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Mixture与响应面法结合开发BHK-21细胞无血清悬浮培养基
被引量：
2
1
作者
汪梁
刘旭平
谭文松
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第9期70-78,共9页
采用Mixture与响应面实验设计相结合的方法开发BHK-21细胞无血清悬浮培养基。在实验室已知配方的6种培养基A-F的基础上,通过Mixture实验筛选出BHK-21细胞无血清培养基的最优组合为A∶B∶C∶D∶E∶F=0∶0∶11∶0∶9∶0。利用响应面法针...
采用Mixture与响应面实验设计相结合的方法开发BHK-21细胞无血清悬浮培养基。在实验室已知配方的6种培养基A-F的基础上,通过Mixture实验筛选出BHK-21细胞无血清培养基的最优组合为A∶B∶C∶D∶E∶F=0∶0∶11∶0∶9∶0。利用响应面法针对培养基中的几种关键组分进行浓度优化,确定谷氨酰胺、酪氨酸、牛血清白蛋白和钙离子的最优浓度分别为3 mmol/L、2.5 g/L、0 g/L和0 mmol/L。该无血清悬浮培养基能很好地支持BHK细胞悬浮生长,培养时细胞最大活细胞密度可达140.21×105个/m L,比商业培养基提高了1.95倍。采用Mixture试验设计和响应面分析法能够在较短的时间内开发出适合BHK-21细胞生长的无血清悬浮培养基,为采用BHK-21细胞大规模工业化生产口蹄疫疫苗奠定了基础。
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关键词
BHK-21细胞
无血清悬浮培养基
Mixture实验设计
响应面分析
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职称材料
神经干细胞提取与培养方法的比较研究
被引量：
8
2
作者
吴增
李媛
+2 位作者
靳晓飞
周晓红
高维娟
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期729-734,共6页
目的探讨神经干细胞(neural stem cells,NSCs)提取、培养的最佳方法,为NSCs的基础研究提供技术参考。方法对NSCs的不同提取、培养方法进行比较:提取胎鼠与乳鼠的大脑皮质、采用不同类型培养基、不同接种密度、不同培养方法、不同换液方...
目的探讨神经干细胞(neural stem cells,NSCs)提取、培养的最佳方法,为NSCs的基础研究提供技术参考。方法对NSCs的不同提取、培养方法进行比较:提取胎鼠与乳鼠的大脑皮质、采用不同类型培养基、不同接种密度、不同培养方法、不同换液方法、不同传代方法,观察NSCs的成球率和NSCs未分化状态的稳定性。用多功能微孔板读数仪检测NSCs活性。结果 (1)胎龄14 d胎鼠较新生24 h内乳鼠的大脑皮质提取NSCs的比例高,杂细胞少,形成的神经球数量多。(2)采用无血清培养基,NSCs可以稳定在未分化状态;而采用含血清培养基,NSCs多数分化为神经元和胶质细胞。(3)以1.0×109·L^(-1)密度接种的NSCs,培养形成的神经球数量多,且状态良好。(4)悬浮培养法较贴壁培养法,可以形成稳定的神经球,有利于保持NSCs处于未分化的状态。(5)半量换液法和只加液不弃液法培养形成的神经球的状态优于全量换液法。(6)原代和1代的神经球用机械吹打法传代后,NSCs的活细胞比例高,再次形成的神经球状态好,且较其他两种方法简便;2代及以后的神经球用Accutase酶传代后,NSCs的活细胞比例高,再次形成的神经球状态好。(7)14 d胎鼠Accutase酶消化组的NSCs活性高于另外3组,差异均具有显著性(P<0.05)。结论提取胎龄14 d胎鼠的大脑皮质,采用无血清培养基,以1.0×10~9·L^(-1)1的密度接种于25 cm^2培养瓶,采取悬浮培养法,每2~3 d加液1~1.5m L,每6~7 d传代1次,所得到的NSCs增殖分裂旺盛,成球率高,神经球状态良好,可以保持稳定的未分化状态。
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关键词
神经干细胞
细胞提取
悬浮
培养
法:
无血清
培养基
细胞活性
巢蛋白
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职称材料
题名
Mixture与响应面法结合开发BHK-21细胞无血清悬浮培养基
被引量：
2
1
作者
汪梁
刘旭平
谭文松
机构
华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第9期70-78,共9页
基金
国家自然科学基金项目(21206040
21406066)
+2 种基金
国家"863"计划项目(2012AA02A303)
国家重大专项(2013ZX10004003-003-003)
中央高校基本科研业务费(WF1214035)
文摘
采用Mixture与响应面实验设计相结合的方法开发BHK-21细胞无血清悬浮培养基。在实验室已知配方的6种培养基A-F的基础上,通过Mixture实验筛选出BHK-21细胞无血清培养基的最优组合为A∶B∶C∶D∶E∶F=0∶0∶11∶0∶9∶0。利用响应面法针对培养基中的几种关键组分进行浓度优化,确定谷氨酰胺、酪氨酸、牛血清白蛋白和钙离子的最优浓度分别为3 mmol/L、2.5 g/L、0 g/L和0 mmol/L。该无血清悬浮培养基能很好地支持BHK细胞悬浮生长,培养时细胞最大活细胞密度可达140.21×105个/m L,比商业培养基提高了1.95倍。采用Mixture试验设计和响应面分析法能够在较短的时间内开发出适合BHK-21细胞生长的无血清悬浮培养基,为采用BHK-21细胞大规模工业化生产口蹄疫疫苗奠定了基础。
关键词
BHK-21细胞
无血清悬浮培养基
Mixture实验设计
响应面分析
Keywords
BHK-21 cells
suspended serum-free medium
Mixture experiment design
response surface analysis
分类号
S859.797 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
神经干细胞提取与培养方法的比较研究
被引量：
8
2
作者
吴增
李媛
靳晓飞
周晓红
高维娟
机构
承德医学院病理生理学教研室
河北中医学院河北省心脑血管病中医药防治重点实验室
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期729-734,共6页
基金
河北省政府资助临床医学优秀人才培养和基础课题研究项目([2017]46号-2)
河北省中医药管理局科研计划项目(No 2015007)
+2 种基金
河北省教育厅科研计划资助项目(No ZD2016101)
河北省博士学位点科研能力建设项目(No179677114D)
河北省硕士研究生创新资助项目(No CXZZSS2017136)
文摘
目的探讨神经干细胞(neural stem cells,NSCs)提取、培养的最佳方法,为NSCs的基础研究提供技术参考。方法对NSCs的不同提取、培养方法进行比较:提取胎鼠与乳鼠的大脑皮质、采用不同类型培养基、不同接种密度、不同培养方法、不同换液方法、不同传代方法,观察NSCs的成球率和NSCs未分化状态的稳定性。用多功能微孔板读数仪检测NSCs活性。结果 (1)胎龄14 d胎鼠较新生24 h内乳鼠的大脑皮质提取NSCs的比例高,杂细胞少,形成的神经球数量多。(2)采用无血清培养基,NSCs可以稳定在未分化状态;而采用含血清培养基,NSCs多数分化为神经元和胶质细胞。(3)以1.0×109·L^(-1)密度接种的NSCs,培养形成的神经球数量多,且状态良好。(4)悬浮培养法较贴壁培养法,可以形成稳定的神经球,有利于保持NSCs处于未分化的状态。(5)半量换液法和只加液不弃液法培养形成的神经球的状态优于全量换液法。(6)原代和1代的神经球用机械吹打法传代后,NSCs的活细胞比例高,再次形成的神经球状态好,且较其他两种方法简便;2代及以后的神经球用Accutase酶传代后,NSCs的活细胞比例高,再次形成的神经球状态好。(7)14 d胎鼠Accutase酶消化组的NSCs活性高于另外3组,差异均具有显著性(P<0.05)。结论提取胎龄14 d胎鼠的大脑皮质,采用无血清培养基,以1.0×10~9·L^(-1)1的密度接种于25 cm^2培养瓶,采取悬浮培养法,每2~3 d加液1~1.5m L,每6~7 d传代1次,所得到的NSCs增殖分裂旺盛,成球率高,神经球状态良好,可以保持稳定的未分化状态。
关键词
神经干细胞
细胞提取
悬浮
培养
法:
无血清
培养基
细胞活性
巢蛋白
Keywords
eural stem cell
cell extraction
suspension culture method
serum-free medium
cell activity
nestin
分类号
R-332 [医药卫生]
R322.81 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Mixture与响应面法结合开发BHK-21细胞无血清悬浮培养基
汪梁
刘旭平
谭文松
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
神经干细胞提取与培养方法的比较研究
吴增
李媛
靳晓飞
周晓红
高维娟
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
8
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