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组蛋白翻译后修饰无标定量方法可靠性的比较
1
作者
刘志伟
朱明睿
+1 位作者
翟琳辉
谭敏佳
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第9期825-830,共6页
组蛋白翻译后修饰是一种表观遗传学修饰,参与调控细胞的新陈代谢等重要生理过程。蛋白质组学发展迅速,使监控组蛋白翻译后修饰的动态变化成为可能。目前主要有3种无标定量方法(谱图计数法、峰面积积分法和信号强度法),但何种定量方法更...
组蛋白翻译后修饰是一种表观遗传学修饰,参与调控细胞的新陈代谢等重要生理过程。蛋白质组学发展迅速,使监控组蛋白翻译后修饰的动态变化成为可能。目前主要有3种无标定量方法(谱图计数法、峰面积积分法和信号强度法),但何种定量方法更可靠尚未见系统性的详细报道。在稳定同位素标记细胞培养技术(SILAC)基础上,对去乙酰化酶抑制剂(SAHA)调控细胞乙酰化修饰水平的定量数据进行对比,比较3种无标定量方法对组蛋白翻译后修饰进行的定量分析,利用定量结果的标准差(SD)评估定量的可靠性,最终发现基于峰面积积分法定量的结果可靠性最高。该研究对难以进行同位素标记实验的样本分析,尤其对临床样本、大样本的组蛋白修饰谱分析具有重要参考意义。
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关键词
组蛋白翻译后修饰
无标定量
可靠性
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职称材料
基于表面等离子共振技术捕获法的CYFRA21-1蛋白活性浓度定量方法研究
2
作者
占宇华
刘鹏鹏
+3 位作者
梁媛媛
俞晓平
宋阳
申屠旭萍
《分析测试学报》
北大核心
2025年第7期1247-1253,共7页
基于表面等离子体共振(SPR)技术的无标浓度分析(CFCA)方法可以不借助任何标准品,仅利用已知的蛋白质扩散系数和在扩散受限条件下测定蛋白的活性浓度。该研究提出了一种捕获形式下的CFCA方法(CCFCA),用于测定CYFRA21-1蛋白活性浓度。结...
基于表面等离子体共振(SPR)技术的无标浓度分析(CFCA)方法可以不借助任何标准品,仅利用已知的蛋白质扩散系数和在扩散受限条件下测定蛋白的活性浓度。该研究提出了一种捕获形式下的CFCA方法(CCFCA),用于测定CYFRA21-1蛋白活性浓度。结果表明,CCFCA法的测定值为0.67 mg/mL,日间精密度为4.6%,而CFCA法的测定值为0.7 mg/mL,日间精密度为6.5%。此外,抗体偶联水平一直是限制CFCA使用的关键性因素,若芯片储存方法或活化方法不当,将导致芯片表面偶联抗体水平达不到CFCA方法所要求的克服传质限制要求(CFCA进行拟合方法学要求QC_(ratio)>0.2),导致测定结果不可靠。由于捕获法能够在Protein G蛋白辅助下使抗体的空间朝向更为合适,使得在低偶联水平下CCFCA法的检测结果仍准确稳定。与经典CFCA方法相比,CCFCA法检测结果可靠,单块芯片通过再生可用于多个抗体-分析物检测,可作为未来测定蛋白质活性浓度的更好选择。
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关键词
无标定量
CYFRA21-1
活性蛋白浓度
捕获法
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职称材料
α-Fe/Nd2Fe14B复合纳米晶合金的X射线定量相分析
3
作者
孙宏宇
李晓红
张湘义
《功能材料》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2004年第z1期599-601,共3页
采用联立方程组确立了α-Fe/Nd2Fe14B复合纳米晶合金中相含量的计算方法.该方法运用最小二乘回归法和抛弃平均法消除病态方程组.将其应用于α-Fe/Nd2Fe14B复合纳米晶合金的相含量计算,所得结果与直接对比法一致.
关键词
复合纳米晶永磁体
无标定量
相分析
相含
量
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职称材料
题名
组蛋白翻译后修饰无标定量方法可靠性的比较
1
作者
刘志伟
朱明睿
翟琳辉
谭敏佳
机构
中国科学院上海药物研究所新药研究国家重点实验室
中国科学院大学
上海市化学品分析风险评估与控制重点实验室
出处
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第9期825-830,共6页
基金
上海市科学技术委员会项目(14DZ2261100)
国家自然科学基金项目(31370814)~~
文摘
组蛋白翻译后修饰是一种表观遗传学修饰,参与调控细胞的新陈代谢等重要生理过程。蛋白质组学发展迅速,使监控组蛋白翻译后修饰的动态变化成为可能。目前主要有3种无标定量方法(谱图计数法、峰面积积分法和信号强度法),但何种定量方法更可靠尚未见系统性的详细报道。在稳定同位素标记细胞培养技术(SILAC)基础上,对去乙酰化酶抑制剂(SAHA)调控细胞乙酰化修饰水平的定量数据进行对比,比较3种无标定量方法对组蛋白翻译后修饰进行的定量分析,利用定量结果的标准差(SD)评估定量的可靠性,最终发现基于峰面积积分法定量的结果可靠性最高。该研究对难以进行同位素标记实验的样本分析,尤其对临床样本、大样本的组蛋白修饰谱分析具有重要参考意义。
关键词
组蛋白翻译后修饰
无标定量
可靠性
Keywords
histone post-translational modification
label-free quantitation
reliability
分类号
O658 [理学—分析化学]
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职称材料
题名
基于表面等离子共振技术捕获法的CYFRA21-1蛋白活性浓度定量方法研究
2
作者
占宇华
刘鹏鹏
梁媛媛
俞晓平
宋阳
申屠旭萍
机构
中国计量大学生命科学学院/浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室
浙江方圆检测集团股份有限公司
浙江省市场监管生物安全重点实验室
出处
《分析测试学报》
北大核心
2025年第7期1247-1253,共7页
基金
国家重点研发计划(2022YFF0608402)
浙江省市场监管生物安全重点实验室课题(2024BS002)。
文摘
基于表面等离子体共振(SPR)技术的无标浓度分析(CFCA)方法可以不借助任何标准品,仅利用已知的蛋白质扩散系数和在扩散受限条件下测定蛋白的活性浓度。该研究提出了一种捕获形式下的CFCA方法(CCFCA),用于测定CYFRA21-1蛋白活性浓度。结果表明,CCFCA法的测定值为0.67 mg/mL,日间精密度为4.6%,而CFCA法的测定值为0.7 mg/mL,日间精密度为6.5%。此外,抗体偶联水平一直是限制CFCA使用的关键性因素,若芯片储存方法或活化方法不当,将导致芯片表面偶联抗体水平达不到CFCA方法所要求的克服传质限制要求(CFCA进行拟合方法学要求QC_(ratio)>0.2),导致测定结果不可靠。由于捕获法能够在Protein G蛋白辅助下使抗体的空间朝向更为合适,使得在低偶联水平下CCFCA法的检测结果仍准确稳定。与经典CFCA方法相比,CCFCA法检测结果可靠,单块芯片通过再生可用于多个抗体-分析物检测,可作为未来测定蛋白质活性浓度的更好选择。
关键词
无标定量
CYFRA21-1
活性蛋白浓度
捕获法
Keywords
calibration free concentration analysis
CYFRA21-1
active protein concentration
capture method
分类号
O657.63 [理学—分析化学]
O629.7 [理学—有机化学]
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职称材料
题名
α-Fe/Nd2Fe14B复合纳米晶合金的X射线定量相分析
3
作者
孙宏宇
李晓红
张湘义
机构
燕山大学
出处
《功能材料》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2004年第z1期599-601,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(50371075和10174059)
河北省自然科学基金资助项目(502172和E2004000233)
文摘
采用联立方程组确立了α-Fe/Nd2Fe14B复合纳米晶合金中相含量的计算方法.该方法运用最小二乘回归法和抛弃平均法消除病态方程组.将其应用于α-Fe/Nd2Fe14B复合纳米晶合金的相含量计算,所得结果与直接对比法一致.
关键词
复合纳米晶永磁体
无标定量
相分析
相含
量
分类号
TM273 [一般工业技术—材料科学与工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
组蛋白翻译后修饰无标定量方法可靠性的比较
刘志伟
朱明睿
翟琳辉
谭敏佳
《色谱》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
基于表面等离子共振技术捕获法的CYFRA21-1蛋白活性浓度定量方法研究
占宇华
刘鹏鹏
梁媛媛
俞晓平
宋阳
申屠旭萍
《分析测试学报》
北大核心
2025
0
在线阅读
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职称材料
3
α-Fe/Nd2Fe14B复合纳米晶合金的X射线定量相分析
孙宏宇
李晓红
张湘义
《功能材料》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2004
0
在线阅读
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职称材料
已选择
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