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真核表达NDV F基因重组质粒的构建及其在CEF细胞中的转染
1
作者
刘兆球
姜世金
常维山
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期444-446,共3页
通过PCR方法自含NDVZF基因的克隆质粒中扩增NDVF基因 ,将其与真核表达载体pcDNA3..1/V5_His_TOPO重组。经核酸内切酶酶切 ,阳性克隆鉴定准确无误 ,核酸序列测定结果与原始基因比较 ,同源性大于 99% ,启始密码和终止密码未出现变异 ,将...
通过PCR方法自含NDVZF基因的克隆质粒中扩增NDVF基因 ,将其与真核表达载体pcDNA3..1/V5_His_TOPO重组。经核酸内切酶酶切 ,阳性克隆鉴定准确无误 ,核酸序列测定结果与原始基因比较 ,同源性大于 99% ,启始密码和终止密码未出现变异 ,将该重组质粒命名为pcDNANDVZF。将pcDNANDVZF在脂质体作用下转染CEF细胞 ,用间接免疫荧光试验检测 ,结果证明pcDNANDVZF可在CEF细胞中大量表达F蛋白。
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关键词
真核重组表达质粒
新城疫病毒f基因
转染
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职称材料
NDV F与ChIL-18融合基因“自杀性”质粒的构建
2
作者
刘勤妮
聂奎
《安徽农学通报》
2008年第5期21-24,共4页
根据GeneBank公布的鸡新城疫病毒(NDV)Lasota株F基因和鸡源性白细胞介素18(ChIL-18)基因序列分别设计特异性引物,且在鸡NDV F基因引物上游引入BamHⅠ位点、下游引入SalⅠ位点,在Ch IL-18基因引物上游引入SalⅠ位点、下游引入HindⅢ、Bam...
根据GeneBank公布的鸡新城疫病毒(NDV)Lasota株F基因和鸡源性白细胞介素18(ChIL-18)基因序列分别设计特异性引物,且在鸡NDV F基因引物上游引入BamHⅠ位点、下游引入SalⅠ位点,在Ch IL-18基因引物上游引入SalⅠ位点、下游引入HindⅢ、BamHⅠ位点。以鸡新城疫病毒Lasota株RNA为模板RT-PCR扩增其F基因,将F基因插入pMD18-T的BamHⅠ与SalⅠ位点中。同时扩增上游带有SalⅠ位点、下游带有HindⅢ、BamHⅠ位点的ChIL-18基因,并将其插入到含有F基因的pMD18-T质粒的SalⅠ、HindⅢ位点之间,从而使NDV F基因与ChIL-18基因形成具有一个完整阅读框的融合基因,然后将融合基因片段定向克隆到pSFV单一启动子(CMV)下游,构建成F-ChIL-18融合基因重组"自杀性"质粒pSFV-F-ChIL-18。
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关键词
鸡
新城疫病毒f基因
鸡源性白细胞介素18
甲
病毒
载体
核酸疫苗
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职称材料
NDV F基因和胸腺五肽基因真核共表达质粒的构建及其免疫原性检测
3
作者
贾红梅
常维山
+2 位作者
宋文刚
柴家前
孙英峰
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007年第12期21-24,29,共5页
为了研究胸腺五肽基因的免疫增强作用,根据GenBank收录的新城疫病毒(NDV) F基因序列,设计1对特异性引物,其中上游引物含有胸腺五肽(Thymopentin,TP-5)的基因序列。以NDV Z株F基因的重组质粒为模板进行PCR扩增,扩增产物与真核表达载体pcD...
为了研究胸腺五肽基因的免疫增强作用,根据GenBank收录的新城疫病毒(NDV) F基因序列,设计1对特异性引物,其中上游引物含有胸腺五肽(Thymopentin,TP-5)的基因序列。以NDV Z株F基因的重组质粒为模板进行PCR扩增,扩增产物与真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO重组,构建了真核共表达质粒pcDNATP-5NDVZF。将重组质粒pcDNATP-5NDVZF、pcDNANDVZF分别以100μg/只的剂量免疫小鼠,用间接ELISA法和MTT法检测其免疫原性。结果表明,重组质粒均能在小鼠体内诱导相应的体液免疫和细胞免疫,其中pcDNATP-5NDVZF的作用较pcDNANDVZF更为显著。说明共表达胸腺五肽基因可增强机体对DNA疫苗的免疫反应。
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关键词
新城疫病毒f基因
pcDNATP-5NDVZ
f
免疫原性
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职称材料
题名
真核表达NDV F基因重组质粒的构建及其在CEF细胞中的转染
1
作者
刘兆球
姜世金
常维山
机构
山东农业大学动物科技学院
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期444-446,共3页
基金
山东省优秀中青年科学家奖励基金
文摘
通过PCR方法自含NDVZF基因的克隆质粒中扩增NDVF基因 ,将其与真核表达载体pcDNA3..1/V5_His_TOPO重组。经核酸内切酶酶切 ,阳性克隆鉴定准确无误 ,核酸序列测定结果与原始基因比较 ,同源性大于 99% ,启始密码和终止密码未出现变异 ,将该重组质粒命名为pcDNANDVZF。将pcDNANDVZF在脂质体作用下转染CEF细胞 ,用间接免疫荧光试验检测 ,结果证明pcDNANDVZF可在CEF细胞中大量表达F蛋白。
关键词
真核重组表达质粒
新城疫病毒f基因
转染
Keywords
eukaryotic expression recombination plasmid
newcastle disease virus(NDV)
f
gene
trans
f
ection
分类号
S852.659.4 [农业科学—基础兽医学]
Q754 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
NDV F与ChIL-18融合基因“自杀性”质粒的构建
2
作者
刘勤妮
聂奎
机构
西南大学动物科技学院
出处
《安徽农学通报》
2008年第5期21-24,共4页
文摘
根据GeneBank公布的鸡新城疫病毒(NDV)Lasota株F基因和鸡源性白细胞介素18(ChIL-18)基因序列分别设计特异性引物,且在鸡NDV F基因引物上游引入BamHⅠ位点、下游引入SalⅠ位点,在Ch IL-18基因引物上游引入SalⅠ位点、下游引入HindⅢ、BamHⅠ位点。以鸡新城疫病毒Lasota株RNA为模板RT-PCR扩增其F基因,将F基因插入pMD18-T的BamHⅠ与SalⅠ位点中。同时扩增上游带有SalⅠ位点、下游带有HindⅢ、BamHⅠ位点的ChIL-18基因,并将其插入到含有F基因的pMD18-T质粒的SalⅠ、HindⅢ位点之间,从而使NDV F基因与ChIL-18基因形成具有一个完整阅读框的融合基因,然后将融合基因片段定向克隆到pSFV单一启动子(CMV)下游,构建成F-ChIL-18融合基因重组"自杀性"质粒pSFV-F-ChIL-18。
关键词
鸡
新城疫病毒f基因
鸡源性白细胞介素18
甲
病毒
载体
核酸疫苗
Keywords
f
gene o
f
Newcastle disease virus
Alphavirus vector
Chicken Interleukin -18
DNA vaccine
分类号
Q933 [生物学—微生物学]
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职称材料
题名
NDV F基因和胸腺五肽基因真核共表达质粒的构建及其免疫原性检测
3
作者
贾红梅
常维山
宋文刚
柴家前
孙英峰
机构
山东农业大学动物科技学院
泰山医学院基础医学部
出处
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007年第12期21-24,29,共5页
基金
山东省医药卫生科技发展计划重点项目(2005ZD05)
山东省自然科学基金项目(Y2005C21)
文摘
为了研究胸腺五肽基因的免疫增强作用,根据GenBank收录的新城疫病毒(NDV) F基因序列,设计1对特异性引物,其中上游引物含有胸腺五肽(Thymopentin,TP-5)的基因序列。以NDV Z株F基因的重组质粒为模板进行PCR扩增,扩增产物与真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO重组,构建了真核共表达质粒pcDNATP-5NDVZF。将重组质粒pcDNATP-5NDVZF、pcDNANDVZF分别以100μg/只的剂量免疫小鼠,用间接ELISA法和MTT法检测其免疫原性。结果表明,重组质粒均能在小鼠体内诱导相应的体液免疫和细胞免疫,其中pcDNATP-5NDVZF的作用较pcDNANDVZF更为显著。说明共表达胸腺五肽基因可增强机体对DNA疫苗的免疫反应。
关键词
新城疫病毒f基因
pcDNATP-5NDVZ
f
免疫原性
Keywords
newcastle disease virus
f
gene
pcDNATP-SNDVZ
f
immunogenicity
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
真核表达NDV F基因重组质粒的构建及其在CEF细胞中的转染
刘兆球
姜世金
常维山
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2003
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
NDV F与ChIL-18融合基因“自杀性”质粒的构建
刘勤妮
聂奎
《安徽农学通报》
2008
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
NDV F基因和胸腺五肽基因真核共表达质粒的构建及其免疫原性检测
贾红梅
常维山
宋文刚
柴家前
孙英峰
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2007
0
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职称材料
已选择
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