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杜氏利什曼原虫amastin基因重组真核表达质粒的构建与表达
被引量：
2
1
作者
李金福
陈建平
+3 位作者
杨志伟
田玉
马莹
胡孝素
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期217-219,222,共4页
目的:构建杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白(amas-tin)编码基因的真核表达重组质粒pcDNA3.1-amastin,并研究其在NIH3T3细胞中的表达。方法:提取杜氏利什曼原虫基因组DNA进行PCR扩增。将扩增的无鞭毛体蛋白基因片段导入质粒pcDNA3.1(+)中,构...
目的:构建杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白(amas-tin)编码基因的真核表达重组质粒pcDNA3.1-amastin,并研究其在NIH3T3细胞中的表达。方法:提取杜氏利什曼原虫基因组DNA进行PCR扩增。将扩增的无鞭毛体蛋白基因片段导入质粒pcDNA3.1(+)中,构建真核表达重组质粒pcDNA3.1-amastin。以pcDNA3.1-amastin转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光染色法和RT-PCR分别鉴定pcDNA3.1-amastin的瞬时表达和稳定表达。结果:在细胞膜和细胞内均观察到较强的绿色荧光,表明pcDNA3.1-amastin成功地转入NIH3T3细胞,并在细胞膜和细胞内获得短暂表达。稳定转染的NIH3T3细胞的总RNA经反转录后,用PCR扩增出无鞭毛体蛋白基因,表明获得了稳定表达。结论:成功地构建杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白基因的真核表达重组质粒,并且该基因在NIH3T3细胞中获得了稳定表达。
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关键词
杜氏利什曼原虫
无鞭毛体蛋白基因
体
外表达
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职称材料
题名
杜氏利什曼原虫amastin基因重组真核表达质粒的构建与表达
被引量：
2
1
作者
李金福
陈建平
杨志伟
田玉
马莹
胡孝素
机构
四川大学华西基础医学与法医学院寄生虫学教研室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第3期217-219,222,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(39870656)
文摘
目的:构建杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白(amas-tin)编码基因的真核表达重组质粒pcDNA3.1-amastin,并研究其在NIH3T3细胞中的表达。方法:提取杜氏利什曼原虫基因组DNA进行PCR扩增。将扩增的无鞭毛体蛋白基因片段导入质粒pcDNA3.1(+)中,构建真核表达重组质粒pcDNA3.1-amastin。以pcDNA3.1-amastin转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光染色法和RT-PCR分别鉴定pcDNA3.1-amastin的瞬时表达和稳定表达。结果:在细胞膜和细胞内均观察到较强的绿色荧光,表明pcDNA3.1-amastin成功地转入NIH3T3细胞,并在细胞膜和细胞内获得短暂表达。稳定转染的NIH3T3细胞的总RNA经反转录后,用PCR扩增出无鞭毛体蛋白基因,表明获得了稳定表达。结论:成功地构建杜氏利什曼原虫无鞭毛体蛋白基因的真核表达重组质粒,并且该基因在NIH3T3细胞中获得了稳定表达。
关键词
杜氏利什曼原虫
无鞭毛体蛋白基因
体
外表达
Keywords
Leishmania Donovani
amastin gene
express in vitro
分类号
R382.22 [医药卫生—医学寄生虫学]
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作者
出处
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被引量
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1
杜氏利什曼原虫amastin基因重组真核表达质粒的构建与表达
李金福
陈建平
杨志伟
田玉
马莹
胡孝素
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
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