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全反式维甲酸通过降解核定位信号-视黄酸受体α促进人白血病细胞分化
被引量:
3
1
作者
李健
刘北忠
+8 位作者
叶娇
熊玲
余莉华
钟鹏强
袁桢
刘冬冬
姚娟娟
刘俊梅
钟梁
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第12期1082-1087,共6页
目的研究全反式维甲酸(ATRA)对核定位信号-视黄酸受体α(NLS-RARα)过表达细胞分化的作用。方法用慢病毒在NB4细胞和U937细胞过表达NLS-RARα蛋白,用实时定量PCR检测NLS-RARα、CD11b、CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPβ)的mRNA水平,Western...
目的研究全反式维甲酸(ATRA)对核定位信号-视黄酸受体α(NLS-RARα)过表达细胞分化的作用。方法用慢病毒在NB4细胞和U937细胞过表达NLS-RARα蛋白,用实时定量PCR检测NLS-RARα、CD11b、CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPβ)的mRNA水平,Westernblot法检测NLS-RARα、CD11b、CEBPβ蛋白水平;ATRA处理后,用Western blot法检测细胞CD11b蛋白水平以及ATRA对NLS-RARα蛋白的降解情况;用改良Wright染色法观察细胞分化形态。结果慢病毒感染的NB4细胞和U937细胞过表达NLS-RARα蛋白,过表达NLS-RARα可下调细胞CD11b、CEBPβ的表达水平;ATRA可以促进NLS-RARα过表达细胞的分化;ATRA可以降解NLS-RARα且呈时间浓度依赖性。结论ATRA通过降解NLS-RARα促进白血病细胞的分化。
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关键词
全反式
维甲酸
(ATRA)
核定位信号
-
视黄酸
受体α
(NLS
-
RARα)
急
性
早
幼
粒细胞
白血病
细胞
分化
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职称材料
FRAP技术揭示PLZF-RARα融合蛋白在细胞核内的运动性依赖于其配基及转录活性
被引量:
1
2
作者
贺薇
黄莺
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期1463-1470,共8页
目的运用光漂白荧光恢复(FRAP)技术检测一系列带有绿色荧光蛋白(GFP)标签的野生型及突变型的早幼粒细胞性白血病锌指-维甲酸受体α(PLZF-RARα)表达蛋白分子在细胞核内运动性。方法运用凝胶迁移实验(EMSA)检测带有GFP标签的野生型及突变...
目的运用光漂白荧光恢复(FRAP)技术检测一系列带有绿色荧光蛋白(GFP)标签的野生型及突变型的早幼粒细胞性白血病锌指-维甲酸受体α(PLZF-RARα)表达蛋白分子在细胞核内运动性。方法运用凝胶迁移实验(EMSA)检测带有GFP标签的野生型及突变型PLZF-RARα融合蛋白结合维甲酸反应元件(RARE)的能力;运用FRAP以及共聚焦荧光显微镜分析一系列GFP-PLZF-RARα及其突变体表达蛋白在细胞核内的运动性;运用转录抑制剂放线菌素D(Act D)和/或全反式维甲酸(ATRA)处理GFP-RARα和GFPPLZF-RARα表达细胞,运用FRAP观察PLZF-RARα和野生型RARα在细胞核内的运动性变化情况。结果位于PLZF结构区的POZ以及锌指结构域不仅是引起PLZF-RARα核内运动性降低的主要原因,同时也是引起配体诱导的核内运动性减慢的关键因素。Act D能够显著地抑制PLZF-RARα和RARα蛋白分子在细胞核内的运动性;分化诱导剂ATRA处理可逆转Act D引起的RARα核内运动性降低效应,但经Act D处理的PLZF-RARα分子无此效应。结论运用FRAP技术发现PLZF-RARα融合蛋白在细胞核内的运动性减慢可能依赖于配体的存在及其转录活性。
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关键词
早幼粒细胞性白血病锌指-维甲酸受体α
维甲酸
受体α
绿色荧光蛋白
光漂白荧光恢复
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职称材料
题名
全反式维甲酸通过降解核定位信号-视黄酸受体α促进人白血病细胞分化
被引量:
3
1
作者
李健
刘北忠
叶娇
熊玲
余莉华
钟鹏强
袁桢
刘冬冬
姚娟娟
刘俊梅
钟梁
机构
重庆医科大学检验医学院临床诊断学教育部重点实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第12期1082-1087,共6页
基金
国家自然科学基金(81772280)。
文摘
目的研究全反式维甲酸(ATRA)对核定位信号-视黄酸受体α(NLS-RARα)过表达细胞分化的作用。方法用慢病毒在NB4细胞和U937细胞过表达NLS-RARα蛋白,用实时定量PCR检测NLS-RARα、CD11b、CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPβ)的mRNA水平,Westernblot法检测NLS-RARα、CD11b、CEBPβ蛋白水平;ATRA处理后,用Western blot法检测细胞CD11b蛋白水平以及ATRA对NLS-RARα蛋白的降解情况;用改良Wright染色法观察细胞分化形态。结果慢病毒感染的NB4细胞和U937细胞过表达NLS-RARα蛋白,过表达NLS-RARα可下调细胞CD11b、CEBPβ的表达水平;ATRA可以促进NLS-RARα过表达细胞的分化;ATRA可以降解NLS-RARα且呈时间浓度依赖性。结论ATRA通过降解NLS-RARα促进白血病细胞的分化。
关键词
全反式
维甲酸
(ATRA)
核定位信号
-
视黄酸
受体α
(NLS
-
RARα)
急
性
早
幼
粒细胞
白血病
细胞
分化
Keywords
all
-
trans retinoic acid(ATRA)
nuclear localization signal
-
retinoic acid receptor
-
α(NLS
-
RARα)
acute promyelocytic leukemia
cell differentiation
分类号
Q254 [生物学—细胞生物学]
R733.71 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
FRAP技术揭示PLZF-RARα融合蛋白在细胞核内的运动性依赖于其配基及转录活性
被引量:
1
2
作者
贺薇
黄莺
机构
上海交通大学基础医学院病理生理学教研室细胞分化与凋亡教育部重点实验室
出处
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第10期1463-1470,共8页
文摘
目的运用光漂白荧光恢复(FRAP)技术检测一系列带有绿色荧光蛋白(GFP)标签的野生型及突变型的早幼粒细胞性白血病锌指-维甲酸受体α(PLZF-RARα)表达蛋白分子在细胞核内运动性。方法运用凝胶迁移实验(EMSA)检测带有GFP标签的野生型及突变型PLZF-RARα融合蛋白结合维甲酸反应元件(RARE)的能力;运用FRAP以及共聚焦荧光显微镜分析一系列GFP-PLZF-RARα及其突变体表达蛋白在细胞核内的运动性;运用转录抑制剂放线菌素D(Act D)和/或全反式维甲酸(ATRA)处理GFP-RARα和GFPPLZF-RARα表达细胞,运用FRAP观察PLZF-RARα和野生型RARα在细胞核内的运动性变化情况。结果位于PLZF结构区的POZ以及锌指结构域不仅是引起PLZF-RARα核内运动性降低的主要原因,同时也是引起配体诱导的核内运动性减慢的关键因素。Act D能够显著地抑制PLZF-RARα和RARα蛋白分子在细胞核内的运动性;分化诱导剂ATRA处理可逆转Act D引起的RARα核内运动性降低效应,但经Act D处理的PLZF-RARα分子无此效应。结论运用FRAP技术发现PLZF-RARα融合蛋白在细胞核内的运动性减慢可能依赖于配体的存在及其转录活性。
关键词
早幼粒细胞性白血病锌指-维甲酸受体α
维甲酸
受体α
绿色荧光蛋白
光漂白荧光恢复
转录
Keywords
promyelocytic leukemia zinc finger
-
retinoic acid receptor α
retinoic acid receptor α
green fluores
-
cence protein
fluorescence recovery after photobleaching
transcription
分类号
R733.71 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
全反式维甲酸通过降解核定位信号-视黄酸受体α促进人白血病细胞分化
李健
刘北忠
叶娇
熊玲
余莉华
钟鹏强
袁桢
刘冬冬
姚娟娟
刘俊梅
钟梁
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
3
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
FRAP技术揭示PLZF-RARα融合蛋白在细胞核内的运动性依赖于其配基及转录活性
贺薇
黄莺
《上海交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
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