新德里金属β-酰胺酶基因特征

1

作者 王国戗 牛菊霞 邢善霞 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第4期545-547,共3页

目的:研究新德里金属β-酰胺酶(NDM-1)基因的特征,分析其可能的来源。方法:在美国生物信息中心(NCBI)检索NDM-1基因,使用Blast生物学软件对检索到的基因与GenBank进行比对。使用ClustalW2.0生物学软件,对5条NDM-1基因和30条各亚型β-内... 目的:研究新德里金属β-酰胺酶(NDM-1)基因的特征,分析其可能的来源。方法:在美国生物信息中心(NCBI)检索NDM-1基因,使用Blast生物学软件对检索到的基因与GenBank进行比对。使用ClustalW2.0生物学软件,对5条NDM-1基因和30条各亚型β-内酰胺酶基因进行多序列比较。结果:在NCBI中检索到3条NDM-1基因,与GenBank比较后共发现9条基因序列与NDM-1基因同源性较高,其中2条为两株海洋细菌的部分基因序列(同源性达69%和70%)。选择5条NDM-1基因与30条β-内酰胺酶基因进行多序列比较,同源性均很低,在基因进化树上NDM-1基因与β-内酰胺酶基因位于不同分枝。结论:NDM-1基因并非来源于β-内酰胺酶基因,NDM-1基因可能与两株海洋细菌有一定的亲缘关系。 展开更多

关键词 新德里金属β-酰胺酶 超级细菌 基因进化

在线阅读 下载PDF 职称材料

携带新德里金属β-内酰胺酶的猪源大肠杆菌全基因组测序及植物提取物药物筛选 被引量：2

2

作者 李海利 张青娴 +5 位作者 朱文豪 游一 王治方 郎利敏 张立宪 王克领 《中国兽药杂志》 2023年第6期23-34,共12页

为了解大肠杆菌携带新德里金属β-内酰胺酶(New Delhi metallo-β-lactamase,NDM)NDM耐药基因情况及筛选敏感植物提取物。采用16S rRNA菌种鉴定,PCR筛查菌耐药基因,bla NDM、bla TEM和AmpC酶耐药基因的确认,全基因组测序,BLAST和MEGA软... 为了解大肠杆菌携带新德里金属β-内酰胺酶(New Delhi metallo-β-lactamase,NDM)NDM耐药基因情况及筛选敏感植物提取物。采用16S rRNA菌种鉴定,PCR筛查菌耐药基因,bla NDM、bla TEM和AmpC酶耐药基因的确认,全基因组测序,BLAST和MEGA软件对序列进行生物信息学分析、系统进化树分析、NDM亚型鉴定和6种植物提取物药敏药物筛选研究。结果表明,从2021年(1-12月)临床猪腹泻病例中分离鉴定的91株大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)中鉴定出1株同时携带新德里金属β-内酰胺酶NDM4、NDM5和β内酰胺酶blaTEM、AmpC酶的大肠杆菌(HN2187)。对其进行11种抗生素和6种植物提取物药物敏感性测试,结果显示HN2187菌株对其均耐药。而HN2187对血根碱、贯叶连翘提取物敏感,对黄芩、姜黄素、千里光和大蒜提取物耐药。HN2187产B类酶,携带NDM4、NDM5、bla TEM、AmpC酶耐药基因,其中bla NDM-4位于质粒pNDM4-HN2187(Plasmid B)上,bla NDM-5位于质粒pNDM5-HN2187(Plasmid A)上,bla TEM1位于质粒pTEM1-HN2187(Plasmid B)上,AmpC酶耐药基因位于染色体上,分别介导bla NDM-4、bla NDM-5、bla TEM和AmpC耐药基因,是耐药菌传播的重要载体。以上研究表明,携带NDM4和NDM5的多重耐药菌已在养殖场传播和流行,应加强该类耐药基因的流行调查、监测和新药物研究,为临床超级细菌和多重耐药菌感染的流行和防治提供理论基础。 展开更多

关键词 碳青霉烯酶 Β内酰胺酶 新德里金属β-内酰胺酶 NDM5 NDM4 blaTEM AMPC 大肠埃希氏菌 细菌耐药

在线阅读 下载PDF 职称材料

产新德里金属β-内酰胺酶大肠埃希菌耐碳青霉烯类药物相关机制研究和分子分型 被引量：4

3

作者 傅芬蕊 张娅 +2 位作者 潘玉红 曹颖平 郑培烝 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期53-59,共7页

目的研究某三甲医院临床分离的产新德里金属β-内酰胺酶(NDM)大肠埃希菌的耐药机制和分子流行病学特征。方法在某三甲医院收集的耐碳青霉烯类大肠埃希菌中利用聚合酶链反应(PCR)筛查是否携带NDM基因,通过测序确定NDM型别并进一步检测其... 目的研究某三甲医院临床分离的产新德里金属β-内酰胺酶(NDM)大肠埃希菌的耐药机制和分子流行病学特征。方法在某三甲医院收集的耐碳青霉烯类大肠埃希菌中利用聚合酶链反应(PCR)筛查是否携带NDM基因,通过测序确定NDM型别并进一步检测其它碳青霉烯酶相关基因和广谱β-内酰胺酶类耐药基因。通过载体构建和表达研究NDM-1、NDM-6及NDM-9对亚胺培南的水解能力。采用多位点序列分型(MLST)对产NDM大肠埃希菌进行分子分型。结果共筛选出8株携带NDM大肠埃希菌,其中2株为NDM-9型,6株为NDM-6型。4株大肠埃希菌同时携带NDM-6、TEM和CTX-M-1基因,1株同时携带NDM-6、TEM和CTX-M-9基因。携带NDM-1、NDM-6与NDM-9重组菌对亚胺培南均耐药,最小抑菌浓度(MIC)分别为32μg/mL、128μg/mL和64μg/mL。产NDM大肠埃希菌MLST分型结果为ST226、ST648和ST1284型各1株,ST101型5株,此5株均来源于神经内科。结论首次发现同时携带NDM-6、TEM和CTX-M-1基因和携带NDM-6、TEM和CTX-M-9基因的大肠埃希菌,NDM-6、NDM-9对亚胺培南的耐药性比NDM-1强,应引起重视。MLST分型结果提示某三甲医院可能存在耐碳青霉烯类大肠埃希菌的院内局部传播。 展开更多

关键词 大肠埃希菌 耐药 新德里金属β-内酰胺酶 多位点序列分型

在线阅读 下载PDF 职称材料

产金属β-内酰胺酶嗜麦芽寡养单胞菌的研究 被引量：8

4

作者 卓超 钱元恕 +3 位作者 李崇智 刘鸿渝 郑行萍 陈海 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期753-756,760,共5页

目的探讨嗜麦芽寡养单胞菌所产金属β-内酰胺酶的酶学特性及分子生物学特征。方法采用纸片协同法筛选产金属β-内酰胺酶菌株;测定产酶株所产β-内酰胺酶对亚胺培南的稳定性和丝氨酸β-内酰胺酶、金属β-内酰胺酶抑制剂的抑酶保护效应;... 目的探讨嗜麦芽寡养单胞菌所产金属β-内酰胺酶的酶学特性及分子生物学特征。方法采用纸片协同法筛选产金属β-内酰胺酶菌株;测定产酶株所产β-内酰胺酶对亚胺培南的稳定性和丝氨酸β-内酰胺酶、金属β-内酰胺酶抑制剂的抑酶保护效应;检测金属β-内酰胺酶的等电点;用PCR法检测金属β-内酰胺酶全基因,并测序。结果纸片协同法筛选产金属β-内酰胺酶菌株4株,药敏试验显示对多种抗菌药物耐药。酶稳定性试验显示,4株产酶菌产碳青霉烯水解酶。酶抑制试验表明,克拉维酸对这4株菌所产酶无抑酶保护效应,而金属β-内酰胺酶抑制剂EDTA对4株菌所产酶有抑制作用,且酶活性能被ZnCl2复活。等电聚焦显示,2株菌(710、750)产的碳青霉烯水解酶pI为6.6,1株菌(603)的pI为6.2,EDTA抑制试验证实均为金属β-内酰胺酶。PCR结果显示,以4株细菌基因组DNA为模板,用所设计的金属β-内酰胺酶全基因引物进行PCR扩增,2株(750,710)扩增结果为阳性,进行序列分析,均为867bp。经GeneBank网上同源性比较,发现与金属酶L1的编码基因blaS(注册号AJ291672.1)的核苷酸序列同源性均为99%。结论嗜麦芽寡养单胞菌710和750号产L1型金属β-内酰胺酶;603号可能产非L1型金属β-内酰胺酶。 展开更多

关键词 嗜麦芽寡养单胞菌 亚胺培南 金属β-内酰胺酶 抑酶保护效应 耐药性

在线阅读 下载PDF 职称材料

产金属β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的相关整合子和同源性分析 被引量：2

5

作者 周蓉 朱卫民 奉婷 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期776-782,共7页

目的调查我院2010年1月—2010年12月临床分离的产金属β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药性、同源性、金属酶基因型及相关整合子。方法收集我院住院患者临床分离非重复对碳青霉烯类抗生素不敏感的肺炎克雷伯菌16株;乙二胺四乙酸(EDTA)协同... 目的调查我院2010年1月—2010年12月临床分离的产金属β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药性、同源性、金属酶基因型及相关整合子。方法收集我院住院患者临床分离非重复对碳青霉烯类抗生素不敏感的肺炎克雷伯菌16株;乙二胺四乙酸(EDTA)协同实验筛选产金属β-内酰胺酶菌株;采用PCR法扩增金属酶和3类整合子基因,测序确定金属酶基因型;应用肠杆菌基因间重复一致序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)分析产酶菌株间的同源性;琼脂倍比稀释法进行常用抗菌药物敏感性实验。结果 16株对碳青霉烯类不敏感的肺炎克雷伯菌中EDTA协同实验阳性的有5株,PCR扩增测序有4株产IMP-8型金属β-内酰胺酶,其中3株携带的IMP-8基因位于I类整合子上;未检测到II、III类整合子和VIM、GIM、SIM、SPM、NDM金属酶基因。ERIC-PCR结果显示产酶株分为2种基因型,A型3株,均分离于呼吸内科重症监护病房患者的痰标本;B型1株。药敏实验结果显示:A型的3株对青霉素类、头孢菌素类抗生素、氨曲南及环丙沙星完全耐药,其中K2菌株对亚胺培南、美罗培南中介,但对阿米卡星敏感;K1、K4菌株对亚胺培南、美罗培南及阿米卡星耐药。B型的K3菌株除氨曲南外对其他β-内酰胺类抗生素均高水平耐药,但对阿米卡星及环丙沙星均敏感。结论该院呼吸内科重症监护病房存在产IMP-8型金属β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌克隆传播,且耐药基因位于I类整合子上,医护人员应予以高度关注,注意进行临床检测和监控,并及时采取有效措施。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 金属β-内酰胺酶 重复一致序列聚合酶链反应 整合子

在线阅读 下载PDF 职称材料

金属β-内酰胺酶(IMP-1)的表达,纯化和鉴定 被引量：2

6

作者 丁世家 邱宗荫 +1 位作者 山口佳宏 后滕正文 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第4期519-521,529,共4页

目的:建立金属β-内酰胺酶IMP-1的表达,纯化和鉴定方法,并探讨实验条件对分离纯化的影响。方法:pET9a/d-IMP-1质粒转化至E.coli Competent BL21(DE3)Cell并在LB培养基中表达后,通过SP Sepharose离子交换柱,得到粗提物,浓缩后用Sephadex ... 目的:建立金属β-内酰胺酶IMP-1的表达,纯化和鉴定方法,并探讨实验条件对分离纯化的影响。方法:pET9a/d-IMP-1质粒转化至E.coli Competent BL21(DE3)Cell并在LB培养基中表达后,通过SP Sepharose离子交换柱,得到粗提物,浓缩后用Sephadex G-75凝胶柱进一步纯化,得到IMP-1的精提物,对纯化产物用SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS进行鉴定,同时用Nitrocefin作底物,测定纯化的金属β-内酰胺酶IMP-1的活性。结果:纯化的IMP-1具有较高的活性,能水解大多数抗生素。其米氏常数Km=9.28μmol/L;用MALDI-TOF-MS法测得的分子量为Mr=25111.9。结论:本文建立了金属β-内酰胺酶IMP-1的表达、纯化、鉴定方法,该法可用于其它的金属β-内酰胺酶的表达和纯化。 展开更多

关键词 金属β-内酰胺酶 IMP-1 基因表达 酶纯化 鉴定方法 克拉维酸

在线阅读 下载PDF 职称材料

金属β-内酰胺酶分子生物学及酶学研究进展 被引量：2

7

作者 林孟娴 钱元恕 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期453-457,共5页

金属β-内酰胺酶能水解碳青霉烯类抗生素,而获得性金属酶可以通过整合子上的移动性基因元件使耐药基因在细菌之间传播,使临床抗感染治疗面临更严峻的考验。通过对获得性金属酶分子及酶动力学特征进行阐述,更好地了解酶结构与功能的关系... 金属β-内酰胺酶能水解碳青霉烯类抗生素,而获得性金属酶可以通过整合子上的移动性基因元件使耐药基因在细菌之间传播,使临床抗感染治疗面临更严峻的考验。通过对获得性金属酶分子及酶动力学特征进行阐述,更好地了解酶结构与功能的关系,为进一步研究耐药机制提供依据。 展开更多

关键词 金属β-内酰胺酶 晶体结构 分子生物学 酶动力学特征

在线阅读 下载PDF 职称材料

β-内酰胺类抗生素对L1型金属β-内酰胺酶的稳定性及酶动力学研究 被引量：1

8

作者 彭青 李文芳 钱元恕 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期411-413,432,共4页

目的通过比较9种β-内酰胺类抗生素对L1型金属β-内酰胺酶(金属酶)的稳定性及酶动力学参数,了解金属酶L1的酶学特性。方法制备金属酶L1的纯化产物,以紫外分光光度计测定9种β-内酰胺类抗生素对L1型金属酶的稳定性及酶动力学参数。结果重... 目的通过比较9种β-内酰胺类抗生素对L1型金属β-内酰胺酶(金属酶)的稳定性及酶动力学参数,了解金属酶L1的酶学特性。方法制备金属酶L1的纯化产物,以紫外分光光度计测定9种β-内酰胺类抗生素对L1型金属酶的稳定性及酶动力学参数。结果重组L1酶水解青霉素及碳青霉烯类抗生素的能力接近,氨曲南及头孢他啶对L1酶高度稳定。结论L1酶的稳定性及动力学研究为指导临床合理应用抗生素提供了科学的理论依据。 展开更多

关键词 β-内酰胺类抗生素 L1型金属酶 稳定性 酶动力学

在线阅读 下载PDF 职称材料

长沙地区产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的分子流行病学特征 被引量：5

9

作者 邬靖敏 邹明祥 李军 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2016年第7期447-451,共5页

目的了解长沙地区多重耐药铜绿假单胞菌(PA)产金属β-内酰胺酶(MBL)菌株基因型和流行情况。方法收集该地区7所综合医院临床分离的PA,对菌株进行鉴定和药敏试验,采用EDTA协同试验、E-test MBL进行MBL表型筛选,聚合酶连反应(PCR)明确其基... 目的了解长沙地区多重耐药铜绿假单胞菌(PA)产金属β-内酰胺酶(MBL)菌株基因型和流行情况。方法收集该地区7所综合医院临床分离的PA,对菌株进行鉴定和药敏试验,采用EDTA协同试验、E-test MBL进行MBL表型筛选,聚合酶连反应(PCR)明确其基因型,肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链反应(ERIC-PCR)进行同源性分析。结果经EDTA协同和E-test MBL初步筛查,81株PA中仅10株为强阳性;PCR结果显示,18株PA MBL基因阳性,其中IMP-9型11株,IMP-1型1株和VIM-2型6株,未检测出SIM、SPM、GIM和NDM-1基因型。ERIC-PCR分型结果显示,12株产IMP PA存在多个型别,而6株产VIM-2菌株为同一型别。结论长沙地区多重耐药PA以IMP-9和VIM-2基因型最常见。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 金属β-内酰胺酶 金属酶 基因型 肠杆菌科基因间重复序列聚合酶链反应

在线阅读 下载PDF 职称材料

紫外分光光度法检测金属β-内酰胺酶活性的研究 被引量：4

10

作者 沈祝飞 周冰 张加慧 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期930-932,937,共4页

目的建立以紫外分光光度法检测金属β-内酰胺酶活性的方法。方法采用以美罗培南作反应底物，中性羟胺与硫酸铁胺为显色体系，通过紫外分光光度计检测反应液中美罗培南剩余量计算金属β-内酰胺酶的分解量，从而计算出其酶活性。结果美罗... 目的建立以紫外分光光度法检测金属β-内酰胺酶活性的方法。方法采用以美罗培南作反应底物，中性羟胺与硫酸铁胺为显色体系，通过紫外分光光度计检测反应液中美罗培南剩余量计算金属β-内酰胺酶的分解量，从而计算出其酶活性。结果美罗培南的浓度在1～5mg／mL范围内，线性良好，相关系数大于0．999。该方法检测限为0．05U，回收率在90％～119％范围内，重复性相对标准偏差为6．1％～8．7％．检测出的酶活性与酶蛋白含量成正相关。结论该方法能有效区分金属β-内酰胺酶与非金属β-内酰胺酶，并准确反应金属p．内酰胺酶分解碳青霉烯类抗生素的能力。 展开更多

关键词 金属β-内酰胺酶 羟胺法 美罗培南 酶活性

在线阅读 下载PDF 职称材料

产金属β-内酰胺酶铜绿假单胞菌的耐药性和基因检测 被引量：2

11

作者 谭萍 祝玲玲 +3 位作者 张松 朱平安 邹汉良 赖秀花 《中国感染控制杂志》 CAS 2008年第2期114-116,121,共4页

目的研究某地区临床分离的铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶株主要基因型及其耐药性。方法以聚合酶链反应(PCR)法检测该市3所医院2002年8月—2007年6月分离的100株耐亚胺培南和(或)头孢他啶铜绿假单胞菌中产金属β-内酰胺酶基因,并用二倍... 目的研究某地区临床分离的铜绿假单胞菌产金属β-内酰胺酶株主要基因型及其耐药性。方法以聚合酶链反应(PCR)法检测该市3所医院2002年8月—2007年6月分离的100株耐亚胺培南和(或)头孢他啶铜绿假单胞菌中产金属β-内酰胺酶基因,并用二倍琼脂稀释法检测10种抗菌药物对产金属酶株的体外最低抑菌浓度(MIC)。结果共检出9株金属酶阳性菌株,其中3株IMP-1扩增阳性;6株VIM扩增阳性,经基因测序确认为VIM-2型。产酶株对头孢哌酮、头孢吡肟、亚胺培南、复方磺胺甲口恶唑全部耐药,部分对阿米卡星、环丙沙星较为敏感。结论该地区铜绿假单胞菌流行株金属酶基因型主要为VIM-2型和IMP-1型;其耐药性强,临床应根据药敏结果选择药物联合使用,以达到最佳抗菌效果。 展开更多

关键词 金属β-内酰胺酶 铜绿假单胞菌 基因型 抗药性 微生物 聚合酶链反应

在线阅读 下载PDF 职称材料

临床分离耐药摩氏摩根菌的β-内酰胺酶表型和基因型分析 被引量：8

12

作者 余娴 凌保东 +2 位作者 谢勇恩 周岐新 雷军 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期665-668,685,共5页

目的探讨临床分离耐药摩氏摩根菌3-87耐药的分子机制。方法采用常规琼脂二倍稀释法对摩氏摩根菌3-87进行15种抗菌药的M IC测定;超声破碎法提取β-内酰胺酶;并用n itrocefin做定性检测,用紫外分光光度计检测酶活性;超薄层等电聚焦测定β... 目的探讨临床分离耐药摩氏摩根菌3-87耐药的分子机制。方法采用常规琼脂二倍稀释法对摩氏摩根菌3-87进行15种抗菌药的M IC测定;超声破碎法提取β-内酰胺酶;并用n itrocefin做定性检测,用紫外分光光度计检测酶活性;超薄层等电聚焦测定β-内酰胺酶等电点和酶抑制实验;ESBL s表型鉴定;Am pC酶的检测;纸片协同法筛选产金属β-内酰胺酶菌株;以摩氏摩根菌3-87质粒DNA为模板扩增blaSHV、blaTEM和blaCTX-M基因,以基因组DNA为模板扩增ampC结构基因;ampC结构基因扩增产物的DNA序列测定及同源性分析。结果摩氏摩根菌3-87对10种β-内酰胺类抗生素、2种氟喹诺酮类抗菌药耐药,对哌拉西林/三唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦、氨基糖苷类抗生素阿米卡星敏感。产酶活性为3727.5U的β-内酰胺酶。产生的pI7.3、8.2及9.6的三种β-内酰胺酶分别能被氯唑西林、克拉维酸、EDTA部分抑制。β-内酰胺酶表型鉴定试验结果显示菌株产ESBL s、Am pC酶及金属β-内酰胺酶三种β-内酰胺酶。blaCTX-M基因引物扩增出阳性扩增条带。ampC结构基因引物扩增阳性扩增带,对扩增产物进行序列分析与已报道的摩氏摩根菌ampC结构基因的核苷酸序列高度同源,推导的氨基酸序列发生了1个氨基酸残基的变异。结论临床分离耐药摩氏摩根菌3-87呈多重耐药,其对β-内酰胺类抗生素耐药的机制是产生了ESBL s、Am pC酶及金属β-内酰胺酶。 展开更多

关键词 摩氏摩根菌 β-内酰胺酶 ESBLS AMPC酶 金属β-内酰胺酶

在线阅读 下载PDF 职称材料

产NDM-1型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌儿童血流感染的临床特征及细菌耐药性分析 被引量：11

13

作者 张烨 董方 +3 位作者 宋文琪 郭凌云 王艳 刘钢 《中国感染与化疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期516-522,共7页

目的研究产NDM-1型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌儿童血流感染的临床特征及细菌耐药性。方法收集首都医科大学附属北京儿童医院2011年1月-2014年8月住院患儿血培养分离的非重复耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKp);用微量肉汤稀释法测定15种抗菌... 目的研究产NDM-1型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌儿童血流感染的临床特征及细菌耐药性。方法收集首都医科大学附属北京儿童医院2011年1月-2014年8月住院患儿血培养分离的非重复耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKp);用微量肉汤稀释法测定15种抗菌药物的MIC值;采用PCR法确定产NDM-1菌株;回顾分析病历资料了解感染产NDM-1菌株患儿的临床特征,并与感染非产NDM-1菌株患儿进行比较。结果 52株CRKp中共检出28株产NDM-1菌株。产NDM-1菌株组均为多重耐药菌,对青霉素、头孢菌素和哌拉西林-他唑巴坦的耐药率达100%(28/28),对氨曲南、甲氧苄啶-磺胺甲唑及庆大霉素的耐药率均>75%,对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为100%(28/28)、92.9%(26/28)。产NDM-1菌株中碳青霉烯类高MIC值的菌株比例高于非产NDM-1菌株。产NDM-1菌株组的患儿中,82.1%(23/28)来自血液病房,常见基础疾病为血液系统恶性肿瘤(78.6%,22/28),20例(76.4%)患儿存在中性粒细胞缺乏伴发热;产与非产NDM-1肺炎克雷伯菌血流感染患儿相比,反复住院(P=0.202)、近期使用抗菌药物(P=0.615)、常见基础疾病(P=0.856)以及深静脉置管(P=0.099)方面差异无统计学意义。明确肺炎克雷伯菌感染后,37例患儿接受了碳青霉烯类药物联合敏感药物治疗。产NDM-1菌株组病死率与非产NDM-1菌株组相比无明显差异(2/28对3/24;P=0.625)。结论该院已出现产NDM-1肺炎克雷伯菌株,呈逐年增长趋势,此类细菌呈多重耐药,碳青霉烯类高MIC值的菌株所占比例高,临床特征上与非产NDM-1菌无明显区别。 展开更多

关键词 新德里金属β内酰胺酶-1 肺炎克雷伯菌 血流感染 儿童 碳青霉烯类抗生素

在线阅读 下载PDF 职称材料

组织型转谷氨酰胺酶与人非小细胞肺癌细胞侵袭力的关系及其机制

14

作者 朱郇悯 汤娟娟 +6 位作者 黎银燕 刘嘉熙 韦雪梅 王飞 陈晓湘 张雪雁 李孜 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第21期3472-3474,共3页

目的:研究组织型转谷氨酰胺酶(tTG)表达与人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549和PAα侵袭力的关系,及其与表皮生长因子受体(EGFR)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)等肿瘤侵袭相关基因之间的关系。方法:Transwell法检测细胞株A549和PAα的侵袭力;R... 目的:研究组织型转谷氨酰胺酶(tTG)表达与人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549和PAα侵袭力的关系,及其与表皮生长因子受体(EGFR)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)等肿瘤侵袭相关基因之间的关系。方法:Transwell法检测细胞株A549和PAα的侵袭力;RT-PCR法、Real-Time PCR法及Western blot检测A549和PAα细胞株中tTG、EGFR和MMP-2的转录和表达水平,观察使用tTG或EGFR抑制剂后PAα细胞中tTG、EGFR、p-EGFR和MMP-2的表达水平变化。结果:PAα细胞株的侵袭能力为A549的165.3倍(P<0.05)。PAα细胞株的tTG、EGFR转录水平为A549细胞株的650.68(P<0.05)和34.4(P<0.001)倍。PAα细胞株的tTG、p-EGFR表达水平高于A549细胞株,MMP-2的转录水平在A549和PAα细胞株之间的差异没有统计学意义(P>0.1),但PAα的MMP-2表达水平高于A549。结论:PAα相对于A549具有高的侵袭力;其机制可能与EGFR的高表达和磷酸化、tTG和MMP-2的高表达有关;tTG可调控MMP-2的水平但它本身不受EGFR信号通路的调控。 展开更多

关键词 癌 非小细胞肺 组织型转谷氨酰胺酶 侵袭力 表皮生长因子受体 基质金属蛋白 酶-2

在线阅读 下载PDF 职称材料

亚胺培南耐药鲍氏不动杆菌AmpC酶、ESBLs及金属酶检测和耐药分析

15

作者 胡巧娟 胡志东 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1088-1090,共3页

目的分析我院亚胺培南耐药鲍氏不动杆菌(IRABA)临床分离株头孢菌素酶(AmpC酶)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和金属β-内酰胺酶(MBLs)的产生情况及其耐药特点。方法应用VITEK-2全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,采用改良三维试... 目的分析我院亚胺培南耐药鲍氏不动杆菌(IRABA)临床分离株头孢菌素酶(AmpC酶)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和金属β-内酰胺酶(MBLs)的产生情况及其耐药特点。方法应用VITEK-2全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,采用改良三维试验方法同时检测2008年1月—2009年9月我院临床分离的63株IRABA的ESBLs和AmpC酶,2-巯基丙酸协同试验检测MBLs。结果63株IRABA中,45株(71.4%)AmpC酶阳性,13株(20.6%)ESBLs阳性,其中8株(12.7%)同时产AmpC酶和ESBLs,未检出产MBLs菌株。AmpC酶阳性菌对12种抗生素的耐药率明显高于AmpC酶阴性菌,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论本组IRABA主要产AmpC酶,且多重耐药现象严重。 展开更多

关键词 鲍氏不动杆菌 β-内酰胺酶 AMPC酶 超广谱β-内酰酶 金属β-内酰胺酶

在线阅读 下载PDF 职称材料

ImiS的表达、纯化及催化3类β-内酰胺类抗生素水解的动力学研究 被引量：1

16

作者 冯吉利 杨霞 +6 位作者 闫小艳 高会洲 冯雷 程序 贾超 吴迪 杨科武 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期197-200,216,共5页

目的研究金属β-内酰胺酶(MBL)ImiS催化β-内酰胺类抗生素水解的动力学特征,为研发MBLs的通用型抑制剂提供实验数据。方法在大肠埃希菌中表达ImiS,以SP-Sepharose离子交换层析柱纯化,通过MALDI-TOF MS测定其分子量,用UV-VIS测定ImiS催... 目的研究金属β-内酰胺酶(MBL)ImiS催化β-内酰胺类抗生素水解的动力学特征,为研发MBLs的通用型抑制剂提供实验数据。方法在大肠埃希菌中表达ImiS,以SP-Sepharose离子交换层析柱纯化,通过MALDI-TOF MS测定其分子量,用UV-VIS测定ImiS催化法罗培南等3类6种β-内酰胺类抗生素水解的酶动力学参数,并考察不同pH、温度及底物浓度对酶活性的影响。结果表征获得ImiS的分子量为25209Da,ImiS对法罗培南、青霉素G、氨苄西林及羧苄青霉素水解的催化常数Kcat分别为(2.15±0.03),(0.85±0.03),(0.71±0.02)和(0.58±0.02)s-1,对头孢三嗪和头孢噻肟无活性。底物为法罗培南时,ImiS最适活性的pH为7.5±0.1,在酸性环境中酶活性降低较为明显,最适活性的温度为(44.8±0.8)℃。结论治疗携带ImiS的病菌引起的感染,使用法罗培南不妥,而头孢三嗪或头孢噻肟为合理。实验结果为ImiS抑制剂的设计与合成提供了很有价值的信息。 展开更多

关键词 细菌耐药 金属β-内酰胺酶ImiS β-内酰胺类抗生素 酶催化动力学

在线阅读 下载PDF 职称材料

WT-L1与Co(Ⅱ)-L1的光谱表征及催化水解β-内酰胺类抗生素的动力学研究

17

作者 闫小艳 高会洲 +2 位作者 冯吉利 杨霞 杨科武 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期388-393,共6页

目的表征金属β-内酰胺酶(MBL)L1的结构和动力学特性,以其发展MBL的通用型抑制剂。方法在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达并纯化野生型L1(Wild type L1,WT-L1),以SDS-PAGE电泳确认;用EDTA除去WT-L1中的Zn(Ⅱ)离子得Apo-L1,再用Co(II)滴定制得... 目的表征金属β-内酰胺酶(MBL)L1的结构和动力学特性,以其发展MBL的通用型抑制剂。方法在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达并纯化野生型L1(Wild type L1,WT-L1),以SDS-PAGE电泳确认;用EDTA除去WT-L1中的Zn(Ⅱ)离子得Apo-L1,再用Co(II)滴定制得Co(Ⅱ)-L1;通过UV-Vis,CD及荧光光谱表征WT-L1及Co(Ⅱ)-L1活性中心的结构;采用稳态动力学方法测定WT-L1及Co(Ⅱ)-L1催化3类9种β-内酰胺类抗生素水解反应的酶动力学参数,确定抗生素对L1的稳定性。结果获得纯化的WT-L1和重组的Co(Ⅱ)-L1;光谱表征表明L1具有两个金属活性中心,Co(II)-L1的二级结构发生显著变化;WT-L1对碳青霉烯类抗生素的酶促活性最强,青霉素类次之,头孢类抗生素较弱,Co(Ⅱ)-L1比WT-L1的酶催活性弱。结论 Co(Ⅱ)-L1的重组实现了对MBL-L1的结构表征,L1对青霉素类抗生素呈现强的催化活性,对头孢类抗生素稳定。 展开更多

关键词 金属β-内酰胺酶L1 金属酶重组 光谱表征 β-内酰胺类抗生素:酶催化动力学

在线阅读 下载PDF 职称材料

18株铜绿假单胞菌的耐药谱和ERIC-PCR分型 被引量：16

18

作者 伍晓锋 黎毅敏 +3 位作者 卓超 袁锦屏 杨灵 任筱兰 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期560-563,共4页

目的研究产金属β-内酰胺酶(MBL)的铜绿假单胞菌感染的菌株同源性和耐药谱。方法用纸片协同法筛选出产MBL铜绿假单胞菌株;琼脂扩散法检测MBL阳性株对10种抗菌药物的药敏结果;用肠杆菌科基因间重复一致序列为引物的聚合酶链反应(ERIC-PCR... 目的研究产金属β-内酰胺酶(MBL)的铜绿假单胞菌感染的菌株同源性和耐药谱。方法用纸片协同法筛选出产MBL铜绿假单胞菌株;琼脂扩散法检测MBL阳性株对10种抗菌药物的药敏结果;用肠杆菌科基因间重复一致序列为引物的聚合酶链反应(ERIC-PCR)方法确定菌株之间的同源性。结果纸片协同法试验检测到18株MBL阳性菌株,它们对头孢噻肟、头孢曲松、替卡西林/克拉维酸、头孢哌酮/舒巴坦和头孢他啶完全耐药,对10种抗菌药物呈现7种耐药模式;ERIC-PCR结果显示,18株MBL阳性株呈现4种基因型,15株为同一基因型。结论该院ICU内产MBL铜绿假单胞菌在2005年第二季度出现暴发流行。 展开更多

关键词 铜绿假单胞菌 聚合酶链反应 基因间重复-致序列引物 金属β-内酰胺酶 耐药谱

在线阅读 下载PDF 职称材料

ST571型产NDM-1肺炎克雷伯菌检出及分子流行病学研究 被引量：9

19

作者 刘婧娴 俞静 刘瑛 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期402-408,共7页

目的探讨产新德里金属-β-内酰胺酶1(NDM-1)肺炎克雷伯菌检出的分子流行病学意义。方法实验菌株为从临床标本中分离到的1株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌。采用VITEK-2 Compact全自动微生物分析系统进行鉴定及药敏试验,PCR及测序方法检测ND... 目的探讨产新德里金属-β-内酰胺酶1(NDM-1)肺炎克雷伯菌检出的分子流行病学意义。方法实验菌株为从临床标本中分离到的1株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌。采用VITEK-2 Compact全自动微生物分析系统进行鉴定及药敏试验,PCR及测序方法检测NDM-1等碳青霉烯酶基因的表达,并对菌株进行质粒转移接合试验及多位点序列分型(MLST)。经检索Pub Med收集其他地区产NDM-1肺炎克雷伯菌的MLST数据,采用e BURST V3软件及Tree drawing软件进行分析。结果该菌株对包括碳青霉烯类在内的多种抗生素均高度耐药,携带NDM-1基因,MLST为ST571含有该基因的质粒通过接合方式成功转移到受体菌。共收集源自28个国家的238株产NDM-1肺炎克雷伯菌的MLST信息,包含41个ST型,CC258(clone complex)为主要流行株。结论我国首次检出ST571型产NDM-1肺炎克雷伯菌,耐药基因可能通过质粒进行传播。产NDM-1肺炎克雷伯菌的分子分型呈多样化,以CC258流行最广,本实验菌株与该克隆复合体菌株的亲缘关系甚远。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌 新德里金属-β-内酰胺酶1 多位点序列分型 分子流行病学

在线阅读 下载PDF 职称材料

分离自住院患儿产NDM型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌分子流行病学调查 被引量：3

20

作者 李媛睿 刘婧娴 +2 位作者 俞静 朱威南 刘瑛 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期689-693,共5页

目的了解产新德里金属-β-内酰胺酶(NDM)型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CRKP)分离株的分子流行病学特点。方法收集2013年9月至2016年3月住院患儿的非重复CRKP;采用PCR方法扩增NDM型碳青霉烯酶基因,并对阳性产物进行DNA测序;对产NDM酶菌株进... 目的了解产新德里金属-β-内酰胺酶(NDM)型碳青霉烯酶肺炎克雷伯菌(CRKP)分离株的分子流行病学特点。方法收集2013年9月至2016年3月住院患儿的非重复CRKP;采用PCR方法扩增NDM型碳青霉烯酶基因,并对阳性产物进行DNA测序;对产NDM酶菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE),并利用BioNumerics软件进行分型;比较不同型别菌株患儿的临床特征。结果从93株CRKP中检出42株产NDM酶,其中23株产NDM-1酶,19株产NDM-5酶。产NDM酶CRKP分为14个PFGE型别(A型~N型),其中A型、M型和N型为优势型别,占菌株总数69%(29/42),其余11型为非优势型别,占菌株总数31%(13/42)。A型菌株(24%,10/42)均产NDM-1酶,M型菌株(17%,7/42)以产NDM-5酶为主,N型菌株(29%,12/42)均产NDM-5酶,其余11个型别菌株(31%,13/42)以产NDM-1酶为主。优势型别组菌株主要在儿科ICU流行,而非优势型别组菌株在儿科各病区散发分布。优势型别组患儿在入院48小时后发生感染率、留置引流管比例和ICU住院时间均高于非优势型别组患儿,差异有统计学意义(P<0.05);两组患儿的年龄、性别、抗生素使用和预后等的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论住院患儿产NDM酶CRKP的碳青霉烯酶类型以NDM-1和NDM-5多见,A型、M型和N型为PFGE优势型别,优势型别在儿科ICU存在小范围播散。 展开更多

关键词 新德里金属-β-内酰胺酶 碳青霉烯酶 肺炎克雷伯菌 分子流行病学

在线阅读 下载PDF 职称材料