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重组昆虫死亡素的异源表达及其对阪崎肠杆菌抗菌活性研究
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作者 余霞 杨雯钰 +2 位作者 周昀 王水平 胡晓清 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第16期20-25,共6页
阪崎肠杆菌(Cronobacter sakazakii)是重要的乳品致病菌,在世界范围污染频发,由于其具有较强的环境耐受性,挖掘针对C.sakazakii的新型抗菌剂具有重要意义。昆虫死亡素(thanatin,Tn)是一种极具潜力的靶向细胞外膜的抗菌肽,含有21个氨基... 阪崎肠杆菌(Cronobacter sakazakii)是重要的乳品致病菌,在世界范围污染频发,由于其具有较强的环境耐受性,挖掘针对C.sakazakii的新型抗菌剂具有重要意义。昆虫死亡素(thanatin,Tn)是一种极具潜力的靶向细胞外膜的抗菌肽,含有21个氨基酸并具有β-发夹结构。Tn对大肠杆菌具有较好杀菌作用,而对C.sakazakii作用尚无报道。基于此,该文对Tn进行异源表达,并首次研究了Tn对C.sakazakii的抗菌作用。利用毕赤酵母(Pichia pastoris),分别借助P_(AOX)和P_(GAP)对密码子优化后的Tn基因进行异源表达,分析Tn对C.sakazakii BAA894的抑菌效果,并通过比较BAA894及其脂多糖缺失株BAA894ΔwaaC的敏感性差异,探究其可能作用机制。结果显示,组成型P.pastoris GS115/pGAPZαA-than-1和诱导型GS115/pPICZαA-than-1均能有效表达活性Tn,合成量分别为24.34 mg/L和28.03 mg/L。Tn经His-tag亲和层析后,80 mg/L Tn对C.sakazakii BAA894生长抑制率达到98.49%,显示Tn对C.sakazakii具有较强杀菌作用,而对BAA894ΔwaaC生长抑制率为91.01%,较BAA894降低了7.48%,显示Tn的作用靶标与脂多糖的核心多糖和O-抗原有关。该研究为挖掘并改进C.sakazakii的新型抗菌剂奠定了重要基础。 展开更多
关键词 昆虫死亡素 抗菌肽 阪崎肠杆菌 巴斯德毕赤酵母 脂多糖
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