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抗金黄色葡萄球菌单链抗体(scFv)的原核表达及蛋白纯化
被引量:
1
1
作者
李晶泉
徐永平
+3 位作者
王熙涛
李媛
王丽丽
李晓宇
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第11期194-201,共8页
旨在将来源于鸡的金黄色葡萄球菌单链抗体(scFv)进行原核诱导表达,获得有抗体活性的目的蛋白。构建含有目的抗体基因的重组质粒,将此质粒进行原核诱导表达并鉴定所获得蛋白的生物活性。结果显示,(1)成功构建了含有金黄色葡萄球菌单链抗...
旨在将来源于鸡的金黄色葡萄球菌单链抗体(scFv)进行原核诱导表达,获得有抗体活性的目的蛋白。构建含有目的抗体基因的重组质粒,将此质粒进行原核诱导表达并鉴定所获得蛋白的生物活性。结果显示,(1)成功构建了含有金黄色葡萄球菌单链抗体(scFv)的重组质粒p Cold I-scFv,质粒成功转化到大肠杆菌表达菌株中;(2)经过诱导表达后,目的蛋白主要以包涵体的形式存在于沉淀中;(3)使用4 mol/L尿素成功地将包涵体变性溶出;(4)通过柱层析法及透析法获得了纯化及复性效果较好的目的蛋白;(5)间接ELISA鉴定证实所获蛋白具有金黄色葡糖球菌抗体活性。通过质粒构建及原核诱导表达、包涵体溶出和复性等步骤,最终获得了有金黄色葡萄球菌抗体活性的目的蛋白。
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关键词
可溶
性
表达
包涵体
蛋白
纯化
蛋白
复
性
有活性的蛋白
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职称材料
题名
抗金黄色葡萄球菌单链抗体(scFv)的原核表达及蛋白纯化
被引量:
1
1
作者
李晶泉
徐永平
王熙涛
李媛
王丽丽
李晓宇
机构
大连理工大学生命科学与技术学院
教育部动物性食品安全保障技术工程研究中心
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第11期194-201,共8页
基金
中央高校基本科研业务费(DUT13 JB04)
国家海洋公益项目(201405003-3)
文摘
旨在将来源于鸡的金黄色葡萄球菌单链抗体(scFv)进行原核诱导表达,获得有抗体活性的目的蛋白。构建含有目的抗体基因的重组质粒,将此质粒进行原核诱导表达并鉴定所获得蛋白的生物活性。结果显示,(1)成功构建了含有金黄色葡萄球菌单链抗体(scFv)的重组质粒p Cold I-scFv,质粒成功转化到大肠杆菌表达菌株中;(2)经过诱导表达后,目的蛋白主要以包涵体的形式存在于沉淀中;(3)使用4 mol/L尿素成功地将包涵体变性溶出;(4)通过柱层析法及透析法获得了纯化及复性效果较好的目的蛋白;(5)间接ELISA鉴定证实所获蛋白具有金黄色葡糖球菌抗体活性。通过质粒构建及原核诱导表达、包涵体溶出和复性等步骤,最终获得了有金黄色葡萄球菌抗体活性的目的蛋白。
关键词
可溶
性
表达
包涵体
蛋白
纯化
蛋白
复
性
有活性的蛋白
Keywords
soluble expression
inclusion
protein purification
protein refolding
active protein
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
S852.4 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗金黄色葡萄球菌单链抗体(scFv)的原核表达及蛋白纯化
李晶泉
徐永平
王熙涛
李媛
王丽丽
李晓宇
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
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