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单克隆抗体治疗日本乙型脑炎病毒感染恒河猴的实验研究 被引量：1
1
作者 张明杰 汪美先 +2 位作者 姜绍谆 马文煜 于碧云 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第1期1-7,共7页
恒河猴感染日本乙型脑炎病毒(JEV)后,出现脑炎的一系列症状与体征,终因呼吸及循环衰竭而死亡。病毒感染猴体温升至39℃以上后的第2天,注射单克隆抗体(McAb)制剂进行治疗。结果McAb经肌肉、静脉、硬膜下加肌肉等不同途径注射后,均显示良... 恒河猴感染日本乙型脑炎病毒(JEV)后,出现脑炎的一系列症状与体征,终因呼吸及循环衰竭而死亡。病毒感染猴体温升至39℃以上后的第2天,注射单克隆抗体(McAb)制剂进行治疗。结果McAb经肌肉、静脉、硬膜下加肌肉等不同途径注射后,均显示良好的疗效,对恒河猴的保护率达100％;其中以硬膜下加肌肉途径注射McAb的效果最佳。多次注射McAb,未发现任何不良反应与毒副作用;提示将鼠源性McAb用于灵长类安全可靠,若过渡到临床使用,是可行的。 展开更多
关键词 单克隆抗体 治疗 日本乙型脑炎病毒感染 恒河猴 实验研究
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猪非典型瘟病毒、经典猪瘟病毒、日本乙型脑炎病毒的三重荧光定量PCR检测方法的建立与应用
2
作者 许浩文 陈军光 +6 位作者 马琼琼 潘杏明 郭美君 朱伟群 周莹珊 董婉玉 王晓杜 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第2期144-151,共8页
猪非典型瘟病毒(APPV)、经典猪瘟病毒(CSFV)、日本乙型脑炎病毒(JEV)均属于黄病毒科重要成员,从临床症状难以区分且三者的混合感染。为建立一种能快速鉴别检测APPV、CSFV、JEV的三重荧光定量PCR(qPCR)检测方法,本研究根据APPV 5'UT... 猪非典型瘟病毒(APPV)、经典猪瘟病毒(CSFV)、日本乙型脑炎病毒(JEV)均属于黄病毒科重要成员,从临床症状难以区分且三者的混合感染。为建立一种能快速鉴别检测APPV、CSFV、JEV的三重荧光定量PCR(qPCR)检测方法,本研究根据APPV 5'UTR基因、CSFV E2基因和JEV E基因分别设计引物与探针,将公司合成的重组质粒标准品pLKO.1-APPV-5'UTR、pLKO.1-CSFV-E2和pLKO.1-JEV-E按体积比1:1:1混合后均为(1×10^(8)拷贝/μL)作为模板,经反应条件优化,初步建立同时检测这3种病毒的三重q PCR方法。以本研究构建的APPV慢病毒、CSFV慢病毒、JEV慢病毒,以及猪流感病毒、猪Delta冠状病毒、猪流行性腹泻病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪轮状病毒、猪传染性胃肠炎病毒、诺如病毒的基因组为模板,采用建立的该方法检测,评估其特异性,结果显示,该方法仅能检测到APPV、CSFV、JEV的慢病毒,而其他病原检测结果均为阴性。选取1×10^(1)拷贝/μL~1×10^(8)拷贝/μL的混合质粒标准品和1×10^(1)TU/m L~1×10^(6)TU/m L的三种混合慢病毒液分别作为模板,采用本研究建立的方法检测,评估该方法的敏感性,结果显示,该方法对重组质粒pLKO.1-APPV-5'UTR、pLKO.1-CSFV-E2和pLKO.1-JEV-E的检测限均为1×10^(2)拷贝/μL,对3种慢病毒的检测限均为1×10^(2)TU/mL。以1×10~7拷贝/μL、1×10^(5)拷贝/μL、1×10~3拷贝/μL的质粒标准品混合物作为模板,分别进行组内和组间的重复性试验,结果显示,组内和组间重复性试验的变异系数(CV)均低于4.5%。利用本研究建立的三重qPCR和已发表的3种病原的SYBR Green qPCR检测方法对111份临床样品(75份猪肛拭子样品和36份猪组织病料样品)分别检测,结果显示,该三重qPCR方法与已发表的APPV、CSFV、JEV SYBR Green qPCR方法的总符合率分别为99.10%、100%、100%。本研究首次建立的检测APPV、CSFV、JEV的三重TaqMan qPCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,为三者临床样品的快速鉴别检测提供了技术支持。 展开更多
关键词 猪非典型瘟病毒 经典猪瘟病毒 日本乙型脑炎病毒 三重荧光定量PCR
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抗日本乙型脑炎病毒的线粒体靶向小分子化合物的筛选及鉴定
3
作者 李晓晗 陈婧 周斌 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期497-506,共10页
[目的]线粒体作为重要的能量代谢细胞器,不仅可以调控宿主先天免疫通路影响病毒复制,而且其生物学功能的改变与病毒生命周期密不可分。本文旨在确定抑制日本乙型脑炎病毒(JEV)的线粒体靶向化合物。[方法]通过体外CCK-8、间接免疫荧光、... [目的]线粒体作为重要的能量代谢细胞器,不仅可以调控宿主先天免疫通路影响病毒复制,而且其生物学功能的改变与病毒生命周期密不可分。本文旨在确定抑制日本乙型脑炎病毒(JEV)的线粒体靶向化合物。[方法]通过体外CCK-8、间接免疫荧光、蛋白免疫印迹、RT-qPCR以及细胞因子检测等试验,对382种线粒体靶向化合物抗JEV的效果进行评价,筛选到的敏感药物在小鼠体内进行抗病毒效果验证。[结果]通过药物初筛,从382种药物中筛选出9种疑似抗JEV药物,进一步的体外分子试验筛选确定了其中3种药物对JEV复制有明显的抑制作用,分别为丙酮酸钠(sodium 2-oxopropanoate)、布喹那(brequinar)及松果菊苷(echinacoside)。动物试验结果表明,3种药物有效抑制了JEV在小鼠体内的增殖,给药组小鼠体重增加明显高于对照组,血液中的病毒含量更低,死亡率更低,细胞因子水平出现显著变化,其中以布喹那给药组最为明显。[结论]成功筛选出3种抗JEV的线粒体靶向化合物,为探究线粒体在病毒复制中发挥的作用提供了借鉴,也为抗JEV的临床药物研发提供了新思路。 展开更多
关键词 线粒体 日本乙型脑炎病毒 抗病毒 药物筛选 小鼠 保护率
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日本乙型脑炎病毒E抗原表位的筛选 被引量：3
4
作者 马丽敏 李琳 +6 位作者 胡乐鹏 何晔 李叶 任秀梅 靳朝 夏志平 王本旭 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期60-63,共4页
为筛选日本乙型脑炎病毒(JEV)的E抗原表位,本实验以抗JEV E蛋白的单克隆抗体(MAb)作为固相筛选分子,应用噬菌体表面展示技术,按消减、结合、洗脱、扩增的顺序筛选噬菌体七肽库,挑取噬菌体单克隆培养并采用MAb包被的ELISA鉴定,对阳性克... 为筛选日本乙型脑炎病毒(JEV)的E抗原表位,本实验以抗JEV E蛋白的单克隆抗体(MAb)作为固相筛选分子,应用噬菌体表面展示技术,按消减、结合、洗脱、扩增的顺序筛选噬菌体七肽库,挑取噬菌体单克隆培养并采用MAb包被的ELISA鉴定,对阳性克隆测序分析,确定JEV E抗原模拟表位的氨基酸序列。设计合成包含该表位的E抗原15肽(E-365GGADSMSMAGMAVSYE-379)cDNA序列,与pGEX-KG构建重组表达质粒,诱导表达重组多肽并进行western blot验证。经过4轮筛选后,噬菌体得到高度富集,挑取单克隆采用MAb包被进行ELISA鉴定,有22个克隆呈阳性。对重组多肽进行western blot验证,结果表明该重组多肽能够特异结合兔抗JEV多克隆抗体。本实验成功筛选出JEV结构蛋白E的特异性噬菌体模拟表位,为开展用JEV抗原表位探索JEV的防制研究创造了条件,为多肽疫苗研制、药物筛选以及特异血清学诊断方法的建立提供重要依据。 展开更多
关键词 日本乙型脑炎病毒 噬菌体表面展示技术 E蛋白 表位肽
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日本乙型脑炎病毒强、弱毒株非结构蛋白NS1、NS2A和NS1-NS2A诱导小鼠CD4^+T细胞应答的研究 被引量：3
5
作者 杨伟 韦冠东 +8 位作者 汤德元 曾智勇 黄涛 王彬 胡玲玲 龙冬梅 黄秋涵 廖晓糠 田红宇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期1693-1700,共8页
为了解日本乙型脑炎病毒(JEV)强、弱毒株非结构蛋白的免疫效果,笔者分析了JEV强、弱毒株非结构蛋白NS1、NS2A和NS1-2A真核表达的差异。通过观察JE减毒活疫苗(SA14-14-2株)和JEV贵州分离株(GZ株)分别在BHK-21细胞上出现的CPE,并收集强、... 为了解日本乙型脑炎病毒(JEV)强、弱毒株非结构蛋白的免疫效果,笔者分析了JEV强、弱毒株非结构蛋白NS1、NS2A和NS1-2A真核表达的差异。通过观察JE减毒活疫苗(SA14-14-2株)和JEV贵州分离株(GZ株)分别在BHK-21细胞上出现的CPE,并收集强、弱毒株的细胞悬液,提取总RNA,分别设计6对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增非结构蛋白NS1、NS2A和NS1-2A的编码基因,构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)-NS1r、pcDNA3.1(+)-NS2Ar、pcDNA3.1(+)-NS1-2Ar、pcDNA3.1(+)-NS1q、pcDNA3.1(+)-NS2Aq和pcDNA3.1(+)-NS1-2Aq,将构建成功的6种真核表达质粒免疫健康小鼠,最后采集小鼠的血液和组织分别进行JEV抗体检测和细胞免疫水平检测。研究结果显示:JEV GZ强毒株与JEV SA14-14-2弱毒株能在BHK21细胞上增殖并产生CPE现象;构建的6种真核表达质粒免疫小鼠后经血常规和T淋巴亚群检测可以极显著或显著增加CD4+和CD8+细胞的含量。表明JEV强毒株非结构蛋白所诱导的细胞免疫略优于弱毒株非结构蛋白诱导的细胞免疫,但差异不明显。本研究结果可为日本乙型脑炎病毒的病原基础研究提供参考。 展开更多
关键词 日本乙型脑炎病毒(JEV) 强毒株 弱毒株 非结构蛋白 真核表达差异
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猪群混合感染伪狂犬病毒及乙型脑炎病毒的鉴定与分离 被引量：2
6
作者 刘宁 宋聪 +5 位作者 高林 谢佳芮 李华春 王静林 姚俊 王生奎 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2016年第2期68-75,共8页
云南省文山市某规模化猪场2015年7-8月频繁发生以种公猪一侧睾丸肿大,母猪流产、产死胎、木乃伊胎及弱仔为主要临床症状的繁殖障碍疫情.为了查明病因,对送检流产胎猪进行病理解剖,采集胎猪及胎盘病料进行猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征... 云南省文山市某规模化猪场2015年7-8月频繁发生以种公猪一侧睾丸肿大,母猪流产、产死胎、木乃伊胎及弱仔为主要临床症状的繁殖障碍疫情.为了查明病因,对送检流产胎猪进行病理解剖,采集胎猪及胎盘病料进行猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒欧洲型及美洲型毒株、猪细小病毒、伪狂犬病毒、乙型脑炎病毒、猪流产衣原体、布氏杆菌及弓形虫PCR和real-time PCR检测,同时应用猪肾原代细胞及BHK-21传代细胞进行病毒分离鉴定以及细菌分离鉴定.检测结果显示,从流产胎猪内脏器官、大脑及胎盘组织扩增出乙型脑炎病毒prM基因及伪狂犬病毒gE基因目的条带.序列分析结果显示,扩增的乙型脑炎病毒prM基因序列与NCBI GenBank中的参考毒株（Accession no.AB594829.1）序列同源性达99%;伪狂犬病毒gE基因核苷酸序列与NCBI GenBank中的参考毒株（Accession no.KT936475.1）序列同源性达100%.应用BHK-21传代细胞盲传分离获得1株可致细胞病变（cytopathic effect,CPE）的病毒株,鉴定为乙型脑炎病毒,并命名为JEV-2015-WS-YN.由此推测,引起此次猪群繁殖障碍极有可能为日本乙型脑炎病毒和伪狂犬病毒共同感染造成. 展开更多
关键词 日本乙型脑炎病毒 伪狂犬病毒 混合感染
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日本乙型脑炎病毒SA14-14-2株NS1-Flag蛋白在293T细胞中的表达 被引量：1
7
作者 臧富玉 亓文宝 +3 位作者 陈孝明 刘国乾 李红梅 廖明 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第9期40-43,共4页
通过RT-PCR方法扩增出日本乙型脑炎病毒SA14-14-2株的NS1基因,利用HindⅢ和HpaⅠ双酶切克隆到带有Flag标签的pcDNA3.1载体上,重组质粒命名为pcDNA3.1-NS1-Flag。脂质体法转染293T细胞后,经间接免疫荧光(IFA)和化学荧光Western blotting... 通过RT-PCR方法扩增出日本乙型脑炎病毒SA14-14-2株的NS1基因,利用HindⅢ和HpaⅠ双酶切克隆到带有Flag标签的pcDNA3.1载体上,重组质粒命名为pcDNA3.1-NS1-Flag。脂质体法转染293T细胞后,经间接免疫荧光(IFA)和化学荧光Western blotting检测,证明带有Flag标签的NS1基因在293T细胞中得到高效表达。 展开更多
关键词 日本乙型脑炎 NS1-Flag融合蛋白 真核表达 293T细胞
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重组日本乙型脑炎病毒NS1的可溶性表达及抗原性分析 被引量：1
8
作者 周丹娜 梁望旺 +6 位作者 郭锐 段正赢 罗明杰 杨克礼 袁芳艳 刘泽文 田永祥 《湖北农业科学》 北大核心 2012年第2期358-360,366,共4页
根据日本乙型脑炎病毒(JEV)Whe株非结构蛋白质1(NS1)的基因序列,设计引物,利用反转录PCR从实验室保藏JEV Whe株中克隆NS1全长序列,并将其插入pET28a表达载体,构建重组表达质粒NS1-pET28a,转化大肠杆菌BL21(ED3),经IPTG诱导,得到可溶性... 根据日本乙型脑炎病毒(JEV)Whe株非结构蛋白质1(NS1)的基因序列,设计引物,利用反转录PCR从实验室保藏JEV Whe株中克隆NS1全长序列,并将其插入pET28a表达载体,构建重组表达质粒NS1-pET28a,转化大肠杆菌BL21(ED3),经IPTG诱导,得到可溶性表达的融合蛋白质His-NS1。结果表明,该融合蛋白质分子量为46ku,大量表达于上清中。镍离子亲和层析柱进行纯化得到His-NS1蛋白质,经Western-blot检测,证明其具有良好的免疫学活性,这为进一步研究JEV NS1的功能及应用奠定了基础。 展开更多
关键词 日本乙型脑炎 非结构蛋白质1 可溶性表达 抗原性分析
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日本乙型脑炎病毒NS1基因及其疫苗的研究进展 被引量：4
9
作者 王凤 汤德元 +4 位作者 李春燕 曾智勇 甘振磊 刘建 郝飞 《中国动物保健》 2012年第12期16-19,共4页
日本乙型脑炎是由日本乙型脑炎病毒引起的严重的人畜共患传染病。乙型脑炎病毒的三种糖基化蛋白PrM、E和NS1是其主要免疫保护性抗原,其中PrM和E蛋白是日本乙型脑炎病毒的结构蛋白,其结构和相关疫苗研究的报道较多。NS1蛋白是日本乙型脑... 日本乙型脑炎是由日本乙型脑炎病毒引起的严重的人畜共患传染病。乙型脑炎病毒的三种糖基化蛋白PrM、E和NS1是其主要免疫保护性抗原,其中PrM和E蛋白是日本乙型脑炎病毒的结构蛋白,其结构和相关疫苗研究的报道较多。NS1蛋白是日本乙型脑炎病毒的非结构蛋白,其主要参与病毒复制的早期阶段,推测可能参与病毒组装和释放。可诱导补体依赖性溶细胞反应,不能产生中和抗体,能诱发机体在非中和性抗体存在的情况下产生保护性免疫。在接种乙脑病毒的细胞的细胞内、细胞表面及上清液中均含有大量的NS1蛋白。对小鼠接种NS1蛋白或NS1蛋白特异性抗体,均能让小鼠产生对乙脑病毒感染的保护性免疫作用。本文主要就乙型脑炎病毒非结构基因NS1及其免疫疫苗的研究进展进行综述,为其更进一步深入研究JEVNS1基因及其相关疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 日本乙型脑炎病毒 NS1基因 相关疫苗
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日本乙型脑炎病毒小鼠脑内分布研究
10
作者 马丽敏 李琳 +9 位作者 张宁 胡乐鹏 李晔 何叶 任秀梅 李志萍 薛慧亮 李丹 靳朝 夏志平 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第2期225-227,共3页
为定位检测日本乙型脑炎病毒(JEV)在试验小鼠脑内分布情况,本研究建立了JEV的小鼠感染模型,取发病死亡小鼠的脑组织制作石蜡切片,利用抗JEV单克隆抗体,采用免疫酶组化方法对抗原进行组织学定位检测。试验结果表明,所建立的间接免疫酶组... 为定位检测日本乙型脑炎病毒(JEV)在试验小鼠脑内分布情况,本研究建立了JEV的小鼠感染模型,取发病死亡小鼠的脑组织制作石蜡切片,利用抗JEV单克隆抗体,采用免疫酶组化方法对抗原进行组织学定位检测。试验结果表明,所建立的间接免疫酶组化方法灵敏度高,特异性好,证明了JEV选择性感染神经元,抗原阳性表达主要集中在脑干、神经节及大脑皮质。 展开更多
关键词 日本乙型脑炎病毒 间接免疫酶组化 抗原分布
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一例猪伪狂犬与猪乙型脑炎脑病毒混合感染的诊断 被引量：2
11
作者 佟玲 《现代化农业》 2020年第7期62-63,共2页
猪伪狂犬病(PRV)是由伪狂犬病病毒引起的一种以发热和脑脊髓炎为特征的急性传染病[1]。此病危害新生仔猪的消化系统、呼吸系统以及神经系统,可致母猪繁殖障碍。我国猪群普遍存在PRV野毒感染,并呈散发性流行。近年来猪场伪狂犬病的感染... 猪伪狂犬病(PRV)是由伪狂犬病病毒引起的一种以发热和脑脊髓炎为特征的急性传染病[1]。此病危害新生仔猪的消化系统、呼吸系统以及神经系统,可致母猪繁殖障碍。我国猪群普遍存在PRV野毒感染,并呈散发性流行。近年来猪场伪狂犬病的感染率逐年上升,严重影响养猪业的发展[2,3]。猪乙型脑炎又称日本乙型脑炎,是由乙型脑炎病毒引起一种人和动物均可感染的由蚊虫介导感染的病毒性疾病。其中人,猪,马,猴,驴感染后脑炎症状明显,病死率高。 展开更多
关键词 猪乙型脑炎 母猪繁殖障碍 乙型脑炎病毒 日本乙型脑炎 病毒性疾病 伪狂犬病病毒 猪伪狂犬病 脑脊髓炎
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日本乙型脑炎病毒保护性抗原基因表达的研究
12
作者 龙冬梅 黄涛 +3 位作者 汤德元 曾智勇 李达 韦冠东 《猪业科学》 2016年第3期98-101,共4页
日本乙型脑炎是由日本乙型脑炎病毒引起的严重的人畜共患性传染病,日本乙型脑炎病毒的结构蛋白包括C、Pr M和E 3种。其中C蛋白主要参与病毒RNA和蛋白之间的相互作用,且具有核定位信号序列,在乙脑病毒中,缺失此序列后C蛋白只在感染细胞... 日本乙型脑炎是由日本乙型脑炎病毒引起的严重的人畜共患性传染病,日本乙型脑炎病毒的结构蛋白包括C、Pr M和E 3种。其中C蛋白主要参与病毒RNA和蛋白之间的相互作用,且具有核定位信号序列,在乙脑病毒中,缺失此序列后C蛋白只在感染细胞的细胞质中出现;PrM和E基因是其主要免疫保护性抗原基因,表达的蛋白是乙型脑炎病毒的主要结构蛋白,是病毒颗粒的主要成分,也是维持病毒粒子形态结构的主要物质,主要参与病毒感染的后期阶段,可诱导产生保护性免疫。近年来许多学者对日本乙型脑炎病毒保护性抗原基因原核表达和真核表达及其相关免疫原性进行了大量的研究,取得了一定的研究进展,文章主要针对日本乙型脑炎病毒保护性抗原基因表达的研究进展进行了综述,为乙型脑炎基因工程疫苗的进一步研究提供参考。 展开更多
关键词 日本乙型脑炎病毒 结构蛋白 原核表达 真核表达 免疫原性
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猪日本乙型脑炎病毒NS1基因的表达和抗体制备 被引量：1
13
作者 沈红霞 韩秀杰 +3 位作者 赵凡凡 张保新 余风艳 王晓杜 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期396-400,共5页
猪Sus scrofa domestica日本乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）是引起母猪繁殖机能障碍的重要病原之一,其NS1蛋白参与病毒复制和组装、调节宿主免疫反应功能。提取猪日本乙型脑炎上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,... 猪Sus scrofa domestica日本乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV）是引起母猪繁殖机能障碍的重要病原之一,其NS1蛋白参与病毒复制和组装、调节宿主免疫反应功能。提取猪日本乙型脑炎上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,扩增该病毒的NS1基因片段,亚克隆到原核表达载体pET-28（a）上,构建重组原核表达质粒pET-28（a）-JEV-NS1,转化大肠埃希菌Escherichia co1i BL21（DE3）菌株,IPTG诱导表达重组JEV-NS1蛋白,获得分子量大小为46 kDa的重组蛋白。为了提高表达量,JEV-NS1基因的958~1 245 bp被截短。聚丙烯酰氨凝胶电泳（SDS-PAGE）分析表明：JEV-NS1表达量明显提高,纯化后含量达到总蛋白的85%以上。纯化后的蛋白免疫ICR小鼠Mus musculus,制备了小鼠抗JEV-NS1多克隆抗体,western-blotting验证了JEV-NS1的抗原性和抗体的特异性。 展开更多
关键词 动物学 日本乙型脑炎病毒 NS1 原核表达 纯化 抗体
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牡丹江市某规模化猪场日本乙型脑炎病毒的RT-PCR检测
14
作者 王时 王亭 赵刚 《畜牧兽医科技信息》 2012年第1期39-40,共2页
日本脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）．3L称乙型脑炎病毒，简称乙脑病毒，属于黄病毒科（Flaviridae）黄病毒属，所引起的疾病称为乙型脑炎或日本脑炎，是严重威胁人畜的一种急性传染病的季节性和一定的地理分布区域，多... 日本脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）．3L称乙型脑炎病毒，简称乙脑病毒，属于黄病毒科（Flaviridae）黄病毒属，所引起的疾病称为乙型脑炎或日本脑炎，是严重威胁人畜的一种急性传染病的季节性和一定的地理分布区域，多发生于蚊虫较多的夏秋季节，属于自然疫源性疾病。猪感染乙脑后土要表现为：潜伏期为3—4d，患病幼畜高热稽留，精神沉郁，步行踉跄，最后身躯麻痹而死；育肥猪持续高热： 展开更多
关键词 日本乙型脑炎病毒 规模化猪场 RT-PCR检测 牡丹江市 自然疫源性疾病 日本脑炎病毒 乙脑病毒 virus
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病毒性 人畜共患病之 猪日本乙型脑炎
15
作者 马吉飞 《动物科学与动物医学》 2005年第10期26-27,共2页
日本乙型脑炎(Japanese B encephalitis,简称JE)又名流行性乙型脑炎,是由日本乙型脑炎病毒引起的一种急性人畜共患传染病,包括马、牛、羊、鼠、犬、禽类等均易感染,猪主要表现为脑炎和繁殖障碍.
关键词 日本乙型脑炎病毒 人畜共患病 病毒性 流行性乙型脑炎 人畜共患传染病 猪 繁殖障碍 禽类 牛
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猪日本乙型脑炎病毒NS5原核表达和多克隆抗体制备
16
作者 余风艳 韩秀杰 +3 位作者 沈红霞 张保新 赵凡凡 王晓杜 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第3期307-310,共4页
提取猪日本乙型脑炎病毒(JEV)上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,扩增JEV-NS5基因片段,亚克隆到原核表达载体pET-28(a)上,构建重组原核表达质粒pET-28(a)-JEV-NS5,转化大肠埃希氏菌BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达重组JEV-NS5蛋白,获得... 提取猪日本乙型脑炎病毒(JEV)上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,扩增JEV-NS5基因片段,亚克隆到原核表达载体pET-28(a)上,构建重组原核表达质粒pET-28(a)-JEV-NS5,转化大肠埃希氏菌BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达重组JEV-NS5蛋白,获得分子质量为103 ku的重组蛋白.该蛋白主要以包涵体形式表达,表达量占总菌体蛋白的35%以上,His-band Ni+纯化后,获得高纯度重组蛋白占总蛋白的比例达75%以上.以纯化的蛋白免疫小鼠,制备小鼠抗JEV-NS5抗体,抗体效价达到3×104,并能与病毒感染的样本反应,证明该蛋白具有较好的特异性. 展开更多
关键词 日本乙型脑炎病毒 非结构蛋白NS5 原核表达 纯化
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日本乙型脑炎病毒对猪外周血单核细胞炎性因子mRNA转录时相影响的研究
17
作者 何潇湘 景亚星 +4 位作者 靳晓慧 兰培英 张利卫 周雍 魏战勇 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期60-65,共6页
为分析猪日本乙型脑炎病毒(JEV)感染猪外周血单核细胞后对其促炎因子转录的影响,探讨JEV感染的分子免疫致病机制。采用real-time RT-PCR方法,测定并分析了JEV感染猪外周血单核细胞(PBMC)后病毒RNA含量及白细胞介素(IL-8、IL-12p35、IL-1... 为分析猪日本乙型脑炎病毒(JEV)感染猪外周血单核细胞后对其促炎因子转录的影响,探讨JEV感染的分子免疫致病机制。采用real-time RT-PCR方法,测定并分析了JEV感染猪外周血单核细胞(PBMC)后病毒RNA含量及白细胞介素(IL-8、IL-12p35、IL-12p40、IL-17、IL-18)炎性细胞因子mRNA转录时相的变化。结果显示,JEV感染猪PBMC后引起IL-8,IL-12p35和p40的分泌呈现不规则的曲线,IL-18表达量持续升高;IL-17表达量持续下降,仅在感染后48 h的时候达到峰值。以上结果表明,JEV感染PBMC可促使炎性因子分泌增加,参与细胞免疫应答。 展开更多
关键词 日本乙型脑炎病毒 猪外周血细胞 炎性细胞因子 转录时相
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一例梅花鹿布氏杆菌和日本乙型脑炎混合感染的诊断
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作者 郭倩妤 石远菊 +4 位作者 汤德元 叶丽 杨伟 廖少山 刘巧玲 《野生动物学报》 北大核心 2019年第2期435-439,共5页
2018年3月17日,贵州省某梅花鹿场的梅花鹿(Cervus nippon)出现关节肿大、下颌肿大、睾丸单侧肿胀,还伴有严重的跛行等症状。采集4份该发病梅花鹿的血样送检。检测结果表明,通过虎红平板凝集试验2份血样检测出了布氏杆菌感染,4份血样经RT... 2018年3月17日,贵州省某梅花鹿场的梅花鹿(Cervus nippon)出现关节肿大、下颌肿大、睾丸单侧肿胀,还伴有严重的跛行等症状。采集4份该发病梅花鹿的血样送检。检测结果表明,通过虎红平板凝集试验2份血样检测出了布氏杆菌感染,4份血样经RT-PCR均扩增出了JEV NS1部分基因的特异性条带,PCR产物测序结果分析显示,4份梅花鹿血样的JEV NS1基因(GZ-015、GZ-019、GZ-022、GZ-039)间的核苷酸同源性分别为99. 9%、99. 3%、99. 4%,与强毒株SA-14、国内外的疫苗株及四川、吉林等地的JEV分离株之间核苷酸同源性为99%以上,GZ-015、GZ-019、GZ-022、GZ-039与强毒株SA-14、弱毒株、国内外的疫苗株及四川、吉林等地的JEV分离株处于同一个较大的遗传进化分支。 展开更多
关键词 梅花鹿 日本乙型脑炎 NS1基因 序列分析
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猪日本乙型脑炎及猪细小病毒复合PCR检测方法的建立 被引量：4
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作者 吕玉金 吴凤笋 +1 位作者 刘胜利 李文刚 《江苏农业科学》 2019年第19期176-179,共4页
根据GenBank上登录的日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)与猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)参考基因序列,设计合成2对特异性引物,在建立优化单项PCR检测方法的基础上,建立了PPV-JEV复合PCR检测方法,可扩增出预期的2... 根据GenBank上登录的日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)与猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)参考基因序列,设计合成2对特异性引物,在建立优化单项PCR检测方法的基础上,建立了PPV-JEV复合PCR检测方法,可扩增出预期的238 bp和152 bp特异性片段。该方法敏感性高、稳定性好、特异性强,临床样品检测结果与单项PCR检测结果符合率100%,该方法适合JEV和PPV的联合检测和鉴别诊断。 展开更多
关键词 猪 日本乙型脑炎病毒 细小病毒 复合PCR
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一株日本乙型脑炎病毒的分离与鉴定 被引量：1
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作者 苗丽娟 张立春 +1 位作者 张宏玲 李青竹 《家畜生态学报》 北大核心 2018年第6期67-68,共2页
吉林省某猪场送检一例病猪,经诊断疑似为日本脑炎病毒感染,对病猪的脏器以及全血进行BHK21细胞接种,对细胞培养物进行PCR检测和间接免疫荧光试验。结果显示,荧光显微镜下细胞浆内可见绿色荧光信号;PCR检测为日本脑炎病毒阳性,成功分离... 吉林省某猪场送检一例病猪,经诊断疑似为日本脑炎病毒感染,对病猪的脏器以及全血进行BHK21细胞接种,对细胞培养物进行PCR检测和间接免疫荧光试验。结果显示,荧光显微镜下细胞浆内可见绿色荧光信号;PCR检测为日本脑炎病毒阳性,成功分离到一株日本乙型脑炎病毒。 展开更多
关键词 猪 日本乙型脑炎 分离 鉴定
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