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普通烟草NtARF2基因克隆及表达模式分析
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作者 武博寒 李鹏志 +7 位作者 蒋红娟 刘涛 贺帅 孟岩 喻奇伟 湛佳伟 温海洋 贾宏昉 《江苏农业科学》 北大核心 2025年第4期94-99,共6页
为探究生长素响应因子NtARF2基因在调控烟草钾的吸收和利用过程中的功能,将烟草K326 NtARF2的cDNA作为模板通过PCR反应进行克隆,利用生物信息学软件分析其结构和功能,通过亚细胞定位技术判断其表达位置,运用qRT-PCR等技术对NtARF2基因... 为探究生长素响应因子NtARF2基因在调控烟草钾的吸收和利用过程中的功能,将烟草K326 NtARF2的cDNA作为模板通过PCR反应进行克隆,利用生物信息学软件分析其结构和功能,通过亚细胞定位技术判断其表达位置,运用qRT-PCR等技术对NtARF2基因的表达模式进行研究。结果表明,NtARF2基因全长2556 bp,可编码851个氨基酸;NtARF2蛋白相对分子质量为94.52805 ku;理论等电点为6.37,酸性;不稳定指数为55.11,属于不稳定蛋白,并且不包含跨膜结构域;同源性和进化树分析表明,烟草NtARF2与拟南芥AtARF2同源性和亲缘性较高。亚细胞定位结果表明该蛋白是一个核蛋白;启动子分析和不同胁迫(低钾、高温、干旱、低温、高盐)处理下的qRT-PCR结果显示,NtARF2基因能够响应低钾、高温、干旱和盐胁迫反应,尤其是低钾响应;进一步研究发现该基因具有组织表达特异性,且低钾条件下烟株根、茎和叶片部位该基因表达量显著降低,推测其参与了不同胁迫下钾离子的吸收和再利用,且可能是一个负调控因子。 展开更多
关键词 普通烟草 NtARF2基因 基因克隆 表达模式 低钾胁迫
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普通烟草NtASAT2的结构预测、克隆表达及功能验证
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作者 韩丽 董滋强 +4 位作者 王丽娇 李文钦 王晨辉 肖成志 毛多斌 《轻工学报》 北大核心 2025年第4期69-76,共8页
为获得具有活性的普通烟草酰基糖酰基转移酶(NtASAT2),采取生物信息学方法对其序列及结构进行分析和预测,并对其基因进行克隆、原核表达与纯化,通过酶催化反应对获得的重组蛋白进行功能验证。结果表明:在NtASAT2二级结构中,α-螺旋及无... 为获得具有活性的普通烟草酰基糖酰基转移酶(NtASAT2),采取生物信息学方法对其序列及结构进行分析和预测,并对其基因进行克隆、原核表达与纯化,通过酶催化反应对获得的重组蛋白进行功能验证。结果表明:在NtASAT2二级结构中,α-螺旋及无规则卷曲占比较大,分别为39.04%和41.13%,且NtASAT2的氨基酸序列与粘毛烟草NacASAT2高度相似;在原核细胞BL21(DE3)表达的重组蛋白中,可溶性NtASAT2含量较少,且NtASAT2与镍柱的亲和力较弱,纯化后仅得到少量目标蛋白;在含有底物的酶催化反应体系中,NtASAT2表现出酶活性并催化生成蔗糖二酯。该研究结果可为NtASAT2在酶催化合成蔗糖酯方面的应用提供理论参考。 展开更多
关键词 普通烟草 酰基糖酰基转移酶 蔗糖酯 克隆 表达与纯化
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普通烟草WRKY基因家族的鉴定及表达分析 被引量:28
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作者 向小华 吴新儒 +5 位作者 晁江涛 杨明磊 杨帆 陈果 刘贯山 王元英 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期840-856,共17页
WRKY 基因家族编码产物是一类含有 WRKY 保守结构域的转录因子(Transcription factors, TFs),在植物的生长发育、胁迫应答等过程中起着重要的作用。目前,已在多种植物中鉴定了 WRKY 基因家族,但在普通烟草(Nicotiana tabacum L.)... WRKY 基因家族编码产物是一类含有 WRKY 保守结构域的转录因子(Transcription factors, TFs),在植物的生长发育、胁迫应答等过程中起着重要的作用。目前,已在多种植物中鉴定了 WRKY 基因家族,但在普通烟草(Nicotiana tabacum L.)中 WRKY 家族的系统鉴定与分析还未见报道。本研究利用 WRKY 保守域全蛋白序列 PF03106检索普通烟草蛋白序列,获得 WRKY 家族候选序列共164个。利用多种生物信息学软件对该家族成员进行了系统进化树、保守结构域、亚细胞定位预测、染色体定位和组织表达等分析。分组鉴定和进化树分析结果显示,可将164个候选 NtWRKY 蛋白分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ3个亚家族。其中,Ⅱ亚家族又可细分为Ⅱ-a、Ⅱ-b、Ⅱ-c、Ⅱ-d 和Ⅱ-e 共5个亚组。WRKY 结构域分析结果显示,多数基因由2~5个外显子组成,各成员间的核心结构域高度保守,含有 WRKY 盒和锌指结构。亚细胞定位预测结果显示,大部分 NtWRKY 成员都定位在细胞核中,参与核基因的转录调控;而第Ⅲ亚家族的大部分成员(74%)定位于细胞质基质中,可能参与细胞质基因的转录调控。染色体定位结果显示,共有154个 NtWRKY 基因能够定位于24条染色体中,且呈不均匀分布,6号染色体上分布最多,含16个候选基因,10号染色体上分布最少,只有1个候选基因。组织表达分析结果显示,大部分 NtWRKY 基因在烟草根、茎、叶中都有表达,但不同基因间的表达模式存在差异,这暗示了烟草 NtWRKY 家族的不同成员在功能上可能具有多样性。研究还发现基因 NtWRKY26、NtWRKY30、NtWRKY32的表达模式受黑胫病原菌(Phytophthora parasitica var. nicotianae)诱导,可能与烟草-黑胫病菌互作机制相关。本研究不仅为研究普通烟草 WRKY 转录因子在调控生长发育过程中的作用奠定了相关理论基础,也为进一步分析普通烟草 WRKY 基因提供了有价值的信息。 展开更多
关键词 普通烟草 WRKY 基因家族 转录因子 生物信息学 基因表达
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普通烟草ARF基因家族序列的鉴定与表达分析 被引量:16
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作者 孙亭亭 张磊 +5 位作者 陈乐 龚达平 王大伟 陈雅琼 陈蕾 孙玉合 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期162-168,共7页
ARF(AUXIN RESPONSE FACTOR)基因含有一个B3功能域和具有转录激活或抑制活性的中心功能域,在植物发育过程中起到非常重要的作用。本研究采用生物信息学方法,根据拟南芥ARF基因序列鉴定了普通烟草基因组中的ARF基因,并对家族成员进行了... ARF(AUXIN RESPONSE FACTOR)基因含有一个B3功能域和具有转录激活或抑制活性的中心功能域,在植物发育过程中起到非常重要的作用。本研究采用生物信息学方法,根据拟南芥ARF基因序列鉴定了普通烟草基因组中的ARF基因,并对家族成员进行了序列特征、系统发生、亚细胞定位和表达模式分析。目前在普通烟草基因组中共得到50个ARF基因成员,其基因结构相对复杂,一般含有10个外显子。亚细胞定位结果表明,少数ARF蛋白定位到线粒体或叶绿体,大多数未检测到定位信号。转录组数据分析表明,ARF基因具有不同的组织表达模式,部分基因表现出组织特异性。这些研究结果为普通烟草ARF基因家族功能的深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 普通烟草 ARF基因家族 系统进化 基因表达
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普通烟草LBD基因家族的全基因组序列鉴定与表达分析 被引量:14
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作者 孙亭亭 龚达平 +4 位作者 张磊 陈雅琼 赵维 向小华 孙玉合 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期316-325,共10页
LBD是一类具有LOB(lateral organ boundaries)结构域的基因家族,在植物发育过程中起到非常重要的作用。采用生物信息学方法,根据拟南芥LBD基因序列鉴定了普通烟草基因组中的LBD基因,并对家族成员进行了序列特征、系统发育和表达谱分... LBD是一类具有LOB(lateral organ boundaries)结构域的基因家族,在植物发育过程中起到非常重要的作用。采用生物信息学方法,根据拟南芥LBD基因序列鉴定了普通烟草基因组中的LBD基因,并对家族成员进行了序列特征、系统发育和表达谱分析。结果表明:普通烟草基因组中共有98个LBD基因成员,其基因结构相对简单,一般含有1~3个外显子。LBD基因家族可分成I和II两大类,两类均含有CX_2CX_6CX_3C保守结构域,但II类不含有LX_6LX_3LX_6L形成的"卷曲螺旋"二级结构,根据与拟南芥LBD蛋白构建的系统发育树则可细分成5个亚家族(Ia、Ib、Ic、Id和II)。将LBD基因与表达序列标签(EST)比对,发现36个基因有EST证据;EST、芯片数据和转录组数据分析表明:LBD基因具有不同的组织表达模式,部分基因表现出组织特异性。这些研究结果为普通烟草LBD基因家族功能的深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 普通烟草 LBD基因家族 系统进化 基因表达
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普通烟草K^+通道基因NKT4的克隆、序列和表达分析 被引量:9
6
作者 曲平治 刘贯山 +4 位作者 刘好宝 司丛丛 胡晓明 冯祥国 刘朝科 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期354-359,共6页
通过比对拟南芥、胡萝卜、番茄和马铃薯的K+通道氨基酸序列得到了保守序列,设计1对简并引物,利用RT-PCR获得3条490bp的普通烟草K+通道基因中间片段。以其中一条中间片段设计特异性引物,应用RACE方法得到5′末端和3′末端cDNA序列。通过... 通过比对拟南芥、胡萝卜、番茄和马铃薯的K+通道氨基酸序列得到了保守序列,设计1对简并引物,利用RT-PCR获得3条490bp的普通烟草K+通道基因中间片段。以其中一条中间片段设计特异性引物,应用RACE方法得到5′末端和3′末端cDNA序列。通过拼接并结合全长克隆及测序验证,获得一个未报道的普通烟草K+通道基因,并将其命名为NKT4(Gen-Bank登录号为FJ233071)。NKT4的cDNA全长为2937bp,其中5′非编码区45bp、编码区2679bp、3′非编码区213bp;编码区编码892个AA。构建了一个烟草、拟南芥及相关植物K+通道蛋白的系统进化树。基因表达分析表明,NKT4主要在烟草主根和侧根中表达,在烟草叶中也有少量表达。 展开更多
关键词 普通烟草 K+通道基因 克隆 RACE 表达
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普通烟草钙依赖蛋白激酶NtCDPK15的基因克隆及表达分析 被引量:8
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作者 康乐 张丽 +4 位作者 张磊 吴清章 丁安明 宗鹏 刘贯山 《中国烟草科学》 CSCD 2013年第3期48-54,共7页
钙依赖蛋白激酶(CDPK)对Ca2+信号转导通路下游元件的调控具有重要作用。本实验采用同源克隆技术从普通烟草中分离得到1个CDPK基因,命名为NtCDPK15(GenBank登录号为JN662020),cDNA全长为1963 bp,ORF大小为1569 bp,编码522个氨基酸。多序... 钙依赖蛋白激酶(CDPK)对Ca2+信号转导通路下游元件的调控具有重要作用。本实验采用同源克隆技术从普通烟草中分离得到1个CDPK基因,命名为NtCDPK15(GenBank登录号为JN662020),cDNA全长为1963 bp,ORF大小为1569 bp,编码522个氨基酸。多序列比对结果表明,NtCDPK15的编码产物具有典型的CDPK保守序列,C末端调控区有4个EF手性结构。系统进化树分析显示,NtCDPK15可能来源于绒毛状烟草,预测NtCDPK15与NtCDPK1这对旁系同源基因在功能上可能非常保守。实时荧光定量PCR分析结果表明,NtCDPK15在根和叶中的表达量显著高于茎中的表达量,但经盐胁迫诱导后NtCDPK15在茎中的表达量显著增加,同时,盐胁迫还使基因在叶中的表达量显著上调,ABA胁迫可诱导基因在根中的表达,而干旱胁迫可使基因在根和叶中的表达量下调,这些结果说明NtCDPK15在普通烟草中的表达受盐胁迫及ABA胁迫诱导,但受干旱胁迫抑制。 展开更多
关键词 普通烟草 CDPK RACE 非生物胁迫 基因表达
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普通烟草SBP转录因子家族的全基因组鉴定及其进化和表达分析 被引量:10
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作者 刘成 李晓旭 +1 位作者 苏玉龙 郭永峰 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2015年第4期1-11,共11页
SBP转录因子家族作为植物特异性的转录因子具有重要的生物学功能,广泛参与花和果实发育等诸多生命过程。利用普通烟草(Nicotiana tabacum)TN90基因组数据,通过隐马尔科夫模型检索,SMART和Pfam分析,鉴定了普通烟草SBP转录因子家族成员;... SBP转录因子家族作为植物特异性的转录因子具有重要的生物学功能,广泛参与花和果实发育等诸多生命过程。利用普通烟草(Nicotiana tabacum)TN90基因组数据,通过隐马尔科夫模型检索,SMART和Pfam分析,鉴定了普通烟草SBP转录因子家族成员;通过多序列比对鉴定并分析了普通烟草SBP结构域的结构特征;通过邻接法、极大似然法进行了系统发育分析;分别利用GSDS和MEME对SBP转录因子家族成员的基因结构和蛋白保守结构域进行了分析;利用普通烟草TN90转录组数据分析了SBP转录因子家族成员在不同组织和时期的表达情况,并对鉴定出的SBP转录因子家族成员进行了GO注释分析。结果表明,普通烟草基因组编码32个SBP转录因子家族成员,氨基酸序列长度差异较大;系统发育分析表明,所有的SBP转录因子家族成员可分为8个亚家族。转录组数据显示,SBP基因家族成员在不同组织和时期中表达迥异,但在花器官中均有较高的表达量。GO注释结果表明,该家族成员作为转录因子,在植物的生长发育、逆境响应等过程中发挥作用。本研究为烟草及其他植物中SBP转录因子家族基因的鉴定和功能研究提供了基础。 展开更多
关键词 生物信息学分析 SBP转录因子家族 普通烟草
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普通烟草MATE基因家族分析及功能预测 被引量:6
9
作者 张艳艳 王倩 +4 位作者 李晓旭 孙亭亭 龚达平 杨明磊 刘贯山 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1307-1314,共8页
植物多药和有毒化合物排出家族(MATE,multidrug and toxic compound extrusion)是一类可转运毒素、金属离子、次级代谢产物的次级转运蛋白家族。该家族主要在植物的解毒机制中发挥作用,部分成员也参与植物的形态建成过程。MATE家族在烟... 植物多药和有毒化合物排出家族(MATE,multidrug and toxic compound extrusion)是一类可转运毒素、金属离子、次级代谢产物的次级转运蛋白家族。该家族主要在植物的解毒机制中发挥作用,部分成员也参与植物的形态建成过程。MATE家族在烟草基因组中的数量、特征及功能目前尚未开展系统分析。本研究利用生物信息学方法对普通烟草(Nicotiana tabacum)基因组中的MATE基因进行了预测分析,共预测到131个基因,分为4个亚家族。亚家族3在进化树中形成较为独立的分枝,其跨膜区数量、亚细胞定位、保守结构域方面与其他亚家族不同。转录组数据显示,相当一部分MATE家族基因在所有组织中低量表达。GO功能注释结果表明该家族成员主要作为一种转运体,在应激响应、生物调控等过程中发挥作用。本研究为烟草及其他植物中MATE家族的鉴定和功能研究提供了数据基础。 展开更多
关键词 普通烟草 MATE家族 生物信息学分析
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普通烟草抗渗透胁迫基因NtP5CS的克隆与表达分析 被引量:5
10
作者 焦蓉 刘贯山 +9 位作者 刘好宝 王树林 侯娜 王全贞 靳义荣 白岩 冯广林 刘朝科 冯祥国 胡晓明 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第2期49-57,共9页
从普通烟草中克隆脯氨酸合成的关键酶基因P5CS,分析其序列特征、进化关系、表达模式,以期为烟草的抗逆研究奠定基础。设计兼并引物获得P5CS基因中间片段,利用RACE技术扩增其全长cDNA;采用生物信息学技术分析该基因的序列结构及其编码蛋... 从普通烟草中克隆脯氨酸合成的关键酶基因P5CS,分析其序列特征、进化关系、表达模式,以期为烟草的抗逆研究奠定基础。设计兼并引物获得P5CS基因中间片段,利用RACE技术扩增其全长cDNA;采用生物信息学技术分析该基因的序列结构及其编码蛋白的保守域及基本特性;利用RT-PCR研究其表达模式。从受干旱胁迫诱导的普通烟草品种中烟14中克隆到全长为2584bp的烟草P5CS基因,命名为NtP5CS,GenBank登录号为HM854026,开放读码框为2160 bp,编码719个氨基酸。经Blast同源性比对分析,该序列与番茄tomPRO2基因在核苷酸和氨基酸水平上高度同源。系统进化树分析显示,NtP5CS与番茄tomPRO2基因可能是直系同源基因。RT-PCR分析表明,干旱、低温、ABA、高盐等胁迫条件均可诱导NtP5CS基因的上调表达,且在旺长期和胁迫条件下根和叶中表达量最高。首次从普通烟草中克隆得到P5CS基因,该基因对水分胁迫响应,可能参与普通烟草抗渗透胁迫反应。 展开更多
关键词 普通烟草 二氢吡咯-5-羧酸合成酶 NtP5CS 克隆 表达分析
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新鉴定高抗TMV普通烟草枯斑资源的N导入片段长度多样性 被引量:4
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作者 刘勇 李梅云 +2 位作者 于海芹 黄昌军 李永平 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第6期94-98,共5页
为了解我国普通烟草(Nicotiana tabacum)资源对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的抗性基因状况,为烟草抗病育种的亲本选择提供信息,利用N基因特异分子标记鉴定出携带N基因的普通烟草资源,并采用N导入片段的特异分子标记鉴定了N... 为了解我国普通烟草(Nicotiana tabacum)资源对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的抗性基因状况,为烟草抗病育种的亲本选择提供信息,利用N基因特异分子标记鉴定出携带N基因的普通烟草资源,并采用N导入片段的特异分子标记鉴定了N导入片段的长度。结果表明,供试的63份接种TMV表现枯斑的普通烟草(简称普通烟草枯斑资源)可划分为3大类型,分别为Coker176类型:GL3.50和GL4.06标记阴性、TN4.39、TN5.226、TN5.51标记阳性;Samsun NN类型:GL3.50、GL4.06、TN4.39、TN5.226标记阳性,TN5.51阴性;Xanthi nc类型:GL3.50、GL4.06、TN4.39、TN5.226、TN5.51标记阳性。402等51份资源的N导入片段长度属于Coker176类型,Ky160等2份资源的N导入片段长度属于Samsun NN类型。Ky52等10份资源的N导入片段长度属于Xanthi nc类型。N导入片段较短的枯斑资源,推测其连锁累赘可能较小,育种利用潜力较大。本文较系统地鉴定了普通烟草抗TMV的枯斑资源的N导入片段长度,可为抗TMV种质资源的育种利用提供参考。 展开更多
关键词 普通烟草 N导入片段 长度
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普通烟草CESA基因家族成员的鉴定、亚细胞定位及表达分析 被引量:16
12
作者 徐宗昌 孔英珍 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期512-524,共13页
纤维素合成酶蛋白(cellulose-synthase proteins,CESA)是一类质膜定位蛋白,以蛋白复合体的形式存在于质膜上合成纤维素,在细胞壁建成和植物生长发育过程中起着非常重要的作用。本研究利用CESA蛋白保守域序列PF03552检索普通烟草(Nicotia... 纤维素合成酶蛋白(cellulose-synthase proteins,CESA)是一类质膜定位蛋白,以蛋白复合体的形式存在于质膜上合成纤维素,在细胞壁建成和植物生长发育过程中起着非常重要的作用。本研究利用CESA蛋白保守域序列PF03552检索普通烟草(Nicotiana tabacum L.)蛋白序列,并通过拟南芥(Arabidopsis thaliana)10个CESA蛋白序列在普通烟草基因组数据库中利用TBLASTN程序进行比对,共获得21条NtCESA基因候选序列,对这些序列进行蛋白序列理化性质分析、系统进化树构建、基因结构分析、保守结构域及跨膜区分析和组织表达模式分析,并对NtCESA9和NtCESA14两个蛋白进行了亚细胞定位实验。结果表明:获得的21条NtCESA蛋白序列的理化性质相似;系统进化分析将21个NtCESA基因和10个At CESA基因分成5个分支,每一个分支各成员之间的进化相对保守,基因结构类似,不同分支之间的基因结构差异也较小;NtCESA蛋白结构域相对保守,都含有CESA蛋白典型的N端锌指结构、C端跨膜区和DDD-QXXRW保守功能域;组织表达分析结果表明,大部分NtCESA基因在幼苗和成熟期烟草的根、叶、胚芽和愈伤组织中都有表达,同一个分支中的基因表达模式基本一致,并且NtCESA基因参与初/次生细胞壁纤维素的合成与该基因编码蛋白的跨膜区数目存在关联,表明NtCESA基因家族成员功能上的复杂性;亚细胞定位结果证实NtCESA9和NtCESA14为质膜定位蛋白。本研究为烟草CESA基因家族功能的深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 普通烟草 CESA基因家族 基因表达 亚细胞定位
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普通烟草长叶柄突变性状的遗传分析 被引量:3
13
作者 陈果 吴新儒 +8 位作者 屈旭 晁江涛 向小华 胡军华 陈浣 王新 刘贯山 王元英 王绍美 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第2期78-83,共6页
叶柄是烟草叶片的重要组成部分,烟草长叶柄性状遗传分析可用于研究烟草叶柄和叶片的发育。利用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变普通烟草烤烟品种中烟100和红花大金元各获得一个(极)长叶柄突变体(M48和M50),将两个突变体分别与各自的野生型中烟10... 叶柄是烟草叶片的重要组成部分,烟草长叶柄性状遗传分析可用于研究烟草叶柄和叶片的发育。利用甲基磺酸乙酯(EMS)诱变普通烟草烤烟品种中烟100和红花大金元各获得一个(极)长叶柄突变体(M48和M50),将两个突变体分别与各自的野生型中烟100和红花大金元及普通烟草烤烟品种革新三号杂交获得F_1,F_1自交获得F_2群体,F_1与其相应的野生型亲本回交获得BC_1F_1群体。对各类型材料进行表型调查和统计分析结果显示:F_1均表现为(极)长叶柄突变表型,在F_2群体和BC_21F_1群体中,经χ~2检验,(极)长叶柄突变表型与野生型表型的理论分离比均符合3:1和1:1,表明(极)长叶柄突变性状由染色体上一对显性单基因控制。上述结果为进一步定位和克隆(极)长叶柄突变基因,揭示其在烟草叶柄和叶片发育中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 普通烟草 EMS诱变 叶柄突变 遗传分析
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普通烟草DREB转录因子的序列鉴定与表达分析 被引量:4
14
作者 胡军华 王大伟 +4 位作者 杨明磊 王新 吴新儒 吴华 刘贯山 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2017年第1期1-7,共7页
DREB转录因子含有一个保守的AP2/ERF结构域,在植物抗逆过程中起关键作用。利用生物信息学分析手段,以拟南芥DREB家族成员序列为参照,在普通烟草(Nicotiana tabacum)基因组公共数据库中鉴定出了68个DREB转录因子。对烟草DREB转录因子家... DREB转录因子含有一个保守的AP2/ERF结构域,在植物抗逆过程中起关键作用。利用生物信息学分析手段,以拟南芥DREB家族成员序列为参照,在普通烟草(Nicotiana tabacum)基因组公共数据库中鉴定出了68个DREB转录因子。对烟草DREB转录因子家族进行了理化性质、系统进化、保守结构域和表达分析。结果表明,普通烟草基因组编码68个DREB转录因子家族成员,氨基酸数目差异较大;系统发育分析表明,拟南芥和烟草的DREB转录因子共125个成员形成6个进化分支,其中烟草比拟南芥缺少A6分支;结构域分析表明,同一分支内的DREB转录因子的保守结构域以及motif具有高度的一致性;组织表达分析表明,大多数DREB家族基因在烟草中表达量较低,在衰老、干旱和病害胁迫下基因表达量较多。此研究将为烟草DREB转录因子的深入分析奠定了生物信息学基础。 展开更多
关键词 DREB转录因子 普通烟草 生物信息学 表达分析
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普通烟草鸟氨酸转氨酶基因Ntδ-OAT的克隆与表达分析 被引量:3
15
作者 焦蓉 刘贯山 +7 位作者 刘好宝 王树林 侯娜 王全贞 靳义荣 刘朝科 冯祥国 胡晓明 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期588-593,600,共7页
鸟氨酸转氨酶是以鸟氨酸为前体合成脯氨酸的关键酶,对植物适应逆境胁迫起关键作用。本研究根据其已知保守序列设计兼并引物,从普通烟草品种中烟14中克隆到一条425bp的中间片段,应用RACE方法设计特异性引物扩增得到5′末端和3′末端cDNA... 鸟氨酸转氨酶是以鸟氨酸为前体合成脯氨酸的关键酶,对植物适应逆境胁迫起关键作用。本研究根据其已知保守序列设计兼并引物,从普通烟草品种中烟14中克隆到一条425bp的中间片段,应用RACE方法设计特异性引物扩增得到5′末端和3′末端cDNA序列,经BLAST验证,首次从普通烟草中克隆到了鸟氨酸转氨酶基因,命名为Ntδ-OAT,其GenBank登录号为GU144571。该基因cDNA全长为1781bp,共编码477个氨基酸。系统进化树分析显示,Ntδ-OAT基因的进化符合传统的生物学分类,主要功能域在生物进化中保守性较高。Real-time PCR分析表明,Ntδ-OAT基因受干旱、高盐、低温、ABA等多种胁迫处理的诱导表达,可能参与普通烟草体内抗渗透胁迫过程。 展开更多
关键词 普通烟草 鸟氨酸转氨酶 Nt-δOAT 克隆 表达分析
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烟夜蛾在普通烟草和黄花烟草上的自然种群生命表及其重要因子分析 被引量:3
16
作者 付晓伟 杨新影 +3 位作者 郭线茹 罗梅浩 原国辉 余明辉 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期632-637,共6页
烟夜蛾(Helicoverpa assultaGuen啨e)对黄花烟草的产卵趋性显著高于普通烟草,为明确2近缘种烟草对该虫种群动态变化的影响,采用作用因子组配生命表的方法,组建了2种烟田内烟夜蛾的自然种群生命表,并进行了重要因子分析,结果表明,(1)烟... 烟夜蛾(Helicoverpa assultaGuen啨e)对黄花烟草的产卵趋性显著高于普通烟草,为明确2近缘种烟草对该虫种群动态变化的影响,采用作用因子组配生命表的方法,组建了2种烟田内烟夜蛾的自然种群生命表,并进行了重要因子分析,结果表明,(1)烟夜蛾在2种烟草上均能完成连续2个世代的生长发育和繁殖,其中第2代烟夜蛾在普通烟田的种群数量呈上升趋势(I2=1.032 5>1),而在黄花烟田呈下降趋势(I2=0.657 7<1),第3代烟夜蛾种群在2种烟田均呈下降趋势,但普通烟田的种群增长(I3=0.457 1)仍大于黄花烟田(I3=0.359 2),表明黄花烟草对烟夜蛾的寄主适合度较普通烟草差;(2)生物因子对烟夜蛾自然种群有重要的控制作用,普通烟田中"烟草和其它"对烟夜蛾种群有较强的控制作用,其次是"病原微生物"和"寄生性天敌",而黄花烟田中"烟草和其它"的控制作用远远大于其它几种作用因子.2种烟草对烟夜蛾寄主适合度的差异可为抗虫烟草品种的筛选提供参考;黄花烟草能吸引烟夜蛾产卵但其寄主适合度较差,有利于压低整个烟田生态系统中烟夜蛾的种群数量,可作为有效的诱集作物,这些防治策略在烟夜蛾的综合治理中具有重要的应用价值. 展开更多
关键词 烟夜蛾 普通烟草 黄花烟草 生命表 诱集作物
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普通烟草RLP类受体蛋白家族成员的鉴定与进化、表达分析 被引量:2
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作者 李奎 李晓旭 +2 位作者 刘成 段奇佳 郭永峰 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2017年第2期63-68,共6页
类受体蛋白(receptor-like proteins,RLPs)作为一类细胞表面受体,广泛存在于高等植物中,参与调控植物生长发育和抗逆等过程。本研究以普通烟草(Nicotiana tabacum)TN90数据库为基础,构建隐马尔科夫模型进行检索,鉴定了普通烟草RLP家族成... 类受体蛋白(receptor-like proteins,RLPs)作为一类细胞表面受体,广泛存在于高等植物中,参与调控植物生长发育和抗逆等过程。本研究以普通烟草(Nicotiana tabacum)TN90数据库为基础,构建隐马尔科夫模型进行检索,鉴定了普通烟草RLP家族成员;采用邻接法构建系统发育树进行系统进化分析;利用GSDS对RLP家族成员的基因结构进行了分析;利用普通烟草TN90转录组数据,分析RLP基因家族成员的表达情况;最后对普通烟草RLP家族成员进行GO注释分析。结果表明,在普通烟草中共鉴定出70个RLP家族成员,各成员的氨基酸序列长度和等电点差异较大;系统进化与基因结构分析表明,普通烟草RLP家族成员划分为6个亚家族,基因结构较为简单;转录组分析结果显示,RLP基因家族成员在不同组织和发育时期的表达有较大差异,个别成员在叶片衰老时期表达量较高;GO注释结果表明,RLPs在植物的生长发育、逆境响应等过程中发挥作用。本研究结果将为普通烟草RLP基因功能分析和利用奠定基础。 展开更多
关键词 普通烟草 RLP基因家族 生物信息学分析
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普通烟草WDR基因的克隆与序列分析
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作者 雷波 陈伟 +2 位作者 王茂胜 潘文杰 李继新 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2010年第4期14-19,共6页
在烟草腺毛的发育中,WD40-bHLH-MYB复合体起着重要的调控作用。利用RT-PCR从云烟85中克隆得到一条普通烟草(Nicotiana tobacum)WDR(NtWDR)全长cDNA序列,GeneBank登录号为GQ260131。NtWDR基因cDNA全长1433bp,具有一个1029bp的开放阅读框(... 在烟草腺毛的发育中,WD40-bHLH-MYB复合体起着重要的调控作用。利用RT-PCR从云烟85中克隆得到一条普通烟草(Nicotiana tobacum)WDR(NtWDR)全长cDNA序列,GeneBank登录号为GQ260131。NtWDR基因cDNA全长1433bp,具有一个1029bp的开放阅读框(ORF)、一个147bp的5′非翻译区和一个257bp的3′非翻译区。该基因编码一个342aa的蛋白质,预测的分子量为38.49kDa,等电点为4.81。BLASTs和NCBI保守域收索表明,NtWDR是AN11/TTG1型WD40蛋白。系统进化和结构特征分析表明,NtWDR基因是PhAN11和Le113964R基因的垂直同源基因。 展开更多
关键词 普通烟草 WDR 腺毛 基因克隆
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普通烟草茉莉酸生物合成途径3个基因的分子克隆、表征和表达分析
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作者 武兆云 孙聚涛 +2 位作者 张智强 薛刚 杨铁钊 《江苏农业科学》 北大核心 2022年第18期75-81,共7页
以普通烟草(Nicotiana tabacum L.)为材料,同源克隆烟草NtLOX、NtAOS和NtAOC基因,对其序列进行分析,构建过表达载体和进行低钾胁迫表达分析。蛋白质序列比对和进化树分析结果表明,NtLOX、NtAOS分别属于植物脂氧合酶(IPR001246)、细胞色... 以普通烟草(Nicotiana tabacum L.)为材料,同源克隆烟草NtLOX、NtAOS和NtAOC基因,对其序列进行分析,构建过表达载体和进行低钾胁迫表达分析。蛋白质序列比对和进化树分析结果表明,NtLOX、NtAOS分别属于植物脂氧合酶(IPR001246)、细胞色素P450(IPR002403)家族,其中NtAOC具有异构酶活性(GO:0016853)。根据氨基酸序列预测结果,NtAOS、NtAOC定位于叶绿体,而NtLOX定位于细胞质。为了对基因功能进行研究,构建3个基因的过表达载体。qRT-PCR分析结果表明,在缺钾条件下,与低钾不耐受(敏感)基因型烟草品种相比,耐低钾基因型中NtLOX在转录物水平升高得更早且持续时间更长。因此,NtLOX的表达水平可能与烟草植物对低钾胁迫的抗性密切相关。研究结果为揭示NtLOX、NtAOS和NtAOC在低钾胁迫中的分子机制奠定了研究基础。 展开更多
关键词 普通烟草 脂氧合酶 丙二烯氧化物合酶 丙二烯氧化物环化酶 分子克隆 生物信息学分析 表达分析
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普通烟草ERF转录因子亚家族成员鉴定及表达模式分析 被引量:9
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作者 任昂彦 孔英珍 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2017年第1期15-22,共8页
乙烯结合响应因子(Ethylene-responsive element binding factors,ERF)家族广泛参与植物的生长发育、逆境调节及激素信号应答等过程。利用生物信息方法,鉴定普通烟草基因组ERF转录因子亚家族成员,并对该亚家族成员的染色体定位、理化性... 乙烯结合响应因子(Ethylene-responsive element binding factors,ERF)家族广泛参与植物的生长发育、逆境调节及激素信号应答等过程。利用生物信息方法,鉴定普通烟草基因组ERF转录因子亚家族成员,并对该亚家族成员的染色体定位、理化性质、系统发生、保守结构域、亚细胞定位和组织表达模式进行分析。结果显示,目前在普通烟草中得到121个ERF基因,在烟草24条染色体分布位置具有不均匀性。通过构建进化树,根据拟南芥ERF亚家族的分类方式将烟草ERF亚家族分为6组,同一分组成员的理化性质及保守域呈现高度一致性。亚细胞定位分析结果显示,绝大部分成员定位在细胞核,少数定位在线粒体和叶绿体上。组织表达模式分析结果显示,烟草ERF基因在幼根、成熟根、离体叶和茎中表达量较高,不同分组成员之间表达存在差异。 展开更多
关键词 普通烟草 ERF基因家族 生物信息 表达模式 基因家族
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