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一株有机溶剂稳定性蛋白酶产生菌的筛选与鉴定 被引量：5
1
作者 房耀维 刘姝 +3 位作者 徐炜枫 王淑军 吕明生 陈丽 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第7期197-201,共5页
为了筛选分泌有机溶剂稳定性蛋白酶耐有机溶剂极端微生物,利用添加苯10%(V/V)的MLB培养液从油污染水样中分离获得有机溶剂耐受菌株56株。通过产蛋白酶筛选培养基(SMA培养基)平板初筛和摇瓶发酵复筛从中筛选获得蛋白酶高产菌株DS1。通过... 为了筛选分泌有机溶剂稳定性蛋白酶耐有机溶剂极端微生物,利用添加苯10%(V/V)的MLB培养液从油污染水样中分离获得有机溶剂耐受菌株56株。通过产蛋白酶筛选培养基(SMA培养基)平板初筛和摇瓶发酵复筛从中筛选获得蛋白酶高产菌株DS1。通过形态学、生理生化及16SrDNA序列(GenbankEU578329)构建的系统进化树将菌株DS1鉴定为Bacillusaquaemaris。该菌株能耐受多种有机溶剂,并可以分泌有机溶剂稳定性蛋白酶。该蛋白酶在25%极性常数(logPOW)大于等于1.8的有机溶剂中稳定性好,于30℃、140r/min,培养14d仍有70%以上的活力。菌株DS1及其所分泌的蛋白酶均能较好的耐受有机溶剂,可以进行有机相催化,具有潜在的工业应用价值。 展开更多
关键词 耐有机溶剂微生物 有机溶剂稳定性蛋白酶 筛选 鉴定
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有机溶剂稳定性蛋白酶发酵动力学研究 被引量：2
2
作者 房耀维 余勃 +4 位作者 刘姝 王淑军 吕明生 焦豫良 曹纯 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第23期240-243,共4页
利用分批发酵研究海洋细菌Bacillus aquaemaris DS1分泌有机溶剂稳定性蛋白酶的代谢特性,结果表明蛋白酶合成和菌体生长呈部分生长关联型。据分批发酵实验结果采用Logistic方程、Luedeking-Piret方程建立了描述菌株生长、产酶以及底物... 利用分批发酵研究海洋细菌Bacillus aquaemaris DS1分泌有机溶剂稳定性蛋白酶的代谢特性,结果表明蛋白酶合成和菌体生长呈部分生长关联型。据分批发酵实验结果采用Logistic方程、Luedeking-Piret方程建立了描述菌株生长、产酶以及底物消耗分批发酵动力学模型。动力学模型计算值与实验值拟合良好,相对误差小于10%。 展开更多
关键词 有机溶剂稳定性脂肪酶 BACILLUS aquaemaris DS1 动力学模型 海洋细菌
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基于理性设计的碱性蛋白酶AprEbl热稳定性改造及其潜在机制分析
3
作者 罗雅妮 胡刘秀 +4 位作者 刘志钰 高旭丽 陈宇 吴传超 刘艳 《食品科学》 北大核心 2025年第12期109-117,共9页
为获得耐高温、催化活性更好的碱性蛋白酶,本研究以来源于地衣芽孢杆菌B66的碱性蛋白酶AprEbl为研究对象,通过分子动力学模拟分析发现,AprEbl的N183、G186、S265、S267、Y320位点具有较高的柔性。采用计算机辅助设计突变位点,通过定点... 为获得耐高温、催化活性更好的碱性蛋白酶,本研究以来源于地衣芽孢杆菌B66的碱性蛋白酶AprEbl为研究对象,通过分子动力学模拟分析发现,AprEbl的N183、G186、S265、S267、Y320位点具有较高的柔性。采用计算机辅助设计突变位点,通过定点突变技术完成5个单点突变体酶的表达并研究其酶学特性,然后挑选出2个优势突变体进行第二轮的组合突变。结果显示,经过两轮突变获得了1个热稳定性大幅提升且比活力与野生型基本持平的突变体S265H/S267F,该组合突变体在55℃和75℃条件下的半衰期分别提高了6.35倍和4.01倍,其余单点突变体在高温条件下的耐受性也比野生型更好。本研究借助生物信息学手法探索了碱性蛋白酶结构与功能的关系,构建了稳定性和催化效率更高的碱性蛋白酶突变体,可为利用蛋白质工程技术改善碱性蛋白酶的酶学性质以满足工业需求提供理论基础。 展开更多
关键词 碱性蛋白酶 理性设计 B因子 定点突变 热稳定性
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家蝇丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin2重组蛋白体外酶学活性和稳定性研究
4
作者 王玮 谭书萍 +4 位作者 黄平 国果 修江帆 尚小丽 张昌容 《贵州农业科学》 2025年第8期77-82,共6页
【目的】探明家蝇丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin2重组蛋白在体外的酶学活性和稳定性,为重组蛋白酶的体外应用和功能研究提供科学依据。【方法】以FITC-Casein作为底物,与常见的丝氨酸蛋白酶即胰蛋白酶(Trypsin)、蛋白酶K(Proteinase K)、枯... 【目的】探明家蝇丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin2重组蛋白在体外的酶学活性和稳定性,为重组蛋白酶的体外应用和功能研究提供科学依据。【方法】以FITC-Casein作为底物,与常见的丝氨酸蛋白酶即胰蛋白酶(Trypsin)、蛋白酶K(Proteinase K)、枯草杆菌蛋白酶(Subtilisin)、胰凝乳蛋白酶(Chymotrypsin)及纯化的家蝇Serpin2重组蛋白共同孵育,使用荧光多功能酶标仪检测荧光强度并计算剩余酶活,分析Serpin2重组蛋白对4种丝氨酸蛋白酶的体外抑制活性;分别设置不同温度、不同缓冲液pH和不同放置时间处理重组蛋白,检测荧光强度并计算剩余酶活,分析环境因素对家蝇Serpin2重组蛋白稳定性的影响。【结果】加入25μL浓度为1mg/mL的Serpin2重组蛋白对胰蛋白酶有极显著的抑制作用,且Serpin2重组蛋白在30℃、缓冲液pH为7、处理15min后稳定性较强,此时重组蛋白对胰蛋白酶的抑制活性均大于90.00%。【结论】家蝇Serpin2重组蛋白具有显著丝氨酸蛋白酶——胰蛋白酶类抑制活性,且在一般条件下具有较高的环境稳定性。 展开更多
关键词 家蝇 丝氨酸蛋白酶抑制剂2 酶学活性 酶稳定性
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叶黄素在有机溶剂中的稳定性 被引量：7
5
作者 庞慧丽 李大婧 刘春泉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第23期15-19,共5页
采用C30-HPLC-DAD检测叶黄素分别在30、40、50℃无水乙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、甲苯中的保留率变化,并分析溶剂种类、氧分压、温度对有机溶剂中叶黄素稳定性的影响。结果表明:在同一温度、常规空气条件下,叶黄素在4种有机溶剂中的稳定... 采用C30-HPLC-DAD检测叶黄素分别在30、40、50℃无水乙醇、乙酸乙酯、四氢呋喃、甲苯中的保留率变化,并分析溶剂种类、氧分压、温度对有机溶剂中叶黄素稳定性的影响。结果表明:在同一温度、常规空气条件下,叶黄素在4种有机溶剂中的稳定性顺序依次为:无水乙醇>乙酸乙酯>四氢呋喃>甲苯,反式叶黄素的保留率随时间的延长而一直呈下降趋势,总顺式叶黄素的保留率则先略有上升后缓慢下降;充氮可有效提高叶黄素的稳定性,效果在四氢呋喃中尤为明显,而且随着时间的延长反式叶黄素的保留率一直呈缓慢下降趋势,总顺式叶黄素的最终保留率明显高于常规条件;温度越高,反式叶黄素的稳定性越低,越易发生异构化反应;反式叶黄素在4种溶剂中的降解遵循一级动力学模型。 展开更多
关键词 叶黄素 保留率 有机溶剂 稳定性
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秋橄榄果实中番茄红素有机溶剂的萃取及其稳定性研究 被引量：4
6
作者 程赛 邵兴锋 +1 位作者 倪穗 宋钰兴 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期179-183,共5页
利用有机溶剂萃取秋橄榄中的番茄红素,对影响萃取的诸因素,如萃取剂的种类、料液比、萃取温度和萃取时间等进行研究,并用响应面法优化提取工艺条件;另外,还研究了温度、光照、金属离子对秋橄榄番茄红素稳定性的影响。结果表明:用丙酮作... 利用有机溶剂萃取秋橄榄中的番茄红素,对影响萃取的诸因素,如萃取剂的种类、料液比、萃取温度和萃取时间等进行研究,并用响应面法优化提取工艺条件;另外,还研究了温度、光照、金属离子对秋橄榄番茄红素稳定性的影响。结果表明:用丙酮作萃取剂时,秋橄榄果实中番茄红素的提取效果最佳,优化后的萃取温度为52℃,萃取时间为2.1 h,料液比为1:21(g:mL)。验证实验发现,萃取量为(218.03±9.10)μg/g鲜重,与预测值较接近。秋橄榄果实中的番茄红素在高温、阳光直照、Fe3+存在的条件下十分不稳定。 展开更多
关键词 秋橄榄 番茄红素 有机溶剂萃取 响应曲面 稳定性
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有机溶剂热生长技术合成碱金属硒化物Cs_2PdSe_(16)及其热稳定性的研究 被引量：2
7
作者 陈震 王如骥 李静 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2001年第7期1091-1094,共4页
以 Pd Cl2 ,Cs2 Se及 Se为原料在乙二胺溶液中用有机溶剂热生长技术 ( Solvothermal Technique)制备碱金属硒化物 Cs2 Pd Se16,用单晶 X射线衍射技术对其进行晶体结构分析 .Cs2 Pd Se16属四方晶系 ,空间群为P4 b2 ,晶胞参数为 :a=1 .2 6... 以 Pd Cl2 ,Cs2 Se及 Se为原料在乙二胺溶液中用有机溶剂热生长技术 ( Solvothermal Technique)制备碱金属硒化物 Cs2 Pd Se16,用单晶 X射线衍射技术对其进行晶体结构分析 .Cs2 Pd Se16属四方晶系 ,空间群为P4 b2 ,晶胞参数为 :a=1 .2 60 1 ( 2 ) nm,b=1 .2 60 1 ( 2 ) nm,c=0 .70 4 4( 1 ) nm,V=1 .1 1 85 ( 3) nm3,Z=2 ,R=0 .0 5 1 4 ,w R=0 .0 991 .该晶体由相互交错的 [Cs Pd( Se4 ) 2 ]-层和 [Cs Se8]+ 层组成 .热分析结果表明 ,其分解温度为 334℃ . 展开更多
关键词 金属硒化物 晶体结构 有机溶剂热生长技术 热稳定性 铯 钯 乙二胺
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有机溶剂处理提高固定化脂肪酶活性及稳定性 被引量：6
8
作者 祖昕 杜凯 +1 位作者 曹方 孙玉梅 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期89-94,共6页
为提高固定化脂肪酶催化转酯化反应的活性和稳定性,采用活性炭、硅胶G和DM-130树脂吸附固定脂肪酶LVK-F100,并用甲醇、丙酮、丙醇、异丙醇、乙酸乙酯、正己烷以及环己烷处理湿的固定化脂肪酶。结果表明,甲醇、正己烷和环己烷处理对固定... 为提高固定化脂肪酶催化转酯化反应的活性和稳定性,采用活性炭、硅胶G和DM-130树脂吸附固定脂肪酶LVK-F100,并用甲醇、丙酮、丙醇、异丙醇、乙酸乙酯、正己烷以及环己烷处理湿的固定化脂肪酶。结果表明,甲醇、正己烷和环己烷处理对固定化脂肪酶有钝化作用,而丙酮、丙醇、异丙醇和乙酸乙酯处理能显著提高固定化脂肪酶的活性。用乙酸乙酯和异丙醇处理吸附固定的脂肪酶1 h,可使固定化脂肪酶活力分别提高1.70-2.25倍、半衰期延长3.2-8.4 h、催化大豆油转酯化反应延长使用周期2-5批。异丙醇和乙酸乙酯处理还可提高固定化脂肪酶的热稳定性。 展开更多
关键词 脂肪酶 固定化 有机溶剂 活性 稳定性
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有机溶剂对液体活性染料分散和水解稳定性影响的模拟研究 被引量：4
9
作者 徐保律 吴伟 +2 位作者 钟毅 徐红 毛志平 《纺织学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第2期113-121,共9页
为探究液体活性染料体系中有机溶剂对活性染料储存稳定性的影响机制,基于分子动力学模拟,考察了4种有机溶剂对高浓度C.I.活性蓝176聚集以及水解稳定性的影响,并进行实验验证。结果表明:不同有机溶剂对活性染料分散及水解效果影响的差异... 为探究液体活性染料体系中有机溶剂对活性染料储存稳定性的影响机制,基于分子动力学模拟,考察了4种有机溶剂对高浓度C.I.活性蓝176聚集以及水解稳定性的影响,并进行实验验证。结果表明:不同有机溶剂对活性染料分散及水解效果影响的差异,与有机溶剂在染料分子聚集有效区域以及染料水解基团周围的分布有关,二者间相互作用的强弱决定了染料的储存稳定性;N-甲基吡咯烷酮体系中,4种有机溶剂的72个染料分子中有31个染料分子可以单分子形式存在,其对C.I.活性蓝176的分散稳定性最佳;己内酰胺在染料水解基团氯原子周围的分布更多,其对抑制液态活性染料的水解效果最好。 展开更多
关键词 液体活性染料 有机溶剂 水解稳定性 分子间相互作用 分子动力学模拟
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不同酶解方式对大豆酶法乳液稳定性能的影响
10
作者 郑乐喜 张晓昆 王欢 《大豆科技》 2025年第3期16-23,共8页
文章采用不同酶解法制备水包油乳液,通过比较粒径、电位、乳化活性、乳化稳定性、表面疏水性和氧化稳定性等指标探究不同大豆酶法乳液稳定性能。结果表明,通过两步酶解制备的乳液粒径最小,为485.87±7.87 nm;Zeta电位绝对值最大,为-... 文章采用不同酶解法制备水包油乳液,通过比较粒径、电位、乳化活性、乳化稳定性、表面疏水性和氧化稳定性等指标探究不同大豆酶法乳液稳定性能。结果表明,通过两步酶解制备的乳液粒径最小,为485.87±7.87 nm;Zeta电位绝对值最大,为-34.81±0.18 mV。与其他酶解方式相较,两步酶解制备乳液表面疏水性、乳化活性及乳化稳定性较好,分别为434.21±2.75、5635.00±3.50 min和54.28±0.09 m^(2)/g。氧化稳定性结果表明,两步酶解制备乳液初级氧化产物和次级氧化产物最少,分别为53.98±0.18μmol/kg和7.03±0.06μmol/kg,乳液氧化稳定性好。 展开更多
关键词 大豆水酶法 碱性蛋白酶 磷脂酶A2 水包油乳液 乳液稳定性
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果菠萝蛋白酶在有机溶剂中的变性与失活动力学的研究 被引量：19
11
作者 陈清西 颜思旭 +1 位作者 力政军 乐伟平 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1993年第1期88-93,共6页
测得果菠萝蛋白酶是由单亚基组成,分子量约为30k,pl为4.6,每个酶分子含一个游离疏基和二个硫硫键,甲醇、乙醇、乙二醇对酶活力有明显的抑制作用,甲醇、乙醇表现为非竞争性,乙二醇为竞争性,其抑制常数分别为:20％、16.5％和11％。在有机... 测得果菠萝蛋白酶是由单亚基组成,分子量约为30k,pl为4.6,每个酶分子含一个游离疏基和二个硫硫键,甲醇、乙醇、乙二醇对酶活力有明显的抑制作用,甲醇、乙醇表现为非竞争性,乙二醇为竞争性,其抑制常数分别为:20％、16.5％和11％。在有机溶剂作用下,监测荧光(332nm)强度随时间的变化过程,作为变性的指标,测定酶在不同浓度有机溶剂中的变性动力学,并按邹氏法测定酶的失活动力学,对酶构象及催化活力关系进行比较,酶的失活速度大于变性速度,说明酶活性中心处于对有机溶剂较敏感的区域,酶的变性与失活过程均可分为快、慢两相的一级反应,这意味着可能存在着部分活力的中间态。 展开更多
关键词 果菠萝蛋白酶 有机溶剂 变性
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不同疏水参数有机溶剂中木瓜蛋白酶及其固定化酶活性的变化 被引量：8
12
作者 何平 黄家乐 +3 位作者 史清翠 巫光宏 初志战 黄卓烈 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2009年第3期223-229,234,共8页
【目的】探寻疏水参数（10gP）不同的有机溶剂对木瓜蛋白酶及其固定化酶活性的影响。【方法】制备固定化木瓜蛋白酶，在疏水参数不同（logP=-1．30，-1．10，-0．76，-0．33，-0．24，0．28，0．49，0．68，0．80，1．31，1，80，2．0，... 【目的】探寻疏水参数（10gP）不同的有机溶剂对木瓜蛋白酶及其固定化酶活性的影响。【方法】制备固定化木瓜蛋白酶，在疏水参数不同（logP=-1．30，-1．10，-0．76，-0．33，-0．24，0．28，0．49，0．68，0．80，1．31，1，80，2．0，2．5，3．5和5．0）的15种有机溶剂及其不同体积分数（ψ-5％，10％，15％，20％，25％，30％，35％，40％，50％，60％和70％）的溶液中，测定木瓜蛋白酶及其固定化酶的活性，以不含相应有机溶剂的0．1mol／LpH7．2磷酸缓冲液或Tris-盐酸缓冲液为对照，分析不同有机溶剂及其体积分数对酶活性的影响。【结果】在低疏水参数（10gP≤-0．24）的有机溶剂中，有机溶剂二甲基亚砜、1，4-二氧六环和乙腈具有在低体积分数（妒≤10％）下，激活木瓜蛋白酶及其固定化酶活性的特性，有机溶剂甲醇、乙醇虽然在低体积分数（p≤10％）下不能激活木瓜蛋白酶及其固定化酶活性，但其活性与对照（So—O）相当；低疏水参数有机溶剂在高体积分数（9≥30％）下抑制酶活。当有机溶剂的疏水参数为0．28～1．31时，其对木瓜蛋白酶及其固定化酶活性有显著抑制作用。在有机溶剂疏水参数较高（logP≥1．80）条件下，低体积分数（9≤10％）时酶活性下降较慢，超过-定体积分数（P≥30％）后,酶活性开始升高。【结论】低logP（10gP≤0．24）有机溶剂在低体积分数（ψ≤10％）时可激活或稳定木瓜蛋白酶及其固定化酶活性，而在高体积分数（ψ≥30％）时对酶活有抑制作用；中logP（0．28≤logP≤1．31）有机溶剂对木瓜蛋白酶及其固定化酶活性具有显著抑制作用；高logP（10gP≥1．80）有机溶剂在低体积分数（ψ≤10％）时抑制木瓜蛋白酶及其固定化酶活性，但在高体积分数（ψ≥30％）时酶活性升高。 展开更多
关键词 木瓜蛋白酶 固定化酶 有机溶剂 疏水参数 酶活性
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醇类有机溶剂对木瓜蛋白酶催化活性的影响机理 被引量：4
13
作者 初志战 陈纪鹏 +2 位作者 刘小林 黄卓烈 黄磊 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1112-1115,共4页
为了探索木瓜蛋白酶在有机溶剂中的催化机理和活力变化,为其工业应用打下基础,研究了在4种不同有机溶剂极性系数的醇类单相共溶体系中,木瓜蛋白酶水解酪蛋白的催化活性及木瓜蛋白酶构象的变化。结果表明:木瓜蛋白酶在体积分数15%丙二醇... 为了探索木瓜蛋白酶在有机溶剂中的催化机理和活力变化,为其工业应用打下基础,研究了在4种不同有机溶剂极性系数的醇类单相共溶体系中,木瓜蛋白酶水解酪蛋白的催化活性及木瓜蛋白酶构象的变化。结果表明:木瓜蛋白酶在体积分数15%丙二醇和体积分数8%正丙醇的溶液中水解酪蛋白的活性分别上升20.1%和17.8%,在乙二醇和丙三醇体系中则酶活力显著下降。动力学测定表明,木瓜蛋白酶在4种有机介质中水解酪蛋白的米氏常数Km与Vmax均明显下降。差示光谱和荧光发射光谱表明,体积分数40%丙三醇可使木瓜蛋白酶含有Trp残基区域的空间结构趋向更紧密,而在体积分数15%丙二醇和体积分数10%乙二醇体系中,无规则卷曲或者β-折叠增加的区域很少包含Trp残基。 展开更多
关键词 木瓜蛋白酶 有机溶剂 酶活力 动力学 构象
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啤酒泡沫稳定性与蛋白酶的关系 被引量：9
14
作者 张峻炎 田亚平 +2 位作者 陆健 李崎 顾国贤 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2002年第9期51-56,共6页
大量的文献资料证实 ,未经巴氏灭菌的纯生啤酒会有一定量的蛋白酶活力残留 ,继而破坏了泡持性蛋白质Z(PrZ) ,使啤酒的泡沫稳定性变差。目前研究者发现主要是蛋白酶A(PrA)在起作用 ,许多人已建立了测定微量PrA和PrZ的方法。人们设想寻找... 大量的文献资料证实 ,未经巴氏灭菌的纯生啤酒会有一定量的蛋白酶活力残留 ,继而破坏了泡持性蛋白质Z(PrZ) ,使啤酒的泡沫稳定性变差。目前研究者发现主要是蛋白酶A(PrA)在起作用 ,许多人已建立了测定微量PrA和PrZ的方法。人们设想寻找一种抑制剂 ,能够添加到蛋白酶A活性偏高的纯生啤酒中 ,抑制PrA对泡沫蛋白的降解 ,但这一工作仍有待进一步研究。 展开更多
关键词 啤酒 泡沫稳定性 蛋白酶 酶活性 抑制
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耐有机溶剂蛋白酶生产菌的筛选 被引量：5
15
作者 欧阳华勇 李冰峰 +4 位作者 权静 夏凡 沈建华 张光东 李晓规 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第28期13606-13609,共4页
由南京紫光精细化工厂污水中筛得一株耐苯微生物,且能大量分泌蛋白酶,经菌种鉴定,确认其为盐芽孢杆菌。该菌所产生的蛋白酶对脱脂奶粉蛋白质有较强的水解能力,产生的菌落透明圈与菌落直径比(R)为2.3,该菌能耐受苯、甲苯等多种有机溶剂... 由南京紫光精细化工厂污水中筛得一株耐苯微生物,且能大量分泌蛋白酶,经菌种鉴定,确认其为盐芽孢杆菌。该菌所产生的蛋白酶对脱脂奶粉蛋白质有较强的水解能力,产生的菌落透明圈与菌落直径比(R)为2.3,该菌能耐受苯、甲苯等多种有机溶剂。该菌所产蛋白酶粗酶的最适反应温度为50℃,最适pH值10.0,亚铁离子能有效提高其活性,且对含有50%(V/V)的苯、甲苯等多种有机溶剂具有良好的耐受性,可望将该酶应用于有机溶剂介质酶催化反应的生产工艺中。 展开更多
关键词 蛋白酶 盐芽孢杆菌 有机溶剂 有机溶剂介质酶催化反应
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绿豆胰蛋白酶抑制剂的含量、多型性及稳定性 被引量：8
16
作者 江均平 李春红 +2 位作者 张涛 云冬梅 杨雪丰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第11期32-35,共4页
测得我国26份绿豆栽培品种胰蛋白酶抑制剂(TI)含量范围为29.0～53.3TIU/g,平均值38.9TIU/g,其中冀绿7号、中绿5号、淮绿5号含量最高,分别为53.5、51.3、49.6TIU/g。明胶-PAGE活性染色结果表明:绿豆含有M1～M44种TI,M2为主要组分;冀绿7... 测得我国26份绿豆栽培品种胰蛋白酶抑制剂(TI)含量范围为29.0～53.3TIU/g,平均值38.9TIU/g,其中冀绿7号、中绿5号、淮绿5号含量最高,分别为53.5、51.3、49.6TIU/g。明胶-PAGE活性染色结果表明:绿豆含有M1～M44种TI,M2为主要组分;冀绿7号品种的M4以结合态形式存在,经100℃或pH1.5处理后消失,同时出现5条新带。绿豆TI性质稳定,水煮30min可保存66.4%～83.1%活性,pH1.5处理8h活性为原来的86.3%～110.0%;提取液放置时间对酶谱有影响。 展开更多
关键词 绿豆 胰蛋白酶抑制剂 多型性 热稳定性 酸稳定性
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果菠萝蛋白酶在有机溶剂微扰时的分子折叠与活力变化的研究 被引量：17
17
作者 陈清西 颜思旭 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1993年第3期424-427,共4页
本文用荧光、紫外差示及CD光谱研究果菠萝蛋白酶经甲醇、乙醇、乙二醇微扰后的构象与活力变化情况.酶的荧光强度随有机溶剂浓度增大而增强,表明Tyr、Trp微环境发生明显变化。232nm和285nm处出现紫外差吸收正峰。前峰与酶分于折叠的变化... 本文用荧光、紫外差示及CD光谱研究果菠萝蛋白酶经甲醇、乙醇、乙二醇微扰后的构象与活力变化情况.酶的荧光强度随有机溶剂浓度增大而增强,表明Tyr、Trp微环境发生明显变化。232nm和285nm处出现紫外差吸收正峰。前峰与酶分于折叠的变化有关,而后峰与Tyr、Trp微环境的变化相关.甲醇、乙醇微扰后,天然酶的208 nm和225 nm CD双负峰逐渐加强,而乙二醇微扰后,225nm负峰加强。208nm负峰减弱并红移直至完全消失,说明酶分子完全伸展. 展开更多
关键词 果菠萝蛋白酶 有机溶剂 微扰作用
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黄鲫(Setipinna taty)蛋白酶解液的抑菌活性及稳定性研究 被引量：13
18
作者 宋茹 韦荣编 +1 位作者 谢超 汪东风 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第13期88-92,共5页
以黄鲫为原料测定其氨基酸组成,比较风味蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解黄鲫蛋白所得酶解液对大肠杆菌的抑菌作用,并对抑菌效果最强的蛋白酶酶解液进行抑菌稳定性研究。结果表明:黄鲫蛋白必需氨基酸含量丰富,... 以黄鲫为原料测定其氨基酸组成,比较风味蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解黄鲫蛋白所得酶解液对大肠杆菌的抑菌作用,并对抑菌效果最强的蛋白酶酶解液进行抑菌稳定性研究。结果表明:黄鲫蛋白必需氨基酸含量丰富,其中胃蛋白酶的水解液对大肠杆菌抑菌作用强,相对分子质量主要分布在3000～1000;黄鲫胃蛋白酶酶解液对热稳定,酸性低pH值可增强其抑菌效果,可耐受胰蛋白酶和β-内酰胺酶处理,该酶解液有作为天然抗菌剂应用的前景。 展开更多
关键词 黄鲫 蛋白酶解液 抑菌活性 稳定性
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Ca^(2+)对菠萝蛋白酶热稳定性和二级结构的影响 被引量：8
19
作者 王晓敏 刘智均 +1 位作者 胡秀沂 黄惠华 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期153-155,158,共4页
研究了Ca2+对菠萝蛋白酶活性及远紫外圆二色谱的变化。在37℃下,Ca2+与酶作用1h后,5～10mmol/L Ca2+对酶的活性均有促进作用,其中当Ca2+浓度为2mmol/L时,促进作用最明显。在60℃下,Ca2+浓度为3mmol/L时,对菠萝蛋白酶的热稳定化效果最好... 研究了Ca2+对菠萝蛋白酶活性及远紫外圆二色谱的变化。在37℃下,Ca2+与酶作用1h后,5～10mmol/L Ca2+对酶的活性均有促进作用,其中当Ca2+浓度为2mmol/L时,促进作用最明显。在60℃下,Ca2+浓度为3mmol/L时,对菠萝蛋白酶的热稳定化效果最好,处理100min后仍然能保留68%的活性;菠萝蛋白酶在60℃下活性的半衰期为86min,除Ca2+浓度为1mmol/L外,其他浓度(2、3、4、5mmol/L)的Ca2+与菠萝蛋白酶作用后,酶的半衰期均有所延长。由圆二色谱曲线发现,菠萝蛋白酶在波长209nm与221nm处有明显的负峰。与Ca2+作用后菠萝蛋白酶的α-螺旋、β-转角和无规则卷曲均有所变化,其中,在37℃下加入Ca2+后,菠萝蛋白酶的α-螺旋均减少,而β-转角有所增加。在70℃下处理1h,Ca2+对菠萝蛋白酶二级结构也有所影响。无Ca2+处理的菠萝蛋白酶和加入4mmol/LCa2+的菠萝蛋白酶的α-螺旋分别减少为34.90%和35.60%,而β-转角则有所增加,分别为26.30%和25.10%。圆二色谱结果表明,α-螺旋结构对菠萝蛋白酶的稳定性起关键作用。 展开更多
关键词 菠萝蛋白酶 热稳定性 CA^2+ 圆二色谱 二级结构
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表面活性剂对液体洗涤剂用蛋白酶储存稳定性的影响 被引量：13
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作者 杨庆利 杨秀全 《日用化学工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期296-298,共3页
通过在质量分数为30%的8种表面活性剂溶液中添加液体蛋白酶,考察不同温度条件下存放90d的过程中酶活性变化;研究了表面活性剂对酶储存稳定性的影响.结果表明:表面活性剂对酶储存稳定性的影响程度因表面活性剂的品种不同而各有差异,其中A... 通过在质量分数为30%的8种表面活性剂溶液中添加液体蛋白酶,考察不同温度条件下存放90d的过程中酶活性变化;研究了表面活性剂对酶储存稳定性的影响.结果表明:表面活性剂对酶储存稳定性的影响程度因表面活性剂的品种不同而各有差异,其中AEO9、6501、AEC对酶的活性影响程度弱;LAS、AOS、APG12～14对酶的活性影响程度强;TX-10、AES对酶的作用居中.温度对酶储存稳定性有显著影响,建议在35℃以下储存为宜. 展开更多
关键词 表面活性剂 液体蛋白酶 稳定性
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