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日勾维多细菌源菌双重PCR快速检测方法建立
1
作者
刘丰
邓源昌
+1 位作者
应国红
王晓炜
《日用化学工业（中英文）》
北大核心
2024年第1期45-50,共6页
建立日勾维多细菌源菌快速检测方法,快速有效地检出样品中的日勾维多细菌源菌。利用日勾维多细菌源菌的看家基因gyrB和ropB,设计2对特异性的扩增引物,以培养液作为DNA扩增模板,建立双重PCR快速检测方法,并通过优化扩增反应的退火温度,...
建立日勾维多细菌源菌快速检测方法,快速有效地检出样品中的日勾维多细菌源菌。利用日勾维多细菌源菌的看家基因gyrB和ropB,设计2对特异性的扩增引物,以培养液作为DNA扩增模板,建立双重PCR快速检测方法,并通过优化扩增反应的退火温度,提高双重PCR的特异性;利用引物gyrB-F/gyrB-R和ropB-F/ropB-R(insert)扩增4株日勾维多细菌源菌,可得到2条特异性的目标DNA条带,但非目标菌会出现非特异性DNA条带。优化后的退火温度为65℃,以4株日勾维多细菌源菌为DNA模板时,可扩增出特异性的目标DNA条带;以大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌和洋葱伯克霍尔德菌为DNA模板时,均检测不到DNA条带。当样品中的日勾维多细菌源菌达到4.4 CFU/mL时,双重PCR即可高灵敏检出样品中的日勾维多细菌源菌。可用双重PCR方法快速检出沐浴露、洗发水等淋洗类化妆品中的日勾维多细菌源菌。
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关键词
化妆品
日勾维多细菌源菌
双重PCR
快速检测
在线阅读
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职称材料
基于MALDI-TOF MS技术对面膜中污染日勾维多细菌源菌的鉴定分析
被引量：
3
2
作者
谭慧敏
王涛
+2 位作者
朱斌
零文超
樊兰艳
《日用化学工业（中英文）》
CAS
北大核心
2022年第10期1107-1112,共6页
对149批面膜产品进行微生物检验,其中4批菌落总数不符合规定。对不合格样品中分离纯化的菌落用MALDITOF MS、16S rDNA测序比对、VITEK 2生化试验3种方法进行鉴定,结果均为日勾维多细菌源菌(Pluralibacter gergoviae);检出菌与日勾维多...
对149批面膜产品进行微生物检验,其中4批菌落总数不符合规定。对不合格样品中分离纯化的菌落用MALDITOF MS、16S rDNA测序比对、VITEK 2生化试验3种方法进行鉴定,结果均为日勾维多细菌源菌(Pluralibacter gergoviae);检出菌与日勾维多细菌源菌标准菌株CICC 24132和一株食品中检出的日勾维多细菌源菌共6株菌在MALDI Biotyper 3及VITEK 2生化反应基础上进行分析分型,经MALDI Biotyper 3对6株菌的蛋白图谱进行聚类分析,来源于面膜中的4株菌亲缘关系比较近;经对比VITEK 2生化试验发现,6株日勾维多细菌源菌生化反应存在差异,其中来源于同一生产厂家的3批面膜检出菌生化反应基本相同。结果表明,MALDI-TOF MS快速鉴定结果可信;经MALDI Biotyper 3聚类分析及生化反应的结果分析,可将4株面膜中分离的日勾维多细菌源菌分成两个亚型,从同一厂家3批不合格样品中检出的污染菌具有高度同源性。
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关键词
MALDI-TOF
MS技术
面膜
日勾维多细菌源菌
快速鉴定
同
源
性分析
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职称材料
题名
日勾维多细菌源菌双重PCR快速检测方法建立
1
作者
刘丰
邓源昌
应国红
王晓炜
机构
深圳市药品检验研究院/国家药品监督管理局化妆品监测评价重点实验室
广东医科大学
出处
《日用化学工业（中英文）》
北大核心
2024年第1期45-50,共6页
基金
广东省药品监督管理局2022年科技创新项目(2022TDB67)
广东省药品监督管理局2023年科技创新项目(2023TDB53)
深圳市药品检验研究院(深圳市医疗器械检测中心)2023年度十大科研课题(YNKT20230205)。
文摘
建立日勾维多细菌源菌快速检测方法,快速有效地检出样品中的日勾维多细菌源菌。利用日勾维多细菌源菌的看家基因gyrB和ropB,设计2对特异性的扩增引物,以培养液作为DNA扩增模板,建立双重PCR快速检测方法,并通过优化扩增反应的退火温度,提高双重PCR的特异性;利用引物gyrB-F/gyrB-R和ropB-F/ropB-R(insert)扩增4株日勾维多细菌源菌,可得到2条特异性的目标DNA条带,但非目标菌会出现非特异性DNA条带。优化后的退火温度为65℃,以4株日勾维多细菌源菌为DNA模板时,可扩增出特异性的目标DNA条带;以大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌和洋葱伯克霍尔德菌为DNA模板时,均检测不到DNA条带。当样品中的日勾维多细菌源菌达到4.4 CFU/mL时,双重PCR即可高灵敏检出样品中的日勾维多细菌源菌。可用双重PCR方法快速检出沐浴露、洗发水等淋洗类化妆品中的日勾维多细菌源菌。
关键词
化妆品
日勾维多细菌源菌
双重PCR
快速检测
Keywords
cosmetics
Pluralibacter gergoviae
duplex-PCR
rapid detection
分类号
TQ658 [化学工程—精细化工]
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职称材料
题名
基于MALDI-TOF MS技术对面膜中污染日勾维多细菌源菌的鉴定分析
被引量：
3
2
作者
谭慧敏
王涛
朱斌
零文超
樊兰艳
机构
广西食品药品检验所
出处
《日用化学工业（中英文）》
CAS
北大核心
2022年第10期1107-1112,共6页
基金
广西药品监督管理局药品安全科研项目计划(桂药监科2021-02(直属))
广西食品药品监督管理局科研计划(KY2017-04)。
文摘
对149批面膜产品进行微生物检验,其中4批菌落总数不符合规定。对不合格样品中分离纯化的菌落用MALDITOF MS、16S rDNA测序比对、VITEK 2生化试验3种方法进行鉴定,结果均为日勾维多细菌源菌(Pluralibacter gergoviae);检出菌与日勾维多细菌源菌标准菌株CICC 24132和一株食品中检出的日勾维多细菌源菌共6株菌在MALDI Biotyper 3及VITEK 2生化反应基础上进行分析分型,经MALDI Biotyper 3对6株菌的蛋白图谱进行聚类分析,来源于面膜中的4株菌亲缘关系比较近;经对比VITEK 2生化试验发现,6株日勾维多细菌源菌生化反应存在差异,其中来源于同一生产厂家的3批面膜检出菌生化反应基本相同。结果表明,MALDI-TOF MS快速鉴定结果可信;经MALDI Biotyper 3聚类分析及生化反应的结果分析,可将4株面膜中分离的日勾维多细菌源菌分成两个亚型,从同一厂家3批不合格样品中检出的污染菌具有高度同源性。
关键词
MALDI-TOF
MS技术
面膜
日勾维多细菌源菌
快速鉴定
同
源
性分析
Keywords
MALDI-TOF MS
facial mask
Pluralibacter gergoviae
rapid identification
homology analysis
分类号
TQ658 [化学工程—精细化工]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
日勾维多细菌源菌双重PCR快速检测方法建立
刘丰
邓源昌
应国红
王晓炜
《日用化学工业（中英文）》
北大核心
2024
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
基于MALDI-TOF MS技术对面膜中污染日勾维多细菌源菌的鉴定分析
谭慧敏
王涛
朱斌
零文超
樊兰艳
《日用化学工业（中英文）》
CAS
北大核心
2022
3
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职称材料
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