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新洋葱伯克霍尔德氏菌YM12的分离鉴定及其对黄瓜软腐病的防治效果 被引量：2
1
作者 卫鑫辰 王巧 +5 位作者 石彬 谢学文 石延霞 柴阿丽 李宝聚 李磊 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2024年第5期1088-1098,共11页
黄瓜软腐病是由巴西果胶杆菌Pectobacteriumbrasiliense引起的一种细菌性病害,该病害发生严重且难防难控,以筛选具有高效抑菌作用的生防微生物为目的,本研究在黄瓜根际土壤中分离得到了一株对巴西果胶杆菌具有显著抑制效果的菌株YM12。... 黄瓜软腐病是由巴西果胶杆菌Pectobacteriumbrasiliense引起的一种细菌性病害,该病害发生严重且难防难控,以筛选具有高效抑菌作用的生防微生物为目的,本研究在黄瓜根际土壤中分离得到了一株对巴西果胶杆菌具有显著抑制效果的菌株YM12。经形态学观察、生理生化特征测定及多基因系统发育树分析,鉴定其为新洋葱伯克霍尔德氏菌Burkholderia cenocepacia;抗生素合成基因检测结果表明,菌株YM12具有产生硝吡咯菌素pyrrolnitrin与藤黄绿脓菌素pyoluteorin的能力;其他生防性状分析表明,YM12具有溶磷能力,还可产生蛋白酶及嗜铁素。经抑菌谱分析,菌株YM12能够抑制5种病原细菌及3种病原真菌的生长。盆栽试验结果表明,菌株YM12对黄瓜软腐病具有明显的防治效果,防效可达62.84%,优于对照药剂春雷霉素。综上,菌株YM12是目前首次报道的对细菌性软腐病具有良好生防效果的新洋葱伯克霍尔德氏菌。 展开更多
关键词 新洋葱伯克霍尔德氏菌 黄瓜软腐病 抑菌活性 生物防治
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洋葱伯克霍尔德菌GD1-1的分离鉴定及对香蕉枯萎病的生防潜力 被引量：1
2
作者 朱杰 郑利乐 +5 位作者 钟鸣鸾 童灵洁 李洁玲 李华平 李云锋 聂燕芳 《华南农业大学学报》 北大核心 2025年第1期72-80,共9页
【目的】从香蕉根际土壤中筛选出对香蕉枯萎病具有良好防治效果的生防菌。【方法】采用对峙培养法,从健康香蕉根际土壤中筛选对尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号小种(Fusarium oxysporum f. sp. cubense tropical race 4,Foc TR4)具有拮抗... 【目的】从香蕉根际土壤中筛选出对香蕉枯萎病具有良好防治效果的生防菌。【方法】采用对峙培养法,从健康香蕉根际土壤中筛选对尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号小种(Fusarium oxysporum f. sp. cubense tropical race 4,Foc TR4)具有拮抗作用的生防菌株,根据菌落形态和生理生化特征并利用分子生物学技术对生防菌株进行鉴定。通过显微观察分析该菌株对Foc TR4菌丝生长和分生孢子萌发的影响,通过对峙培养法分析其抑菌谱,通过盆栽试验分析该菌株对香蕉枯萎病的防治效果和促生潜力。【结果】筛选出了1株对Foc TR4具有显著抑制作用的拮抗菌GD1-1,鉴定为洋葱伯克霍尔德菌Burkholderia contaminans。菌株GD1-1对Foc TR4菌丝生长的抑制率为72.5%,对分生孢子萌发的抑制率为99.8%,并可以导致Foc TR4菌丝膨大变粗、畸形等。菌株GD1-1具有解钾、解磷、产蛋白酶和产铁载体的能力,对10种植物病原真菌均具有较好的抑制效果,表现出广谱抑菌作用。盆栽试验结果表明,菌株GD1-1对香蕉枯萎病的防效为55.6%,且对香蕉植株具有良好的促生作用。【结论】洋葱伯克霍尔德菌GD1-1对Foc TR4具有明显的抑制作用,对香蕉枯萎病具有良好的防治效果,对香蕉植株具有促生作用。作为优质的生防菌源,菌株GD1-1具有一定的开发应用潜力。 展开更多
关键词 香蕉枯萎病 尖孢镰刀菌古巴专化型 洋葱伯克霍尔德菌 拮抗作用 生物防治
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2015—2021年CHINET临床分离洋葱伯克霍尔德菌耐药性变迁
3
作者 葛春悦 胡云建 +87 位作者 艾效曼 杨洋 胡付品 朱德妹 徐英春 张小江 李辉 季萍 谢轶 康梅 王传清 付盼 徐元宏 黄颖 孙自镛 陈中举 倪语星 孙景勇 褚云卓 田素飞 胡志东 李金 俞云松 林洁 单斌 杜艳 郭素芳 魏莲花 邹凤梅 张泓 王春 卓超 苏丹虹 郭大文 赵金英 喻华 黄湘宁 刘文恩 李艳明 金炎 邵春红 徐雪松 鄢超 王山梅 楚亚菲 张利侠 马娟 周树平 周艳 朱镭 孟晋华 董方 吕志勇 胡芳芳 沈瀚 周万青 贾伟 李刚 吴劲松 卢月梅 李继红 段金菊 康建邦 马晓波 郑燕萍 郭如意 朱焱 陈运生 孟青 王世富 胡雪飞 沈继录 黄文辉 汪瑞忠 房华 俞碧霞 赵勇 龚萍 温开镇 张贻荣 刘江山 廖龙凤 顾洪芹 姜琳 贺雯 薛顺虹 冯佼 岳春雷 《中国感染与化疗杂志》 北大核心 2025年第5期557-562,共6页
目的 了解2015—2021年国内不同地区52所医院临床分离洋葱伯克霍尔德菌的数量和对抗菌药物的耐药性变迁。方法 收集2015年1月1日至2021年12月31日52所医院临床分离洋葱伯克霍尔德菌9 261株,按CHINET统一监测方案采用纸片扩散法或药敏试... 目的 了解2015—2021年国内不同地区52所医院临床分离洋葱伯克霍尔德菌的数量和对抗菌药物的耐药性变迁。方法 收集2015年1月1日至2021年12月31日52所医院临床分离洋葱伯克霍尔德菌9 261株,按CHINET统一监测方案采用纸片扩散法或药敏试验自动测试仪(机器法)进行抗菌药物敏感性试验,依据2023年CLSI折点标准判断结果。结果 9 261株洋葱伯克霍尔德菌在各个年龄组均有分布,尤其是老年患者分离的菌株数量居多,儿童菌株中的分离率为11.1% (1 032株),低于成人患者,且差异有统计学意义;≥60岁老年人菌株的分离率46.5%(4 310株)高于青壮年菌株的分离率42.3%(3 919株)。临床分离菌主要以痰液等呼吸道标本为主 (占71.1%),尿液标本为10.7%,血标本为8.1%。洋葱伯克霍尔德菌对CLSI M100 33rd 2023年版推荐的5种抗菌药物均较敏感,细菌耐药率均较低;相比较该菌对美罗培南和左氧氟沙星的耐药率较高,分别为12.4%和18.7%;而对头孢他啶、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑和米诺环素的耐药率均低于8.1%。三个年龄组临床分离的洋葱伯克霍尔德菌对左氧氟沙星的耐药率均是最高的,且以其中≥60岁年龄组菌株的耐药率最高,为20.6%,<18岁年龄组的菌株耐药率最低,为12.4%。结论 洋葱伯克霍尔德菌是临床重要的不发酵糖革兰阴性菌。遵循CLSI的原则,使用正确的方法进行药敏试验和准确报告结果以及做好耐药监测工作,有助于临床合理选择治疗药物,同时也有助于医院感染的预防和管控。 展开更多
关键词 洋葱伯克霍尔德菌 耐药率 头孢他啶 美罗培南 米诺环素 左氧氟沙星 甲氧苄啶-磺胺甲噁唑
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花园伯克霍尔德氏菌来源酯合成酶生物信息学分析及合成脂肪酸乙酯的分子机制
4
作者 赖鲸慧 杨建平 +5 位作者 代梦琦 曾珊 赵蕾 杨冰艳 黄明泉 徐友强 《食品工业科技》 北大核心 2025年第13期184-195,共12页
目的:菌株BJQ0011是一株分离自酒曲并且可在水相体系催化合成脂肪酸乙酯的细菌,本文拟深入研究其水相体系合成脂肪酸乙酯的机制。方法:本研究对细菌BJQ0011进行全基因组测序和生物信息学分析,定位潜在水相体系酯合成酶,通过基因克隆表... 目的:菌株BJQ0011是一株分离自酒曲并且可在水相体系催化合成脂肪酸乙酯的细菌,本文拟深入研究其水相体系合成脂肪酸乙酯的机制。方法:本研究对细菌BJQ0011进行全基因组测序和生物信息学分析,定位潜在水相体系酯合成酶,通过基因克隆表达技术对潜在水相体系酯合成酶进行功能验证,利用分子对接分析酶催化合成脂肪酸乙酯的分子机制。结果:菌株BJQ0011为花园伯克霍尔德氏菌(Burkholderia anthina),基因JFN94_RS18195编码的酶可在水相体系催化合成丁酸乙酯、戊酸乙酯、己酸乙酯、辛酸乙酯和癸酸乙酯,其中催化辛酸合成辛酸乙酯的效率最高。该酶的潜在催化三联体为Ser111-Asp241-His274,Ala22和Met112位点可能参与氧阴离子洞的形成。结合多配体分子对接结果,总结了酶JFN94_RS18195催化合成脂肪酸乙酯的分子过程。结论:本研究结果为白酒重要风味脂肪酸乙酯的合成提供微生物和酶学基础。 展开更多
关键词 酯合成 脂肪酸乙酯 花园伯克霍尔德氏菌 酶 浓香型白酒
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泰国伯克霍尔德氏菌环二鸟苷酸代谢关键酶PdcA的筛选及活性分析
5
作者 王卓 李新 沈锡辉 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第10期169-180,共12页
【目的】筛选泰国伯克霍尔德氏菌环二鸟苷酸(c-di-GMP)代谢关键酶,并对其活性以及突变体的运动性、生物膜形成能力和毒性等进行分析,为相关致病性伯克霍尔德氏菌的防治提供科学依据。【方法】以泰国伯克霍尔德氏菌E264菌株为研究对象,... 【目的】筛选泰国伯克霍尔德氏菌环二鸟苷酸(c-di-GMP)代谢关键酶,并对其活性以及突变体的运动性、生物膜形成能力和毒性等进行分析,为相关致病性伯克霍尔德氏菌的防治提供科学依据。【方法】以泰国伯克霍尔德氏菌E264菌株为研究对象,通过氨基酸多序列比对筛选泰国伯克霍尔德氏菌中的c-di-GMP代谢酶的关键活性位点。采用同源重组方法构建单基因缺失突变体,利用泳动试验和生物膜形成试验筛选c-di-GMP代谢关键酶,并通过体外酶促反应和高效液相色谱分析其酶活性。通过大蜡螟幼虫感染试验检测c-di-GMP代谢关键酶基因缺失对E264菌株毒性的影响。【结果】共筛选到14个c-di-GMP代谢酶,其中BTH_Ⅰ0751和BTH_Ⅰ1393的EAL结构域以及BTH_Ⅰ2871的GGDEF结构域活性位点发生了突变;成功构建了14个c-di-GMP代谢酶基因缺失突变体,并筛选出PdcA(BTH_Ⅱ2363)为c-di-GMP代谢关键酶。结构域分析结果显示,PdcA含有Per-ARNT-Sim(PAS)传感结构域(N-端)和GGDEF结构域(C-端);酶活性分析结果显示,PdcA具有c-di-GMP合成酶活性,能够调节胞内c-di-GMP水平,而且其PAS结构域对酶活性的发挥至关重要。大蜡螟幼虫感染试验发现,pdcA的缺失增强了泰国伯克霍尔德氏菌E264的毒力。【结论】PdcA是泰国伯克霍尔德氏菌E264 c-di-GMP代谢的关键酶,能够调节其运动性、生物膜形成能力以及毒力。PdcA的c-di-GMP合成活性依赖于自身的PAS结构域。 展开更多
关键词 泰国伯克霍尔德氏菌 环二鸟苷酸 PDCA 运动性 生物膜形成能力
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洋葱伯克霍尔德菌复合群的流行病学、临床特点及耐药机制研究进展
6
作者 崔文杰 卢熔琦 刘亚丽 《协和医学杂志》 北大核心 2025年第5期1148-1156,共9页
洋葱伯克霍尔德菌复合群(Burkholderia cepacia complex, Bcc)是一组遗传学相近但表型多样的革兰阴性条件致病菌。该菌群对特定免疫功能缺陷人群(如囊性纤维化、慢性肉芽肿病患者)具有显著致病性,可引发肺部感染、败血症及尿路感染等严... 洋葱伯克霍尔德菌复合群(Burkholderia cepacia complex, Bcc)是一组遗传学相近但表型多样的革兰阴性条件致病菌。该菌群对特定免疫功能缺陷人群(如囊性纤维化、慢性肉芽肿病患者)具有显著致病性,可引发肺部感染、败血症及尿路感染等严重感染性疾病。其中囊性纤维化患者感染Bcc后可进展为急性呼吸衰竭或Cepacia综合征,严重威胁患者生命。值得注意的是,该菌株不仅在医院环境中广泛定植,更因其复杂的多重耐药机制导致临床治疗失败率居高不下。本文系统综述Bcc的流行病学特征、临床特点及耐药机制等,以期为该病原体的精准诊断与感染防控提供参考。 展开更多
关键词 洋葱伯克霍尔德菌复合群 流行病学 多重耐药菌 耐药机制
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基于体温扩增的唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种3种可视化快速检测方法的建立 被引量：1
7
作者 林志伟 王帅 +5 位作者 蔡杰 聂丹丹 李涛 李红娜 杨艳歌 袁飞 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第9期219-225,共7页
为实现食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种(Burkholderia gladioli pv. cocovenenans)的快速检测,基于体温扩增技术——酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA),并根据唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种bonM... 为实现食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种(Burkholderia gladioli pv. cocovenenans)的快速检测,基于体温扩增技术——酶促重组等温扩增(enzymatic recombinase amplification,ERA),并根据唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种bonM基因序列设计和筛选了ERA检测引物和探针,分别建立ERA显色法、荧光法、试纸条法3种可视化快速检测方法,并评估其特异性和灵敏度,以及在市售样品检测适用性和准确性。结果显示,建立的方法对3株唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病型菌株均有扩增,其他常见的食源性致病菌以及其他唐菖蒲伯克霍尔德氏菌均无扩增,说明检测方法的特异性良好。3种方法的检出限均为10^(-2)ng/μL,灵敏度较好。采用建立的3种可视化快速检测方法对15份市售样品进行检测,检出阳性2份,检出率为13.3%。该结果与国标方法的检测结果一致,说明方法具有较好的适用性和准确性。本研究建立的基于体温扩增技术的显色法、荧光法和试纸条法具有较高的特异性及灵敏度,37℃体温扩增15 min左右即可获取检测结果,且裸眼可视,可为食品中唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种的现场可视化快速筛查提供新型简便的策略。 展开更多
关键词 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌椰毒致病变种 酶促等温扩增技术 可视化 快速检测
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吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007产脂肪酶发酵条件优化及酶学特性 被引量：2
8
作者 白凤麟 赵波 +1 位作者 叶建仁 任嘉红 《中国饲料》 北大核心 2024年第17期32-39,共8页
为提高内生生防菌吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007发酵产脂肪酶的能力,并确定该菌株脂肪酶的酶学性质,通过单因子试验和正交设计试验,优化该菌株产脂肪酶的发酵培养条件,初步考察了温度、pH、金属离子和有机溶剂对其活性的影响。结果显示:JK... 为提高内生生防菌吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007发酵产脂肪酶的能力,并确定该菌株脂肪酶的酶学性质,通过单因子试验和正交设计试验,优化该菌株产脂肪酶的发酵培养条件,初步考察了温度、pH、金属离子和有机溶剂对其活性的影响。结果显示:JK-SH007菌株产脂肪酶最优培养基组成及发酵条件为:葡萄糖15 g/L,蛋白胨20 g/L,K2HPO42.5 g/L,花生油400μL/50 mL,初始pH 8.0,发酵温度33℃。该脂肪酶反应最适温度为60℃,且在50~60℃条件下具有良好热稳定性;反应最适pH为8.0,在pH 5.0~10.0活性稳定;该脂肪酶对甲醇、乙醇、乙酸乙酯的耐受性好,具有较高甲醇抗性。研究结果表明,该酶对温度和pH均具有较宽的适应度,具有开发成生物催化剂的潜力。 展开更多
关键词 脂肪酶 吡咯伯克霍尔德氏菌 发酵条件 酶学性质
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基于响应面法的双向伯克霍尔德氏菌BK发酵培养基优化 被引量：1
9
作者 戍柯婷 韩小红 +3 位作者 周柏威 齐文忠 齐欢 吴松青 《中国森林病虫》 北大核心 2024年第5期40-47,共8页
为探究马尾松Pinus massoniana的伴生细菌双向伯克霍尔德氏菌BK菌株的生防潜力,优化其发酵培养基。通过单因素试验筛选得到的最佳碳源为蔗糖和麦芽糖,最佳氮源为酵母粉和胰蛋白胨,最佳无机盐为硫酸镁和柠檬酸三钠;利用Plackett-Burman... 为探究马尾松Pinus massoniana的伴生细菌双向伯克霍尔德氏菌BK菌株的生防潜力,优化其发酵培养基。通过单因素试验筛选得到的最佳碳源为蔗糖和麦芽糖,最佳氮源为酵母粉和胰蛋白胨,最佳无机盐为硫酸镁和柠檬酸三钠;利用Plackett-Burman试验确定3个主要影响因素分别为蔗糖、麦芽糖和装液量;通过最陡爬坡试验结合Box-Behnken设计试验及响应面分析法,以发酵液OD_(600)为响应值,优化培养基配比,获得培养基最佳配方为蔗糖8.0 g/L,麦芽糖12.5 g/L,酵母粉11.3 g/L,硫酸镁0.6 g/L,氯化钠7 g/L;最佳发酵条件为在30℃、150 r/min条件下发酵、装液量25 mL/250 mL、接菌量1%,pH7.0~7.2;根据最佳配比验证,优化后培养基的OD_(600)为1.25,较初始培养基(OD_(600)=0.62)提高1.02倍,与模型预测值相符。研究结果优化了双向伯克霍尔德氏菌BK菌株生产发酵条件,可为后续该菌的实践应用提供理论基础。 展开更多
关键词 双向伯克霍尔德氏菌 单因素试验 PLACKETT-BURMAN设计 OD_(600)
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树木伯克霍尔德氏菌DHR18诱导橡胶树抗病性相关防御酶分析
10
作者 罗佑红 赵欣阳 +3 位作者 蔡海滨 孟祥佳 周燚 涂敏 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第10期2129-2137,共9页
为探究树木伯克霍尔德氏菌(Burkholderia arboris)DHR18诱导橡胶树对胶孢炭疽菌优势种(Colletotrichum siamense)的抗性,以橡胶树苗GT1为材料,检测不同浓度的树木伯克霍尔德氏菌DHR18发酵液处理以及DHR18与胶孢炭疽菌CH-1协同处理下橡... 为探究树木伯克霍尔德氏菌(Burkholderia arboris)DHR18诱导橡胶树对胶孢炭疽菌优势种(Colletotrichum siamense)的抗性,以橡胶树苗GT1为材料,检测不同浓度的树木伯克霍尔德氏菌DHR18发酵液处理以及DHR18与胶孢炭疽菌CH-1协同处理下橡胶树叶片中多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、过氧化物酶(peroxidase,POD)、苯丙氨酸解氨酶(phenylalanin ammonialyase,PAL)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)5种防御相关酶的活性变化。结果表明:经3个浓度(1×10^(8)、1×10^(7)、1×10^(6) CFU/mL)的DHR18发酵液处理后,橡胶树叶片中CAT、POD、PAL、SOD和PPO活性均高于对照,其中1×107CFU/mL浓度处理的5种防御酶活性最高,防御酶活峰值分别为1 009.14、29 138.67、110.24、902.42、148.00 U/g,分别是对照的2.68倍、3.35倍、1.88倍、3.97倍、4.51倍。树木伯克霍尔德氏菌DHR18与胶孢炭疽菌CH-1协同处理下,先喷施DHR18处理组的5种防御酶活性均高于其他处理组,显著高于对照,其CAT、POD、PAL、SOD和PPO活性峰值分别为1 230.85、45 504.67、117.53、1342.17、134.40 U/g,分别是对照的4.56倍、3.10倍、2.04倍、3.28倍、5.98倍;菌株DHR18对胶孢炭疽菌的平板抑制率为71.56%,在橡胶树苗上对胶孢炭疽病预防效果为81.79%,防治效果为44.35%。研究结果表明,树木伯克霍尔德氏菌DHR18可促使橡胶树防御相关酶的活性提高,诱导橡胶树产生系统抗性,诱导抗病性可能是树木伯克霍尔德氏菌DHR18拮抗胶孢炭疽病的原因之一。 展开更多
关键词 伯克霍尔德氏菌 橡胶树 胶孢炭疽菌 诱导抗病性 防御酶
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洋葱伯克霍尔德氏菌Lu10-1产生抗菌活性物质的发酵培养基和发酵条件优化 被引量：4
11
作者 查传勇 董法宝 +2 位作者 杨悦 冀宪领 牟志美 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期229-235,共7页
洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia)Lu10-1是从桑叶中分离得到的一株具有抗菌及促进植物生长等多种生物学功能的内生细菌。利用基于统计学的响应面法(response surface methodology,RSM)对影响该菌产生抗细菌活性物质的发酵培养... 洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia)Lu10-1是从桑叶中分离得到的一株具有抗菌及促进植物生长等多种生物学功能的内生细菌。利用基于统计学的响应面法(response surface methodology,RSM)对影响该菌产生抗细菌活性物质的发酵培养基组成和发酵培养条件进行了优化。部分重复因子试验表明,酵母浸粉和氯化钠是培养基组分中的主要影响因子,其中酵母浸粉为正效应,氯化钠为负影响;结合最陡爬坡路径逼近最大响应区域和中心组合设计及响应面分析,确定了培养基中主要配方的最佳质量浓度为蔗糖17.0 g/L、酵母浸粉5.855 g/L、氯化钠4.519 g/L、磷酸二氢钾0.2 g/L。通过PB(plackeet-burman)试验发现接种量和发酵温度是该菌株产生抗菌活性物质发酵条件中的主要影响因子,经中心组合设计法优化的最佳发酵条件为:接种量0.027 7 mL/mL,摇瓶装液量100 mL,发酵温度30.29℃,培养基初始pH6.2,培养时间42 h。 展开更多
关键词 桑叶 内生细菌 洋葱伯克霍尔德氏菌Lu10-1菌株 抗细菌活性物质 响应面法 培养基 培养条件
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洋葱伯克霍尔德氏菌Lu10-1产脂肪酶发酵条件优化及酶学性质研究 被引量：3
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作者 张瑶 路国兵 +2 位作者 周波 王冰 牟志美 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期190-196,共7页
旨在对洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia)Lu10-1产脂肪酶的发酵条件及酶学性质进行研究。通过单因素和正交实验探讨了碳源、氮源、诱导物、初始p H值、温度等主要发酵参数的影响,并初步考察了温度、p H、金属离子和有机溶剂等... 旨在对洋葱伯克霍尔德氏菌(Burkholderia cepacia)Lu10-1产脂肪酶的发酵条件及酶学性质进行研究。通过单因素和正交实验探讨了碳源、氮源、诱导物、初始p H值、温度等主要发酵参数的影响,并初步考察了温度、p H、金属离子和有机溶剂等对其催化反应的影响。结果表明,B.cepacia Lu10-1产脂肪酶最佳培养基组成和发酵参数为:可溶性淀粉1.5%,蛋白胨1.5%,橄榄油3 g/L,K2HPO4 2 g/L,发酵温度32℃,初始p H 9.0,培养48 h酶活达12.4 U/m L,比初始酶活提高了2.7倍。酶的最适温度和p H值分别为60℃和9,在60℃以下保持100 h酶活仍保持在80%以上,在p H5.0-10.0之间活性稳定,对甲醇、乙醇等有机溶剂耐受性好。 展开更多
关键词 脂肪酶 洋葱伯克霍尔德氏菌 发酵条件优化 酶学性质
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洋葱伯克霍尔德氏菌L68邻苯二酚2,3-双加氧酶基因克隆、表达和纯化 被引量：2
13
作者 吕鹏 刘大桅 张长铠 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期11-14,共4页
采用自行设计的引物,从洋葱伯克霍尔德氏菌L68中PCR扩增得到phnE(邻苯二酚2,3-双加氧酶)基因,亚克隆到高表达载体pET 32a上,转入表达菌株中。经双向测序,证实构建过程中未出现突变。重组子经IPTG诱导后,可以表达有活性的重组双加氧酶。... 采用自行设计的引物,从洋葱伯克霍尔德氏菌L68中PCR扩增得到phnE(邻苯二酚2,3-双加氧酶)基因,亚克隆到高表达载体pET 32a上,转入表达菌株中。经双向测序,证实构建过程中未出现突变。重组子经IPTG诱导后,可以表达有活性的重组双加氧酶。选择26℃进行重组蛋白诱导。薄层扫描显示,表达重组蛋白总量最高可占总蛋白的64.92%。利用金属螯合层析对重组蛋白进行了一步纯化,SDS-PAGE结果显示,重组蛋白纯度达到95%。 展开更多
关键词 洋葱伯克霍尔德氏菌 邻苯二酚2 3-双加氧酶 克隆表达 金属螯合层析
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新洋葱伯克霍尔德菌NSM-05产抗菌物质的培养条件 被引量：2
14
作者 吴义飞 吴小芹 《林业科技开发》 北大核心 2014年第4期83-86,共4页
为了提高拮抗细菌新洋葱伯克霍尔德菌NSM-05产生抗菌物质的能力,分别采用单因素、正交试验和实验条件的优化等方法对NSM-05菌株产生抗菌物质的最佳培养条件进行研究。结果表明,NSM-05菌株在产生抗菌物质最多的培养条件为:玉米粉质量分数... 为了提高拮抗细菌新洋葱伯克霍尔德菌NSM-05产生抗菌物质的能力,分别采用单因素、正交试验和实验条件的优化等方法对NSM-05菌株产生抗菌物质的最佳培养条件进行研究。结果表明,NSM-05菌株在产生抗菌物质最多的培养条件为:玉米粉质量分数为0.45%,蛋白胨为1.0%,NaCl为0.75%,MgSO4为0.25%,pH为6.5,培养温度25℃,通气量≥50%,摇床速度200 r/min,培养时间为48 h。 展开更多
关键词 洋葱伯克霍尔德菌 培养条件 拮抗物质
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156株洋葱伯克霍尔德菌的临床分布及耐药性分析 被引量：24
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作者 刘义刚 陶传敏 +4 位作者 陈文昭 陈慧莉 康梅 陈知行 范红 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2008年第1期53-55,共3页
目的了解2003--2006年我院临床分离的洋葱伯克霍尔德菌的标本来源、临床分布和耐药性。方法用MicroScanWalkAway-4-0全自动微生物鉴定和药敏系统对我院临床分离的洋葱伯克霍尔德菌进行鉴定和药敏试验，并分析结果。结果20032006年共分离... 目的了解2003--2006年我院临床分离的洋葱伯克霍尔德菌的标本来源、临床分布和耐药性。方法用MicroScanWalkAway-4-0全自动微生物鉴定和药敏系统对我院临床分离的洋葱伯克霍尔德菌进行鉴定和药敏试验，并分析结果。结果20032006年共分离出156株洋葱伯克霍尔德菌，痰标本中分离菌株数占84．0％（131／156），血液中占5．1％（8/156）。药敏试验结果显示，多数测试的抗菌药物耐药率均大于50％；耐药率小于50％有哌拉西林他唑巴坦（4．8％～21．4％）、复方磺胺甲嗯唑（5．6％～23．8％）和头孢他啶（17．2％～40．0％）。结论洋葱伯克霍尔德菌对多数抗菌药物具有较高的耐药性，临床抗感染治疗应以分离菌株的体外抗菌药物敏感性为依据。 展开更多
关键词 洋葱伯克霍尔德菌 耐药性 抗生素
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洋葱伯克霍尔德菌医院感染的分布及耐药性分析 被引量：12
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作者 石娜 徐卫 +4 位作者 舒雪芹 周铁丽 徐莉珠 廖洪菊 金嵘 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期369-370,共2页
目的了解我院洋葱伯克霍尔德菌医院感染的分布及耐药趋势,为临床治疗及医院感染的控制提供参考.方法收集我院1999年1月～2003年12月洋葱伯克霍尔德菌医院感染共63例,采用全自动微生物鉴定仪进行细菌鉴定及药敏试验.结果洋葱伯克霍尔德... 目的了解我院洋葱伯克霍尔德菌医院感染的分布及耐药趋势,为临床治疗及医院感染的控制提供参考.方法收集我院1999年1月～2003年12月洋葱伯克霍尔德菌医院感染共63例,采用全自动微生物鉴定仪进行细菌鉴定及药敏试验.结果洋葱伯克霍尔德菌对多种抗菌药物耐药,对环丙沙星、头孢他啶、头孢噻肟、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率较低,分别为4.8%、10.2%、15.3%、18.2%.结论洋葱伯克霍尔德菌是一种高度天然耐药的细菌,治疗上应根据药敏结果选用抗菌药物. 展开更多
关键词 洋葱伯克霍尔德菌 医院感染 耐药性
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吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007对杨树根际微生物数量及功能多样性的影响 被引量：12
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作者 任嘉红 李浩 +2 位作者 刘辉 叶建仁 吴小芹 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第5期126-133,共8页
【目的】为揭示生防菌吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007进入自然环境后对周围的微生态因子是否存在威胁,对其进入自然环境后的微生态效应和生物安全性做出正确评估。【方法】采用固体平板法研究JK-SH007菌株对美洲黑杨盆栽苗土壤微生物种群... 【目的】为揭示生防菌吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007进入自然环境后对周围的微生态因子是否存在威胁,对其进入自然环境后的微生态效应和生物安全性做出正确评估。【方法】采用固体平板法研究JK-SH007菌株对美洲黑杨盆栽苗土壤微生物种群数量的影响,对4种主要土壤酶(酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、脱氢酶、转化酶)的活力进行测定,并通过Biolog ECO微孔板法分析JK-SH007菌株对美洲黑杨土壤功能多样性的影响。【结果】从整体趋势来看,在美洲黑杨根际引入JK-SH007菌株后,随着时间延长,根际土壤中的细菌、放线菌、真菌数量逐渐高于对照,且差异显著,在接种后150天接种处理达到峰值(3.36×109cfu·g^(-1)干土;7.50×107cfu·g^(-1)干土;1.14×107cfu·g^(-1)干土),随后显著降低,但仍优于未接种处理;JK-SH007处理后土壤酶活性均有所增强,土壤酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、脱氢酶、转化酶活性均大于对照,其中,接种对碱性磷酸酶、转化酶活性的促进最为明显;根际土壤中微生物的AWCD值(除了在接种后30,90天时),接种处理和未接种处理的AWCD值相当,几乎持平;而接种后10,20,60,120,150,180天时接种处理土样微生物的AWCD值均高于CK;土壤微生物多样性(Shannon指数、Simpson指数和Mc Intosh指数)在接种前期没有明显的规律性,与对照几乎持平,120,150,180天时,接种JK-SH007处理的Simpson指数、Shannon指数、Mc Intosh指数均高于对照,但差异不显著。【结论】在根际引入JK-SH007对美洲黑杨根际土壤微生物的整体活性和功能多样性的提高有一定的促进作用,在一定程度上丰富了土壤微生物种群,有利于保持和促进土壤肥力和健康状况,但这些影响随着时间的延长而减弱;同时也说明JK-SH007菌株的施入不会对环境中土著微生物构成威胁或威胁较小,符合Bcc菌的安全应用范围,进一步证明该菌株的生物安全性,为将来该菌株的野外应用及生防菌剂的开发奠定基础。 展开更多
关键词 美洲黑杨 吡咯伯克霍尔德氏菌 微生物种群 安全性
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吡咯伯克霍尔德氏菌JK-SH007的发酵条件及其对杨树溃疡病的防治效果 被引量：19
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作者 任嘉红 班虎栋 +1 位作者 叶建仁 李浩 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2010年第3期300-306,共7页
本文研究了拮抗细菌吡咯伯克霍尔德氏菌Burkholderia pyrrocinia菌株JK-SH007产抗菌物质的最佳发酵条件及其对杨树溃疡病的野外防治效果。结果表明,牛肉膏、蛋白胨是发酵培养基中最佳营养物质,有利于菌株JK-SH007抗菌物质的产生;培养基... 本文研究了拮抗细菌吡咯伯克霍尔德氏菌Burkholderia pyrrocinia菌株JK-SH007产抗菌物质的最佳发酵条件及其对杨树溃疡病的野外防治效果。结果表明,牛肉膏、蛋白胨是发酵培养基中最佳营养物质,有利于菌株JK-SH007抗菌物质的产生;培养基初始pH、培养时间、温度、培养体积、不同牛肉膏、蛋白胨组合等对菌株生长及其抗菌物质的产生有明显的影响,初始pH7、牛肉膏2g、蛋白胨20g、以1/2装液量装液、30℃振荡培养36h可获得较高产量的胞外分泌型抗菌物质;菌株JK-SH007的发酵液对杨树溃疡病的野外防效可达40.54%。 展开更多
关键词 杨树溃疡病 吡咯伯克霍尔德氏菌 抗菌物质 发酵 防治效果
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院内下呼吸道感染洋葱伯克霍尔德菌的耐药性分析 被引量：8
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作者 石娜 徐卫 +3 位作者 薛利霞 舒雪芹 温鸿 陈永平 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第6期972-973,共2页
目的:了解院内洋葱伯克霍尔德菌下呼吸道感染的危险因素和耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法:收集2004年1月至2006年6月院内洋葱伯克霍尔德菌下呼吸道感染139例,菌株采用全自动微生物鉴定仪进行细菌鉴定及药敏试验。结果:... 目的:了解院内洋葱伯克霍尔德菌下呼吸道感染的危险因素和耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法:收集2004年1月至2006年6月院内洋葱伯克霍尔德菌下呼吸道感染139例,菌株采用全自动微生物鉴定仪进行细菌鉴定及药敏试验。结果:洋葱伯克霍尔德菌对多种抗菌药物耐药,仅复方新诺明、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、美罗培南的耐药率较低,分别为5.8%、15.4%、16.5%、18.4%、24.5%、27.0%。结论:院内下呼吸道感染的洋葱伯克霍尔德菌高度耐药,治疗上应根据药敏选用抗菌药物。 展开更多
关键词 交叉感染 抗药性 洋葱伯克霍尔德菌 微生物
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重症监护室洋葱伯克霍尔德菌医院肺部感染及耐药性分析 被引量：17
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作者 袁小玲 高绍衍 +2 位作者 黄宇筠 区秀燕 缪炯矞 《中国抗感染化疗杂志》 2005年第2期102-105,共4页
目的调查重症监护室(ICU)洋葱伯克霍尔德菌医院肺部感染情况及病原菌耐药特点,为其防治提供依据.方法对2002年11月-2004年8月出院患者在ICU内洋葱伯克霍尔德菌医院肺部感染病例进行回顾性分析,用微量稀释法测定18种抗菌药物对洋葱伯克... 目的调查重症监护室(ICU)洋葱伯克霍尔德菌医院肺部感染情况及病原菌耐药特点,为其防治提供依据.方法对2002年11月-2004年8月出院患者在ICU内洋葱伯克霍尔德菌医院肺部感染病例进行回顾性分析,用微量稀释法测定18种抗菌药物对洋葱伯克霍尔德菌的MIC.结果37例洋葱伯克霍尔德菌医院肺部感染占同期医院肺部感染病例的3.3%.多发生于老年人,平均(64±10)岁,均有2～5种原发病或伴随疾病,所有患者均使用过抗菌药物,32例(86.5%)接受人工气道机械通气治疗,28例(75.7%)接受过纤维支气管镜(纤支镜)诊断及治疗性操作,31例(83.8%)入住ICU时间＞2周,18种抗菌药物药敏试验结果显示哌拉西林-三唑巴坦、美罗培南和复方磺胺甲噁唑的体外活性最高,敏感率均为100.0%,其次为头孢他啶、头孢唑肟,敏感率分别是78.4%和61.1%,其余均＜30%.结论洋葱伯克霍尔德菌具有多重耐药性,且往往与多种医院肺部感染菌并存,ICU洋葱伯克霍尔德菌医院肺部感染应引起足够重视,特别是对接受呼吸道侵袭性操作的患者,应重视对建立人工气道后早期病原学检查、呼吸管路和纤支镜的消毒管理及病原菌耐药性监测,并根据药敏试验结果选用如哌拉西林-三唑巴坦、美罗培南和复方磺胺甲噁唑、头孢他啶和头孢唑肟等敏感抗菌药物,不宜选用亚胺培南、氨基苷类及其他β内酰胺酶类抗菌药物. 展开更多
关键词 洋葱伯克霍尔德菌 医院肺部感染 重症监护室 耐药性
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