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应用时间分辨荧光免疫层析法快速定量检测玉米及其副产物中的伏马毒素 被引量：1
1
作者 肖蕴祺 汪劲能 +1 位作者 邱良祝 施寿荣 《中国饲料》 北大核心 2025年第3期116-122,共7页
实验旨在开发一种可快速定量检测伏马毒素(FB_(1))含量的试纸条,为谷物饲料质量监管、风险评估提供技术支持。实验以玉米及其副产物中FB_(1)为研究对象,基于时间分辨荧光免疫层析技术(TRFIA)开发试纸条。通过将FB_(1)抗体与荧光微球进... 实验旨在开发一种可快速定量检测伏马毒素(FB_(1))含量的试纸条,为谷物饲料质量监管、风险评估提供技术支持。实验以玉米及其副产物中FB_(1)为研究对象,基于时间分辨荧光免疫层析技术(TRFIA)开发试纸条。通过将FB_(1)抗体与荧光微球进行偶联标记,制备FB_(1)荧光免疫层析试纸条,以检测线T信号值与质控线C信号值的比值为纵坐标,标准溶液浓度为横坐标,建立定量标准曲线。通过优化抗体标记过程中混匀转速和复溶液pH,及改变样品垫的处理方式,以提升FB_(1)-TRFIA试纸条的稳定性和精密度。结果显示:FB_(1)-TRFIA试纸条的最低检测限为50.75μg/kg,定量限为100.10μg/kg;组内CV分别为4.83%(FB_(1)1 mg/kg)、2.86%(FB_(1)15 mg/kg)、4.88%(FB_(1)50 mg/kg);组间CV分别为4.90%、3.11%、5.32%,FB_(1)添加回收率为98.33%~102.87%;阳性样本检测结果与LC-MS/MS方法一致;试纸条在4℃和37℃放置14 d,T/C基本不变。本研究建立的FB_(1)-TRFIA试纸条性能良好,适用于玉米及其副产物中FB_(1)含量的快速定量检测。 展开更多
关键词 伏马毒素 时间分辨荧光免疫层析法 玉米 定量快检
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时间分辨荧光免疫层析法检测酥油中黄曲霉毒素M1的研究 被引量：1
2
作者 魏娜 张飞龙 《西藏农业科技》 2019年第4期37-39,共3页
为寻求酥油中黄曲霉毒素M1快速准确检测方法,本研究利用时间分辨荧光免疫层析法测定酥油中黄曲霉毒素M1含量,结果表明:该检测方法样品加标回收率为77. 6%89. 6%,RSD <15%,与免疫亲和柱净化-HPLC法相比,相对误差<12%,该法具有简便... 为寻求酥油中黄曲霉毒素M1快速准确检测方法,本研究利用时间分辨荧光免疫层析法测定酥油中黄曲霉毒素M1含量,结果表明:该检测方法样品加标回收率为77. 6%89. 6%,RSD <15%,与免疫亲和柱净化-HPLC法相比,相对误差<12%,该法具有简便快速、灵敏度高、重现性好等特点,可用于酥油中黄曲霉毒素M1的快速检测。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫层析法 黄曲霉毒素M1 酥油 快速检测
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时间分辨荧光免疫层析法定量检测稻谷中的镉 被引量：3
3
作者 张海涛 祁苏娴 +2 位作者 董曼佳 陆廷瑾 杨婷婷 《中国粮油学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期170-173,共4页
本研究制备了一种用于稻谷中镉检测的时间分辨荧光免疫层析定量检测卡。采用铕纳米微球作为荧光探针,标记抗Cd-EDTA的单克隆抗体,基于竞争抑制原理建立免疫层析定量方法并对其进行方法学研究。结果表明:定量检测卡的灵敏度为0.088 ng/mL... 本研究制备了一种用于稻谷中镉检测的时间分辨荧光免疫层析定量检测卡。采用铕纳米微球作为荧光探针,标记抗Cd-EDTA的单克隆抗体,基于竞争抑制原理建立免疫层析定量方法并对其进行方法学研究。结果表明:定量检测卡的灵敏度为0.088 ng/mL,标准曲线线性范围为0.1~5.0 ng/mL,检出限和定量限分别为0.026 mg/kg和0.064 mg/kg,对有证标准物质的正确度在81.0%~91.7%,对实际样本的检测与ICP-MS检测结果一致性较高。该法重复性较好,变异系数在10%以内。结果显示,该法灵敏度高、操作简便、成本低廉,因此,非常适合基层单位大量样本的快速初步筛查。 展开更多
关键词 镉 稻谷 时间分辨荧光免疫层析法 快速定量检测
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呕吐毒素时间分辨荧光免疫层析法的建立与评价 被引量：6
4
作者 张东升 严艺琳 +3 位作者 熊晓辉 董曼佳 游京晶 张一平 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第20期233-239,共7页
构建并评价了呕吐毒素(Deoxynivalenol,DON)时间分辨荧光免疫层析法(TRFIA)。以Eu^(3+)螯合物的纳米微球为荧光探针标记抗DON单抗,采用竞争抑制建立免疫层析定量方法,优化了微球与抗体标记量,检测的环境温度、反应时间、加样体积及缓冲... 构建并评价了呕吐毒素(Deoxynivalenol,DON)时间分辨荧光免疫层析法(TRFIA)。以Eu^(3+)螯合物的纳米微球为荧光探针标记抗DON单抗,采用竞争抑制建立免疫层析定量方法,优化了微球与抗体标记量,检测的环境温度、反应时间、加样体积及缓冲体系;研究了方法的灵敏度、精密度及准确度。结果表明,每100μL荧光微球结合纯单抗50μg,最佳划膜浓度为1.0 mg/m L,最佳测定条件为室温(25±2)℃,10 min,加样体积100μL,PBS (0.01 mol/L,pH7.2)的缓冲体系,方法的灵敏度为0.25 ng/m L,线性范围为0.5~25.0 ng/m L,玉米、小麦阴性样本(加标浓度200、500、1000、2000μg/kg)平均加标回收率为91.4%~109.3%,6种典型样本经TRFIA与免疫亲和净化-高效液相色谱法(IAC-HPLC)同时测定DON含量,相关系数r达0.9754。TRFIA具有灵敏度高、速度快、定量准等技术特点,适用于谷物及制品中DON的快速定量。 展开更多
关键词 呕吐毒素 时间分辨荧光微球 免疫层析法 评价 检测
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镧系荧光免疫层析法辅助诊断牛结核病的应用研究
5
作者 张家瑞 张力 +5 位作者 李岩 屈勇刚 张旭 剡文亮 殷涛 章健 《中国奶牛》 2025年第8期22-26,共5页
本研究旨在评估镧系荧光免疫层析法对牛结核病的诊断效果。试验采用镧系荧光免疫层析法对24份采集自某奶牛养殖小区的牛结核病阳性淘汰牛血清进行抗体检测,应用荧光定量PCR对与血清对应的淘汰牛的鼻腔拭子进行核酸检测。根据镧系荧光免... 本研究旨在评估镧系荧光免疫层析法对牛结核病的诊断效果。试验采用镧系荧光免疫层析法对24份采集自某奶牛养殖小区的牛结核病阳性淘汰牛血清进行抗体检测,应用荧光定量PCR对与血清对应的淘汰牛的鼻腔拭子进行核酸检测。根据镧系荧光免疫层析法检测结果及鼻腔拭子荧光定量PCR结果,挑选检测结果均为阳性的淘汰牛的肺脏等组织样品送至国家动物结核病专业实验室进行病原菌分型。经调查﹐24头淘汰牛在皮内变态反应中的72h后皮厚差均大于2mm,IFN-γ体外释放试验阳性率为100%(24/24)。镧系荧光免疫层析法检出阳性血清3份,阴性血清21份。24份鼻腔拭子经荧光定量PCR检测,3份样品出现扩增曲线且Ct值在35.4~35.9,判定为牛结核病核酸阳性。在送至国家动物结核病专业实验室进行PCR检测的3头牛的对应脏器中,有3份肺门淋巴结、3份肺脏样品、1份乳房淋巴结和1份肠系膜淋巴结样品均扩增获得406bp目的条带,判定为牛分枝杆菌核酸阳性。应用镧系荧光免疫层析法检测血清中的抗体对辅助检出具有牛结核病传染风险的牛可提供较为可靠的数据。 展开更多
关键词 牛结核病 奶牛 镧系荧光免疫层析法 抗体检测
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时间分辨荧光免疫分析技术在产毒霉菌检测中的研究进展
6
作者 王子煊 麦丹 《畜禽业》 2025年第8期27-31,共5页
产毒霉菌在食品中广泛存在,其所产生的黄曲霉毒、赭曲霉毒素、伏马菌素等毒素对人类健康构成严重威胁。随着食品安全问题日益严峻,准确、快速地检测产毒霉菌及其毒素对于保障食品安全至关重要。时间分辨荧光免疫分析技术(time-resolved ... 产毒霉菌在食品中广泛存在,其所产生的黄曲霉毒、赭曲霉毒素、伏马菌素等毒素对人类健康构成严重威胁。随着食品安全问题日益严峻,准确、快速地检测产毒霉菌及其毒素对于保障食品安全至关重要。时间分辨荧光免疫分析技术(time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)凭借其高灵敏度、特异性强、操作简便等优势,在产毒霉菌检测领域展现出良好的应用前景。综述了TRFIA的基本原理及其在食品检测中的应用前景,介绍了其在食品中常见的产毒霉菌检测方面的最新研究进展,并对该技术目前存在的问题及未来发展方向进行了探讨。研究表明:TRFIA作为一种高效、可靠的检测技术,有望在食品安全检测领域发挥更为重要的作用。 展开更多
关键词 时间分辨荧光免疫分析技术 产毒霉菌 食品安全 快速检测
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时间分辨荧光免疫分析仪的校准方法研究 被引量：1
7
作者 周瑾艳 武利庆 +6 位作者 黄彦捷 王晶 黄哲峰 李志雄 孙雅玲 许俊斌 陈玲 《中国测试》 CAS 北大核心 2024年第S01期305-310,共6页
研究一种适用于时间分辨荧光原理的免疫分析仪校准方法。经过对时间分辨荧光免疫分析仪荧光特性、孵育舱温度、分析项目浓度示值误差,重复性等性能指标的实验和研究,建立该分析仪的校准方法。起草该分析仪的校准规范,提出了仪器的校准... 研究一种适用于时间分辨荧光原理的免疫分析仪校准方法。经过对时间分辨荧光免疫分析仪荧光特性、孵育舱温度、分析项目浓度示值误差,重复性等性能指标的实验和研究,建立该分析仪的校准方法。起草该分析仪的校准规范,提出了仪器的校准项目与技术指标,确定了校准用的仪器设备,设计了完备的校准方案,使时间分辨荧光免疫分析仪的量值准确、可靠、可溯源,为统一相关量值发挥重要的作用。 展开更多
关键词 时间分辨 荧光 免疫分析 铕
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牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立 被引量：6
8
作者 张正英 崔乃元 +4 位作者 高海燕 刘海珍 黄文颖 郝云晴 马立才 《肉类研究》 北大核心 2020年第8期57-62,共6页
为建立定量检测牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析方法,以羧基化铕微球作为荧光标记物,与阿维菌素鼠单克隆抗体G10703进行共价偶联后喷涂于释放垫上,将阿维菌素抗原和羊抗鼠免疫球蛋白G分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线(T... 为建立定量检测牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析方法,以羧基化铕微球作为荧光标记物,与阿维菌素鼠单克隆抗体G10703进行共价偶联后喷涂于释放垫上,将阿维菌素抗原和羊抗鼠免疫球蛋白G分别包被于硝酸纤维素膜上作为检测线(T)和质控线(C),制备免疫层析试纸条;利用牦牛肉样本阿维菌素添加量和对应的T线与C线荧光信号峰值比值(T/C)拟合得到四参数标准曲线,建立牦牛肉中阿维菌素残留的时间分辨荧光免疫层析检测方法,并对所建立方法的灵敏度、准确度、特异性、精密度和稳定性等进行评价,用液相色谱-串联质谱方法对所建立方法的性能进行确证。结果表明:本方法对牦牛肉中阿维菌素的定量限为1.0μg/kg,加标回收率为86.9%~105.2%,与阿维菌素、伊维菌素、多拉菌素及依普菌素的交叉反应率分别为100.0%、73.1%、42.6%和97.5%,批内变异系数为5.4%~9.5%,批间变异系数为7.5%~11.2%,该方法准确度、精密度、灵敏度均较高,且性能稳定。 展开更多
关键词 牦牛肉 阿维菌素 时间分辨荧光免疫层析
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时间分辨免疫荧光层析快速检测水产品中高效氯氰菊酯方法的建立 被引量：1
9
作者 姜琳琳 苏捷 《渔业研究》 2018年第4期258-267,共10页
高效氯氰菊酯在农业中应用广泛,其中水产品可以富集水系统中的高效氯氰菊酯,并通过食物链,影响人体的健康。本研究通过铕(Eu)颗粒标记氯氰菊酯抗体,研发针对高效氯氰菊酯检测的时间分辨免疫荧光检测卡。在对虾样品中添加高效氯氰菊酯标... 高效氯氰菊酯在农业中应用广泛,其中水产品可以富集水系统中的高效氯氰菊酯,并通过食物链,影响人体的健康。本研究通过铕(Eu)颗粒标记氯氰菊酯抗体,研发针对高效氯氰菊酯检测的时间分辨免疫荧光检测卡。在对虾样品中添加高效氯氰菊酯标准品分析检测卡的准确度、精确度等指标时,研究发现氯氰菊酯检测卡的平均相对误差在4.24%~8.66%之间,检测卡的批内变异系数在3.0%~8.6%之间,批间变异系数在4.8%~6.6%之间,最低检测限为0.35 ng/m L,检测范围为1~19.3 ng/m L,四参数拟合曲线决定系数R2=0.999 0;检测卡检测结果与气相色谱检测结果的相对误差在8%~20%之间,线性相关系数R=0.989 9。结果表明本技术方法可以应用于水产品中高效氯氰菊酯的快速定量检测。 展开更多
关键词 高效氯氰菊酯 时间分辨免疫荧光 快速定量检测
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Eu-TRFM免疫层析试纸条检测大肠杆菌O157:H7方法的建立
10
作者 冯昭仪 吴娅芳 +4 位作者 王英林 赵思远 程家洛 郭旭东 刘箐 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第2期163-172,共10页
【目的】建立一种快速、高效且灵敏的大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7检测方法。【方法】运用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)介导法,以时间分辨荧光微球为标记物与抗体进行偶联,使用荧光读取仪定量分析检测大肠... 【目的】建立一种快速、高效且灵敏的大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)O157:H7检测方法。【方法】运用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺(EDC)介导法,以时间分辨荧光微球为标记物与抗体进行偶联,使用荧光读取仪定量分析检测大肠杆菌O157:H7。通过对缓冲液的标记pH、时间分辨荧光微球探针添加量、T线抗体质量浓度以及样本与标记抗体的孵育时间进行优化来提高检测灵敏度。【结果】在最优条件下,大肠杆菌O157:H7的检测灵敏度可达3.2×10^(3)CFU/mL,比传统胶体金免疫层析方法提高了10~1000倍,并且与其他8株常见的食源性致病菌不存在交叉反应。另外,该方法在人工污染的饮用水、牛奶和牛肉实际样品检测中均表现出良好的检测性能。【结论】该Eu-TRFM免疫层析试纸条适用于大肠杆菌O157:H7的检测。 展开更多
关键词 大肠杆菌O157:H7 时间分辨荧光微球 免疫层析试纸条 检测
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降钙素原时间分辨荧光免疫层析检测方法的建立及性能评价 被引量：7
11
作者 黄德智 应昊俊 +1 位作者 刘飞 蒲晓允 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期581-586,共6页
目的建立一种时间分辨荧光免疫层析定量降钙素原(procalcitonin, PCT)的检测方法并评价其性能。方法利用双抗体夹心法原理,以时间分辨荧光的纳米微球作为标记示踪物,运用免疫层析技术建立PCT免疫检测方法,并对该方法进行线性、灵敏度、... 目的建立一种时间分辨荧光免疫层析定量降钙素原(procalcitonin, PCT)的检测方法并评价其性能。方法利用双抗体夹心法原理,以时间分辨荧光的纳米微球作为标记示踪物,运用免疫层析技术建立PCT免疫检测方法,并对该方法进行线性、灵敏度、精密度、特异性、相关性等性能指标的测定。结果本检测方法线性良好,线性范围为0.05～100 ng/mL,方程为Y=0.074 7X+0.524 6,R^2=0.990 4,灵敏度为0.03 ng/mL,批内精密度CV≤5.42%,批间精密度CV≤6.86%,与AE-180全自动化学发光免疫分析仪结果一致性较好,阳性符合率96.61%,阴性符合率94.44%,假阳性率5.56%,假阴性率3.39%和诊断符合率95.53%。结论本研究建立了PCT时间分辨免疫层析检测方法,该方法简便、经济、快速、并可以定量,各项性能参数均达到临床检测要求,可用于临床血清PCT浓度的检测。 展开更多
关键词 降钙素原 时间分辨荧光微球 免疫层析
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时间分辨荧光免疫层析试纸条在油料饼粕黄曲霉毒素B_1检测中的应用 被引量：19
12
作者 李静 李培武 +3 位作者 张奇 丁小霞 张文 张兆威 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期256-262,共7页
采用黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的时间分辨荧光速测仪,对油料饼粕中黄曲霉毒素B1的快速检测进行了应用研究。该时间分辨荧光免疫分析技术是基于时间分辨荧光免疫层析试纸条和载有Eu（Ⅲ）标记特异性单克隆抗体的样品... 采用黄曲霉毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条及配套的时间分辨荧光速测仪,对油料饼粕中黄曲霉毒素B1的快速检测进行了应用研究。该时间分辨荧光免疫分析技术是基于时间分辨荧光免疫层析试纸条和载有Eu（Ⅲ）标记特异性单克隆抗体的样品瓶建立的检测技术。时间分辨荧光速测仪可内置标准曲线,直接输出检测结果。对6种油料饼粕做黄曲霉毒素B1添加回收率实验,回收率在70%~120%之间,批间、批内变异系数〈15%。在实际样品的检测中,时间分辨荧光免疫层析试纸条检测技术与液相色谱-串联质谱法相比,检测结果相对误差〈15%。时间分辨荧光免疫层析试纸条检测技术测定快速、准确,技术稳定、可靠,设备经济、小型,适用于大批量油料饼粕样品的快速检测和风险评估。 展开更多
关键词 油料饼粕 黄曲霉毒素B1 时间分辨荧光免疫层析试纸条 时间分辨荧光速测仪 定量检测
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基于免疫层析技术的时间分辨荧光免疫分析仪研究 被引量：23
13
作者 任冰强 黄立华 黄惠杰 《仪器仪表学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1330-1335,共6页
基于时间分辨荧光免疫分析和免疫层析技术的原理,研制了一种新型的时间分辨荧光免疫分析仪。与现有的时间分辨荧光分析仪不同,它所检测的是以Eu3+离子及其螯合物为标记物的免疫层析试纸条。通过测量免疫反应后试纸条检测带上Eu3+螯合物... 基于时间分辨荧光免疫分析和免疫层析技术的原理,研制了一种新型的时间分辨荧光免疫分析仪。与现有的时间分辨荧光分析仪不同,它所检测的是以Eu3+离子及其螯合物为标记物的免疫层析试纸条。通过测量免疫反应后试纸条检测带上Eu3+螯合物的含量,参照标准浓度曲线就可以定量得到待测样品溶液的浓度。实验表明,仪器的最低检测浓度可达到ng/mL量级,测量的相对标准偏差小于3%,在5～103ng/mL浓度范围内具有良好的线性响应特性,相关系数R2=0.9997。 展开更多
关键词 传感器技术 标记免疫学 时间分辨荧光免疫分析仪 免疫层析技术
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时间分辨荧光免疫分析法间接测定雌二醇 被引量：13
14
作者 王永成 唐棣 +1 位作者 常文保 慈云祥 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期89-92,共4页
以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很... 以氯磺酰基噻吩甲酰三氟丙酮 ( CTTA)为铕 ( Eu)的螯合剂 ,羊抗鼠 ( SAM)的 Ig G为二抗 ,用 SAM- Ig G- CTTA- Eu作标记二抗 ,建立了以竞争抑制为基础的时间分辨荧光免疫分析测定游离雌二醇 ( E2 )的新方法。同均相方法相比灵敏度有很大提高 ,测定雌二醇 ( E2 )的线性范围为 2 .5～ 2 0 0 pg/m L,检测限为 2 .5 pg/m L。这一方法可望用于 E2 展开更多
关键词 雌二醇 时间分辨荧光免疫分析法 铕 测定 血清 临床分析 CTTA SAM
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环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法的建立与应用 被引量：12
15
作者 李丽华 白瑞樱 +6 位作者 孙远明 沈玉栋 徐振林 雷红涛 张挺 王弘 杨金易 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第8期216-220,共5页
建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(CPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF-OVA)共同竞争限量的CPF抗体,用铕标羊抗兔IgG示踪,建立环丙沙星时间分辨荧... 建立基于时间分辨荧光免疫分析技术的环丙沙星(CPF)间接竞争检测方法。将环丙沙星-卵清白蛋白(CPF-OVA)包被于固相微孔板,CPF标准品或样品中CPF与CPF包被原(CPF-OVA)共同竞争限量的CPF抗体,用铕标羊抗兔IgG示踪,建立环丙沙星时间分辨荧光免疫分析方法(CPF-TRFIA);考察包被质量浓度、抗体稀释液、反应时间等对方法灵敏度的影响。结果表明:在优化条件下,该方法的检测限为0.5μg/L,半抑制质量浓度(IC5 0)为4.32μg/L,线性范围(IC20～IC80)为1.14～28.85μg/L;该方法对蜂蜜中CPF平均回收率为80.66%～100.30%,对牛奶中CPF的平均回收率为76.30%～95.22%,两者的平均批内和批间变异系数分别为7.42%和10.92%。CPF-TRFIA间接竞争法测定环丙沙星具有灵敏度高、特异性好、性能稳定的优点,适于高通量筛查。 展开更多
关键词 环丙沙星 时间分辨荧光免疫分析 抗体 添加回收
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间接竞争时间分辨荧光免疫分析法检测稻米中Cry1C毒素 被引量：6
16
作者 徐重新 杨晶祎 +6 位作者 陆梦晓 仲建峰 张存政 张霄 何鑫 刘媛 刘贤金 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期44-48,共5页
利用免疫新西兰大白兔制备Cry1C毒素多克隆抗体,建立间接竞争时间分辨荧光免疫分析（CI-TRFIA）方法,用于稻米中Cry1C毒素的残留检测。通过4次免疫,采集Cry1C毒素多克隆抗体血清,并用饱和硫酸铵沉淀和Protein A柱纯化,测定抗体效价;以制... 利用免疫新西兰大白兔制备Cry1C毒素多克隆抗体,建立间接竞争时间分辨荧光免疫分析（CI-TRFIA）方法,用于稻米中Cry1C毒素的残留检测。通过4次免疫,采集Cry1C毒素多克隆抗体血清,并用饱和硫酸铵沉淀和Protein A柱纯化,测定抗体效价;以制备Eu-N1标记的羊抗兔IgG作为检测抗体,建立Cry1C毒素的CI-TRFIA检测方法,并进行抗原类似物的特异性分析和Cry1C毒素在稻米中的添加回收试验。结果表明：获得的多克隆抗体质量浓度为3.86 mg·mL^-1,效价为1∶48 000;建立的CI-TRFIA检测方法,其灵敏度（IC10）为0.074 ng·mL^-1,中抑制浓度（IC50）为60.16 ng·mL^-1,线性检测范围（IC20~IC80）为0.96~1 633.60 ng·mL^-1;对Cry1B、Cry1Ab和Cry1Ac均有一定的交叉反应;添加回收试验的批内、批间回收率为84.53%~107.12%,变异系数为6.05%~11.24%。结论：该检测方法稳定性和重复性较好,可以满足Cry1C毒素的检测要求。 展开更多
关键词 Cry1C毒素 多克隆抗体 稻米 时间分辨荧光免疫分析
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时间分辨荧光微球免疫层析技术定量检测人血清胃蛋白酶原Ⅰ的实验研究 被引量：4
17
作者 周衍 范俊 +4 位作者 蒋叶华 张珏 张艺 傅利新 黄飚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第18期1803-1807,共5页
目的研制快速定量检测人血清胃蛋白酶原Ⅰ(pepsinogensⅠ,PGⅠ)试纸,并评价试纸性能。方法以包裹有时间分辨荧光的纳米微球作为标记示踪物,运用免疫层析试纸技术,研制PGⅠ检测试纸;考察试纸的检测线性、灵敏度、精密度、与对比试剂的符... 目的研制快速定量检测人血清胃蛋白酶原Ⅰ(pepsinogensⅠ,PGⅠ)试纸,并评价试纸性能。方法以包裹有时间分辨荧光的纳米微球作为标记示踪物,运用免疫层析试纸技术,研制PGⅠ检测试纸;考察试纸的检测线性、灵敏度、精密度、与对比试剂的符合率。结果试纸定量检测的线性良好,方程为Y=0.027 9+0.004 8X,r=0.997 8;灵敏度为0.27μg/L;批内CV小于10%,批间CV11.03%;与市售PGⅠ试剂平行检测489份血清样本,有良好的相关性(YTRFIA=0.856 6Xstrip+7.545 6,R2=0.989 1,P<0.01)。结论 PGⅠ时间分辨荧光纳米微球免疫层析试纸操作简单、快速、经济、可定量,满足临床检测血清PGⅠ的需求。 展开更多
关键词 胃蛋白酶原Ⅰ 时间分辨荧光纳米微球 免疫层析
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C肽与胰岛素双标记时间分辨荧光免疫分析法的建立及初步临床应用 被引量：4
18
作者 马强 李来庆 +4 位作者 贺安 林冠峰 邹丽萍 李明 吴英松 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2011年第7期670-676,共7页
建立钐(Sm3+)标记检测C肽(C-peptide)及铕(Eu3+)标记检测胰岛素(insulin)的双标记时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),并初步尝试检测人血C肽以及胰岛素含量.将抗C肽单克隆抗体(Biodesign No.E54094M)与抗insulin单克隆抗体(BiodesignNo.E86... 建立钐(Sm3+)标记检测C肽(C-peptide)及铕(Eu3+)标记检测胰岛素(insulin)的双标记时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA),并初步尝试检测人血C肽以及胰岛素含量.将抗C肽单克隆抗体(Biodesign No.E54094M)与抗insulin单克隆抗体(BiodesignNo.E86306M)混合包被96孔板,然后用Sm3+标记抗C肽单克隆抗体(Medix No.9103),Eu3+标记抗insulin单克隆抗体(Biodesign No.E86802M),运用双抗体夹心一步法建立C肽/胰岛素双标记时间分辨免疫荧光分析法.结果显示:C肽分析灵敏度为0.2μg/L,线性范围为0.5～22μg/L,平均回收率达到99.6%,分析内和分析间变异系数分别为4.6%～6.0%和5.1%～7.6%.胰岛素分析灵敏度为0.8 mU/L,线性范围为3.6～180 mU/L,平均回收率为99.4%,分析内和分析间变异系数分别为3.7%～6.0%和5.1%～8.0%.C肽/胰岛素双标记检测试剂与PerkinElmer公司对应的单标记进口试剂盒分别同时测定血清样本200份,检测结果高度相关,具有较好的一致性,相关系数分别为0.98与0.99.总之,自建C肽/胰岛素双标记时间分辨荧光免疫分析方法的性能均可以达到临床检测要求,有望替代现有国内外较为昂贵的单标记试剂,可用于胰岛素分泌不足导致的糖尿病诊断及糖尿病的大规模普查筛选. 展开更多
关键词 双标记 时间分辨荧光免疫分析 C肽 胰岛素
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时间分辨荧光免疫分析螯合剂的制备及标记方法 被引量：3
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作者 赵劼 马庆杰 +3 位作者 赵伟 潘立华 徐文贵 孙文伟 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期810-812,共3页
目的 :制备时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂 4,7-二 (氯磺酸基苯基 ) - 1 ,1 0 -菲咯啉 -2 ,9-二羧酸 ( BCPDA)。方法 :合成物 BCPDA的结构由熔点、元素分析、红外光谱和核磁共振谱确证 ;采用标记曲线法测定标记物中蛋白质的含量 ;应... 目的 :制备时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂 4,7-二 (氯磺酸基苯基 ) - 1 ,1 0 -菲咯啉 -2 ,9-二羧酸 ( BCPDA)。方法 :合成物 BCPDA的结构由熔点、元素分析、红外光谱和核磁共振谱确证 ;采用标记曲线法测定标记物中蛋白质的含量 ;应用荧光分光光度计测定 Eu3 + - BCPDA的荧光强度 ;采用放免法测定标记蛋白质的活性。结果 :BCPDA与 Eu3 + 结合后可测量到的最低浓度为1× 1 0 -1 5mol· L-1 标记蛋白质的相对生物活性高于 80 %。结论 :成功地制备时间分辨荧光免疫分析双功能螯合剂 BCPDA,并建立 Eu3 + - 展开更多
关键词 荧光免疫测定 螯合剂 化学合成 光谱法 时间分辨
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小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法的建立 被引量：11
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作者 孙雨 宋晓晖 +7 位作者 董浩 赵柏林 曲萍 蒋菲 杨天意 张晨 杨林 王传彬 《动物医学进展》 北大核心 2019年第4期1-8,共8页
通过优化大肠埃希菌密码子、优化表达条件等方法,在大肠埃希菌表达系统中成功获得了可溶性的N蛋白与NH融合蛋白。进一步基于纯化的可溶性N蛋白与NH融合蛋白建立了小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法。该方法敏感性高,特... 通过优化大肠埃希菌密码子、优化表达条件等方法,在大肠埃希菌表达系统中成功获得了可溶性的N蛋白与NH融合蛋白。进一步基于纯化的可溶性N蛋白与NH融合蛋白建立了小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法。该方法敏感性高,特异性强,能够特异性的检测羊血清中的小反刍兽疫病毒抗体,与其他相关疫病病原无交叉反应;重复性试验组内与组间变异系数均小于10%。对292份临床血清样品进行检测,与法国IDVET竞争ELISA试剂盒比较,阳性样品符合率为92.47%,阴性样品符合率为97.26%,总的符合率为94.86%。该方法与传统的ELISA方法相比,具有敏感性、特异性相当,操作简单、快速,具有较高的推广应用价值。 展开更多
关键词 小反刍兽疫病毒 N活性蛋白 NH融合蛋白 可溶性表达与纯化 时间分辨荧光免疫测定方法
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