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无胶筛分毛细管电泳法测定猕猴血浆中的反义寡核苷酸药物癌泰得 被引量:4
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作者 王秀中 王清清 +4 位作者 王诗鸿 李卫平 宋海峰 鲁丹丹 王升启 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期561-565,共5页
采用两步固相萃取(SPE)法结合无胶筛分毛细管电泳(NGCE)技术建立了猕猴血浆中的反义寡核苷酸药物癌泰得的定量分析方法。优化并确定了SPE的相关条件(阴离子交换柱,上样缓冲液pH值为9.0,上样体积及洗脱体积分别为5mL和3mL)和NGCE的分析条... 采用两步固相萃取(SPE)法结合无胶筛分毛细管电泳(NGCE)技术建立了猕猴血浆中的反义寡核苷酸药物癌泰得的定量分析方法。优化并确定了SPE的相关条件(阴离子交换柱,上样缓冲液pH值为9.0,上样体积及洗脱体积分别为5mL和3mL)和NGCE的分析条件(灌胶时间为30min,分离电压为24kV)。在优化的条件下,猕猴血浆中癌泰得在1.95~250mg/L范围内呈良好的线性关系,定量限(LOQ)为1.95mg/L。批内准确度为93.38%~100.71%,批内相对标准偏差<11%;批间准确度为89.46%~103.46%,批间相对标准偏差<9%。在不同条件(室温下存放4h;4℃下存放24h;反复冻融(-80℃至室温)2次;-80℃下保存1个月)下癌泰得在猕猴血浆中的稳定性良好。已将该方法成功地应用于癌泰得的猕猴药代动力学研究。 展开更多
关键词 固相萃取 无胶筛分毛细管电泳 反义寡核苷酸 癌泰得 猕猴
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聚环氧乙烷无胶筛分毛细管电泳分离宽分子量范围DNA片段 被引量:3
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作者 李玉荣 陈长宝 周杰 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2011年第4期844-850,共7页
在无胶筛分毛细管电泳中,以聚环氧乙烷为筛分介质,用硅烷化处理的毛细管柱(31.2 cm×75μmi.d.,有效长度21.0 cm)分离DL5000 DNA Marker(DNA长度为100~5000 bp),考察了筛分介质浓度、缓冲液pH值、分离电压和溴化乙锭浓度对分离双链... 在无胶筛分毛细管电泳中,以聚环氧乙烷为筛分介质,用硅烷化处理的毛细管柱(31.2 cm×75μmi.d.,有效长度21.0 cm)分离DL5000 DNA Marker(DNA长度为100~5000 bp),考察了筛分介质浓度、缓冲液pH值、分离电压和溴化乙锭浓度对分离双链DNA片段的影响,优化得到分离100~5000 bp DNA片段的最佳条件.毛细管电泳的最佳条件为PEO浓度5 mg/mL,缓冲液pH值8.0,电压-12.0 kV及溴化乙锭浓度3.0μg/mL.在此条件下,可对山梨醇脱氢酶基因(SDH)和乙烯受体基因(ETR1)的聚合酶链式反应(PCR)扩增产物同时进行检测,分离和鉴定效果良好. 展开更多
关键词 无胶筛分毛细管电泳 聚环氧乙烷 DNA分离
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基于温敏性N,N-二甲基丙烯酰胺/N-异丙基丙烯酰胺无规共聚物的毛细管无胶电泳筛分介质 被引量:3
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作者 江凤浩 洪瀚 +1 位作者 姜伯玮 苏朝晖 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1312-1321,共10页
本文合成了N,N-二甲基丙烯酰胺/N-异丙基丙烯酰胺无规共聚物(P(DMA-co-NIPAM))和聚N,N-二甲基丙烯酰胺(PDMA),并将二者共混制备毛细管无胶电泳筛分介质,旨在降低筛分介质粘度的同时增强其对DNA的分离性能。核磁共振氢谱(1H NMR)和傅里... 本文合成了N,N-二甲基丙烯酰胺/N-异丙基丙烯酰胺无规共聚物(P(DMA-co-NIPAM))和聚N,N-二甲基丙烯酰胺(PDMA),并将二者共混制备毛细管无胶电泳筛分介质,旨在降低筛分介质粘度的同时增强其对DNA的分离性能。核磁共振氢谱(1H NMR)和傅里叶变换红外光谱(FT-IR)证明了2种聚合物的成功合成。表征了P(DMA-co-NIPAM)/PDMA共混物溶液的流体力学直径(Dh)、低剪切粘度和吸光度,结果表明,P(DMAco-NIPAM)聚合物具有温敏性,低临界溶解温度(LCST)为60~80℃。DNA筛分结果显示,PDMA中添加了10%P(DMA-co-NIPAM)的复合筛分介质性能最好,相比PDMA粘度降低19%以上,对大DNA片段的分辨率和理论塔板数均明显提高,分离时间缩短4%,显示了优良的分离性能。 展开更多
关键词 毛细管电泳 毛细管无胶电泳筛分介质 DNA分离 温敏性聚合物 聚N N-二甲基丙烯酰胺
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转基因玉米的多重PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光检测方法研究 被引量:14
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作者 周颖 黎源倩 裴晓方 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1458-1463,共6页
采用三重PCR反应,同时扩增CaMV 35S启动子、hsp70 intron1和CryIA(b)基因之间序列以及Invertase基因,扩增产物用无胶筛分毛细管电泳-激光诱导荧光检测,从而建立了多重PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光快速检测转基因玉米的新方法.对影响多重... 采用三重PCR反应,同时扩增CaMV 35S启动子、hsp70 intron1和CryIA(b)基因之间序列以及Invertase基因,扩增产物用无胶筛分毛细管电泳-激光诱导荧光检测,从而建立了多重PCR-毛细管电泳-激光诱导荧光快速检测转基因玉米的新方法.对影响多重PCR扩增和毛细管电泳的因素进行了优化.在优化的条件下,本方法可以同时检测转基因玉米样品中3种外源基因.经序列测试证实,三重PCR扩增产物的序列与原基因完全一致,表明扩增结果可靠.该方法能检出0.05%MON810转基因玉米成分,远低于欧盟对转基因食品规定标识的质量分数阈值(1%).该方法对玉米及其制品的检测结果与实时荧光PCR方法的检测结果一致,与传统的琼脂糖凝胶电泳法相比,具有特异性高、快速及灵敏等优点,适用于玉米中转基因成分以及转基因玉米MON810品系的快速筛选、鉴定和检测,能满足我国实施转基因食品标签法规的要求. 展开更多
关键词 多重PCR 无胶筛分毛细管电泳 激光诱导荧光检测 转基因玉米
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