星形胶质细胞通过Cx47调控外泌体介导的CHI3L1分泌并促进少突胶质前体细胞增殖

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作者 张笑妍 程楠楠 彭彦 《中南大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第4期573-585,共13页

目的:神经退行性变性疾病与髓鞘缺失紧密相关,而少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)的增殖和分化是髓鞘修复的关键,但其调控机制尚未完全明确。本研究旨在探讨星形胶质细胞(astrocytes,ASTs)通过间隙连接蛋白47(co... 目的:神经退行性变性疾病与髓鞘缺失紧密相关,而少突胶质前体细胞(oligodendrocyte precursor cells,OPCs)的增殖和分化是髓鞘修复的关键,但其调控机制尚未完全明确。本研究旨在探讨星形胶质细胞(astrocytes,ASTs)通过间隙连接蛋白47(connexin 47,Cx47)调控外泌体介导的几丁质酶3样蛋白1(chitinase-3-like protein 1,CHI3L1)分泌及其对OPCs增殖的影响机制。方法:采用清洁的出生后第1天斯普拉格-道利(postnatal day 1 Sprague-Dawley,P1SD)乳鼠原代细胞,建立OPCs与ASTs上清液共培养组(A组)、ASTs与OPCs直接接触培养组(C组)及OPCs单独培养组(O组)。采用光学显微镜、5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(5-ethynyl-2'-deoxyuridine,EdU)掺入及流式细胞术评估细胞状态和增殖能力。采用转录组测序(RNA sequencing,RNA-Seq)和生物信息学分析(bioinformatics analysis,BA)筛选3组中OPCs的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。采用蛋白质印迹(Western blotting,WB)和流式细胞术分析各培养组蛋白质表达和细胞周期。采用差速离心法分离、提纯外泌体,通过纳米颗粒追踪分析(nanoparticle tracking analysis,NTA)、透射电子显微镜分析观察OPCs分泌的外泌体数量和质量,采用WB验证外泌体中CHI3L1的表达水平。采用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术敲除Cx47,评估敲除后OPCs增殖能力和外泌体分泌情况。构建包裹CHI3L1的小单层脂质体(single unilamellar vesicles,SUVs)作为人工外泌体模型,采用NTA和电子显微镜鉴定其结构和尺寸。在敲除Cx47后,补充人工外泌体并采用流式细胞术和EdU试验检测OPCs增殖情况。结果:在直接接触共培养条件下,相较于O组和A组,C组OPCs增殖最为显著(P<0.05)。RNA-Seq和WB分析结果显示,ASTs通过Cx47显著促进OPCs的增殖,并增强富含CHI3L1的外泌体的分泌。在采用siRNA技术抑制Cx47表达后,OPCs增殖活性以及外泌体释放量均显著降低(P<0.05);再次补充分离提纯的外泌体和外源性CHI3L1后,采用siRNA技术敲除Cx47对OPCs细胞增殖的抑制作用被削弱。结论:本研究揭示了ASTs通过Cx47调控OPCs增殖的新途径,ASTs在直接接触OPCs时通过Cx47增强富含CHI3L1的外泌体分泌,将细胞间接触信号转化为分泌信号,从而促进OPCs增殖。CHI3L1作为外泌体中的关键分子,在神经系统中的功能和髓鞘修复中的作用机制值得深入研究。 展开更多

关键词 少突胶质前体细胞 星形胶质细胞 间隙连接蛋白47 外泌体 几丁质酶3样蛋白1 5-乙炔基-2'-脱氧尿苷 转录组测序 差异表达基因 细胞增殖

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小鼠抗星形胶质细胞上调基因1(AEG-1)单克隆抗体的制备及应用

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作者 路蔓 龙敏 +2 位作者 郜赵伟 刘冲 张惠中 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1690-1694,共5页

目的制备并纯化具有高特异性的抗星形胶质细胞上调基因1(AEG-1)单克隆抗体(mAb),并进行异硫氰酸荧光素(FITC)标记,鉴定标记的mAb与肿瘤细胞的结合能力。方法小鼠腹水诱生法制备并纯化抗AEG-1 mAb,Western blot法和免疫组织化学染色检测... 目的制备并纯化具有高特异性的抗星形胶质细胞上调基因1(AEG-1)单克隆抗体(mAb),并进行异硫氰酸荧光素(FITC)标记,鉴定标记的mAb与肿瘤细胞的结合能力。方法小鼠腹水诱生法制备并纯化抗AEG-1 mAb,Western blot法和免疫组织化学染色检测mAb的纯度及免疫活性。流式细胞术检测FITC标记mAb的标记效率,流式细胞术及免疫细胞化学染色检测FITC标记mAb与肿瘤细胞的结合能力。结果纯化得到了具有较高纯度的抗AEG-1 mAb,免疫活性良好;流式细胞术检测结果显示,FITC标记的mAb标记的肿瘤细胞表面荧光强度明显增加,标记率可达到90%以上;FITC标记的mAb可特异性识别并结合AEG-1阳性表达的肿瘤细胞,还能与小鼠体内注射的肿瘤细胞结合,在BALB/c小鼠血液中可检测出荧光染色阳性的肿瘤细胞。结论成功制备出小鼠抗AEG-1 mAb并进行了FITC标记,标记的mAb在体内外均可与肿瘤细胞特异性结合。 展开更多

关键词 星形胶质细胞上调基因1(aeg-1) 单克隆抗体 异硫氰酸荧光素标记 肿瘤特异性

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胆囊癌组织星形胶质细胞上调基因1异常表达与临床病理及预后的关系 被引量：3

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作者 崔大鹏 张迎春 +5 位作者 宋文丽 张鹏娟 张星月 刘振显 连晶晶 刘博 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第15期1963-1966,共4页

目的探讨胆囊癌组织星形胶质细胞上调基因1(AEG-1)表达与临床病理及预后的关系。方法选取2016年1月至2018年6月收治的128例胆囊癌患者,均于术后进行癌组织AEG-1检测。随访2年,记录生存时间。采用多因素COX回归分析胆囊癌患者预后影响因... 目的探讨胆囊癌组织星形胶质细胞上调基因1(AEG-1)表达与临床病理及预后的关系。方法选取2016年1月至2018年6月收治的128例胆囊癌患者,均于术后进行癌组织AEG-1检测。随访2年,记录生存时间。采用多因素COX回归分析胆囊癌患者预后影响因素,绘制Kaplan-Meier生存曲线。结果128例患者癌组织AEG-1阳性率71.87%。手术方式、肿瘤最大径、分化程度、TNM分期、胆总管浸润、淋巴结转移、AEG-1表达是生存影响因素(P<0.05)。AEG-1阳性和阴性患者生存情况差异有统计学意义(P=0.009)。结论胆囊癌组织AEG-1表达与肿瘤最大径、病理分型、分化程度、TNM分期、周围组织侵犯等有关,且AEG-1表达是预后影响因素。 展开更多

关键词 胆囊癌 星形胶质细胞上调基因1 临床病理 预后 生存分析 血管新生 细胞凋亡

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上调星形胶质细胞中PP2A对APP/PS1双转基因小鼠的神经保护作用 被引量：5

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作者 李夏春 彭敏峰 +2 位作者 高丽华 楼正青 柳秀平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1189-1194,共6页

目的:探讨上调星形胶质细胞中蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)对APP/PS1双转基因小鼠的神经保护作用。方法:构建带胶质细胞原纤维酸性蛋白启动子的e GFP-wt PP2A慢病毒,特异性上调星形胶质细胞中的PP2A。将实验小鼠随机分为... 目的:探讨上调星形胶质细胞中蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase 2A,PP2A)对APP/PS1双转基因小鼠的神经保护作用。方法:构建带胶质细胞原纤维酸性蛋白启动子的e GFP-wt PP2A慢病毒,特异性上调星形胶质细胞中的PP2A。将实验小鼠随机分为野生对照+慢病毒空载体组(Con组)、APP/PS1双转基因小鼠+慢病毒空载体组(APP/PS1组)和APP/PS1双转基因小鼠+慢病毒感染组(PP2A组),各组小鼠经侧脑室注射慢病毒4周后,采用脑片免疫荧光检测β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)的水平,通过Golgi染色观察树突棘密度和形态学变化,电镜检测突触后致密物(postsynaptic density,PSD)的厚度,Morris水迷宫定位航行实验检测感染慢病毒后对学习和记忆的影响。结果:上调星形胶质细胞中PP2A降低APP/PS1双转基因小鼠Aβ的水平,增加树突棘密度、有突触功能的蘑菇状树突棘比例和PSD厚度,缩短寻找平台逃避潜伏期。结论:上调星形胶质细胞中PP2A改善APP/PS1双转基因小鼠AD样Aβ聚集的病理改变,具有重塑突触结构与功能和改善学习记忆能力的作用。 展开更多

关键词 蛋白磷酸酶2A 星形胶质细胞 APP/PS1双转基因小鼠 神经保护作用

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星形胶质细胞上调基因1和基质金属蛋白酶9在人脑胶质瘤中的表达及其相关性研究 被引量：7

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作者 吴建珩 李晓辉 +1 位作者 单峤 李培栋 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期648-651,共4页

目的 探讨星形胶质细胞上调基因1 （AEG-1）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）在人脑胶质瘤中的表达情况及两者的相关性.方法 收集2009年5月-2012年6月郑州大学第五附属医院住院的具有明确病理分级的脑胶质瘤标本72例为脑胶质瘤组,其中低级别... 目的 探讨星形胶质细胞上调基因1 （AEG-1）和基质金属蛋白酶9（MMP-9）在人脑胶质瘤中的表达情况及两者的相关性.方法 收集2009年5月-2012年6月郑州大学第五附属医院住院的具有明确病理分级的脑胶质瘤标本72例为脑胶质瘤组,其中低级别组（Ⅰ～Ⅱ级）32例、高级别组（Ⅲ～Ⅳ级）40例,另收集脑创伤行内减压去除的脑组织36例为对照组.分别采用反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）与Western blotting测定标本中AEG-1和MMP-9的 mRNA及蛋白表达水平.结果与对照组比较,低级别组和高级别组AEG-1、MMP-9 mRNA及蛋白表达水平上调（P＜0.05）;与低级别组比较,高级别组AEG-1、MMP-9 mRNA及蛋白表达水平上调（P＜0.05）.Spearman相关分析显示,MMP-9与AEG-1表达呈正相关（r=0.693,P＜0.01）.结论 AEG-1和MMP-9在人脑胶质瘤中呈高表达,且其表达与脑胶质瘤的病理分级相关,可能与脑胶质瘤的增殖及侵袭有关. 展开更多

关键词 星形胶质细胞上调基因1 基质金属蛋白酶9 神经胶质瘤

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星形胶质细胞活化基因-1(AEG-1)在葡萄膜黑色素瘤中的表达及其与临床组织病理学的关系 被引量：5

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作者 毛英 白海霞 +4 位作者 畅颖 高飞 张志豹 张旭 李彬 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第2期121-125,共5页

目的研究葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma,UM)组织中星形胶质细胞活化基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)的表达及其与临床组织病理学的关系。方法收集北京同仁医院眼科2013年1月至2017年5月,经眼科病理室确诊为UM且临床资料完善... 目的研究葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma,UM)组织中星形胶质细胞活化基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)的表达及其与临床组织病理学的关系。方法收集北京同仁医院眼科2013年1月至2017年5月,经眼科病理室确诊为UM且临床资料完善的50例患者(50眼)UM石蜡组织标本为实验组,11例(11眼)因外伤行眼球摘除但大部分葡萄膜组织正常的石蜡组织标本为对照组。应用免疫组织化学法检测所有石蜡标本中氉AEG-1的表达,并分析UM临床病理学特征与AEG-1的相关性。结果 AEG-1蛋白染色呈粉红色或者红色,主要定位于UM核周、细胞浆和细胞膜。实验组中,AEG-1阴性表达21眼(42.0%),阳性表达29眼(58.0%);对照组中AEG-1均呈阴性表达,两组AEG-1表达比较差异有显著统计学意义(P=0.000),提示AEG-1在UM中高表达。在实验组中,当UM患眼存在临床组织病理学高危因素时,即存在肿瘤累及睫状体、虹膜新生血管生成、肿瘤基底最大直径>16 mm、肿瘤高度>8 mm、肿瘤细胞为混合细胞型、肿瘤细胞属于上皮样或混合细胞型、肿瘤眼外生长的患者,其AEG-1阳性表达率分别为73.1%、73.9%、95.2%、82.4%、83.3%、74.1%、69.4%,明显高于非高危因素患者,以上各特征组AEG-1表达比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。而患者性别、眼别、年龄、累及视盘与否、继发视网膜脱离与否、上皮样细胞型、侵犯巩膜导管与否组AEG-1表达差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论 AEG-1在UM组织中高表达,且与UM临床组织病理学多种高危因素呈显著相关性,提示AEG-1的高表达有可能成为判断UM患者预后的重要指标之一。 展开更多

关键词 葡萄膜黑色素瘤 星形胶质细胞活化基因-1 高危因素 免疫组织化学

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PDTC对A549细胞增殖、细胞周期、凋亡及星形细胞上调基因-1表达的影响 被引量：5

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作者 陈李影慧 吴武佳 秦东春 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第4期485-488,共4页

目的:观察NF-κB特异性抑制剂PDTC对人肺腺癌A549细胞增殖、细胞周期、凋亡及星形细胞上调基因-1(AEG-1)表达的影响。方法:用不同浓度(25、50、100、200μmol/L)的PDTC分别处理A549细胞,对照组不给PDTC。应用MTT法检测处理24、48、72h... 目的:观察NF-κB特异性抑制剂PDTC对人肺腺癌A549细胞增殖、细胞周期、凋亡及星形细胞上调基因-1(AEG-1)表达的影响。方法:用不同浓度(25、50、100、200μmol/L)的PDTC分别处理A549细胞,对照组不给PDTC。应用MTT法检测处理24、48、72h后细胞增殖抑制率,流式细胞术检测处理24h后细胞周期的变化,Ho-echst33342荧光染色检测处理24h后细胞的凋亡情况,RT-PCR和Westernblot检测处理24h后细胞AEG-1mRNA和蛋白的表达。结果:经PDTC处理的A549细胞增殖明显受抑,呈时间和浓度依赖性(F时间=531.981,F浓度=388.475,P<0.05);与对照组相比,PDTC处理24h后A549细胞G0/G1期细胞比例上升(P<0.05),细胞形态出现明显凋亡改变;随着PDTC浓度的增加,癌细胞内AEG-1mRNA和蛋白的表达水平降低(F=275.162、59.473,P<0.05)。结论:PDTC可抑制A549细胞的增殖,诱导其凋亡,其机制可能与PDTC抑制NF-κB、AEG-1的表达有关。 展开更多

关键词 肺癌 A549细胞 PDTC NF-ΚB 凋亡 星形细胞上调基因-1

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大鼠颞叶癫痫点燃后海马星形细胞上调基因-1 mRNA和蛋白水平的表达变化 被引量：2

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作者 左娣 刘昆梅 +4 位作者 张瑞 和祯泉 丁娜 马琳 张春 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2016年第11期1158-1162,共5页

目的颞叶癫痫反复发作,对颞叶癫痫发病机制深入研究尤其重要。文中旨在探讨颞叶癫痫脑损伤后星形细胞上调基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)mRNA和蛋白水平的表达变化。方法雄性SD大鼠60只,随机数字表法分为对照组、癫痫组,每组3... 目的颞叶癫痫反复发作,对颞叶癫痫发病机制深入研究尤其重要。文中旨在探讨颞叶癫痫脑损伤后星形细胞上调基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)mRNA和蛋白水平的表达变化。方法雄性SD大鼠60只,随机数字表法分为对照组、癫痫组,每组30只。癫痫组一侧海马注射海人酸制备癫痫大鼠模型,对照组注射相同体积等渗盐水。通过RT-PCR、Western blot以及免疫组化等技术检测AEG-1mRNA和蛋白分子水平变化。结果在海人酸致痫大鼠模型中,AEG-1 mRNA较对照组明显升高[(1.508±0.090)vs(1.000±0.150),P<0.05];AEG-1蛋白的表达亦明显增加[(1.048±0.080)vs(0.749±0.550),P<0.05];免疫组化结果表明,癫痫组大鼠海马CA1、CA3、DG区AEG-1表达均高于对照组。结论 AEG-1与颞叶癫痫有高度相关性,AEG-1mRNA和蛋白水平表达变化说明AEG-1可能参与了癫痫发作过程。 展开更多

关键词 海人酸 癫痫 海马 星形细胞上调基因-1

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抑制或过表达GRK5基因对星形胶质细胞凋亡及IL-1β和TNF-α表达的影响 被引量：1

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作者 贾蕾 史娟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1163-1167,共5页

目的:探讨抑制或过表达G蛋白偶联受体激酶5(GRK5)基因对星形胶质细胞(AS)凋亡及IL-1β和TNF-α表达的影响。方法:培养原代AS,将干扰GRK5表达的siRNA(GRK5-siRNA)及GRK5的过表达质粒(pc DNA3.1-GRK5)分别转染AS,通过Western blot检测转染... 目的:探讨抑制或过表达G蛋白偶联受体激酶5(GRK5)基因对星形胶质细胞(AS)凋亡及IL-1β和TNF-α表达的影响。方法:培养原代AS,将干扰GRK5表达的siRNA(GRK5-siRNA)及GRK5的过表达质粒(pc DNA3.1-GRK5)分别转染AS,通过Western blot检测转染24 h后的细胞中GRK5蛋白的表达;缺氧处理AS,细胞分为空白组、缺氧组、缺氧+pc DNA3.1-GRK5组和缺氧+GRK5-siRNA组,缺氧处理24 h后通过流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率及ROS含量;RT-PCR检测IL-1β和TNF-α的mRNA表达;Western blot检测p53、信号转导与转录因子3(STAT3)和p-STAT3蛋白表达。结果:与空白组比较,转染GRK5-siRNA的AS中GRK5的表达显著降低,转染pc DNA3.1-GRK5的细胞GRK5的表达显著升高(P<0.05);与空白组比较,缺氧组细胞凋亡率、ROS水平及IL-1β、TNF-α、p53和p-STAT3的表达均显著升高(P<0.05);与缺氧组比较,缺氧+pc DNA3.1-GRK5组细胞凋亡率、ROS水平及IL-1β、TNF-α、p53和p-STAT3的表达均显著降低,缺氧+GRK5-siRNA组细胞凋亡率、ROS水平及IL-1β、TNF-α、p53和p-STAT3的表达均显著升高(P<0.05)。结论:过表达GRK5可降低AS凋亡和ROS水平,下调IL-1β、TNF-α、p53表达及STAT3信号通路,抑制GRK5表达反之。 展开更多

关键词 GRK5基因 星形胶质细胞 凋亡 STAT3信号通路 IL-1Β TNF-Α

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星形细胞上调基因1、β-连环素及周期素D1在肝细胞癌中的表达及临床意义

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作者 于营 罗新华 +1 位作者 程明亮 程云娟 《临床肝胆病杂志》 CAS 2016年第8期1549-1552,共4页

目的探讨肝细胞癌(HCC)组织中星形细胞上调基因(AEG)1、β-连环素(β-catenin)及周期素D1(Cyclin D1)的表达及临床意义。方法随机选取2013年7月-2014年12月贵州省人民医院经手术及病理证实为HCC的癌组织标本和对应癌旁组织各40例,另选取... 目的探讨肝细胞癌(HCC)组织中星形细胞上调基因(AEG)1、β-连环素(β-catenin)及周期素D1(Cyclin D1)的表达及临床意义。方法随机选取2013年7月-2014年12月贵州省人民医院经手术及病理证实为HCC的癌组织标本和对应癌旁组织各40例,另选取8例正常肝组织作为对照组。采用免疫组化SP法检测AEG-1、β-catenin及Cyclin D1蛋白在HCC组织、对应癌旁肝组织及正常肝组织中的表达情况,并分析其表达与HCC临床病理因素的相关性。计数资料组间比较采用χ2检验或Fisher确切概率法,AEG-1、β-catenin、Cyclin D1在HCC中的相关性采用Spearman等级相关分析。结果 AEG-1、β-catenin及Cyclin D1在HCC组织及癌旁肝组织中的表达均高于正常肝组织,差异均有统计学意义(χ2值分别为7.840、4.274、8.817、4.274、9.919、4.850,P值分别为0.005、0.039、0.003、0.039、0.002、0.028)。AEG-1、β-catenin、Cyclin D1的阳性表达在性别、年龄、HBs Ag、肿瘤大小方面差异无统计学意义(P值均>0.05),而在病理分化程度、肝癌TNM分期及转移方面差异有统计学意义(P值均<0.05)。相关性分析显示,AEG-1蛋白的表达与β-catenin、Cyclin D1蛋白的表达呈正相关(r值分别为0.420、0.741,P值均<0.01)。结论 AEG-1、β-catenin及Cyclin D1在HCC的发生、发展过程中起着重要的作用;AEG-1可能通过上调Cyclin D1、β-catenin的表达和活性而促进HCC的发生和转移;联合检测三者的表达,可作为HCC基因治疗及预后评价的重要指标。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 星形细胞上调基因1 Β连环素 细胞周期蛋白D1

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siRNA下调AEG-1基因表达对胶质瘤细胞血管拟态形成的影响 被引量：5

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作者 梁晨 唐荣华 +2 位作者 上官健 廉民学 郭世文 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期87-91,共5页

目的探讨下调星型细胞上调基因-1(AEG-1)表达对胶质瘤细胞血管拟态(VM)形成的影响及其可能的机制。方法利用siRNA下调U87胶质瘤细胞中AEG-1表达,通过体外构建胶质瘤VM模型,研究下调AEG-1表达对胶质瘤VM形成的影响;Real-time PCR及Wester... 目的探讨下调星型细胞上调基因-1(AEG-1)表达对胶质瘤细胞血管拟态(VM)形成的影响及其可能的机制。方法利用siRNA下调U87胶质瘤细胞中AEG-1表达,通过体外构建胶质瘤VM模型,研究下调AEG-1表达对胶质瘤VM形成的影响;Real-time PCR及Western blot分别检测AEG-1表达下调对U87细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP2)mRNA及蛋白表达的影响;免疫荧光法检测AEG-1表达下调对VM模型中VEGF及MMP2表达的影响。结果 siRNA下调AEG-1表达能显著降低U87细胞体外VM的形成(P<0.01),同时下调AEG-1基因能够显著抑制U87细胞及其构成的VM中VEGF及MMP2的表达(P<0.01)。结论 siRNA下调AEG-1表达能显著抑制胶质瘤细胞VM的形成,其部分机制可能是通过下调VEGF及MMP2表达实现。 展开更多

关键词 星型细胞上调基因-1 SIRNA 胶质瘤 血管拟态

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星形胶质细胞升高基因1在肿瘤中的多重调节功能研究进展

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作者 顾文文 曹永兵 +1 位作者 姜远英 龚晓健 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期668-672,共5页

星形胶质细胞升高基因1(astrocyte elevated gene 1,AEG-1)作为重要的癌基因之一,目前已被证实在多种肿瘤的发生发展过程中发挥关键性作用。近十年来研究表明AEG-1在神经母细胞瘤、黑素瘤、肝癌、乳腺癌、前列腺癌等几乎所有器官的恶性... 星形胶质细胞升高基因1(astrocyte elevated gene 1,AEG-1)作为重要的癌基因之一,目前已被证实在多种肿瘤的发生发展过程中发挥关键性作用。近十年来研究表明AEG-1在神经母细胞瘤、黑素瘤、肝癌、乳腺癌、前列腺癌等几乎所有器官的恶性肿瘤中均有不同程度过表达,在肿瘤细胞增殖、促进血管生成、肿瘤转化、侵袭和转移以及化疗耐药等方面发挥多重调节作用,其机制涉及到PI3K/Akt、NF-κB等多个信号通路。本文主要综述近年来AEG-1在肿瘤发生发展过程中多重调节作用的相关研究进展,以及将其作为恶性肿瘤治疗新靶点的应用前景。 展开更多

关键词 星形胶质细胞升高基因1 血管生成 肿瘤转移 化疗耐药

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DISC1基因过表达对星形胶质细胞质膜伸展的影响

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作者 刘淑宝 田衍平 +2 位作者 陈显军 吴锡艳 肖岚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期938-942,共5页

目的构建精神分裂症断裂基因1(Disrupted-In-Schizophrenia 1,DISC1)蛋白表达质粒,检测其过表达后对星形胶质细胞(Astrocytes,ASTs)质膜伸展的影响。方法针对小鼠DISC1基因mRNA编码序列,设计合成可扩增全长引物;以小鼠脑白质cDNA为模板... 目的构建精神分裂症断裂基因1(Disrupted-In-Schizophrenia 1,DISC1)蛋白表达质粒,检测其过表达后对星形胶质细胞(Astrocytes,ASTs)质膜伸展的影响。方法针对小鼠DISC1基因mRNA编码序列,设计合成可扩增全长引物;以小鼠脑白质cDNA为模板进行PCR扩增,构建全长表达质粒,命名为pEGFP-n1-DISC1。分别将过表达组pEGFP-n1-DISC1和空载体对照组pEGFP-n1电转染原代培养ASTs,以Western blot及免疫荧光染色检测DISC1-GFP融合蛋白的表达,利用Image-Pro Plus 5.0软件分析对照组与DISC1过表达组星形胶质细胞质膜伸展面积的大小。结果成功从cDNA中扩增出DISC1编码序列并插入pEGFP-n1载体,双酶切和测序结果证实,DISC1蛋白编码序列插入载体,并能正确读码翻译。构建质粒转染ASTs 60 h后,可见DISC1-GFP融合蛋白表达;与对照组相比,DISC1过表达组ASTs的质膜伸展面积明显增加(P<0.05)。结论成功构建小鼠DISC1全长基因表达载体,DISC1基因过表达后可促使ASTs质膜伸展面积增加。 展开更多

关键词 精神分裂症断裂基因1 真核表达质粒 星形胶质细胞 质膜伸展

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慢病毒介导星形胶质细胞活化基因-1沉默对葡萄膜黑色素瘤生物学行为的影响 被引量：4

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作者 毛英 白海霞 +1 位作者 畅颖 李彬 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期748-755,共8页

目的探讨星形胶质细胞活化基因-1（AEG-1）对葡萄膜黑色素瘤（UM）生物学行为的影响。方法培养不同侵袭转移潜能的MUM-2B和MUM-2C细胞系，根据AEG-1基因序列设计出有效RNA干扰（RNAi）靶点序列及RNAi阴性对照scramble序列进行慢病毒载... 目的探讨星形胶质细胞活化基因-1（AEG-1）对葡萄膜黑色素瘤（UM）生物学行为的影响。方法培养不同侵袭转移潜能的MUM-2B和MUM-2C细胞系，根据AEG-1基因序列设计出有效RNA干扰（RNAi）靶点序列及RNAi阴性对照scramble序列进行慢病毒载体的制备和病毒包装。在2株细胞系中，经AEG-1-RNAi慢病毒感染的细胞作为慢病毒感染组，空白慢病毒载体感染的细胞作为阴性对照组，未处理的细胞作为正常对照组。采用Real-time PCR、Western blot法分别检测各组细胞中AEG-1转录水平和蛋白表达水平；采用MTT法、Annexin V-APC法、细胞侵袭试验和细胞Transwell试验检测慢病毒介导AEG-1沉默对人UM细胞系生物学行为的影响。结果成功制备RNAi慢病毒载体而进行病毒包装，然后分别转染对数生长期的MUM-2B、MUM-2C细胞系，2株细胞系中的正常对照组、阴性对照组和慢病毒感染组间细胞中AEG-1 mRNA相对表达量总体比较差异均有统计学意义（F=130.02，P<0.01；F=144.17，P<0.01）。在MUM-2B细胞系中和MUM-2C细胞系中，染组较阴性对照组AEG-1 mRNA相对表达量分别下降约77.1%和79.8%，差异均有统计学意义（均P<0.01）；正常对照组与阴性对照组细胞中AEG-1 mRNA相对表达量比较，差异均无统计学意义（均P>0.05）。Western blot法检测结果显示，AEG-1蛋白表达水平在2株细胞系中的各组比较，差异均有统计学意义（F=146.17，P<0.01；F=156.79，P<0.01），其中慢病毒感染组较阴性对照组蛋白相对表达均显示下调，差异均有统计学意义（均P<0.01）。MTT法检测发现，2株细胞系实验第2～5天，慢病毒感染组细胞增生倍数较阴性对照组明显下降，差异均有统计学意义（t=5.78、30.68、23.99、29.40，均P<0.01；t=7.88、7.09、5.56、6.60，均P<0.01）；Annexin V-APC法检测发现，2株细胞系中慢病毒感染组凋亡率明显高于阴性对照组，差异均有统计学意义（t=54.34，P＜0.01；t=11.68，P＜0.01）；细胞侵袭试验发现，在2株细胞系中慢病毒感染组侵袭倍数明显低于阴性对照组，差异均有统计学意义（t=16.04，P＜0.01；t=13.98，P＜0.01）；细胞Transwell试验发现，在2株细胞系中慢病毒感染组转移倍数均明显低于阴性对照组，差异均有统计学意义（t=12.04，P＜0.01；t=22.43，P＜0.01）。结论慢病毒介导AEG-1沉默后，通过抑制UM细胞AEG-1的转录水平和蛋白表达水平，从而改变UM细胞的生物学行为，一定程度上减缓细胞增生，促进细胞凋亡并降低细胞侵袭和转移的能力。 展开更多

关键词 葡萄膜黑色素瘤 星形胶质细胞活化基因-1 慢病毒载体 细胞增生 凋亡 侵袭 转移

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基于CRISPR/Cas9技术AEG-1基因敲除神经细胞系的构建及AEG-1基因敲除介导的神经细胞周期阻滞和细胞凋亡抑制 被引量：2

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作者 王斌 刘昆梅 +6 位作者 郭乐 张春 和祯泉 丁娜 杨华 孙之鹏 王晓 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期1201-1210,共10页

星形胶质细胞上调基因-1(AEG-1)是近年来研究较多的癌基因,但在神经系统疾病方面研究尚少。AEG-1与神经退行性疾病有关,然而其具体作用机制尚不明确。本研究通过设计靶向AEG-1 sgRNA序列并合成相应寡核苷酸,将其克隆到GV392质粒中,构建s... 星形胶质细胞上调基因-1(AEG-1)是近年来研究较多的癌基因,但在神经系统疾病方面研究尚少。AEG-1与神经退行性疾病有关,然而其具体作用机制尚不明确。本研究通过设计靶向AEG-1 sgRNA序列并合成相应寡核苷酸,将其克隆到GV392质粒中,构建sgRNA/Cas9二合一表达载体,并进行慢病毒包装纯化。用慢病毒感染小鼠海马神经元HT22细胞,进行药物筛选和sgRNA活性鉴定,建立稳定的AEG-1基因敲除的细胞系;并进一步观察神经元HT22细胞的增殖与凋亡能力。结果显示,成功构建了3种靶向AEG-1基因的sgRNA/Cas9二合一表达载体。所设计的sgRNA的插入序列和开放阅读框架完全正确,成功建立了AEG-1基因敲除的稳转神经细胞系。进一步研究表明,AEG-1敲除后的神经HT22细胞与正常神经HT22细胞相比,细胞突起数目减少,细胞周期阻滞,细胞凋亡率减少。以上结果为后续进一步研究AEG-1与神经系统疾病关系奠定了基础。 展开更多

关键词 星形胶质细胞上调基因-1 CRISPR/Cas9 HT22细胞 细胞周期 细胞凋亡

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AEG-1表达下调对人宫颈癌细胞细胞周期和侵袭能力的影响及其机制 被引量：11

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作者 秦瑞英 夏永华 +4 位作者 任艳芳 潘莹 杨君 王慧玲 王玉红 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期1020-1024,共5页

目的:研究星形细胞上调基因1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)在人宫颈鳞癌细胞和组织中的表达,探讨AEG-1表达下调对宫颈癌SiHa细胞细胞周期和侵袭能力的影响,并分析其可能的分子机制。方法:采用Western blotting检测正常宫颈组织、... 目的:研究星形细胞上调基因1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)在人宫颈鳞癌细胞和组织中的表达,探讨AEG-1表达下调对宫颈癌SiHa细胞细胞周期和侵袭能力的影响,并分析其可能的分子机制。方法:采用Western blotting检测正常宫颈组织、宫颈鳞癌组织、HeLa、SiHa和CaSki细胞中AEG-1蛋白的表达。将对照siR-NA和AEG-1 siRNA分别转染SiHa细胞,利用Western blotting检测SiHa细胞中AEG-1蛋白的表达,采用流式细胞术检测细胞周期分布的变化,采用Boyden小室检测细胞侵袭能力的变化,最后采用Western blotting检测cyclin D1、细胞周期素依赖性激酶2(CDK2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达的变化。结果:宫颈鳞癌组织中AEG-1蛋白表达显著高于正常宫颈组织(P<0.05),同时3株宫颈癌细胞中AEG-1蛋白表达均显著高于正常宫颈组织,其中SiHa细胞中AEG-1蛋白表达最高(P<0.05)。此外,AEG-1 siRNA能显著下调SiHa细胞中AEG-1蛋白的表达(P<0.05),其表达下调能明显促使SiHa细胞在G0/G1期的比例增加和降低其侵袭能力。Western blotting结果表明,AEG-1 siRNA组中cyclin D1、CDK2和MMP-9蛋白的表达均显著低于未处理组和对照siRNA组(P<0.05)。结论:AEG-1在宫颈癌中的高表达可能与宫颈癌的发生发展密切相关,其表达下调介导的细胞周期静止和侵袭能力降低可能与cyclin D1、CDK2和MMP-9蛋白表达下调密切相关。 展开更多

关键词 星形细胞上调基因1 宫颈肿瘤 小干扰RNA 细胞周期 肿瘤侵袭

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伴皮层下囊肿的巨脑性白质脑病基因突变导致星形胶质细胞肿胀与囊肿形成 被引量：1

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作者 曹彬彬 王静敏 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期314-317,共4页

伴皮层下囊肿的巨脑性白质脑病(MLC)是MLC1或GlialCAM突变导致的主要以星形胶质细胞功能障碍为主的髓鞘变性疾病,特征为脑白质弥漫性肿胀与囊肿形成。MLC1/GlialCAM主要表达于星形胶质细胞终足,可能参与星形胶质细胞胞膜水与离子的转运... 伴皮层下囊肿的巨脑性白质脑病(MLC)是MLC1或GlialCAM突变导致的主要以星形胶质细胞功能障碍为主的髓鞘变性疾病,特征为脑白质弥漫性肿胀与囊肿形成。MLC1/GlialCAM主要表达于星形胶质细胞终足,可能参与星形胶质细胞胞膜水与离子的转运。GlialCAM蛋白可协助MLC1蛋白及ClC2通道在细胞胞膜定位。MLC1蛋白可能参与多种水与离子的转运,参与细胞体积调节。MLC1/GlialCAM突变后,可能会影响星形胶质细胞内外水与离子稳态,导致细胞肿胀及囊肿的形成,最终发生MLC。 展开更多

关键词 伴皮层下囊肿的巨脑性白质脑病 MLC1基因 胶质细胞粘附分子基因 星形胶质细胞 水与离子稳态

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EMP1基因在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义 被引量：3

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作者 张海涛 卢亦成 何金 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第5期466-470,共5页

目的:探讨上皮膜蛋白1基因(epithelial membrane protein 1,EMP1)在人脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤恶性程度的相互关系。方法:肿瘤组织标本均取自上海长征医院神经外科2005至2006年部分手术病例,正常脑组织来源于捐献,分别采用逆转录酶... 目的:探讨上皮膜蛋白1基因(epithelial membrane protein 1,EMP1)在人脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤恶性程度的相互关系。方法:肿瘤组织标本均取自上海长征医院神经外科2005至2006年部分手术病例,正常脑组织来源于捐献,分别采用逆转录酶聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化染色方法检测33例星形细胞瘤、3例少枝胶质细胞瘤、2例室管膜瘤以及7例正常脑组织标本中EMP1 mRNA及蛋白的表达。结果:EMP1无论在基因还是在蛋白表达水平上,在胶质瘤和正常脑组织中均有不同程度表达,但在星形细胞瘤中表达的含量明显高于正常脑组织,且在星形细胞瘤中含量随着其病理分级的增高而增高,在低级别(WHOⅠ～Ⅱ级)与高级别(Ⅲ～Ⅳ级)之间存在显著差异(蛋白P<0.05;基因P<0.01)。结论:基因EMP1在人脑胶质瘤中显著高表达,并且与星形细胞瘤的恶性程度密切相关。 展开更多

关键词 胶质瘤 星形细胞瘤 上皮膜蛋白1基因 RT-PCR 免疫组织化学

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敲低转移黏附蛋白(MTDH)基因抑制SGC7901细胞增殖及迁移 被引量：5

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作者 余海红 蒋莉萍 +5 位作者 周恺韬 汪小平 刘彬 郑永亮 曾俊权 肖凤 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1234-1239,共6页

目的通过小干扰RNA技术(RNAi)敲低胃癌SGC7901细胞转移黏附蛋白(MTDH)即星形细胞上调基因1(AEG-1),并探讨其对SGC7901细胞增殖和迁移的影响。方法构建MDTH短发夹RNA(MTDH-sh RNA)质粒并转染SGC7901细胞,Western blot法检测SGC7901细胞M... 目的通过小干扰RNA技术(RNAi)敲低胃癌SGC7901细胞转移黏附蛋白(MTDH)即星形细胞上调基因1(AEG-1),并探讨其对SGC7901细胞增殖和迁移的影响。方法构建MDTH短发夹RNA(MTDH-sh RNA)质粒并转染SGC7901细胞,Western blot法检测SGC7901细胞MTDH蛋白水平。敲低SGC7901细胞MTDH水平后,MTT法检测细胞增殖情况,TranswellTM小室检测SGC7901细胞迁移能力。结果 MTDH-sh RNA转染SGC-7901胃癌细胞后,可明显敲低细胞中MTDH蛋白水平。敲低SGC7901细胞MTDH水平后,细胞的增殖和迁移能力均显著降低。结论敲低SGC7901细胞MTDH水平可抑制SGC-7901胃癌细胞的增殖和迁移。 展开更多

关键词 转移黏附蛋白(MTDH) 星形细胞上调基因1(aeg-1) 胃癌 细胞增殖 细胞迁移

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AEG-1基因在NSCLC中的表达及其临床病理意义 被引量：2

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作者 高建华 曹华 +2 位作者 李萱 虞春华 宋晓东 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1833-1836,共4页

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中星型胶质细胞上调基因1(AEG-1)的表达及其临床意义。方法:选取本院心胸外科手术切除治疗的83例NSCLC患者的术后癌组织标本及20例癌旁组织标本进行研究,采用免疫组化染色法检测两组AEG-1蛋白的表达水... 目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中星型胶质细胞上调基因1(AEG-1)的表达及其临床意义。方法:选取本院心胸外科手术切除治疗的83例NSCLC患者的术后癌组织标本及20例癌旁组织标本进行研究,采用免疫组化染色法检测两组AEG-1蛋白的表达水平,并分析AEG-1蛋白与NSCLC患者的临床病理学关系。结果:AEG-1 NSCLC组织中的AEG-1蛋白高表达46例(55.42%)显著高于癌旁组织的2例(10.00%)(P<0.05);NSCLC组织中的AEG-1蛋白高表达与患者的T分期、N分期及发生远处转移具有显著的相关性(P<0.05),与患者年龄、性别、分化程度关系不显著(P>0.05)。AEG-1高表达NSCLC患者的中位生存时间15.0个月显著低于AEG-1低表达患者的19.0个月(log-rankχ2=4.119,P<0.05)。结论:NSCLC组织中AEG-1基因表达上调,并且与患者的临床分期及远处转移有关。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 星型胶质细胞上调基因1 基因表达 免疫组化

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