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含表皮细胞的无细胞真皮复合皮的构建及生长活性研究 被引量:12
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作者 肖仕初 夏照帆 +3 位作者 杨珺 刘旺 王广庆 刘志国 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期606-607,I002,共3页
为探讨体外构建复合皮的可能性 ,制备来源于猪皮的无细胞真皮基质 ,在其表皮面种植表皮细胞于体外培养 ,定期消化分离无细胞真皮上的表皮细胞 ,采用细胞计数法和增殖试验观察表皮细胞增殖活力 ,并分别于 1周和 2周后通过组织切片HE染色... 为探讨体外构建复合皮的可能性 ,制备来源于猪皮的无细胞真皮基质 ,在其表皮面种植表皮细胞于体外培养 ,定期消化分离无细胞真皮上的表皮细胞 ,采用细胞计数法和增殖试验观察表皮细胞增殖活力 ,并分别于 1周和 2周后通过组织切片HE染色、扫描电镜观察细胞生长状况。结果显示 ,表皮细胞随培养时间延长 ,数量明显增多 ,且仍具有一定的增殖潜力。培养 1周、2周后分别形成单层细胞膜片及含 3~ 6层细胞的复层膜片。提示以异种无细胞真皮为载体 ,可于体外成功构建含表皮细胞层的活性复合皮。 展开更多
关键词 无细胞真皮 表皮细胞 复合皮 组织工程
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小剂量胰岛素局部应用对移植无细胞真皮后血管化过程的影响 被引量:3
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作者 牛震海 薛宝升 +1 位作者 孙树 唐明睿 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期421-423,共3页
目的:观察小剂量胰岛素局部应用对无细胞真皮移植后血管化过程的影响。方法:制备猪脱细胞真皮基质。96只大鼠移植猪脱细胞真皮基质并浸润注射不同浓度胰岛素,A组0.1u、B组0.05u、C组0.01u组,D组注射等渗盐水。隔日注射,至术后第13d止。... 目的:观察小剂量胰岛素局部应用对无细胞真皮移植后血管化过程的影响。方法:制备猪脱细胞真皮基质。96只大鼠移植猪脱细胞真皮基质并浸润注射不同浓度胰岛素,A组0.1u、B组0.05u、C组0.01u组,D组注射等渗盐水。隔日注射,至术后第13d止。于移植后2,3,4,7,14,28d取无细胞真皮组织活检,HE及免疫组织化学染色观察移植物血管化过程,并测定血糖浓度的变化。结果:术后第2d在A、B组移植片双面浅层可见成纤维细胞及炎性细胞浸润;第4dA、B组移植片内血管内皮细胞数多于C、D组(P<0.05);第7dA、B组移植片双面浅层可见新生血管形成,结构完整;第14dA、B组血管数量明显大于C、D组(P<0.05);第28d各组间血管数无明显差异。B、C、D组注射胰岛素后6h血糖波动在4.80~7.70mmol/L,与术前相比无显著性差异,A组注射胰岛素后1h血糖明显降低(P<0.01)。结论:小剂量胰岛素局部应用能明显促进无细胞真皮的早期血管化过程。 展开更多
关键词 无细胞真皮 移植 胰岛素 血糖 血管化
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兔无细胞真皮基质的研制 被引量:3
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作者 向军 刘英开 +3 位作者 陆树良 青春 廖镇江 史济湘 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2003年第3期223-226,共4页
目的 探讨制备兔无细胞真皮基质(ADM)的最佳方法。 方法 选用三种不同的去表皮处理液,即高渗NaCl溶液、dispase Ⅱ分离酶和嗜热蛋白酶(thermolysin),结合去污剂0.5%十二烷基硫酸钠(SDS)处理,分别制备兔ADM,并对其进行组织学检测。 结果... 目的 探讨制备兔无细胞真皮基质(ADM)的最佳方法。 方法 选用三种不同的去表皮处理液,即高渗NaCl溶液、dispase Ⅱ分离酶和嗜热蛋白酶(thermolysin),结合去污剂0.5%十二烷基硫酸钠(SDS)处理,分别制备兔ADM,并对其进行组织学检测。 结果 高渗NaCl-SDS制备的兔ADM尚有少量表皮残留,乳白色中夹杂浅黄色,组织学观察可见真皮中有较多细胞碎屑;而经dispase Ⅱ-SDS和thermolysin-SDS制备的兔ADM表皮完全去除,呈乳白色,组织学观察发现真皮中已不见任何细胞成分,胶原纤维排列规则。电镜观察,上述三种方法制备的兔ADM基底膜结构均完整。 结论 由dispase Ⅱ-SDS法和thermolysin-SDS法制备的兔ADM达到了完全去细胞化,符合制备要求。 展开更多
关键词 无细胞真皮基质 基底膜复合物 组织形态学 dispaseⅡ-SDS法 thermolysin-SDS法 去表皮处理
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表皮细胞和成纤维细胞在异种无细胞真皮上的生长和增殖 被引量:1
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作者 肖仕初 夏照帆 +3 位作者 刘旺 郇京宁 张素珍 杨王君 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第z1期90-90,共1页
  及时封密创面是烧伤治疗的关键,但大面积深度烧伤患者常存在自体皮源不足的问题.近年来,组织工程技术的应用为提供充足的皮源带来了希望,如在胶原-GAG(氨基葡聚糖)膜及PGA/PGL(聚羟基乙酸/聚乳酸)网上种植表皮细胞和(或)成纤维细胞...   及时封密创面是烧伤治疗的关键,但大面积深度烧伤患者常存在自体皮源不足的问题.近年来,组织工程技术的应用为提供充足的皮源带来了希望,如在胶原-GAG(氨基葡聚糖)膜及PGA/PGL(聚羟基乙酸/聚乳酸)网上种植表皮细胞和(或)成纤维细胞,经体外培养后可形成复合皮,并初步用于烧伤创面的修复.本研究观察了表皮细胞和成纤维细胞种植于无细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)上的生长和增殖情况,为进一步移植试验奠定基础.…… 展开更多
关键词 无细胞真皮 皮肤 人工 皮肤移植
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巴马香猪无细胞真皮制备及其生物学特性 被引量:3
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作者 陈俊颖 魏泓 《中国比较医学杂志》 CAS 2006年第11期671-674,704,共5页
目的制备来源于巴马香猪皮肤的无细胞真皮,研究其生物学特性,为其异种无细胞真皮应用于烧伤及创伤修复临床形成积累基础研究资料。方法研究两种不同的酶(0.1%dispaseII和0.25%胰蛋白酶)处理去表皮,结合去污剂0.5%Triton X-100处理不同... 目的制备来源于巴马香猪皮肤的无细胞真皮,研究其生物学特性,为其异种无细胞真皮应用于烧伤及创伤修复临床形成积累基础研究资料。方法研究两种不同的酶(0.1%dispaseII和0.25%胰蛋白酶)处理去表皮,结合去污剂0.5%Triton X-100处理不同时间制作无细胞真皮的方法,随后对不同方法制作的无细胞真皮进行常规石蜡切片,显微镜下观察其结构,并进行微生物检测和细胞毒性检测。结果胰蛋白酶法去除表皮彻底,且基底膜保留完整,dispaseII也能完整地去除表皮,但对基底膜有破坏;0.5%Triton X-100室温下振荡处理24h能完全去除真皮中的细胞成分及皮肤附属器且对皮肤胶原结构没有破坏;在所用试剂中加入0.02%的NaN3能够起到完全抑菌的作用;制作的无细胞真皮无细胞毒性。结论无细胞真皮内已经完全没有细胞成分及皮肤附属器,抗原性显著降低,无细胞无毒性,可替代异体无细胞真皮基质作为创伤修复的真皮支架。 展开更多
关键词 巴马香猪 无细胞真皮 真皮替代物
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无细胞真皮基质的制备及扫描电镜观察
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作者 马绍英 李宝兴 +1 位作者 赵亚平 李春源 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期646-649,共4页
目的:制备无细胞真皮基质(ADM)及通过扫描电镜(SEM)观察研究所制备的ADM经大剂量辐照后其形态结构是否有改变。方法:用高渗盐溶液除去皮肤的表皮,经十二烷基硫酸钠(SDS)和胰蛋白酶处理去除真皮中的细胞成分,得到ADM。结果:通过SEM观察表... 目的:制备无细胞真皮基质(ADM)及通过扫描电镜(SEM)观察研究所制备的ADM经大剂量辐照后其形态结构是否有改变。方法:用高渗盐溶液除去皮肤的表皮,经十二烷基硫酸钠(SDS)和胰蛋白酶处理去除真皮中的细胞成分,得到ADM。结果:通过SEM观察表明,ADM中细胞成分基本被去除,经20kGy辐照后,胶原纤维排列正常,结构完整。结论:本研究方法能基本去除皮肤中的细胞成分且辐照后不损伤胶原纤维的三维结构,可为临床修复烧伤创面提供良好的移植材料。 展开更多
关键词 ADM 无细胞真皮基质 细胞成分 胶原纤维 皮肤 法能 高渗盐 去皮 酶处理 去除
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人与巴马香猪无细胞真皮移植效果的比较
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作者 郑书全 葛良鹏 魏泓 《中国比较医学杂志》 CAS 2007年第10期568-571,I0002,共5页
目的比较巴马香猪与人无细胞真皮植入大鼠后的相容性、血管化和收缩率等移植效果,为猪无细胞真皮替代人无细胞真皮用于深度创伤治疗提供依据。方法以机械去表皮法制备巴马香猪与人无细胞真皮经辐照处理后移植于Wistar大鼠全厚皮肤缺损... 目的比较巴马香猪与人无细胞真皮植入大鼠后的相容性、血管化和收缩率等移植效果,为猪无细胞真皮替代人无细胞真皮用于深度创伤治疗提供依据。方法以机械去表皮法制备巴马香猪与人无细胞真皮经辐照处理后移植于Wistar大鼠全厚皮肤缺损创面进行初步的淋巴细胞浸润、成纤维细胞进入生长、血管化、新生皮肤和创面收缩率比较。结果移植1个月后,移植两种无细胞真皮的的创面均完全愈合,组织学检测表明:巴马香猪无细胞真皮与人无细胞真皮相比炎症的发生时间较长,血管化速度和细胞迁入生长缓慢,而愈合后创面收缩率差异不显著。结论巴马香猪无细胞真皮的生物相容性和血管化等移植效果不及人无细胞真皮,主要影响因素可能在于二者蛋白质的差异。 展开更多
关键词 巴马香猪 真皮 无细胞 生物相容性 血管化 收缩率
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无细胞猪真皮的生物相容性评价 被引量:9
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作者 苏爱华 王远亮 +2 位作者 唐丽灵 潘君 罗彦凤 《重庆大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期99-101,共3页
采用猪皮制备的无细胞真皮基质,在基质上接种血管内皮细胞(VEC),鼠成纤维细胞(3T3),在细胞水平检测其生物相容性。采用MTT法检测VEC、3T3在基质上增殖活力;将复合培养1周的VEC-真皮复合物作组织切片,光镜下观察细胞生长状况。结果发现VE... 采用猪皮制备的无细胞真皮基质,在基质上接种血管内皮细胞(VEC),鼠成纤维细胞(3T3),在细胞水平检测其生物相容性。采用MTT法检测VEC、3T3在基质上增殖活力;将复合培养1周的VEC-真皮复合物作组织切片,光镜下观察细胞生长状况。结果发现VEC在无细胞猪真皮基质上增殖迅速,并已经形成单层细胞膜片,某些局部区域已形成2~3层细胞膜片。结果说明采用的无细胞猪真皮基质具有良好的生物相容性,该材料可能有广泛的应用前景。 展开更多
关键词 无细胞真皮 细胞相容性 组织工程材料
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真皮替代物的研究现状与展望 被引量:2
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作者 刘强 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期660-661,共2页
关键词 无细胞真皮基质 胶原 基底膜
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