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PCR双向开启硫黄素T/G四链体探针无标记检测牛奶中沙门氏菌方法研究
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作者 尚慧杰 徐建国 +2 位作者 彭育勃 陈伟 姚丽 《合肥工业大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第5期677-681,687,共6页
文章提出一种基于聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的硫黄素T(ThT)/G-四链体探针无标记检测牛奶中沙门氏菌(Salmonella)方法。以沙门氏菌的invA基因为检测目标,设计特异性发卡引物,通过PCR和特异功能的G-四链体实现对沙... 文章提出一种基于聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)的硫黄素T(ThT)/G-四链体探针无标记检测牛奶中沙门氏菌(Salmonella)方法。以沙门氏菌的invA基因为检测目标,设计特异性发卡引物,通过PCR和特异功能的G-四链体实现对沙门氏菌的检测。结果表明,该检测方法操作简便、特异性强、灵敏度高。在最优反应体系下,沙门氏菌的浓度与信号输出值具有良好的线性关系,其回归方程为Y=27.149X+0.292,R^(2)=0.981,其线性范围为10^(2)~10^(6) CFU/mL。纯菌样品和实际样品都能在细菌浓度为10^(2) CFU/mL时检测出信号,表明该方法具有抗基质效应。研究结果为食源性致病菌的检测提供了一种新的思路。 展开更多
关键词 G-四链体 硫黄素T 沙门氏菌 无标记检测 聚合酶链式反应(PCR)
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植物水孔蛋白PIP2表达量快速无标记检测 被引量:1
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作者 徐铭 赵子健 夏秀英 《大连理工大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第1期15-21,共7页
相较于传统的抗体检测,适配体更易于大量快速合成,且可和多种检测技术相结合,在蛋白检测方面具有巨大的潜力.水孔蛋白作为生物体内水分跨膜运输的主要途径,了解其表达量的变化在植物水代谢研究中有着重要意义.利用传统的混合列分法构建... 相较于传统的抗体检测,适配体更易于大量快速合成,且可和多种检测技术相结合,在蛋白检测方面具有巨大的潜力.水孔蛋白作为生物体内水分跨膜运输的主要途径,了解其表达量的变化在植物水代谢研究中有着重要意义.利用传统的混合列分法构建了8个C端恒定半胱氨酸残基的类肽适配体文库,结合表面等离激元共振成像技术,筛选得到能特异性结合高等植物水孔蛋白PIP2的类肽适配体PPA7,其亲和力 K D高达2.52×10 -9 mol/L.利用PPA7检测了石竹玻璃化和正常植株的水孔蛋白表达量,结果表明,石竹玻璃化植株的水孔蛋白表达量显著高于正常植株.研究提供了一种新的植物蛋白定量检测策略,也为进一步明确水孔蛋白在组培苗玻璃化发生中的作用奠定了基础. 展开更多
关键词 水孔蛋白 PIP2 类肽适配体 表面等离激元共振成像 快速无标记检测
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基于金纳米杆/PMMA基底SERS特性的高灵敏肿瘤标志物无标记检测 被引量:1
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作者 佟丽莹 洑颢 +3 位作者 彭乐 李庆宁 石清华 周骏 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2019年第3期784-790,共7页
高品质贵金属纳米结构基底的制备是应用表面增强拉曼散射(SERS)技术进行高灵敏生物检测的关键。采用改进的Langmuir-Blodgett方法,通过在金纳米杆(Au NRs)溶胶注入乙醇,使得Au NRs迁移至溶胶与甲苯的交界面,并用聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)... 高品质贵金属纳米结构基底的制备是应用表面增强拉曼散射(SERS)技术进行高灵敏生物检测的关键。采用改进的Langmuir-Blodgett方法,通过在金纳米杆(Au NRs)溶胶注入乙醇,使得Au NRs迁移至溶胶与甲苯的交界面,并用聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)固定交界面处的Au NRs,形成大面积分布、均匀致密排列的二维畴状Au NRs/PMMA纳米结构薄膜基底。然后,采用等离子体清洗技术处理制备的基底,使得金纳米杆(Au NRs)的表面裸露,以增强基底的SERS特性。实验表明, Au NRs/PMMA基底具有优良的SERS特性,在785 nm波长的激光照射下,增强因子可以达到5.49×10~6。此外,利用制备的Au NRs/PMMA基底,开展前列腺癌症肿瘤标志物——前列腺特异性抗原(PSA)的高灵敏无标记定量检测研究。在PSA的无标记检测过程中,首先对PSA标准溶液和新生牛血清进行SERS光谱的直接检测,得到PSA分别位于823, 1 080, 1 385, 1 586和1 640 cm^(-1)处的主要的拉曼特征峰;其次,通过对PSA标准溶液、临床男性血清样本及女性血清样本的SERS光谱进行测量和分析,筛选出在PSA的SERS光谱中与血清中PSA含量相关的拉曼特征峰,它们是分别位于649, 680以及1 640 cm^(-1)处的拉曼特征峰。进一步,通过对与PSA同属糖蛋白的肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP)以及与PSA同源的人腺体激肽释放酶2(hK2)进行SERS光谱检测和分析,发现位于1 640 cm^(-1)处的拉曼特征峰对于PSA具有高的特异性,将其作为临床血清样本中PSA无标记定量检测的具有特异性的拉曼特征峰,并以此为依据,对不同PSA浓度的标准溶液进行检测,得到位于1 640 cm^(-1)处的拉曼特征峰强度与PSA样本溶液中PSA的浓度相关的剂量-响应曲线。最后,开展临床血清样本的应用检测。结果表明,基于Au NRs/PMMA基底的SERS检测结果与化学发光免疫分析(CLIA)方法的检测结果一致,且具有比CLIA更高的检测灵敏度,最低检测极限为0.06 ng·mL^(-1),且无标记检测范围为0.1 mg·mL^(-1)~0.1 ng·mL^(-1)。因此,基于Au NRs/PMMA SERS基底的高灵敏肿瘤标志物无标记检测具有重要应用前景。 展开更多
关键词 表面增强拉曼散射 金纳米杆 前列腺特异性抗原 无标记检测
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基于谱分解动态散射成像的细胞无标记检测与分类方法 被引量:4
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作者 周雨宁 夏华 +4 位作者 王晓莉 柳竞涵 翟嘉 李晨曦 蒋景英 《电子测量与仪器学报》 CSCD 北大核心 2022年第6期42-47,共6页
细胞成像及检测技术在医学研究及临床诊断领域具有重要的研究意义和应用价值,而无标记与高通量检测尤其具有挑战。本研究基于动态散射理论的细胞成像方法,搭建了动态散射成像系统,提出了基于谱分解的动态信号提取算法,结合机器学习算法... 细胞成像及检测技术在医学研究及临床诊断领域具有重要的研究意义和应用价值,而无标记与高通量检测尤其具有挑战。本研究基于动态散射理论的细胞成像方法,搭建了动态散射成像系统,提出了基于谱分解的动态信号提取算法,结合机器学习算法实现了无标记、高通量的细胞分类。采用血细胞、EG7-OVA肿瘤细胞、A549肺癌肿瘤细胞进行实验验证,结果表明本文提出的方法对血细胞与肿瘤细胞识别准确率可达98%以上,对于血细胞、EG7-OVA细胞和A549细胞之间的三分类识别率约为91%。本文实现的细胞检测和分类方法具有临床应用前景。 展开更多
关键词 动态散射成像 谱分解 无标记细胞检测与分类 机器学习
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急性呼吸道感染的病毒检测新策略:基于SERS和机器学习方法
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作者 姜恒 吕紫薇 +1 位作者 李洋 董妥 《光谱学与光谱分析》 北大核心 2025年第5期1217-1224,共8页
快速准确地检测引发急性呼吸道感染(ARI)的常见病毒,对于公共卫生防控至关重要。尽管传统的病毒检测方法在一定程度上满足了临床需求,但其往往存在耗时较长、成本较高或灵敏度有限等局限性,亟需更为快速和高效的检测手段。表面增强拉曼... 快速准确地检测引发急性呼吸道感染(ARI)的常见病毒,对于公共卫生防控至关重要。尽管传统的病毒检测方法在一定程度上满足了临床需求,但其往往存在耗时较长、成本较高或灵敏度有限等局限性,亟需更为快速和高效的检测手段。表面增强拉曼光谱(SERS)技术因其高灵敏度和特异性,逐渐成为病毒检测领域的研究热点。研究旨在开发一种结合SERS技术与机器学习方法的新型高效检测策略,以实现对呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(IFA)和人腺病毒(HAdV)的精准检测。采用柠檬酸盐制备银纳米颗粒(Ag@cit),将碘离子孵育和钙离子聚集的银纳米颗粒(Ag@ICNPs)作为SERS基底。Ag@ICNPs具有适合病毒检测的优质“热点”,能够超快速、高灵敏、无标记地捕获呼吸道病毒的特征指纹图谱。为了进一步提高检测的效率和准确性,将机器学习方法引入到SERS技术中,通过对多种机器学习算法的改进,成功建立了病毒分类器,能够在3 min内对检测限低至1.0×10^(2)copies·mL^(-1)的三种病毒进行快速鉴定,且准确率高达100%。此外,利用病毒浓度与特征峰强度间关系所构建的浓度依赖性曲线,具有良好的线性关系(R2均大于0.998),为量化样本中病毒含量提供了可能性,这对于临床通过病毒负荷的变化监测治疗效果和病情进展具有重要意义。该研究揭示了“SERS@机器学习”联合应用在呼吸道病毒快速精准检测中的显著优势,并为ARI临床诊断提供了一种具有潜在应用价值的新途径,有望在未来成为临床诊断和公共卫生防控中的重要工具。 展开更多
关键词 表面增强拉曼光谱 机器学习 呼吸道病毒 无标记检测
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无标记生物检测中微悬臂层合梁的纳米热机变形 被引量:1
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作者 邢晶晶 张能辉 郑晋 《上海大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期266-268,272,共4页
以无标记生物检测引起的探针挠度为未知量,放弃单向受力假设,建立了在杂交表面应力和热载荷作用下生物探针纳米力学行为的连续介质力学层合梁模型.分别采用线性和均匀温度场模拟了生物探针在生物化学反应中的瞬态和稳态温度分布,从而解... 以无标记生物检测引起的探针挠度为未知量,放弃单向受力假设,建立了在杂交表面应力和热载荷作用下生物探针纳米力学行为的连续介质力学层合梁模型.分别采用线性和均匀温度场模拟了生物探针在生物化学反应中的瞬态和稳态温度分布,从而解释了Fritz有关DNA分子杂交实验中的双金属效应. 展开更多
关键词 无标记生物检测 杂交表面应力 纳米热机变形 微悬臂层合梁
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光学表面等离子共振生物传感器检测脱落酸的试验研究 被引量:3
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作者 穆琳瑛 王满苹 +5 位作者 王顺 王婷婷 曹百穹 孙晓辉 朱娟花 胡建东 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期75-79,共5页
采用便携式光学表面等离子共振生物传感器快速检测植物激素脱落酸.建立了一种新颖、无标记和检测脱落酸抗体和抗原特异性结合反应的方法.在光学表面等离子共振生物传感器的传感芯片表面固定脱落酸抗原用以制备生物分子识别膜,采用间接... 采用便携式光学表面等离子共振生物传感器快速检测植物激素脱落酸.建立了一种新颖、无标记和检测脱落酸抗体和抗原特异性结合反应的方法.在光学表面等离子共振生物传感器的传感芯片表面固定脱落酸抗原用以制备生物分子识别膜,采用间接抑制法快速检测脱落酸.采用0,25,50,200,500,1 000 mg·L-1的脱落酸实际样品进行检测.结果表明,光学表面等离子共振响应信号与脱落酸含量之间呈良好的线性关系,相关系数为-0.998,相对偏差为4.13%. 展开更多
关键词 植物激素脱落酸 光学表面等离子共振 分子识别膜 生物传感器 无标记检测
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基于便携式表面增强拉曼光谱仪检测血红蛋白 被引量:2
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作者 任肖锋 郑大威 +3 位作者 王惠琴 张萍 林太凤 卫晓丹 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期299-303,共5页
本研究以纳米Au溶胶为增强试剂,利用便携式拉曼光谱仪,建立了一种血红蛋白的快速无标记检测方法。测定了系列浓度梯度的不同粒径纳米Au溶胶对血红蛋白表面增强拉曼光谱(SERS)信号的增强效果,并进行了重复性验证。结果表明,与血红蛋白溶... 本研究以纳米Au溶胶为增强试剂,利用便携式拉曼光谱仪,建立了一种血红蛋白的快速无标记检测方法。测定了系列浓度梯度的不同粒径纳米Au溶胶对血红蛋白表面增强拉曼光谱(SERS)信号的增强效果,并进行了重复性验证。结果表明,与血红蛋白溶液的普通拉曼测试效果相比,血红蛋白与纳米Au溶胶混合后,拉曼信号得到显著增强,且粒径为50±15 nm的纳米Au溶胶对血红蛋白拉曼信号的增强效果最好;血红蛋白的拉曼特征峰强度I1531与其质量浓度间具有较好的线性关系,线性范围是5~30 mg/L,相关系数R^2=0.9223;不同批次、相同质量浓度的血红蛋白与纳米Au溶胶混合测定的实验结果重现性好,且与共聚焦显微拉曼光谱仪测定血红蛋白的SERS结果相一致。该方法检测耗时短、设备操作简便且具有较好的重现性。 展开更多
关键词 血红蛋白 纳米金溶胶 表面增强拉曼光谱 快速无标记检测
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表面等离子体共振免疫传感器用于快速检测微囊藻毒素的研究 被引量:3
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作者 李莹 钟金钢 +2 位作者 马骁 李仕萍 齐攀 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期304-307,314,共5页
针对现有微囊藻毒素(MC-LR)检测方法操作复杂、因标记而污染环境、仪器贵重,不利于现场快速检测等问题,将自行研制的表面等离子体共振(SPR)生物芯片检测仪应用于微囊藻毒素的检测,提出抑制型SPR生物芯片快速检测痕量微囊藻毒素的方法。... 针对现有微囊藻毒素(MC-LR)检测方法操作复杂、因标记而污染环境、仪器贵重,不利于现场快速检测等问题,将自行研制的表面等离子体共振(SPR)生物芯片检测仪应用于微囊藻毒素的检测,提出抑制型SPR生物芯片快速检测痕量微囊藻毒素的方法。采用该方法分别对浓度为3.5、2.5、1.5、1、0μg/L的MC-LR样品进行了检测。结果表明:该方法检测限小于1μg/L,可满足世界卫生组织(WHO)对于饮用水和我国地表水环境质量标准中MC-LR最低含量检测的需求。该方法完成一个样品检测耗时约8 min,相比于高效液相色谱法(HPLC)和酶联免疫吸附法(ELISA)等传统检测方法,快速定量是其最大的优势,可用于食品质量监控和现场实时检测。 展开更多
关键词 表面等离子体共振 生物芯片 无标记快速检测 微囊藻毒素
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基于微流控的现代生物医学检测技术概述 被引量:3
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作者 成一诺 陈子浩 李锦帆 《应用化工》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1227-1231,共5页
首先介绍了微泵和微阀等常用的微流控器件,然后介绍了利用微流控技术进行片上预处理的方法,包括细胞分离、细胞裂解和微流控富集技术。最后,对微流控在免疫检测中的应用进行了介绍。现代医学检测需要一种全自动、集成化、低成本并且易... 首先介绍了微泵和微阀等常用的微流控器件,然后介绍了利用微流控技术进行片上预处理的方法,包括细胞分离、细胞裂解和微流控富集技术。最后,对微流控在免疫检测中的应用进行了介绍。现代医学检测需要一种全自动、集成化、低成本并且易于操作的微流控系统,从这些方面考虑,给出了微流控生物芯片的一些改进方向。 展开更多
关键词 微流控 生物医学检测 免疫检测 预处理 富集 无标记检测
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一种高精度图像套准系统的设计与实现
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作者 武博文 刘志红 樊浩力 《印刷与数字媒体技术研究》 CAS 北大核心 2024年第2期145-152,共8页
在数字印后工艺生产中,介质传送误差常导致套准困难,通常需要对印刷品进行精确定位。目前,常用的定位方法是在印刷品空白处加入套印标识物,通过检测标识物进行定位。然而,这种方法在图像幅面占据整个印刷品幅面时无法使用。为了解决这... 在数字印后工艺生产中,介质传送误差常导致套准困难,通常需要对印刷品进行精确定位。目前,常用的定位方法是在印刷品空白处加入套印标识物,通过检测标识物进行定位。然而,这种方法在图像幅面占据整个印刷品幅面时无法使用。为了解决这一问题,本研究设计并实现了一套高精度智能图像套准系统,在保证图像采集与印刷的实时性与效率的同时,通过利用预先设计好的模板,在实时采集的图像中寻找匹配程度最高的区域,从而在印刷品中未加入套印标识的情况下,仍可实现印刷套准。印刷生产环境中实验结果表明,本方法的准确性和效率等均可满足实际工业生产的需求,具有较高的泛用性与实际的生产应用价值。 展开更多
关键词 数字印刷 数字印后增效 图像套准 无标记检测技术
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基于光强传输方程的相位显微成像系统设计
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作者 彭贺 闫克丁 +5 位作者 刘静 曹皓月 周扬 杨树蔚 马悦 胡亚维 《激光杂志》 北大核心 2024年第12期28-33,共6页
为了解决传统显微成像技术在观察无色透明样本时的难题,设计了基于光强传输方程的相位显微成像系统。该系统利用轴向微分近似法和在焦图像近似法,结合双目CMOS相机同时采集过焦和欠焦图像,从而求解光强传输方程并实现样本的相位恢复。... 为了解决传统显微成像技术在观察无色透明样本时的难题,设计了基于光强传输方程的相位显微成像系统。该系统利用轴向微分近似法和在焦图像近似法,结合双目CMOS相机同时采集过焦和欠焦图像,从而求解光强传输方程并实现样本的相位恢复。系统还整合了自动对焦算法和相位相关的视场校正算法,以减少人为和设备误差造成的影响。经测试,该系统在10倍物镜下的分辨率达到了2.19μm。在实际应用中,不仅成功对人血涂片进行相位恢复,观察到血红细胞的特有结构,还能用于培养皿的划痕检测。该系统因其低成本、易实现及广泛的应用潜力,在观察无色透明样本方面展现出了显著的优势。 展开更多
关键词 光强传输方程 相位恢复 显微成像系统 无标记检测
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