胞计数,绘制生长曲线。结果有限稀释法和连续传代法纯化NSCs的Nestin阳性率均高于原代NSCs(31.00%±0.02%),有限稀释法的Nestin阳性率(91.00%±0.03%)高于连续传代法(58.80%±0.02%,P<0.05)。有限稀释法纯化NSCs的生长曲线一直处于增生趋势,而连续传代法的细胞前3周是上升趋势,以后趋于平缓(P<0.05)。结论有限稀释法能有效纯化体外培养的NSCs,并保持细胞良好增生能力及多向分化潜能,为基因治疗视神经损伤疾病提供大量种子细胞。
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关键词
脑室管膜下区
神经干细胞
有限稀释法
连续传代
法
纯化
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职称材料
MDCK单克隆细胞的制备方法研究
2
作者
张松
张丽
+3 位作者
乔自林
王家敏
马桂兰
侯兰新
《浙江农业科学》
2019年第2期283-286,共4页
为优化有限稀释法制备MDCK单克隆细胞的参数条件,从而提高有限稀释法制备MDCK单克隆细胞株的效率。使用有限稀释法制备MDCK单克隆细胞,通过比较不同类型血清、血清浓度和单孔接种密度对制备MDCK单克隆细胞数的影响,确定有限稀释法制备M...
为优化有限稀释法制备MDCK单克隆细胞的参数条件,从而提高有限稀释法制备MDCK单克隆细胞株的效率。使用有限稀释法制备MDCK单克隆细胞,通过比较不同类型血清、血清浓度和单孔接种密度对制备MDCK单克隆细胞数的影响,确定有限稀释法制备MDCK单克隆细胞的最佳实验条件。结果显示,添加15%胎牛血清、最佳单孔接种密度为1个·孔^(-1)是制备MDCK单克隆细胞的最佳条件。
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关键词
有限稀释法
MDCK单克隆细胞
接种密度
血清浓度
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职称材料
抗大肠杆菌耐热性肠毒素ST_1单克隆抗体的制备与鉴定
被引量：
3
3
作者
管翠萍
贾伟
陈萍萍
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2009年第18期8362-8363,共2页
[目的]培养大肠杆菌耐热性肠毒素ST1单克隆抗体的细胞株,建立一种快速、灵敏、特异和便于临床操作的检测耐热性肠毒素ST1的方法。[方法]将制备的ST1包涵体与弗氏完全佐剂充分混匀,免疫BALB/c小鼠,取其脾脏细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合...
[目的]培养大肠杆菌耐热性肠毒素ST1单克隆抗体的细胞株,建立一种快速、灵敏、特异和便于临床操作的检测耐热性肠毒素ST1的方法。[方法]将制备的ST1包涵体与弗氏完全佐剂充分混匀,免疫BALB/c小鼠,取其脾脏细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合,然后用间接ELISA法筛选和有限稀释法进行细胞克隆。[结果]获得2株能稳定分泌抗ST1肠毒素单抗杂交瘤细胞株。[结论]将单克隆抗体与酶联免疫吸附实验两者相结合可有效获得所需的杂交瘤细胞株,为下一步临床检测奠定了基础。
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关键词
有限稀释法
单克隆抗体
杂交瘤细胞株
间接ELISA
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职称材料
题名
两种方法纯化胎鼠脑室管膜下区神经干细胞的结果比较
被引量：
3
1
作者
周雪美
原慧萍
周欣荣
曲巍
李鸿翼
邵正波
机构
哈尔滨医科大学附属第二医院眼科
出处
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2009年第2期90-93,共4页
基金
国家自然科学基金资助(编号:30471844)~~
文摘
目的利用有限稀释法和连续传代法纯化体外培养的神经干细胞(neural stem cells,NSCs),并对2种方法纯化后的细胞纯度及增生能力进行比较。方法机械分离孕龄14.5d的胎鼠脑室管膜下区细胞,利用有限稀释法和连续传代法纯化NSCs,通过免疫细胞化学法鉴定纯度(Nestin阳性率)及分化细胞的类型。将2种方法纯化后的第3代NSCs以相同的密度接种后连续培养6周,每周进行细胞计数,绘制生长曲线。结果有限稀释法和连续传代法纯化NSCs的Nestin阳性率均高于原代NSCs(31.00%±0.02%),有限稀释法的Nestin阳性率(91.00%±0.03%)高于连续传代法(58.80%±0.02%,P<0.05)。有限稀释法纯化NSCs的生长曲线一直处于增生趋势,而连续传代法的细胞前3周是上升趋势,以后趋于平缓(P<0.05)。结论有限稀释法能有效纯化体外培养的NSCs,并保持细胞良好增生能力及多向分化潜能,为基因治疗视神经损伤疾病提供大量种子细胞。
关键词
脑室管膜下区
神经干细胞
有限稀释法
连续传代
法
纯化
Keywords
subependymal zone of brain
neural stem cells
limiting dilution assay
consecutive passage assay
purification
分类号
Q24 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
MDCK单克隆细胞的制备方法研究
2
作者
张松
张丽
乔自林
王家敏
马桂兰
侯兰新
机构
西北民族大学生物医学研究中心甘肃省动物细胞工程技术创新中心
西北民族大学生命科学与工程学院
兰州民海生物工程有限公司
出处
《浙江农业科学》
2019年第2期283-286,共4页
基金
国家科技重大专项(2015ZX09102016)
教育部动物医学生物工程创新团队(IRT_17R88)
+1 种基金
西北民族大学"双一流"引导专项生物工程特色学科(10018703
1001070204)
文摘
为优化有限稀释法制备MDCK单克隆细胞的参数条件,从而提高有限稀释法制备MDCK单克隆细胞株的效率。使用有限稀释法制备MDCK单克隆细胞,通过比较不同类型血清、血清浓度和单孔接种密度对制备MDCK单克隆细胞数的影响,确定有限稀释法制备MDCK单克隆细胞的最佳实验条件。结果显示,添加15%胎牛血清、最佳单孔接种密度为1个·孔^(-1)是制备MDCK单克隆细胞的最佳条件。
关键词
有限稀释法
MDCK单克隆细胞
接种密度
血清浓度
分类号
S852.1 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
抗大肠杆菌耐热性肠毒素ST_1单克隆抗体的制备与鉴定
被引量：
3
3
作者
管翠萍
贾伟
陈萍萍
机构
宁夏大学生命科学学院
宁夏医学院
出处
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2009年第18期8362-8363,共2页
文摘
[目的]培养大肠杆菌耐热性肠毒素ST1单克隆抗体的细胞株,建立一种快速、灵敏、特异和便于临床操作的检测耐热性肠毒素ST1的方法。[方法]将制备的ST1包涵体与弗氏完全佐剂充分混匀,免疫BALB/c小鼠,取其脾脏细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合,然后用间接ELISA法筛选和有限稀释法进行细胞克隆。[结果]获得2株能稳定分泌抗ST1肠毒素单抗杂交瘤细胞株。[结论]将单克隆抗体与酶联免疫吸附实验两者相结合可有效获得所需的杂交瘤细胞株,为下一步临床检测奠定了基础。
关键词
有限稀释法
单克隆抗体
杂交瘤细胞株
间接ELISA
Keywords
Limiting dilution
Monoclonal antibody
Hybridoma cell strain
Indirect ELISA
分类号
R378.21 [医药卫生—病原生物学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
两种方法纯化胎鼠脑室管膜下区神经干细胞的结果比较
周雪美
原慧萍
周欣荣
曲巍
李鸿翼
邵正波
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2009
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
MDCK单克隆细胞的制备方法研究
张松
张丽
乔自林
王家敏
马桂兰
侯兰新
《浙江农业科学》
2019
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
抗大肠杆菌耐热性肠毒素ST_1单克隆抗体的制备与鉴定
管翠萍
贾伟
陈萍萍
《安徽农业科学》
CAS
北大核心
2009
3
在线阅读
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职称材料
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