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抑制ERK和Akt激酶对曲古柳菌素诱导的卵巢癌细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 张莉 郝权 +1 位作者 包乐纹 付欣 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期826-828,共3页
目的:探讨抑制胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)和蛋白激酶B(Akt)对曲古柳菌素(TSA)诱导的卵巢癌细胞凋亡的影响。方法:常规培养OVCAR-3卵巢癌细胞株,分为对照、TSA、TSA+PD98059和TSA+Y294002四组,其中... 目的:探讨抑制胞外信号调节激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)和蛋白激酶B(Akt)对曲古柳菌素(TSA)诱导的卵巢癌细胞凋亡的影响。方法:常规培养OVCAR-3卵巢癌细胞株,分为对照、TSA、TSA+PD98059和TSA+Y294002四组,其中TSA组为TSA 2.5μM处理24 h,TSA+PD98059组和TSA+Y294002组采用5μM PD98059或Y294002预处理1 h后,2.5μMTSA处理24 h。MTT法分析各组细胞生存情况,Western blot法检测P53及细胞色素C蛋白的表达,分光光度法检测Caspase-9,Caspase-8和Caspase-3活性。结果:MTT分析结果显示,与对照组比较,TSA处理后显著降低OVCAR-3细胞的存活率(P<0.05);与TSA单独处理比较,采用5μM PD98059或Y294002预处理可以进一步降低OVCAR-3细胞的存活率(P<0.05)。Western bot分析结果显示TSA处理可以显著增加OVCAR-3细胞中P53及细胞色素C蛋白的表达,增加OVCAR-3细胞Caspase-9,Caspase-8和Caspase-3活性;对比TSA单独处理,TSA和Y294002联合应用可以增加OVCAR-3细胞中P53及细胞色素C蛋白的表达,提高Caspase-9,Caspase-8和Caspase-3的活性(P<0.05),而TSA和PD98059联合应用无这种效果。结论:TSA可以诱导卵巢癌OV-CAR-3细胞凋亡,其机制可能与上调P53及细胞色素C蛋白表达,激活Caspase-9、Caspase-8、Caspase-3和线粒体凋亡途径有关。抑制Akt可以通过以上机制进一步促进TSA诱导的细胞凋亡。 展开更多
关键词 ERK AKT 曲古柳菌素 卵巢癌 细胞凋亡
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HDAC抑制剂TSA抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖并促进乳腺癌细胞凋亡 被引量:5
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作者 王丹 陈宇鹏 梁静 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期570-573,共4页
曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)作为组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACi),是近年来发现的一类新型抗肿瘤药物,对多种实体瘤及血液系统肿瘤具有显著抗肿瘤作用.体外实验及动物模型显示,TSA对于乳腺癌也有一... 曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)作为组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACi),是近年来发现的一类新型抗肿瘤药物,对多种实体瘤及血液系统肿瘤具有显著抗肿瘤作用.体外实验及动物模型显示,TSA对于乳腺癌也有一定杀伤作用.目前认为,TSA可以通过抑制组蛋白去乙酰化作用而影响细胞内基因转录,但其抗肿瘤作用的分子机理尚不清楚.本文通过MTT法检测不同剂量的TSA对乳腺癌细胞生长的影响,发现TSA可以剂量依赖地抑制乳腺癌细胞MCF-7的生长.膜联蛋白(annexin)-Ⅴ/PI双染法和PAPR水解检测证实TSA同时促进MCF-7细胞凋亡.Western印迹分析表明,在分子水平上,TSA诱导MCF-7细胞中的周期抑制蛋白p21表达,同时使得抗凋亡因子Bcl-2的表达水平降低,表明TSA可能通过调控p21和Bcl-2的表达来实现抑制乳腺癌细胞生长并促使其凋亡,从而发挥抗肿瘤作用. 展开更多
关键词 曲古抑菌素a(tsa) 乳腺癌 P21 Bcl-2
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TSA诱导橡胶树次生乳管分化过程qRT-PCR内参基因的筛选 被引量:2
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作者 吴绍华 张世鑫 +1 位作者 杨署光 田维敏 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2020年第3期504-512,共9页
橡胶树乳管分化过程中差异表达基因的鉴定对于进一步认识乳管分化的分子机理具有重要的作用。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)是进行基因表达分析的常用技术手段,合适内参基因的选择是准确进行基因表达定量的前提。以组蛋白去乙酰化抑制剂曲... 橡胶树乳管分化过程中差异表达基因的鉴定对于进一步认识乳管分化的分子机理具有重要的作用。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)是进行基因表达分析的常用技术手段,合适内参基因的选择是准确进行基因表达定量的前提。以组蛋白去乙酰化抑制剂曲古抑菌素A(trichostatin A, TSA)诱导橡胶树次生乳管分化的实验系统,采用qRT-PCR技术分析TSA处理橡胶树萌条及对照内层树皮中22个候选内参基因的表达情况。结果显示:TSA诱导橡胶树萌条次生乳管分化的过程中,稳定性最高的3个基因分别为UBC3、UBC4和eIF1Aa,而稳定性最差的3个基因分别为ROC3、PTP、CYP2。以UBC3、Actin和ROC3基因为内参,分析组蛋白去乙酰化酶基因HDA1和HDA2在TSA处理下树皮中表达量相对于对照的变化,结果初步证实TSA诱导橡胶树萌条次生乳管分化的过程中,UBC3是最佳的内参基因,ROC3不适合作为内参基因。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 乳管分化 曲古抑菌素a(tsa) 内参基因
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曲古菌素A对乳腺癌MDA-MB-231细胞的作用 被引量:3
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作者 姜小良 张徽 +1 位作者 刘香丽 林晓 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第3期312-316,共5页
目的:研究组蛋白去乙酰化酶(Histone deacetylase,HDAC)抑制剂曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭、细胞周期及ERα表达的影响。方法:100~400nmol/L的TSA分别处理MDA-MB-231细胞6~48h后用四甲基偶氮唑... 目的:研究组蛋白去乙酰化酶(Histone deacetylase,HDAC)抑制剂曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭、细胞周期及ERα表达的影响。方法:100~400nmol/L的TSA分别处理MDA-MB-231细胞6~48h后用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测MDA-MB-231细胞的生长活性。应用流式细胞仪观察细胞周期的变化。采用RT -PCR法检测MDA-MB-231细胞在24h不同浓度100~400nmoi/L TSA作用下对ERα,MMP-9 mRNA表达的影响。采用免疫组织化学法检测MDA-MB-231细胞在24h不同浓度100~400nmol/L TSA作用下对ERα,MMP-9在细胞中表达的影响。采用细胞侵袭实验检测MDA-MB-231细胞在24h不同浓度100~400nmol/L TSA作用下细胞侵袭力的变化。结果:TSA可显著抑制MDA-MB-231细胞的增殖,呈时间及剂量依赖性。TSA能够延缓细胞周期G_2/M期进程,阻滞细胞于G_2期。RT-PCR显示,TSA能够上调ERαmRNA在MDA-MB-231细胞中的表达,下调MMP-9在MDA-MB-231细胞中的表达。侵袭实验显示TSA能够较明显的抑制MDA-MB-231细胞的侵袭。结论:TSA能够较明显的上调ERα与下调MMP-9的表达可能是抑制MDA-MB-231细胞增生侵袭与转移的重要机制之一。 展开更多
关键词 曲古抑菌素a(tsa) MDA—MB-231细胞 雌激素受体α(ERα) 基质金属蛋白酶9(MMP-9)
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去乙酰化酶抑制剂TSA通过激活ERK和p38抑制间充质干细胞成脂分化 被引量:3
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作者 龚雨琴 季煜华 +1 位作者 李智耀 王奎栋 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期35-41,共7页
本文研究了丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPKs)信号通路在组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACis)曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)抑制间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)C... 本文研究了丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPKs)信号通路在组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACis)曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)抑制间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)C3H10T1/2成脂分化中的调节机制.首先利用MTT法检测TSA对其增殖活性的影响;Western印迹法首先检测MAPKs信号通路中pERK和p-p38蛋白在间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化过程中的表达情况,以及不同浓度、不同时间TSA处理对pERK和p-p38蛋白差异变化情况;其次再用Western印迹检测TSA对成脂分化过程中间充质干细胞pERK和p-p38蛋白表达的影响.MTT结果显示,TSA浓度在1 nmol/L~100 nmol/L范围内抑制C3H10T1/2细胞的增殖活性,且TSA浓度约为60 nmol/L时即抑制一半以上的C3H10T1/2细胞增殖活性.Western印迹结果显示,TSA处理5 min~80 min,及浓度在1 nmol/L~100 nmol/L范围内激活MAPK信号通路中pERK和p-p38蛋白的表达;C3H10T1/2细胞成脂分化过程中,胞内pERK和p-p38蛋白的表达呈现下调趋势;而TSA抑制了成脂分化过程中C3H10T1/2细胞内pERK和p-p38蛋白的表达变化.本研究结果提示,在C3H10T1/2细胞成脂分化过程中,MAPK信号途径分子pERK和p-p38表达下调;TSA可能是通过活化pERK和p-p38进而抑制间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化. 展开更多
关键词 曲古抑菌素a(tsa) 丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路 C3H10T1/2细胞 成脂分化
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HDAC对接研究:苯甲酰胺类抑制剂结合方式推测(英文) 被引量:7
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作者 谢爱华 李伯玉 +4 位作者 廖晨钟 李志斌 鲁先平 石乐明 周家驹 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第6期569-572,共4页
通过计算机模拟的对接过程研究,发现了MS-275——一种苯甲酰胺类的组蛋白去乙酰酶(HDAC)抑制剂与酶的可能的全新结合方式。这种结合方式与已经阐明的组蛋白去乙酰酶类似蛋白(HDLP)与曲古柳菌素A(trichostatin A,TSA)和suberoylanilide h... 通过计算机模拟的对接过程研究,发现了MS-275——一种苯甲酰胺类的组蛋白去乙酰酶(HDAC)抑制剂与酶的可能的全新结合方式。这种结合方式与已经阐明的组蛋白去乙酰酶类似蛋白(HDLP)与曲古柳菌素A(trichostatin A,TSA)和suberoylanilide hydroxamic acid(SAHA)形成的复合物晶体结构中配体与酶的作用方式完全不同.从对接结果看,MS-275的作用靶点在酶活性口袋的最狭窄部位,而不是直接作用于锌离子.这似乎能够解释MS-275的低毒性特点,并且为设计和筛选全新的HDAC抑制剂提供了新思路. 展开更多
关键词 组蛋白去乙酰酶(HDAC) 组蛋白去乙酰酶类似蛋白(HDLP) 曲古柳菌素a(tsa) 对接 MS-275
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组蛋白去乙酰化酶在杨树根再生和生长中的功能 被引量:5
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作者 张冰 夏德安 马旭俊 《江苏农业科学》 北大核心 2017年第5期40-43,共4页
组蛋白去乙酰化酶(HDAC)在植物生长和发育过程中具有十分重要的调控作用。目前,关于HDAC的研究主要集中在草本植物,而关于木本植物的HDAC功能研究鲜有报道。以84 K杨(银白杨×腺毛杨)和小黑杨2种杨树组培苗为供试材料,在培养基中添... 组蛋白去乙酰化酶(HDAC)在植物生长和发育过程中具有十分重要的调控作用。目前,关于HDAC的研究主要集中在草本植物,而关于木本植物的HDAC功能研究鲜有报道。以84 K杨(银白杨×腺毛杨)和小黑杨2种杨树组培苗为供试材料,在培养基中添加0、1、5μmol/L浓度的组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素(TSA),研究TSA对杨树根再生和生长的影响。结果表明,TSA处理明显抑制2种杨树根的再生和生长,TSA浓度越高,对组培苗根的再生和生长的抑制作用越大。研究结果对于通过根系改良提高杨树对水分和营养物质的利用率、增强杨树抗逆性具有十分重要的意义。 展开更多
关键词 组蛋白去乙酰化酶(HDAC) 曲古抑菌素(tsa) 根再生 生长
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