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携带新德里金属β-内酰胺酶的猪源大肠杆菌全基因组测序及植物提取物药物筛选 被引量:2
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作者 李海利 张青娴 +5 位作者 朱文豪 游一 王治方 郎利敏 张立宪 王克领 《中国兽药杂志》 2023年第6期23-34,共12页
为了解大肠杆菌携带新德里金属β-内酰胺酶(New Delhi metallo-β-lactamase,NDM)NDM耐药基因情况及筛选敏感植物提取物。采用16S rRNA菌种鉴定,PCR筛查菌耐药基因,bla NDM、bla TEM和AmpC酶耐药基因的确认,全基因组测序,BLAST和MEGA软... 为了解大肠杆菌携带新德里金属β-内酰胺酶(New Delhi metallo-β-lactamase,NDM)NDM耐药基因情况及筛选敏感植物提取物。采用16S rRNA菌种鉴定,PCR筛查菌耐药基因,bla NDM、bla TEM和AmpC酶耐药基因的确认,全基因组测序,BLAST和MEGA软件对序列进行生物信息学分析、系统进化树分析、NDM亚型鉴定和6种植物提取物药敏药物筛选研究。结果表明,从2021年(1-12月)临床猪腹泻病例中分离鉴定的91株大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)中鉴定出1株同时携带新德里金属β-内酰胺酶NDM4、NDM5和β内酰胺酶blaTEM、AmpC酶的大肠杆菌(HN2187)。对其进行11种抗生素和6种植物提取物药物敏感性测试,结果显示HN2187菌株对其均耐药。而HN2187对血根碱、贯叶连翘提取物敏感,对黄芩、姜黄素、千里光和大蒜提取物耐药。HN2187产B类酶,携带NDM4、NDM5、bla TEM、AmpC酶耐药基因,其中bla NDM-4位于质粒pNDM4-HN2187(Plasmid B)上,bla NDM-5位于质粒pNDM5-HN2187(Plasmid A)上,bla TEM1位于质粒pTEM1-HN2187(Plasmid B)上,AmpC酶耐药基因位于染色体上,分别介导bla NDM-4、bla NDM-5、bla TEM和AmpC耐药基因,是耐药菌传播的重要载体。以上研究表明,携带NDM4和NDM5的多重耐药菌已在养殖场传播和流行,应加强该类耐药基因的流行调查、监测和新药物研究,为临床超级细菌和多重耐药菌感染的流行和防治提供理论基础。 展开更多
关键词 碳青霉烯酶 Β内酰胺酶 新德里金属β-内酰胺酶 NDM5 NDM4 blaTEM AMPC 大肠埃希氏菌 细菌耐药
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产新德里金属β-内酰胺酶大肠埃希菌耐碳青霉烯类药物相关机制研究和分子分型 被引量:4
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作者 傅芬蕊 张娅 +2 位作者 潘玉红 曹颖平 郑培烝 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期53-59,共7页
目的研究某三甲医院临床分离的产新德里金属β-内酰胺酶(NDM)大肠埃希菌的耐药机制和分子流行病学特征。方法在某三甲医院收集的耐碳青霉烯类大肠埃希菌中利用聚合酶链反应(PCR)筛查是否携带NDM基因,通过测序确定NDM型别并进一步检测其... 目的研究某三甲医院临床分离的产新德里金属β-内酰胺酶(NDM)大肠埃希菌的耐药机制和分子流行病学特征。方法在某三甲医院收集的耐碳青霉烯类大肠埃希菌中利用聚合酶链反应(PCR)筛查是否携带NDM基因,通过测序确定NDM型别并进一步检测其它碳青霉烯酶相关基因和广谱β-内酰胺酶类耐药基因。通过载体构建和表达研究NDM-1、NDM-6及NDM-9对亚胺培南的水解能力。采用多位点序列分型(MLST)对产NDM大肠埃希菌进行分子分型。结果共筛选出8株携带NDM大肠埃希菌,其中2株为NDM-9型,6株为NDM-6型。4株大肠埃希菌同时携带NDM-6、TEM和CTX-M-1基因,1株同时携带NDM-6、TEM和CTX-M-9基因。携带NDM-1、NDM-6与NDM-9重组菌对亚胺培南均耐药,最小抑菌浓度(MIC)分别为32μg/mL、128μg/mL和64μg/mL。产NDM大肠埃希菌MLST分型结果为ST226、ST648和ST1284型各1株,ST101型5株,此5株均来源于神经内科。结论首次发现同时携带NDM-6、TEM和CTX-M-1基因和携带NDM-6、TEM和CTX-M-9基因的大肠埃希菌,NDM-6、NDM-9对亚胺培南的耐药性比NDM-1强,应引起重视。MLST分型结果提示某三甲医院可能存在耐碳青霉烯类大肠埃希菌的院内局部传播。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 耐药 新德里金属β-内酰胺酶 多位点序列分型
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产金属β-内酰胺酶猪源ST201型多杀性巴氏杆菌的耐药性和致病性分析
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作者 杨荣荣 张婷 +4 位作者 唐萍萍 何爽方 赵苗苗 雷连成 张付贤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期5692-5705,共14页
为探究湖北荆州某生猪养殖企业育肥猪呼吸道疾病的致病原,采集病猪肺组织进行病原的筛查和分离鉴定。本研究对分离菌株进行形态学观察、生理生化、16S rDNA基因序列测定、血清型分型、多位点序列分析、药物敏感性试验、耐药基因测序分... 为探究湖北荆州某生猪养殖企业育肥猪呼吸道疾病的致病原,采集病猪肺组织进行病原的筛查和分离鉴定。本研究对分离菌株进行形态学观察、生理生化、16S rDNA基因序列测定、血清型分型、多位点序列分析、药物敏感性试验、耐药基因测序分析以及动物致病性试验。结果显示,分离菌株Pm0525为革兰阴性短杆菌;生化试验、PCR和16S rDNA测序鉴定为多杀性巴氏杆菌。该菌为荚膜血清型A型,分子分型为ST201型,与ST1615型聚为一支;分离菌株对庆大霉素、卡那霉素、麦迪霉素等13种抗生素敏感,对氯霉素、克林霉素、头孢呋辛、头孢他啶和四环素耐药;分离菌株具有中等生物被膜形成能力,携带SulⅠ、SulⅡ、tetA和bla-TEM四种耐药基因,可通过产金属β-内酰胺酶(MBL)方式发挥抗β-内酰胺类抗生素的作用。中药药敏试验结果显示,该分离菌株对中药黄连呈现明显的敏感性。该分离株携带18种毒力基因,并对小鼠具有较强的致病性。本研究系统性分析了猪源多杀性巴氏杆菌的血清型、分子分型、药物敏感性和致病性,为进一步研究多杀性巴氏杆菌感染的致病机制、防控和精准施治提供科学依据和数据参考。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 金属β-内酰胺酶 MLST分析 耐药性 致病性
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亚胺培南耐药铜绿假单胞菌的金属β-内酰胺酶检测 被引量:23
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作者 余广超 徐霖 +7 位作者 袁广卿 张甜 陈康 蒋岗 姜余琴 许沙沙 常彦敏 曹开源 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期223-227,共5页
目的了解金属β-内酰胺酶在广州地区铜绿假单胞菌中的流行状况及其流行亚型,完善广州地区金属β-内酰胺酶的分子流行病学资料。方法采用双纸片协同法和双纸片增效法对164株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌筛选金属β-内酰胺酶表型阳性的菌株... 目的了解金属β-内酰胺酶在广州地区铜绿假单胞菌中的流行状况及其流行亚型,完善广州地区金属β-内酰胺酶的分子流行病学资料。方法采用双纸片协同法和双纸片增效法对164株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌筛选金属β-内酰胺酶表型阳性的菌株,采用PCR检测5类金属β-内酰胺酶的编码基因(IMP家族、VIM家族、GIM-1、SPM-1和SIM-1),利用生物信息学的方法对检测到的金属β-内酰胺酶亚型进行比对分析并制作分子进化树。结果 164株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌中筛选出22株金属β-内酰胺酶表型阳性的菌株,IMP阳性15株(9.1%),其中11株为IMP-9亚型,另外4株携带一个新的亚型,命名为IMP-25,VIM阳性5株(3.0%),均为VIM-2亚型,未检测到GIM-1、SPM-1和SIM-1型金属β-内酰胺酶。结论广州地区铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶的基因型已经出现多型化的特征,同时存在IMP型和VIM型金属β-内酰胺酶的流行,本次研究发现了一个新的金属β-内酰胺酶亚型(IMP-25),为IMP家族金属β-内酰胺酶的多样性及其分子流行病学资料提供了新的信息。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 金属β-内酰胺酶 耐药基因
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259株铜绿假单胞菌耐药性及产金属β-内酰胺酶情况分析 被引量:9
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作者 朱立军 任利珍 +2 位作者 干迪郁 郭慧群 姜映霞 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期240-240,I0001-I0003,共4页
目的分析院内感染铜绿假单胞菌的药敏谱和金属β-内酰胺酶的产生情况。方法对2009年度医院内感染铜绿假单胞菌259株,用VITEK 2 compact全自动微生物分析系统检测其对17种抗生素的药敏谱,用双纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶。结果铜绿... 目的分析院内感染铜绿假单胞菌的药敏谱和金属β-内酰胺酶的产生情况。方法对2009年度医院内感染铜绿假单胞菌259株,用VITEK 2 compact全自动微生物分析系统检测其对17种抗生素的药敏谱,用双纸片协同试验检测金属β-内酰胺酶。结果铜绿假单胞菌对AMP、FTN、CTT、SAM等耐药率较高,对TOB、AMK、GEN、TZP等较敏感;金属β-内酰胺酶携带率为5.0%,产酶菌株耐药情况严重。结论结合细菌药敏谱慎用碳青霉烯类,合理利用抗生素,对治愈铜绿假单胞菌引起的感染及控制产金属β-内酰胺酶菌株的流行具有重要意义。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 金属β-内酰胺酶 耐药性
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耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶基因检测及其与整合子的关系研究 被引量:9
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作者 张娟 叶聪秀 +2 位作者 曹开源 刘配辰 黄小荣 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期705-710,共6页
目的了解临床分离铜绿假单胞菌对常用抗生素的耐药特征;调查金属β-内酰胺酶在铜绿假单胞菌的流行状况和基因型以及与整合子之间的关系。方法收集广东省4家三甲医院临床分离的铜绿假单胞菌,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验;双纸片协同法... 目的了解临床分离铜绿假单胞菌对常用抗生素的耐药特征;调查金属β-内酰胺酶在铜绿假单胞菌的流行状况和基因型以及与整合子之间的关系。方法收集广东省4家三甲医院临床分离的铜绿假单胞菌,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验;双纸片协同法和增效法筛选金属β-内酰胺酶表型阳性菌株;设计合成金属β-内酰胺酶和整合子的引物序列进行PCR扩增和测序分析,检测金属β-内酰胺酶基因型并分析其与整合子之间的关系。结果 287株铜绿假单胞菌对11种抗生素的耐药率分别为:亚胺培南(33.80%),美罗培南(33.45%)、头孢他啶(27.87%)、头孢吡肟(36.24%)、庆大霉素(45.30%)、阿米卡星(36.94%)、环丙沙星(33.10%)、左氧氟沙星(37.63%)、氨曲南(47.39%)、哌拉西林(35.19%)、哌拉西林/三唑巴坦(28.57%);多重耐药菌占34.84%(100/287),泛耐药菌株占9.41%(27/287);共有9株铜绿假单胞菌呈金属β-内酰胺酶表型阳性,其中2株产IMP-9型MBL,1株产IMP-25型MBL,4株产VIM-2型MBL;有8株金属β-内酰胺酶表型阳性菌株携带了I类整合子,但只有2株成功扩出可变区,其中1株携带了IMP-9基因。结论铜绿假单胞菌耐药情况严重,本地区铜绿假单胞菌中MBLs的基因型以IMP-9、IMP-25和VIM-2为主;MBLs的基因环境较为复杂,部分MBLs为整合子所携带。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 碳青霉烯类 金属β-内酰胺酶 整合子
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耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的耐药性分析及金属β-内酰胺酶的检测 被引量:6
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作者 雷金娥 袁莉 +3 位作者 李和平 马列婷 王亚文 曾晓艳 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期129-130,F0003,共3页
目的了解我院鲍曼不动杆菌的耐药性及其产金属β-内酰胺酶(MBLs)的情况。方法采用K-B纸片扩散法测定13种抗菌药物的耐药性;分别用金属螯合剂乙二胺四乙酸(EDTA)和2-巯基丙酸抑制试验测定鲍曼不动杆菌产金属β-内酰胺酶的情况。结果91株... 目的了解我院鲍曼不动杆菌的耐药性及其产金属β-内酰胺酶(MBLs)的情况。方法采用K-B纸片扩散法测定13种抗菌药物的耐药性;分别用金属螯合剂乙二胺四乙酸(EDTA)和2-巯基丙酸抑制试验测定鲍曼不动杆菌产金属β-内酰胺酶的情况。结果91株鲍曼不动杆菌中有23株对亚胺培南耐药,其仅对阿米卡星和米诺环素耐药率较低,分别为21.7%和26.1%;对头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦和环丙沙星部分耐药,耐药率分别为52.2%、43.5%和65.2%;对头孢吡肟耐药率非常高(91.3%);对氨苄西林/舒巴坦、庆大霉素、头孢噻肟、头孢他啶、复方磺胺和美罗培南全部耐药;与亚胺培南敏感组比较,除阿米卡星、环丙沙星、米诺环素外,亚胺培南耐药组对其他抗生素的敏感率明显降低、耐药率明显增高(P<0.05)。23株耐亚胺培南鲍曼不动杆菌金属β-内酰胺酶的检出率为65.2%(15/23)。结论耐亚胺培南不动杆菌的耐药现象非常严重,临床应根据药敏结果合理选用抗生素;金属β-内酰胺酶的产生是鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药的重要机制之一,实验室应加强对产酶菌株的监测。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 金属β-内酰胺酶 亚胺培南 耐药性
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金属β-内酰胺酶——抗感染治疗面临的新挑战 被引量:10
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作者 蒋晓飞 洪秀华 倪语星 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期700-704,共5页
碳青霉烯类抗生素是当今抗菌谱最广、治疗产 β 内酰胺酶革兰氏阴性杆菌感染疗效最好的 β 内酰胺类抗生素。某些细菌产生的金属 β 内酰胺酶 (metallo β lactamase,简称金属酶 )能水解碳青霉烯 ,导致产酶菌的耐药谱增宽 ,已引起临床... 碳青霉烯类抗生素是当今抗菌谱最广、治疗产 β 内酰胺酶革兰氏阴性杆菌感染疗效最好的 β 内酰胺类抗生素。某些细菌产生的金属 β 内酰胺酶 (metallo β lactamase,简称金属酶 )能水解碳青霉烯 ,导致产酶菌的耐药谱增宽 ,已引起临床重视。其中由染色体编码的金属酶多分布于临床较少见的细菌中 ;而获得性金属酶不仅可分布于铜绿假单胞菌和肠杆菌科细菌中 ,还能够通过质粒、整合子等水平扩散 ,大大增强了播散的能力及对临床的威胁程度。 展开更多
关键词 金属β-内酰胺酶 碳青霉烯 革兰氏阴性杆菌 治疗
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产金属β-内酰胺酶嗜麦芽寡养单胞菌的研究 被引量:8
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作者 卓超 钱元恕 +3 位作者 李崇智 刘鸿渝 郑行萍 陈海 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期753-756,760,共5页
目的探讨嗜麦芽寡养单胞菌所产金属β-内酰胺酶的酶学特性及分子生物学特征。方法采用纸片协同法筛选产金属β-内酰胺酶菌株;测定产酶株所产β-内酰胺酶对亚胺培南的稳定性和丝氨酸β-内酰胺酶、金属β-内酰胺酶抑制剂的抑酶保护效应;... 目的探讨嗜麦芽寡养单胞菌所产金属β-内酰胺酶的酶学特性及分子生物学特征。方法采用纸片协同法筛选产金属β-内酰胺酶菌株;测定产酶株所产β-内酰胺酶对亚胺培南的稳定性和丝氨酸β-内酰胺酶、金属β-内酰胺酶抑制剂的抑酶保护效应;检测金属β-内酰胺酶的等电点;用PCR法检测金属β-内酰胺酶全基因,并测序。结果纸片协同法筛选产金属β-内酰胺酶菌株4株,药敏试验显示对多种抗菌药物耐药。酶稳定性试验显示,4株产酶菌产碳青霉烯水解酶。酶抑制试验表明,克拉维酸对这4株菌所产酶无抑酶保护效应,而金属β-内酰胺酶抑制剂EDTA对4株菌所产酶有抑制作用,且酶活性能被ZnCl2复活。等电聚焦显示,2株菌(710、750)产的碳青霉烯水解酶pI为6.6,1株菌(603)的pI为6.2,EDTA抑制试验证实均为金属β-内酰胺酶。PCR结果显示,以4株细菌基因组DNA为模板,用所设计的金属β-内酰胺酶全基因引物进行PCR扩增,2株(750,710)扩增结果为阳性,进行序列分析,均为867bp。经GeneBank网上同源性比较,发现与金属酶L1的编码基因blaS(注册号AJ291672.1)的核苷酸序列同源性均为99%。结论嗜麦芽寡养单胞菌710和750号产L1型金属β-内酰胺酶;603号可能产非L1型金属β-内酰胺酶。 展开更多
关键词 嗜麦芽寡养单胞菌 亚胺培南 金属β-内酰胺酶 抑酶保护效应 耐药性
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广州地区产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的流行病学研究 被引量:6
10
作者 潘婉仪 黄宪章 +3 位作者 杨洁 庞雪云 周强 庄俊华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1893-1895,共3页
目的调查广州地区耐亚胺培南铜绿假单胞菌产金属酶的流行情况,以及产酶菌的耐药谱,以期指导临床用药。方法用VITEK-32型全自动细菌分析系统筛选出来自广州4家三甲医院20052007年耐亚胺培南和(或)头孢他啶的铜绿假单胞菌,琼脂糖平皿二... 目的调查广州地区耐亚胺培南铜绿假单胞菌产金属酶的流行情况,以及产酶菌的耐药谱,以期指导临床用药。方法用VITEK-32型全自动细菌分析系统筛选出来自广州4家三甲医院20052007年耐亚胺培南和(或)头孢他啶的铜绿假单胞菌,琼脂糖平皿二倍稀释法测定铜绿假单胞菌对常用抗生素的MIC值,PCR技术检测编码金属酶的IMP、VIM、GIM-1和SPM-1共4种基因型。结果 144株受试菌中PCR检测金属β-内酰胺酶阳性26株,其中扩增IMP型阳性25株,VIM型阳性1株。未检测出GIM-1和SPM-1型金属酶。产金属酶菌株对多种抗生素高度耐药且耐药率明显高于非产金属酶菌株(P〈0.001)。结论本地区中分离产金属酶的铜绿假单胞菌以IMP型为主,对临床常用的多种抗生素具有高度耐药性,且呈水平传播趋势,应加强对产酶株的临床检测和监控。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 金属β-内酰胺酶 耐药分析
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临床分离革兰阴性杆菌耐药性分析及金属β-内酰胺酶检测 被引量:13
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作者 邹明祥 范学工 +3 位作者 张艳亮 廖经忠 刘文恩 李宪 《中国感染控制杂志》 CAS 2006年第3期239-243,共5页
目的了解临床标本分离的革兰阴性(G^-)杆菌的耐药性及产金属β-内酰胺酶现状,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法应用MicroScan及TDR-100微生物鉴定系统,结合K-B纸片扩散法对分离菌株进行鉴定和药物敏感性测定;采用双纸片协同... 目的了解临床标本分离的革兰阴性(G^-)杆菌的耐药性及产金属β-内酰胺酶现状,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法应用MicroScan及TDR-100微生物鉴定系统,结合K-B纸片扩散法对分离菌株进行鉴定和药物敏感性测定;采用双纸片协同法检测金属B一内酰胺酶。结果839株G^-杆菌中,肠杆菌科细菌450株,非发酵菌389株。肠杆菌科以大肠埃希菌为主,占17.52%,其次为肺炎克雷伯菌,占11.80%;非发酵菌以铜绿假单胞菌为主,占24.43%,其次为鲍曼不动杆菌,占8.58%。肠杆菌科细菌对美罗培南耐药率为0~11.8%,而对美洛西林、头孢哌酮、氨苄西林/舒巴坦、复方磺胺甲曙唑及庆大霉素耐药率达41.2%~91.3%;非发酵菌对头孢吡肟和美罗培南耐药率分别为0-20.0%以及0~30.0%,而对美洛西林、复方磺胺甲嗯唑及庆大霉素耐药率达40.0%-93.3%。在耐头孢他啶和/或美罗培南的258株G^-杆菌中,共检出17株(6.59%)金属β-内酰胺酶阳性菌,产该酶菌株对多种抗菌药物耐药。结论临床分离的G^-杆菌耐药已十分严重,并出现产金属β-内酰胺酶菌株;应加强对细菌耐药性监测,防止耐药菌株播散,尤其是产金属β-内酰胺酶菌株感染的暴发。 展开更多
关键词 革兰阴性杆菌 抗药性 微生物 抗菌药物 微生物敏感性试验 金属β-内酰胺酶
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耐亚胺培南铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶和oprD2基因的检测 被引量:7
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作者 张颖 赵祝香 +1 位作者 陈惠玲 赵子文 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1275-1278,共4页
目的:了解我院临床分离下呼吸道感染的耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IRPA)oprD2基因和金属β-内酰胺酶(MBL)的分子流行病学情况。方法:铜绿假单胞菌的鉴定和药敏采用VITEK-2系统进行药物的最低抑菌浓度(MIC)检测。应用双纸片增效法和聚合酶... 目的:了解我院临床分离下呼吸道感染的耐亚胺培南铜绿假单胞菌(IRPA)oprD2基因和金属β-内酰胺酶(MBL)的分子流行病学情况。方法:铜绿假单胞菌的鉴定和药敏采用VITEK-2系统进行药物的最低抑菌浓度(MIC)检测。应用双纸片增效法和聚合酶链反应(PCR)方法检测其产MBL的表型及相关的oprD2基因、IMP型和VIM型金属酶基因。结果:157株亚胺培南铜绿假单胞菌对多种抗菌药物的耐药率均在40%以上,经双纸片增效法筛选出20株MBL阳性(12.7%),经PCR方法检测20株MBL阳性株中有13株IMP型基因阳性,oprD2基因有67株阳性,其余90株缺失(57.3%),未发现VIM型基因。有10株IRPA既携带IMP型基因同时又有oprD2基因缺失。结论:我院临床分离下呼吸道感染的耐亚胺培南铜绿假单胞菌呈较严重的多重耐药。IMP型基因是我院IRPA产MBL的主要基因型;oprD2基因缺失可能是铜绿假单胞菌亚胺培南耐药的重要原因之一。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 基因 OprD2 金属β-内酰胺酶 药物耐受
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临床分离肠杆菌科细菌金属β-内酰胺酶检测 被引量:3
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作者 孙秋 黄文祥 +2 位作者 史芳静 刘成伟 李崇智 《中国感染控制杂志》 CAS 2014年第6期321-326,331,共7页
目的研究某院2007—2011年临床分离的肠杆菌科细菌产金属β-内酰胺酶主要基因型及流行情况。方法常规分离菌株,采用纸片扩散法和琼脂稀释法进行药物敏感性试验,改良Hodge试验和Etest MBL确认纸条法表型筛查金属β-内酰胺酶,聚合酶链反应... 目的研究某院2007—2011年临床分离的肠杆菌科细菌产金属β-内酰胺酶主要基因型及流行情况。方法常规分离菌株,采用纸片扩散法和琼脂稀释法进行药物敏感性试验,改良Hodge试验和Etest MBL确认纸条法表型筛查金属β-内酰胺酶,聚合酶链反应(PCR)扩增金属β-内酰胺酶基因型,接合试验分析质粒携带基因的转移,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析产金属酶细菌的同源性。结果 3 297株肠杆菌科细菌中,对碳青霉烯类抗生素耐药的菌株共41株,其中14株碳青霉烯酶表型阳性,3株肺炎克雷伯菌产IMP-8型金属酶,属于同一克隆,并可通过质粒传递。结论该院发现3株产IMP-8型金属酶的肺炎克雷伯菌,且具有较高的同源性。 展开更多
关键词 肠杆菌科细菌 金属β-内酰胺酶 肺炎克雷伯菌 抗药性 微生物 多重耐药
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嗜麦芽寡养单胞菌与金属β-内酰胺酶 被引量:4
14
作者 邓笑伟 刘长庭 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期321-323,343,共4页
嗜麦芽寡养单胞菌耐药性强,产金属β-内酰胺酶是嗜麦芽寡养单胞菌对包括亚胺培南在内的广谱头孢菌素耐药的主要原因,金属酶作用机制复杂,没有相应的抑制剂投入应用,已成为临床抗感染治疗很棘手的问题。本文就嗜麦芽寡养单胞菌所产金属β... 嗜麦芽寡养单胞菌耐药性强,产金属β-内酰胺酶是嗜麦芽寡养单胞菌对包括亚胺培南在内的广谱头孢菌素耐药的主要原因,金属酶作用机制复杂,没有相应的抑制剂投入应用,已成为临床抗感染治疗很棘手的问题。本文就嗜麦芽寡养单胞菌所产金属β-内酰胺酶种类、特性、作用机制和抑制剂等方面研究作一简要概述。 展开更多
关键词 嗜麦芽寡养单胞菌 耐药性 金属β-内酰胺酶
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IMP型金属β-内酰胺酶活性中心的计算机模拟分析 被引量:1
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作者 许岩 余江河 +2 位作者 郑珩 劳兴珍 吕品一 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期543-547,共5页
应用信息论方法和计算机模拟的方法,对IMP型β-内酰胺酶序列及活性中心进行分析,结果表明在配体结合部位的大部分残基是高度保守的,但也有部分残基易发生变异,如32位Pro、31位Val和163位Try,这些变异是引起该酶不同变异型对β-内酰胺类... 应用信息论方法和计算机模拟的方法,对IMP型β-内酰胺酶序列及活性中心进行分析,结果表明在配体结合部位的大部分残基是高度保守的,但也有部分残基易发生变异,如32位Pro、31位Val和163位Try,这些变异是引起该酶不同变异型对β-内酰胺类抗生素水解能力不同的重要原因,在设计抑制剂时需考虑在酶高变区附近分子的柔性,以防出现新突变型而对所设计抑制剂产生抗性。将酶和底物亚胺培南及青霉素G对接结果表明,底物与酶的结合自由能与酶的催化活性间有很好的相关性,可作为评估底物或酶抑制剂结合能力的重要评价指标。对接模型更细致地显示了酶中与底物相互作用的氨基酸残基,为酶抑制剂的合理设计奠定了基础。 展开更多
关键词 IMP 金属β-内酰胺酶 香农熵 同源模建 分子对接
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产金属β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的相关整合子和同源性分析 被引量:2
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作者 周蓉 朱卫民 奉婷 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期776-782,共7页
目的调查我院2010年1月—2010年12月临床分离的产金属β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药性、同源性、金属酶基因型及相关整合子。方法收集我院住院患者临床分离非重复对碳青霉烯类抗生素不敏感的肺炎克雷伯菌16株;乙二胺四乙酸(EDTA)协同... 目的调查我院2010年1月—2010年12月临床分离的产金属β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药性、同源性、金属酶基因型及相关整合子。方法收集我院住院患者临床分离非重复对碳青霉烯类抗生素不敏感的肺炎克雷伯菌16株;乙二胺四乙酸(EDTA)协同实验筛选产金属β-内酰胺酶菌株;采用PCR法扩增金属酶和3类整合子基因,测序确定金属酶基因型;应用肠杆菌基因间重复一致序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)分析产酶菌株间的同源性;琼脂倍比稀释法进行常用抗菌药物敏感性实验。结果 16株对碳青霉烯类不敏感的肺炎克雷伯菌中EDTA协同实验阳性的有5株,PCR扩增测序有4株产IMP-8型金属β-内酰胺酶,其中3株携带的IMP-8基因位于I类整合子上;未检测到II、III类整合子和VIM、GIM、SIM、SPM、NDM金属酶基因。ERIC-PCR结果显示产酶株分为2种基因型,A型3株,均分离于呼吸内科重症监护病房患者的痰标本;B型1株。药敏实验结果显示:A型的3株对青霉素类、头孢菌素类抗生素、氨曲南及环丙沙星完全耐药,其中K2菌株对亚胺培南、美罗培南中介,但对阿米卡星敏感;K1、K4菌株对亚胺培南、美罗培南及阿米卡星耐药。B型的K3菌株除氨曲南外对其他β-内酰胺类抗生素均高水平耐药,但对阿米卡星及环丙沙星均敏感。结论该院呼吸内科重症监护病房存在产IMP-8型金属β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌克隆传播,且耐药基因位于I类整合子上,医护人员应予以高度关注,注意进行临床检测和监控,并及时采取有效措施。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 金属β-内酰胺酶 重复一致序列聚合酶链反应 整合子
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金属β-内酰胺酶(IMP-1)的表达,纯化和鉴定 被引量:2
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作者 丁世家 邱宗荫 +1 位作者 山口佳宏 后滕正文 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第4期519-521,529,共4页
目的:建立金属β-内酰胺酶IMP-1的表达,纯化和鉴定方法,并探讨实验条件对分离纯化的影响。方法:pET9a/d-IMP-1质粒转化至E.coli Competent BL21(DE3)Cell并在LB培养基中表达后,通过SP Sepharose离子交换柱,得到粗提物,浓缩后用Sephadex ... 目的:建立金属β-内酰胺酶IMP-1的表达,纯化和鉴定方法,并探讨实验条件对分离纯化的影响。方法:pET9a/d-IMP-1质粒转化至E.coli Competent BL21(DE3)Cell并在LB培养基中表达后,通过SP Sepharose离子交换柱,得到粗提物,浓缩后用Sephadex G-75凝胶柱进一步纯化,得到IMP-1的精提物,对纯化产物用SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS进行鉴定,同时用Nitrocefin作底物,测定纯化的金属β-内酰胺酶IMP-1的活性。结果:纯化的IMP-1具有较高的活性,能水解大多数抗生素。其米氏常数Km=9.28μmol/L;用MALDI-TOF-MS法测得的分子量为Mr=25111.9。结论:本文建立了金属β-内酰胺酶IMP-1的表达、纯化、鉴定方法,该法可用于其它的金属β-内酰胺酶的表达和纯化。 展开更多
关键词 金属β-内酰胺酶 IMP-1 基因表达 酶纯化 鉴定方法 克拉维酸
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金属β-内酰胺酶分子生物学及酶学研究进展 被引量:2
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作者 林孟娴 钱元恕 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期453-457,共5页
金属β-内酰胺酶能水解碳青霉烯类抗生素,而获得性金属酶可以通过整合子上的移动性基因元件使耐药基因在细菌之间传播,使临床抗感染治疗面临更严峻的考验。通过对获得性金属酶分子及酶动力学特征进行阐述,更好地了解酶结构与功能的关系... 金属β-内酰胺酶能水解碳青霉烯类抗生素,而获得性金属酶可以通过整合子上的移动性基因元件使耐药基因在细菌之间传播,使临床抗感染治疗面临更严峻的考验。通过对获得性金属酶分子及酶动力学特征进行阐述,更好地了解酶结构与功能的关系,为进一步研究耐药机制提供依据。 展开更多
关键词 金属β-内酰胺酶 晶体结构 分子生物学 酶动力学特征
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台州地区产金属β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌的检测及其耐药性分析 被引量:5
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作者 李俏俏 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期132-136,共5页
目的分析台州地区耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶(MBL)的情况及其对临床常用抗菌药物的耐药性,为临床抗感染治疗提供依据。方法采用K-B法进行体外药敏试验,筛选出耐碳青霉烯类的铜绿假单胞菌株;采用E-test法检测耐碳青霉烯... 目的分析台州地区耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶(MBL)的情况及其对临床常用抗菌药物的耐药性,为临床抗感染治疗提供依据。方法采用K-B法进行体外药敏试验,筛选出耐碳青霉烯类的铜绿假单胞菌株;采用E-test法检测耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌是否产MBL;采用PCR及DNA测序技术检测IMP、VIM、SIM-1、GIM-1和SPM-1这5种主要的MBL基因型。结果在临床分离的180株铜绿假单胞菌中耐碳青霉烯类的有51株(28.3%),其中产MBL的有13株(25.5%);13株产酶菌株中IMP-1型阳性8株,VIM-2型阳性5株,未检测出SIM、GIM-1和SPM-1型,且产MBL的铜绿假单胞菌对多种抗菌药物耐药且耐药率显著高于非产酶菌株(P<0.05)。结论 本地区耐碳青霉烯类的铜绿假单胞菌检出率较高,多重耐药现象较严重,产MBL是铜绿假单胞菌对碳青霉烯类药物耐药的主要原因之一,且台州地区耐碳青霉烯类的铜绿假单胞菌以产IMP-1型和VIM-2型为主,临床应加强对产酶株的检测和监控,合理选用抗菌药物。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 碳青霉烯类 金属β-内酰胺酶 耐药性
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产金属β内酰胺酶大肠埃希菌感染3例 被引量:1
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作者 林志强 吴娜梅 蔡莉莉 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期457-461,共5页
耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌(CRGNB)的传播是一个全球性的公共卫生问题。CRGNB分离株通常具有广泛的耐药性,导致抗菌治疗选择有限,死亡率升高。在美国,碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)每年引起超过13000例感染,并导致超过1000人死亡。CR... 耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌(CRGNB)的传播是一个全球性的公共卫生问题。CRGNB分离株通常具有广泛的耐药性,导致抗菌治疗选择有限,死亡率升高。在美国,碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)每年引起超过13000例感染,并导致超过1000人死亡。CRE是指至少对一种碳青霉烯类抗生素耐药或产生碳青霉烯酶的肠杆菌目细菌,分为非产碳青霉烯酶和产碳青霉烯酶两类[1]。常见的碳青霉烯酶包括肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)、新德里金属β内酰胺酶(NDM)、亚胺培南水解金属β内酰胺酶(IMP)、维罗纳整合子编码的金属β内酰胺酶(VIM)和苯唑西林酶(OXA-48)。NDM是肠杆菌科细菌中最常见的金属酶,主要见于大肠埃希菌、阴沟肠杆菌。我国碳青霉烯类耐药大肠埃希菌中产NDM比例超过70%,以NDM-1/5为主[2]。在制定抗感染方案时,除了考虑病原菌对抗菌药物的敏感性,还需要考虑抗菌药物在感染部位的组织浓度。本研究对福建医科大学附属泉州第一医院收治的产金属β内酰胺酶大肠埃希菌所致腹腔感染、尿路感染、骨髓炎的3个病例进行回顾性分析,总结其临床特征,为临床诊治提供参考。 展开更多
关键词 金属Β内酰胺酶 大肠埃希菌 头孢他啶-阿维巴坦 替加环素 美罗培南
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