日本血吸虫脂肪酸结合蛋白DNA联合白细胞介素-12的免疫保护作用 被引量：4

1

作者 朱晓华 石佑恩 《医药导报》 CAS 2005年第4期268-270,共3页

目的　探讨白细胞介素-12 (IL-12)对日本血吸虫脂肪酸结合蛋白 (Sj14FABP)DNA疫苗的辅佐作用。方法　大量制备pVIVO2、pVIVO2 IL-12、pVIVO2 Sj14FABP质粒DNA。48只雄性Balb/c小鼠随机分为A、B、C、D组,每组各 12只,每只小鼠于免疫前 1... 目的　探讨白细胞介素-12 (IL-12)对日本血吸虫脂肪酸结合蛋白 (Sj14FABP)DNA疫苗的辅佐作用。方法　大量制备pVIVO2、pVIVO2 IL-12、pVIVO2 Sj14FABP质粒DNA。48只雄性Balb/c小鼠随机分为A、B、C、D组,每组各 12只,每只小鼠于免疫前 1d在右后腿股四头肌肌内注射 0 75%盐酸布比卡因 30μL。A组给予 0 9%氯化钠注射液 100μL,im;B组给予pVIVO2质粒DNA 100μg,im; C组给予pVIVO2 Sj14FABP质粒DNA 100μg,im;D组给予pVIVO2 Sj14FABP质粒DNA50μg和pVIVO2 IL 12质粒DNA50μg,im。免疫 30d后,每只小鼠以 ( 40±2 )条尾蚴感染,感染 45d后,计数成虫及肝内虫卵;用ELISA法检测小鼠血清中IgG抗体水平。结果　C、D组的减虫率分别为24 11%和 38 83%,减卵率为 27 20%和 40 27%,差异有显著性(P<0. 05);免疫 30d后小鼠血清IgG水平无明显升高,各组间差异无显著性 (P>0 05)。结论　pVIVO2 Sj14FABP能够诱导小鼠产生部分抗血吸虫感染的保护力,IL-12是一种有效的血吸虫病DNA疫苗佐剂。 展开更多

关键词 日本血吸虫脂肪酸结合蛋白 白细胞介素-12 DNA疫苗 佐剂

在线阅读 下载PDF 职称材料

日本血吸虫脂肪酸结合蛋白重组抗原对小鼠免疫保护性的研究 被引量：8

2

作者 赵巍 苏川 +7 位作者 吴海玮 胡雪梅 沈蕾 季敏君 王荣芝 马磊 陈淑贞 张兆松 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第3期42-44,73,共4页

目的　研究日本血吸虫 (中国大陆株 )脂肪酸结合蛋白 (Sj FABPc)重组抗原作为血吸虫病疫苗候选分子的潜能 ,并探讨Sj FABPc/Sj2 6GST融合蛋白作为复合疫苗的可能性。 方法　用亲和层析法制备Sj FABPc重组抗原和Sj FABPc/Sj2 6GST融合蛋... 目的　研究日本血吸虫 (中国大陆株 )脂肪酸结合蛋白 (Sj FABPc)重组抗原作为血吸虫病疫苗候选分子的潜能 ,并探讨Sj FABPc/Sj2 6GST融合蛋白作为复合疫苗的可能性。 方法　用亲和层析法制备Sj FABPc重组抗原和Sj FABPc/Sj2 6GST融合蛋白。将两种蛋白分别免疫BALB/c小鼠后进行攻击感染试验。结果　Sj FABPc及Sj FABPc/Sj2 6GST分别诱导小鼠产生了 2 3 6 0 % (P <0 0 5 )和 2 1 72 % (P >0 0 5 )的成虫减虫率 ,5 9 36 % (P <0 0 0 1)和 4 9 6 8% (P <0 0 0 1)的总减卵率。 展开更多

关键词 日本血吸虫 脂肪酸结合蛋白 重组抗原 融合表达 免疫保护 血吸虫病 动物实验

在线阅读 下载PDF 职称材料

含日本血吸虫脂肪酸结合蛋白(SjFABPc)基因DNA重组质粒pCD-SjFABPc在哺乳动物细胞中的表达 被引量：6

3

作者 冯新港 余新炳 +1 位作者 吴忠道 周俊梅 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第5期39-42,共4页

目的　观察裸DNA重组质粒pCD -SjFABPc在体外转染HepG2细胞以及质粒DNA免疫鼠肌组织中的表达 ,为进一步应用该质粒进行DNA免疫实验奠定基础。方法　用脂质体介导DNA转染法将pCD -SjFABPc转染贴壁细胞HepG2 ,G418加压筛选获得阳性克隆细... 目的　观察裸DNA重组质粒pCD -SjFABPc在体外转染HepG2细胞以及质粒DNA免疫鼠肌组织中的表达 ,为进一步应用该质粒进行DNA免疫实验奠定基础。方法　用脂质体介导DNA转染法将pCD -SjFABPc转染贴壁细胞HepG2 ,G418加压筛选获得阳性克隆细胞并传代培养 ,SDS -PAGE及Western -blot鉴定目的基因在HepG2细胞中的表达 ;将pCD -SjFABPc质粒肌注免疫BALB/c小鼠 ,于 6 5d后取注射部位的肌组织约 0 3cm3 大小 ,经固定、包埋、切片 ,免疫酶组织化学染色 ,显微照相记录。结果　在被转染的HepG2细胞裂解样品中 ,呈现一分子量约 14kDa大小且能被感染兔血清特异识别的条带 ;免疫组化结果显示免疫组切片标本中有特异性阳性反应。结论　pCD 展开更多

关键词 日本血吸虫 脂肪酸结合蛋白 重组质粒 DNA

在线阅读 下载PDF 职称材料

日本血吸虫脂肪酸结合蛋白基因在大肠杆菌的表达 被引量：5

4

作者 田生和 段凯 +3 位作者 赖建平 王大坤 郑宏 石磊 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第5期15-17,共3页

目的　克隆并表达日本血吸虫脂肪酸结合蛋白基因以制备血吸虫疫苗候选分子。方法　利用 Ｐ Ｃ Ｒ 技术扩增日本血吸虫大陆株的ｃ Ｄ Ｎ Ａ 基因， 经 Ｂａｍ Ｈ Ｉ和 Ｅｃｏ Ｒ Ｉ双酶切后定向克隆于原核表达质粒 Ｐ Ｅ Ｇ Ｘ２ － Ｔ... 目的　克隆并表达日本血吸虫脂肪酸结合蛋白基因以制备血吸虫疫苗候选分子。方法　利用 Ｐ Ｃ Ｒ 技术扩增日本血吸虫大陆株的ｃ Ｄ Ｎ Ａ 基因， 经 Ｂａｍ Ｈ Ｉ和 Ｅｃｏ Ｒ Ｉ双酶切后定向克隆于原核表达质粒 Ｐ Ｅ Ｇ Ｘ２ － Ｔ， 并在大肠杆菌进行表达研究。结果　获得目的基因克隆， 在大肠杆菌可诱导表达约４４ｋ Ｄ 的融合蛋白， 该重组抗原能被慢性血吸虫病人血清特异性识别。结论　成功地表达了一种血吸虫疫苗候选抗原， 为进一步研究打下基础。 展开更多

关键词 日本血吸虫 脂肪酸结合蛋白 疫苗 大肠杆菌

在线阅读 下载PDF 职称材料

日本血吸虫大陆株脂肪酸结合蛋白SjFABPc编码区基因的体外扩增及克隆 被引量：8

5

作者 冯新港 余新炳 +1 位作者 李焱 刘彦文 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1999年第3期33-36,共4页

目的体外扩增日本血吸虫中国大陆株脂肪酸结合蛋白（SjFABPc）抗原的编码区基因序列，将其克隆到真核表达质位pcDNA3中，为进一步对其进行核酸疫苗研究奠定基础。方法特定寡核苷酸引物的设计与合成；异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法分离日本... 目的体外扩增日本血吸虫中国大陆株脂肪酸结合蛋白（SjFABPc）抗原的编码区基因序列，将其克隆到真核表达质位pcDNA3中，为进一步对其进行核酸疫苗研究奠定基础。方法特定寡核苷酸引物的设计与合成；异硫氰酸胍-酚-氯仿一步法分离日本血吸虫成虫RNA，RT－PCR扩增目的基因；分子克隆常规操作将扩增产物亚克隆至中间载体pUC18中，然后走向克隆到真核表达载体pcDNA3中。结果RT－PCR特异性扩增出SjFABPc编码区基因序列，其片段大小为440hp；经酶切、PCR鉴定表明所构建的质粒pUC－SjFABPc和pCD－SjFABPc中含有所扩增的基因序列。结论RT－PCR扩增的SjFABPc抗原编码区基因序列与预期长度相村合；成功地构建了含目的基因的真核表达质粒pCD－SjFABPc。从而，为进一步对其进行DNA免疫系列研究工作奠定了基础。 展开更多

关键词 日本血吸虫 脂肪酸结合蛋白 RT-PCR 基因克隆

在线阅读 下载PDF 职称材料

重组日本血吸虫极低密度脂结合蛋白的抗原性及诊断价值的研究 被引量：4

6

作者 干小仙 王越 +5 位作者 曾肖芃 丁建祖 沈慧英 沈丽英 Paul Brindley 樊晋江 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第8期695-697,694,共4页

目的　探讨重组日本血吸虫特异性极低密度脂结合蛋白 (SVLBP)的抗原性及其诊断价值。方法　SVLBP基因亚克隆入pQE - 30表达载体 ,克隆菌在IPTG诱导下表达重组蛋白 ;非变性条件下制备克隆菌裂解液 ,用亲和层析法纯化重组蛋白 ;用Westernb... 目的　探讨重组日本血吸虫特异性极低密度脂结合蛋白 (SVLBP)的抗原性及其诊断价值。方法　SVLBP基因亚克隆入pQE - 30表达载体 ,克隆菌在IPTG诱导下表达重组蛋白 ;非变性条件下制备克隆菌裂解液 ,用亲和层析法纯化重组蛋白 ;用Westernblot鉴定其抗原性 ;纯化SVLBP重组蛋白免疫家兔获得抗血清 ;以SVLBP重组蛋白为抗原 ,ELISA法检测血吸虫感染者血清及健康人血清。结果　克隆菌在IPTG诱导下高表达SVLBP重组蛋白 ;该重组蛋白诱导家兔产生单特异抗体 ,抗体滴度为 1∶6 4 0 0 ;SVLBP重组蛋白与血吸虫病人血清有较强的反应 ;以该蛋白为抗原检测 36人份血吸虫感染者血清 ,阳性率为 83.3% ,5 0人份健康人血清 ,假阳性率为 2 % (1/5 0 ) ,10人份肺吸虫病人血清 ,1例阳性 ,交叉反应率为 10 % (1/10 )。结论　SVLBP重组蛋白有较好的抗原性 ,以该重组蛋白为抗原检测日本血吸虫病患者血清中特异性抗体 ,敏感性和特异性均较高 ,具有一定的诊断价值。 展开更多

关键词 日本血吸虫 极低密度脂结合蛋白 抗原性 诊断

在线阅读 下载PDF 职称材料

日本血吸虫一个新钙结合蛋白全长编码区的克隆与功能预测 被引量：6

7

作者 彭鸿娟 陈晓光 王珣章 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第2期47-49,共3页

目的　对用表达序列标签 (ExpressionSequenceTag ,EST)策略从日本血吸虫尾蚴cDNA文库中筛选出的新基因进行功能预测。方法　用NCBI站点的BLASTx及BLASTn程序对所获得的新基因序列进行同源性搜索 ;用NCBIBLAST站点的blasttwosequence程... 目的　对用表达序列标签 (ExpressionSequenceTag ,EST)策略从日本血吸虫尾蚴cDNA文库中筛选出的新基因进行功能预测。方法　用NCBI站点的BLASTx及BLASTn程序对所获得的新基因序列进行同源性搜索 ;用NCBIBLAST站点的blasttwosequence程序对同源性高的基因进行核苷酸及氨基酸水平的同源性比较 ;利用motifscaninaProteinsequence对cDNA序列所编码的蛋白质进行结构域搜索。结果　发现一个与曼氏血吸虫尾蚴期特异性 8kDa钙结合蛋白 (Sm8)基因高度同源的日本血吸虫新基因 ,cDNA序列与氨基酸水平的同一性均为 82 % ;蛋白结构域搜索结果显示 ,该cDAN序列所编码的蛋白质具有 2个EF手钙结合位点。结论　用EST策略筛选新基因是一个可行的方法 ,所筛到的日本血吸虫新基因编码一种钙结合蛋白 ,全长编码序列与Sm8基因高度同源 ,对该基因的期特异性及免疫保护性的探讨具有重要的意义。 展开更多

关键词 日本血吸虫 基因功能预测 钙结合蛋白 全长编码序列 免疫保护

在线阅读 下载PDF 职称材料

日本血吸虫M_r为8000钙结合蛋白基因的表达及其融合蛋白免疫反应性的评价 被引量：1

8

作者 许行 彭鸿娟 陈晓光 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第7期706-708,713,共4页

目的将亚克隆在pET32a(+)质粒上的日本血吸虫Mr为8 000钙结合蛋白(calcium-binding protein, CBP) 基因进行表达及蛋白纯化,并对表达产物用Western blotting 及ELISA方法进行免疫反应性的评价。方法将重组表达质粒pET32a(+)-CBP 转化入... 目的将亚克隆在pET32a(+)质粒上的日本血吸虫Mr为8 000钙结合蛋白(calcium-binding protein, CBP) 基因进行表达及蛋白纯化,并对表达产物用Western blotting 及ELISA方法进行免疫反应性的评价。方法将重组表达质粒pET32a(+)-CBP 转化入宿主菌BL21中,IPTG诱导表达后超声裂菌,离心后取上清进行SDS-PAGE,观察融合蛋白的表达情况;用金属Ni鏊合物亲和层析树脂(Ni-NTA)柱子纯化目标蛋白;将SDS-PAGE后的蛋白从凝胶转移到聚氟乙烯膜上,分别用6-组氨酸(6-His)抗体、日本血吸虫尾蚴感染6周的兔血清及紫外照射减毒尾蚴免疫的兔血清作一抗进行免疫印迹,将纯化后的融合蛋白作为包被抗原,ELISA法检测正常兔血清及感染兔血清,对该蛋白的免疫反应性作出评价。结果重组菌株用IPTG诱导后于Mr=29 000处有一表达条带,该蛋白与硫氧还蛋白融合表达,带有6-His基团, 用抗6-His抗体做免疫印迹有特异性的反应条带,而用尾蚴感染兔血清及紫外照射减毒尾蚴免疫的兔血清做免疫印迹都没有特异性的目标反应带出现,ELISA 的结果显示该蛋白与血吸虫感染兔血清没有免疫反应性。结论CBP蛋白与硫氧还蛋白融合表达后为可溶性蛋白且相对分子质量约为29 000,该蛋白与尾蚴感染兔血清及紫外照射减毒尾蚴免疫的兔血清均无免疫反应性。 展开更多

关键词 日本血吸虫 钙结合蛋白基因 基因表达 免疫反应性 ELISA

在线阅读 下载PDF 职称材料

日本血吸虫凝溶胶蛋白基因在虫体不同发育阶段的转录水平分析

9

作者 汪勇沛 詹永乐 《上海畜牧兽医通讯》 2010年第1期48-49,共2页

关键词 日本血吸虫 转录水平 发育阶段 蛋白基因 肌动蛋白结合蛋白 虫体 溶胶 细胞形态

在线阅读 下载PDF 职称材料

日本血吸虫DNA多价疫苗pVIVO_2SjFABP-23的构建及其保护性免疫 被引量：9

10

作者 李春艳 余龙江 +4 位作者 刘智 朱路 朱晓华 胡媛 石佑恩 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期122-126,共5页

目的构建日本血吸虫多价DNA疫苗pVIVO2SjFABP-23,并观察其在小鼠抗血吸虫感染中的免疫保护作用。方法根据Sj FABP和Sj23的基因序列合成两对特异性引物,利用重组PCR技术将日本血吸虫Sj FABP和Sj23的基因片段进行拼接,得到融合基因SjFABP-... 目的构建日本血吸虫多价DNA疫苗pVIVO2SjFABP-23,并观察其在小鼠抗血吸虫感染中的免疫保护作用。方法根据Sj FABP和Sj23的基因序列合成两对特异性引物,利用重组PCR技术将日本血吸虫Sj FABP和Sj23的基因片段进行拼接,得到融合基因SjFABP-23,再将该片段重组于p GEM-T载体中,进行PCR扩增及DNA序列测定。然后经双酶切将目的片段SjFABP-23克隆到pVIVO2的一个多克隆位点上转化E.coliGT 110获得重组质粒pVIVO2SjFABP-23,免疫小鼠进行免疫保护性实验。结果PCR扩增出一条大小约为1.1Kb的目的片段。免疫小鼠获得52.14%减虫率(P<0.01)和60.93%的减卵率(P<0.01),且均高于单价疫苗pVIVO2Sj23(P<0.05)。结论PCR成功扩增SjFABP-23的基因片段,血吸虫DNA多价疫苗pVI-VO2SjFABP-23构建成功,该疫苗在小鼠抗血吸虫感染中具有比单价疫苗pVIVO2Sj23更好的免疫保护作用。 展开更多

关键词 日本血吸虫 23K Da膜蛋白 脂肪酸结合蛋白 多价DNA疫苗 免疫保护

在线阅读 下载PDF 职称材料

以pcD-IL-2为基因佐剂的含日本血吸虫SjFABPc基因真核表达重组质粒裸DNA免疫小鼠的研究 被引量：11

11

作者 冯新港 余新炳 +1 位作者 吴忠道 周俊梅 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第6期7-10,共4页

目的　在小鼠模型中评价含日本血吸虫脂肪酸结合蛋白分子基因的真核表达质粒pcD -SjFABPc与含IL - 2基因佐剂的质粒构建体 pCD -IL - 2经肌注、皮内途径导入机体后所诱生的免疫反应。 方法　碱裂解法大量制备重组质粒 pcD-SjFABPc、pCD ... 目的　在小鼠模型中评价含日本血吸虫脂肪酸结合蛋白分子基因的真核表达质粒pcD -SjFABPc与含IL - 2基因佐剂的质粒构建体 pCD -IL - 2经肌注、皮内途径导入机体后所诱生的免疫反应。 方法　碱裂解法大量制备重组质粒 pcD-SjFABPc、pCD -IL - 2重组质粒及空质粒 pcDNA3,经肌肉及皮内注射免疫BALB/c小鼠 ,每只鼠注射 10 0 μg ,两周后同量加强免疫一次。分别于末次免疫后的第 2 0d、5 0d及 65d用MTT法检测脾脏T淋巴细胞增殖与NK细胞活性 ,并用双夹心ELISA测定血清细胞因子IL - 2、IFN -γ及IL - 10含量 ;ELISA法测定免疫鼠血清IgG抗体。 结果　NK细胞杀伤活性及脾淋巴细胞增殖测定 ,加佐剂组 ( pcD -SjFABPc联合 pCD -IL - 2组 )较不加佐剂组 ( pcD -SjFABPc组 )NK细胞杀伤及脾淋巴细胞增殖活性皆增加 (P <0 .0 5 )。两途径三次检测IL - 2及IFN -γ值均明显高于NS对照组和空质粒组 ,且加佐剂组的明显高于不加佐剂组的 (P <0 .0 5 ) ;不同途径各组IL - 10值与NS及空质粒对照组的比较则无显著性差别 (P >0 .0 5 )。注射质粒后 2 0d和 5 0d ,未测出抗体 ;免疫后 65d检测 ,pcD -SjFABPc和pcD -SjFABPc联合 pcD -IL - 2免疫组的OD值明显高于对照组 (P <0 .0 1) ,而该两组OD490 值之间无显著性差异 (P >0 .0 展开更多

关键词 日本血吸虫 脂肪酸结合蛋白 DNA免疫 IL-2基因佐剂

在线阅读 下载PDF 职称材料

日本血吸虫(中国大陆株)FABPc重组抗原高效融合表达、纯化及免疫学活性鉴定 被引量：4

12

作者 赵巍 苏川 +4 位作者 吴海玮 胡雪梅 沈蕾 陈淑贞 张兆松 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第5期43-45,共3页

目的　构建Sj-FABPc表达克隆 ,获得大量纯化rSj-FABPc重组 (日本血吸虫脂肪酸结合蛋白 )抗原 ,了解其作为候选疫苗抗原的潜能。方法　以PCR法从Sj-cDNA库中扩增出目的基因片段后亚克隆入表达载体pGEX - 6P - 1进行融合表达 ,经Glutathio... 目的　构建Sj-FABPc表达克隆 ,获得大量纯化rSj-FABPc重组 (日本血吸虫脂肪酸结合蛋白 )抗原 ,了解其作为候选疫苗抗原的潜能。方法　以PCR法从Sj-cDNA库中扩增出目的基因片段后亚克隆入表达载体pGEX - 6P - 1进行融合表达 ,经GlutathioneSepharoseTM4B亲和层析柱和PreScissionTMProtease酶切后纯化出rSj-FABPc ,Westernblot鉴定其抗原性 ,以rSj-FABPc免疫小鼠 ,制备特异性抗血清 ,并用ELISA法检测重组抗原的免疫活性。结果　纯化的rSj-FABPc能被血吸虫成虫免疫兔血清和急、慢性血吸虫病人血清所识别 ,并能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答 ,抗体滴度为 1∶12 80 0。结论　rSj-FABPc具有良好的抗原性 。 展开更多

关键词 日本血吸虫 脂肪酸结合蛋白 基因克隆 重组抗原

在线阅读 下载PDF 职称材料

几种日本血吸虫新基因的表达特性分析 被引量：2

13

作者 彭鸿娟 陈晓光 +3 位作者 李华 周晓红 沈树满 王珣章 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第2期46-49,共4页

目的　对从日本血吸虫尾蚴cDNA文库中筛选出的 3种新基因 ,腺苷酸激酶 (AK)、蛋白酶体激活因子PA2 8β亚单位 (PA2 8)、8kDa钙结合蛋白 (CBP)基因进行表达特性研究。方法　分别提取雌雄成虫、尾蚴、断尾童虫的总RNA ,利用RT-PCR酶混合... 目的　对从日本血吸虫尾蚴cDNA文库中筛选出的 3种新基因 ,腺苷酸激酶 (AK)、蛋白酶体激活因子PA2 8β亚单位 (PA2 8)、8kDa钙结合蛋白 (CBP)基因进行表达特性研究。方法　分别提取雌雄成虫、尾蚴、断尾童虫的总RNA ,利用RT-PCR酶混合物试剂盒 ,一步法对总RNA进行反转录及PCR扩增。结果　AK及PA2 8蛋白基因可以在雌雄成虫、尾蚴、断尾童虫体内表达 ,CBP只在尾蚴及断尾童虫中表达。结论　所筛到的AK、PA2 8、CBP基因均是日本血吸虫特异基因 ,AK及PA2 8基因可以在雌雄成虫、尾蚴、断尾童虫体内表达 ,CBP可能是日本血吸虫尾蚴。 展开更多

关键词 日本血吸虫 新基因 表达特性 腺苷酸激酶 蛋白酶体激活因子 8kDa钙结合蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

日本血吸虫8k CaBP基因启动子区的克隆与分析 被引量：1

14

作者 彭鸿娟 陈晓光 +1 位作者 周晓红 沈树满 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第8期869-872,共4页

目的克隆日本血吸虫8kCaBP(Sj8CaBP)基因启动子区并对该序列进行分析。方法提取日本血吸虫基因组DNA,并按ClontechUniversalGenomeWalkerTMKit的操作手册说明,建立日本血吸虫基因组DNA文库。根据手册要求及Sj8CaBP基因的cDNA序列,设计... 目的克隆日本血吸虫8kCaBP(Sj8CaBP)基因启动子区并对该序列进行分析。方法提取日本血吸虫基因组DNA,并按ClontechUniversalGenomeWalkerTMKit的操作手册说明,建立日本血吸虫基因组DNA文库。根据手册要求及Sj8CaBP基因的cDNA序列,设计合成该基因染色体步移的特异性引物与试剂盒提供的端子引物进行巢式PCR。将得到的PCR产物克隆测序,测序结果用启动子区的分析软件及与其cDNA序列比对进行分析。结果得到的Sj8CaBP基因长度为1079bp(GenBank登录号AY262018),该基因包含Sj8CaBP基因完整的开放阅读框(ORF),包括1个内含子及2个外显子,在其5'端UTR区具有明显的启动子区,包括TATA盒及CAAT盒,没有发现GC盒及一些血吸虫基因启动子区所常见的AP-1(Activeprotein1)结合位点。结论从日本血吸虫基因组文库中获得一个长1079bp的Sj8CaBP基因片段(GenBank登录号为AY262018),经分析证明,该片段包含一个启动子区,具有TATA盒及CAAT盒的结构及1个内含子2个外显子. 展开更多

关键词 日本血吸虫 钙结合蛋白 启动子区 基因文库 外显子 内含子

在线阅读 下载PDF 职称材料