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无机多聚磷酸盐在神经变性疾病中的作用、机制及潜在应用
被引量：
2
1
作者
耿雪薇
陈晓丹
+3 位作者
黄筱钧
黄胜
罗洪斌
石廷玉
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期734-743,共10页
无机多聚磷酸盐(inorganic polyphoshpate,polyP)是由磷酸根通过高能磷酸键连接而成的线状聚合物[1]。在生物出现之前polyP就已经存在于地球。在早期地球的高压和干燥环境中能产生polyP,比如在类似地球早期环境的火山口存在polyP。poly...
无机多聚磷酸盐(inorganic polyphoshpate,polyP)是由磷酸根通过高能磷酸键连接而成的线状聚合物[1]。在生物出现之前polyP就已经存在于地球。在早期地球的高压和干燥环境中能产生polyP,比如在类似地球早期环境的火山口存在polyP。polyP的广泛存在表明其在生物的起源和生存方面起到非常关键的作用[2]。polyP在细菌中起到多种作用,如细菌的运动性、生物膜形成、毒性和压力抗性等[3]。
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关键词
无机多聚磷酸盐
神经变性疾病
阿尔茨海默症
帕金森疾病
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职称材料
大肠杆菌O157:H7体内多聚磷酸盐的DAPI荧光定量检测
被引量：
1
2
作者
杜艳丽
韩宗利
+1 位作者
王湘雨
万成松
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期344-350,共7页
目的应用荧光剂DAPI探索一种直接定量大肠杆菌O157:H7无机多聚磷酸盐(polyP)的可靠方法。方法提取并纯化大肠杆菌O157:H7野生株DNA,DAPI与DNA、polyP45结合,测定360 nm和415 nm激发光的发射光谱;应用共聚焦显微镜,观察细菌DAPI-DNA和DAP...
目的应用荧光剂DAPI探索一种直接定量大肠杆菌O157:H7无机多聚磷酸盐(polyP)的可靠方法。方法提取并纯化大肠杆菌O157:H7野生株DNA,DAPI与DNA、polyP45结合,测定360 nm和415 nm激发光的发射光谱;应用共聚焦显微镜,观察细菌DAPI-DNA和DAPI-polyP复合物荧光,验证DAPI检测polyP的可行性;细菌液氮速冻溶解、-80℃速冻溶解、-20℃速冻溶解、60℃加热10 min、Triton x-100作用、室温下放置后倍比稀释涂平板,观察6种方法对细菌存活的影响;与DAPI作用后,测定荧光值,确定细胞膜通透性的最佳前处理方法;建立标准曲线,测定EHEC野生株、ppk1两个突变株polyP含量。结果应用360 nm激发波长,DAPI-DNA最大发射波长为460 nm;应用415 nm激发波长,DAPI-polyP最大发射波长为550 nm;应用405 nm激发光,收集DAPI-DNA蓝色荧光(425～475 nm),应用488 nm激发光,收集DAPI-polyP绿色荧光(500～560 nm);最佳细菌前处理方法为-80℃速冻后室温下自然溶解;标准曲线为Y=1849X+127.5(R2=0.991),测定各株菌polyP量,其中野生株显著高于ppk1缺失突变株。结论 DAPI荧光定量检测方法具有直接、可靠、易于操作、定量检测等特点,可为进一步研究polyP在肠出血型大肠埃希菌O157:H7中的作用提供技术支持。
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关键词
无机多聚磷酸盐
DAPI染色
大肠杆菌O157:H7
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职称材料
海分枝杆菌ppk基因的生物学功能研究
3
作者
祝琳
施旭骏
高谦
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期649-656,共8页
目的构建海分枝杆菌(Mycobacterium marinum)ppk基因敲除株,对其生物学功能进行研究。方法利用基因同源重组技术,构建了海分枝杆菌ppk基因敲除株;使用DAPI染色法检测细菌胞内多聚无机磷酸盐(poly inorganic phosphate,poly-Pi)浓度;比...
目的构建海分枝杆菌(Mycobacterium marinum)ppk基因敲除株,对其生物学功能进行研究。方法利用基因同源重组技术,构建了海分枝杆菌ppk基因敲除株;使用DAPI染色法检测细菌胞内多聚无机磷酸盐(poly inorganic phosphate,poly-Pi)浓度;比较野生株及突变株在不同环境压力下的生存能力;用野生株和突变株分别感染斑马鱼成鱼,通过观察斑马鱼的存活情况,研究ppk基因对海分枝杆菌毒力的影响。将野生株和突变株分别感染小鼠来源的巨噬细胞系RAW267.4,检测其在巨噬细胞内的增殖。结果 ppk突变株胞内polyPi浓度明显下降;在斑马鱼成鱼感染模型中出现显著减毒表型;其在小鼠来源的巨噬细胞感染模型中的增殖较野生型菌株明显减弱;在营养缺陷、抗生素(利福平、左氧氟沙星)等环境压力下,其生存能力下降。结论 ppk基因影响分枝杆菌在环境压力下的生存,并且在其致病中发挥重要作用。
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关键词
分枝杆菌
多聚
磷酸盐
激酶
多聚
无机
磷酸盐
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职称材料
题名
无机多聚磷酸盐在神经变性疾病中的作用、机制及潜在应用
被引量：
2
1
作者
耿雪薇
陈晓丹
黄筱钧
黄胜
罗洪斌
石廷玉
机构
湖北民族大学医学部病原生物学教研室
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第4期734-743,共10页
基金
国家自然科学基金青年基金资助项目(No.81801979,No.31600073)
湖北省自然科学基金青年项目(No.2018CFB384)
湖北民族大学大学生创新创业训练计划项目(No.201910517004,No.201910517005)。
文摘
无机多聚磷酸盐(inorganic polyphoshpate,polyP)是由磷酸根通过高能磷酸键连接而成的线状聚合物[1]。在生物出现之前polyP就已经存在于地球。在早期地球的高压和干燥环境中能产生polyP,比如在类似地球早期环境的火山口存在polyP。polyP的广泛存在表明其在生物的起源和生存方面起到非常关键的作用[2]。polyP在细菌中起到多种作用,如细菌的运动性、生物膜形成、毒性和压力抗性等[3]。
关键词
无机多聚磷酸盐
神经变性疾病
阿尔茨海默症
帕金森疾病
Keywords
Inorganic polyphosphate
Neurodegenerative diseases
Alzheimer disease
Parkinson disease
分类号
R338 [医药卫生—人体生理学]
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
大肠杆菌O157:H7体内多聚磷酸盐的DAPI荧光定量检测
被引量：
1
2
作者
杜艳丽
韩宗利
王湘雨
万成松
机构
深圳职业技术学院医护学院
北京大学深圳医院神经外科
南方医科大学公共卫生学院BSL-
深圳大学第一附属医院深圳市第二人民医院消化内科
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第3期344-350,共7页
基金
国家自然科学基金(81371765)
广东省自然科学基金(2018B030311063,2014A030313312)
文摘
目的应用荧光剂DAPI探索一种直接定量大肠杆菌O157:H7无机多聚磷酸盐(polyP)的可靠方法。方法提取并纯化大肠杆菌O157:H7野生株DNA,DAPI与DNA、polyP45结合,测定360 nm和415 nm激发光的发射光谱;应用共聚焦显微镜,观察细菌DAPI-DNA和DAPI-polyP复合物荧光,验证DAPI检测polyP的可行性;细菌液氮速冻溶解、-80℃速冻溶解、-20℃速冻溶解、60℃加热10 min、Triton x-100作用、室温下放置后倍比稀释涂平板,观察6种方法对细菌存活的影响;与DAPI作用后,测定荧光值,确定细胞膜通透性的最佳前处理方法;建立标准曲线,测定EHEC野生株、ppk1两个突变株polyP含量。结果应用360 nm激发波长,DAPI-DNA最大发射波长为460 nm;应用415 nm激发波长,DAPI-polyP最大发射波长为550 nm;应用405 nm激发光,收集DAPI-DNA蓝色荧光(425～475 nm),应用488 nm激发光,收集DAPI-polyP绿色荧光(500～560 nm);最佳细菌前处理方法为-80℃速冻后室温下自然溶解;标准曲线为Y=1849X+127.5(R2=0.991),测定各株菌polyP量,其中野生株显著高于ppk1缺失突变株。结论 DAPI荧光定量检测方法具有直接、可靠、易于操作、定量检测等特点,可为进一步研究polyP在肠出血型大肠埃希菌O157:H7中的作用提供技术支持。
关键词
无机多聚磷酸盐
DAPI染色
大肠杆菌O157:H7
Keywords
polyP
DAPI staining
Enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7
分类号
R378.21 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
海分枝杆菌ppk基因的生物学功能研究
3
作者
祝琳
施旭骏
高谦
机构
复旦大学基础医学院医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第6期649-656,共8页
文摘
目的构建海分枝杆菌(Mycobacterium marinum)ppk基因敲除株,对其生物学功能进行研究。方法利用基因同源重组技术,构建了海分枝杆菌ppk基因敲除株;使用DAPI染色法检测细菌胞内多聚无机磷酸盐(poly inorganic phosphate,poly-Pi)浓度;比较野生株及突变株在不同环境压力下的生存能力;用野生株和突变株分别感染斑马鱼成鱼,通过观察斑马鱼的存活情况,研究ppk基因对海分枝杆菌毒力的影响。将野生株和突变株分别感染小鼠来源的巨噬细胞系RAW267.4,检测其在巨噬细胞内的增殖。结果 ppk突变株胞内polyPi浓度明显下降;在斑马鱼成鱼感染模型中出现显著减毒表型;其在小鼠来源的巨噬细胞感染模型中的增殖较野生型菌株明显减弱;在营养缺陷、抗生素(利福平、左氧氟沙星)等环境压力下,其生存能力下降。结论 ppk基因影响分枝杆菌在环境压力下的生存,并且在其致病中发挥重要作用。
关键词
分枝杆菌
多聚
磷酸盐
激酶
多聚
无机
磷酸盐
Keywords
mycobacterium
polyphosphate kinase
poly inorganic phosphate
分类号
Q933 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
无机多聚磷酸盐在神经变性疾病中的作用、机制及潜在应用
耿雪薇
陈晓丹
黄筱钧
黄胜
罗洪斌
石廷玉
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2021
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
大肠杆菌O157:H7体内多聚磷酸盐的DAPI荧光定量检测
杜艳丽
韩宗利
王湘雨
万成松
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2019
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
海分枝杆菌ppk基因的生物学功能研究
祝琳
施旭骏
高谦
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2016
0
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职称材料
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