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层粘连蛋白对晚G_1期人胃癌BGC-823细胞生长的促进作用
被引量：
5
1
作者
孟书聪
董晓敏
+3 位作者
张莎
林明
黄应申
肖军军
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第10期870-875,共6页
为研究层粘连蛋白(laminin,LN)促进肿瘤细胞生长作用,采用脉冲标记计数有丝分裂百分率(percentage labeling mitosis,PLM)法测得体外培养人胃癌(BGC-823)细胞周期时间为41h,其中G1期时间为24.5h.分裂细胞脱离法获取分裂期细胞,继续培养2...
为研究层粘连蛋白(laminin,LN)促进肿瘤细胞生长作用,采用脉冲标记计数有丝分裂百分率(percentage labeling mitosis,PLM)法测得体外培养人胃癌(BGC-823)细胞周期时间为41h,其中G1期时间为24.5h.分裂细胞脱离法获取分裂期细胞,继续培养23h,在细胞运行进入G1晚期时,将其置于LN0、0.11、0.55、1.10μmol/L基质上孵育4h;细胞荧光光度计检测晚G1期细胞内Ca2+浓度、钙调蛋白、DNA含量.结果显示,LN与其膜上受体结合后引起细胞内Ca2+浓度、钙调蛋白、DNA含量增加,尤以在0.55μmol/LLN作用显著(P<0.001).蛋白质免疫印迹分析证明,cPKC-α呈现表达,提示LN与其受体结合可增强其细胞cPKC-α的活性;分析G1期细胞周期蛋白E(cyclinE)、细胞周期蛋白依赖性激酶CDK2表达水平,呈现逐渐增强的趋势;LN可诱导c-Myc蛋白呈现高表达,提示LN与其受体结合增强与细胞增殖密切相关的基因表达;在LN作用前后的BGC-823细胞均未检测到Bax蛋白表达.结果提示,在人胃癌(BGC-823)细胞G1/S期交界处,层粘连蛋白与其膜上受体结合引起细胞内Ca2+浓度升高,诱导钙调蛋白的释放,其含量增加,增强蛋白激酶C的活化,导致细胞内DNA含量增加、G1/S期细胞周期蛋白与CDK表达增强、诱导原癌基因c-Myc呈持续表达状态,而凋亡基因Bax不表达.
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关键词
层粘连蛋白
晚
g
1
期人
胃
癌细胞
(
bgc-
823
)
Ca2+/CaM/PKC
相关基因表达
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职称材料
题名
层粘连蛋白对晚G_1期人胃癌BGC-823细胞生长的促进作用
被引量：
5
1
作者
孟书聪
董晓敏
张莎
林明
黄应申
肖军军
机构
北京大学基础医学院细胞生物学系
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第10期870-875,共6页
基金
国家自然科学基金(No.330690)
北京大学985项目(No.985-2-016-24)资助~~
文摘
为研究层粘连蛋白(laminin,LN)促进肿瘤细胞生长作用,采用脉冲标记计数有丝分裂百分率(percentage labeling mitosis,PLM)法测得体外培养人胃癌(BGC-823)细胞周期时间为41h,其中G1期时间为24.5h.分裂细胞脱离法获取分裂期细胞,继续培养23h,在细胞运行进入G1晚期时,将其置于LN0、0.11、0.55、1.10μmol/L基质上孵育4h;细胞荧光光度计检测晚G1期细胞内Ca2+浓度、钙调蛋白、DNA含量.结果显示,LN与其膜上受体结合后引起细胞内Ca2+浓度、钙调蛋白、DNA含量增加,尤以在0.55μmol/LLN作用显著(P<0.001).蛋白质免疫印迹分析证明,cPKC-α呈现表达,提示LN与其受体结合可增强其细胞cPKC-α的活性;分析G1期细胞周期蛋白E(cyclinE)、细胞周期蛋白依赖性激酶CDK2表达水平,呈现逐渐增强的趋势;LN可诱导c-Myc蛋白呈现高表达,提示LN与其受体结合增强与细胞增殖密切相关的基因表达;在LN作用前后的BGC-823细胞均未检测到Bax蛋白表达.结果提示,在人胃癌(BGC-823)细胞G1/S期交界处,层粘连蛋白与其膜上受体结合引起细胞内Ca2+浓度升高,诱导钙调蛋白的释放,其含量增加,增强蛋白激酶C的活化,导致细胞内DNA含量增加、G1/S期细胞周期蛋白与CDK表达增强、诱导原癌基因c-Myc呈持续表达状态,而凋亡基因Bax不表达.
关键词
层粘连蛋白
晚
g
1
期人
胃
癌细胞
(
bgc-
823
)
Ca2+/CaM/PKC
相关基因表达
Keywords
laminin
late-
g
1
phase human
g
astric cancer （
bgc-
823
） cells
Ca^2＋/CaM/PKC
related
g
ene expression
分类号
Q979.1 [生物学]
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出处
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1
层粘连蛋白对晚G_1期人胃癌BGC-823细胞生长的促进作用
孟书聪
董晓敏
张莎
林明
黄应申
肖军军
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
5
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