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脑脊液细胞中结核早期分泌性靶抗原6的检测及其早期诊断价值被引量：7: 1; 作者职瑾史明 +6 位作者冯国栋杨毅宁代文刘婷婷边婷袁子文赵钢《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期387-390,共4页; 目的探讨免疫荧光染色法检测脑脊液细胞中结核早期分泌性靶抗原6(ESAT-6)对结核性脑膜炎诊断的价值。方法收集36例确诊结核性脑膜炎患者的脑脊液为病例组,45例非结核性脑膜炎患者脑脊液为对照组。用双盲法对2组脑脊液细胞进行ESAT-6免... 展开更多; 关键词免疫荧光染色法早期分泌性靶抗原6 结核性脑膜炎诊断; 在线阅读下载PDF 职称材料

结核分枝杆菌Hsp65-Esat6与hGM-CSF联合DNA疫苗的构建与体外研究被引量：1: 2; 作者王森林张梦媛 +2 位作者王学坤周曙光江振友《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期29-35,共7页; 目的:应用分子生物学技术,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并在真核细胞中表达.方法:以p EGHsp65Esat-6为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65-Esat6基因,同时从质粒p ORF-h GM-CSF中扩增出基因佐剂h GM-CSF,分别克隆到真核表达载体p I... 展开更多; 关键词热休克蛋白65kd-早期分泌性抗原靶6kd 人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子双顺反子基因佐剂; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠巨噬细胞内表达结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白对细胞增殖和凋亡的影响被引量：6: 3; 作者任琳李轶 +2 位作者王山梅师娟郭思《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1809-1814,共6页; 目的:建立培养滤液蛋白10-早期分泌性抗原靶6(CFP10-ESAT6)真核表达质粒并转染RAW264.7巨噬细胞,观察胞内表达CFP10-ESAT6对细胞活性及凋亡的影响,并初步探讨其机制。方法:将CFP10-ESAT6融合基因插入真核表达质粒pEGFP-N1,构建重组质粒... 展开更多; 关键词结核分枝杆菌培养滤液蛋白10 早期分泌性抗原靶6 巨噬细胞细胞增殖细胞凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

结核分支杆菌ESAT-6基因蛋白的表达: 4; 作者王敏罗琴芳黄韧《中国比较医学杂志》 2008年第7期16-19,共4页; 目的构建致病性结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶(Early secretary antigenic target,ESAT-6)基因的pET原核表达载体,诱导表达并初步鉴定该蛋白。方法设计特异性引物,用PCR方法从结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组中扩增ESAT-6基因,产物通过... 展开更多; 关键词结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶ESAT-6 载体构建融合表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名脑脊液细胞中结核早期分泌性靶抗原6的检测及其早期诊断价值被引量：7: 1; 作者职瑾史明冯国栋杨毅宁代文刘婷婷边婷袁子文赵钢; 机构第四军医大学西京医院神经内科西安市第一医院神经内科; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期387-390,共4页; 基金国家自然科学基金(81371334); 文摘目的探讨免疫荧光染色法检测脑脊液细胞中结核早期分泌性靶抗原6(ESAT-6)对结核性脑膜炎诊断的价值。方法收集36例确诊结核性脑膜炎患者的脑脊液为病例组,45例非结核性脑膜炎患者脑脊液为对照组。用双盲法对2组脑脊液细胞进行ESAT-6免疫荧光染色,统计分析灵敏度和特异度等。结果病例组ESAT-6存在于中性粒细胞、单核细胞及淋巴细胞中,对照组脑脊液细胞中无ESAT-6表达。灵敏度为88.89%、特异度为93.33%;阳性预测值为91.43%、阴性预测值为91.30%;阳性似然比为13.33、阴性似然比为0.12;Youden指数为82.22%,ROC曲线下面积为0.94。结论免疫荧光染色检测脑脊液细胞中ESAT-6的灵敏度及特异度均较高,是结核性脑膜炎诊断的有效方法。; 关键词免疫荧光染色法早期分泌性靶抗原6 结核性脑膜炎诊断; 分类号 R529.3 [医药卫生—内科学] R392-33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名结核分枝杆菌Hsp65-Esat6与hGM-CSF联合DNA疫苗的构建与体外研究被引量：1: 2; 作者王森林张梦媛王学坤周曙光江振友; 机构暨南大学医学院微生物学与免疫学教研室; 出处《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期29-35,共7页; 基金国家"十二五"科技重大专项(2014ZX10003002 2012ZX10004903); 文摘目的:应用分子生物学技术,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并在真核细胞中表达.方法:以p EGHsp65Esat-6为模板经聚合酶链反应(PCR)扩增出Hsp65-Esat6基因,同时从质粒p ORF-h GM-CSF中扩增出基因佐剂h GM-CSF,分别克隆到真核表达载体p IRES的多克隆位点A(MCSA)和B(MCSB)中,构建p IHsp65-Esat6GM共表达质粒,并转染Hep G-2细胞中表达和检测.结果:酶切鉴定提示插入的基因片段大小分别为1.93 kb和0.47kb,测序分析表明克隆的Hsp65-Esat6和人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(h GM-CSF)序列与Gen Bank上公布序列完全一致;Western-bolt检测到Hsp65-Esat6融合蛋白相对分子质量(Mr)为75 000 k Da;RT-PCR方法检测出p IGM,p IHsp65GM和p IHsp65-Esat6GM转染组细胞均有h GM-CSF mRNA表达,三组细胞中h GM-CSF基因mRNA的表达量差异无统计学意义(P>0.05).ELISA方法检测到p IHsp65-Esat6GM转染组细胞培养上清中h GM-CSF的表达,且与空载体对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:成功构建和表达了p IHsp65-Esat6GM质粒,为研制优于卡介苗(BCG)的新型抗结核病的DNA疫苗奠定了基础.; 关键词热休克蛋白65kd-早期分泌性抗原靶6kd 人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子双顺反子基因佐剂; Keywords Hsp65-Esat6 hGM-CSF bicistronic gene adjuvant; 分类号 R378.911 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠巨噬细胞内表达结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白对细胞增殖和凋亡的影响被引量：6: 3; 作者任琳李轶王山梅师娟郭思; 机构河南省人民医院感染控制科、细菌室; 出处《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1809-1814,共6页; 基金河南省医学科技攻关计划普通项目(No.201203094); 文摘目的:建立培养滤液蛋白10-早期分泌性抗原靶6(CFP10-ESAT6)真核表达质粒并转染RAW264.7巨噬细胞,观察胞内表达CFP10-ESAT6对细胞活性及凋亡的影响,并初步探讨其机制。方法:将CFP10-ESAT6融合基因插入真核表达质粒pEGFP-N1,构建重组质粒,转染RAW264.7巨噬细胞。采用MTT的方法测定CFP10-ESAT6融合蛋白对RAW264.7巨噬细胞活性的影响,采用结核分枝杆菌19 kD脂蛋白和十字孢碱(staurosporine)处理RAW264.7巨噬细胞,并以流式细胞术检测细胞凋亡率以及Toll样受体2(TLR2)的表达。结果:成功构建了重组质粒pEGFP-N1/CFP10-ESAT6并转染至RAW264.7巨噬细胞;与对照组相比,胞内表达CFP10-ESAT6不能影响巨噬细胞的活性,但可以明显抑制结核分枝杆菌19 kD脂蛋白所造成的凋亡(P<0.05),并显著抑制了TLR2的表达(P<0.05)。结论:巨噬细胞内表达的CFP10-ESAT6融合蛋白不具有细胞毒性作用,但可以通过下调TLR2的表达来抑制结核分枝杆菌19 kD脂蛋白所造成的凋亡。; 关键词结核分枝杆菌培养滤液蛋白10 早期分泌性抗原靶6 巨噬细胞细胞增殖细胞凋亡; Keywords Mycobacterium tuberculosis Culture filtrate protein 10 Early secretory antigenic target 6 Macrophages Cell proliferation Apoptosis; 分类号 R363 [医药卫生—病理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名结核分支杆菌ESAT-6基因蛋白的表达: 4; 作者王敏罗琴芳黄韧; 机构广东医学院广东省实验动物监测所; 出处《中国比较医学杂志》 2008年第7期16-19,共4页; 基金广东省科技计划项目(2007B020707003) 广东省自然科学基金项目(07300986); 文摘目的构建致病性结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶(Early secretary antigenic target,ESAT-6)基因的pET原核表达载体,诱导表达并初步鉴定该蛋白。方法设计特异性引物,用PCR方法从结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组中扩增ESAT-6基因,产物通过双酶切克隆入pET-32a(+)质粒,经PCR、酶切、测序等方法鉴定后,转入大肠杆菌BL21菌体中IPTG诱导表达,并经镍柱纯化、Western-blotting鉴定。结果所获得ESAT-6基因序列与GenBank公布的完全一致;表达融合蛋白相对分子质量约2.5×104,并能与特异性单抗结合,具有一定免疫学活性。结论成功表达纯化并鉴定构建了ESAT-6融合蛋白。; 关键词结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶ESAT-6 载体构建融合表达; Keywords Mycobacterlum tuberculosis ESAT-6 Construction of vector Fusion expression; 分类号 R378 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	脑脊液细胞中结核早期分泌性靶抗原6的检测及其早期诊断价值	职瑾史明冯国栋杨毅宁代文刘婷婷边婷袁子文赵钢	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2015	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	结核分枝杆菌Hsp65-Esat6与hGM-CSF联合DNA疫苗的构建与体外研究	王森林张梦媛王学坤周曙光江振友	《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心	2016	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	小鼠巨噬细胞内表达结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白对细胞增殖和凋亡的影响	任琳李轶王山梅师娟郭思	《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心	2013	6	在线阅读下载PDF 职称材料
4	结核分支杆菌ESAT-6基因蛋白的表达	王敏罗琴芳黄韧	《中国比较医学杂志》	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料