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基于LAMP的果蔬斯高维尔炭疽菌可视化检测方法
被引量：
3
1
作者
罗跃
吴小毛
+3 位作者
刘阿丽
姚小龙
李荣玉
耿广东
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2022年第1期98-103,共6页
为果蔬斯高维尔炭疽菌检测提供高效便捷、特异性好、可视化的检测方法,以果蔬斯高维尔炭疽菌内部转录间隔区ITS序列为靶基因,设计4条LAMP引物和1条环引物,通过对引物比例、反应时间、反应体系等条件的选择,建立对果蔬斯高维尔炭疽菌具...
为果蔬斯高维尔炭疽菌检测提供高效便捷、特异性好、可视化的检测方法,以果蔬斯高维尔炭疽菌内部转录间隔区ITS序列为靶基因,设计4条LAMP引物和1条环引物,通过对引物比例、反应时间、反应体系等条件的选择,建立对果蔬斯高维尔炭疽菌具有特异性扩增的LAMP检测方法。特异性试验结果显示:所建立的LAMP反应体系在最佳反应温度65℃条件下扩增60 min,以果蔬斯高维尔炭疽菌DNA为模板的反应体系在指示剂钙黄绿素和羟基萘酚蓝的作用下,分别呈现绿色和蓝色,反应结果为阳性,扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳检测呈梯形条带;而以其他8株对照菌株DNA为模板的反应体系和空白对照分别呈现橘黄色和紫色,均为阴性反应,无扩增条带出现,表明该LAMP检测方法对果蔬斯高维尔炭疽菌特异性强。
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关键词
环介导等温扩增技术
果蔬
斯高维尔炭疽菌
可视化检测
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职称材料
辣椒炭疽病病原分离鉴定及对杀菌剂敏感性测定
被引量：
4
2
作者
周志成
孙海
+4 位作者
肖仲久
莫维弟
程欢欢
彭丽娟
丁海霞
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第3期430-437,共8页
[目的]明确辣椒炭疽病病原菌Colletotrichum spp.种类,并筛选防治药剂。[方法]采集贵州省贵阳市花溪区具有典型炭疽病症状的‘党武’辣椒叶片和果实,分离病原菌;采用单孢分离法、柯赫氏法则、形态学特征结合ITS、GADPH、CHS-1和ACT多基...
[目的]明确辣椒炭疽病病原菌Colletotrichum spp.种类,并筛选防治药剂。[方法]采集贵州省贵阳市花溪区具有典型炭疽病症状的‘党武’辣椒叶片和果实,分离病原菌;采用单孢分离法、柯赫氏法则、形态学特征结合ITS、GADPH、CHS-1和ACT多基因序列分析,明确病原菌的致病能力及分类地位;采用菌丝生长速率法测定病原菌对6种化学杀菌剂和6种生物杀菌剂的敏感性。[结果]病原菌鉴定为斯高维尔炭疽菌Colletotrichum scovillei;室内药剂敏感性测定发现12种杀菌剂对C. scovillei均有一定的抑制作用,75%(w)肟菌·戊唑醇WDG、10%(w)苯醚甲环唑WDG和250 g/L吡唑醚菌酯SC的抑制效果最好,EC50分别为0.254、0.731、0.745 mg/L。其次是200 g/L异硫氰酸烯丙酯SL、3%(w)中生菌素WP、10 g/L申嗪霉素SC、80 g/L宁南霉素AS、200 g/L异硫氰酸烯丙酯EW和10 g/L蛇床子素ME,EC50分别为1.238、1.307、1.711、2.929、3.175和2.191 mg/L。将10%(w)苯醚甲环唑WDG和250 g/L吡唑醚菌酯SC按照1∶4、2∶3的体积比复配时,联合毒力测定和评价结果显示两者复配对该病菌具有协同增效作用。[结论]本研究可为辣椒生产中辣椒炭疽病的田间药剂防治提供参考。
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关键词
辣椒
炭疽
病
多基因序列分析
联合毒力测定
斯高维尔炭疽菌
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职称材料
吉林白城与内蒙古开鲁辣椒白皮病病原鉴定及生防菌筛选
3
作者
孙平平
范博文
+3 位作者
付崇毅
王永
毕智君
李正男
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2023年第12期60-71,共12页
【目的】明确吉林白城和内蒙古开鲁辣椒白皮病病原,并从辣椒根际土壤中筛选对该病原菌具有良好防效的生防菌,为辣椒白皮病的诊断和绿色防控提供参考。【方法】从吉林白城和内蒙古开鲁辣椒产区,采集表现“白皮”症状的辣椒果实及其根际...
【目的】明确吉林白城和内蒙古开鲁辣椒白皮病病原,并从辣椒根际土壤中筛选对该病原菌具有良好防效的生防菌,为辣椒白皮病的诊断和绿色防控提供参考。【方法】从吉林白城和内蒙古开鲁辣椒产区,采集表现“白皮”症状的辣椒果实及其根际土壤样品,采用组织分离法分离纯化病原菌,果实接种法验证分离病原菌的致病性,通过形态学结合ITS-ACT-TUB-CHS-GAPDH-HIS3多基因联合法对分离的致病菌进行鉴定。利用逐级稀释法分离辣椒根际土壤样品中的放线菌,用离体结合活体测定法筛选对分离病原菌有显著拮抗活性的生防菌,并采用形态学、培养特性和分子序列相结合的方法对筛选的生防菌株进行鉴定。【结果】从吉林白城和内蒙古开鲁辣椒样品中分离得到25株真菌,其中有6株真菌在致病性测定中表现出典型的白皮病症状,分别为LJ1、LJ2、LJ3、LJ4、LJ5和KLLJ9,形态学结合多基因联合确定分离的病原菌均为斯高维尔炭疽菌(Colletotrichum scovillei)。以斯高维尔炭疽菌LJ1为供试靶标菌,从辣椒根际土壤中分离到1株拮抗放线菌SLJ2-2,其能有效抑制斯高维尔炭疽菌LJ1的感染和扩展,喷施3次SLJ2-2发酵上清液后对斯高维尔炭疽菌LJ1的抑制率达到95.53%,结合形态学、培养特性和分子生物学方法将SLJ2-2鉴定为微黄白链霉菌(Streptomyces albidoflavus)。【结论】吉林白城和内蒙古开鲁地区辣椒白皮病主要由斯高维尔炭疽菌侵染引起,从辣椒根际土壤中筛选出的微黄白链霉菌能有效抑制该病原菌的感染及其在辣椒上的扩展。
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关键词
辣椒白皮病
病原鉴定
生物防治
斯高维尔炭疽菌
微白黄链霉菌
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职称材料
题名
基于LAMP的果蔬斯高维尔炭疽菌可视化检测方法
被引量：
3
1
作者
罗跃
吴小毛
刘阿丽
姚小龙
李荣玉
耿广东
机构
贵州大学作物保护研究所
贵州大学农学院
出处
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2022年第1期98-103,共6页
基金
贵州省科技支撑计划(黔科合支撑〔2019〕2272,黔科合支撑〔2020〕1Y134)
贵州省科技成果应用及产业化计划(黔科合成果〔2021〕059)
+2 种基金
贵州省科技平台及人才团队建设计划(黔科合平台人才〔2018〕5219)
贵州省高层次创新型人才培养(百层次创新型人才)(黔科合平台人才〔2022〕)
贵州大学培育项目(贵大培育〔2019〕09)。
文摘
为果蔬斯高维尔炭疽菌检测提供高效便捷、特异性好、可视化的检测方法,以果蔬斯高维尔炭疽菌内部转录间隔区ITS序列为靶基因,设计4条LAMP引物和1条环引物,通过对引物比例、反应时间、反应体系等条件的选择,建立对果蔬斯高维尔炭疽菌具有特异性扩增的LAMP检测方法。特异性试验结果显示:所建立的LAMP反应体系在最佳反应温度65℃条件下扩增60 min,以果蔬斯高维尔炭疽菌DNA为模板的反应体系在指示剂钙黄绿素和羟基萘酚蓝的作用下,分别呈现绿色和蓝色,反应结果为阳性,扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳检测呈梯形条带;而以其他8株对照菌株DNA为模板的反应体系和空白对照分别呈现橘黄色和紫色,均为阴性反应,无扩增条带出现,表明该LAMP检测方法对果蔬斯高维尔炭疽菌特异性强。
关键词
环介导等温扩增技术
果蔬
斯高维尔炭疽菌
可视化检测
Keywords
LAMP
fruit and vegetable
Colletotrichum scovillei
visual detection
分类号
S432.9 [农业科学—植物病理学]
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职称材料
题名
辣椒炭疽病病原分离鉴定及对杀菌剂敏感性测定
被引量：
4
2
作者
周志成
孙海
肖仲久
莫维弟
程欢欢
彭丽娟
丁海霞
机构
贵州大学农学院
北京市植物保护站
遵义师范学院资源与环境学院
贵州大学烟草学院
贵州省农业科学院
出处
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第3期430-437,共8页
基金
贵州省科技厅基础研究项目(黔科合基础-ZK[2022]一般094)
中国博士后科学基金(2020M683658XB)
+2 种基金
贵州省教育厅青年科技人才成长项目(黔教合KY字[2018]101)
国家重点研发计划(2017YFD0201605)
贵州省研究生科研基金(黔教合YJSKYJJ(2021)055)。
文摘
[目的]明确辣椒炭疽病病原菌Colletotrichum spp.种类,并筛选防治药剂。[方法]采集贵州省贵阳市花溪区具有典型炭疽病症状的‘党武’辣椒叶片和果实,分离病原菌;采用单孢分离法、柯赫氏法则、形态学特征结合ITS、GADPH、CHS-1和ACT多基因序列分析,明确病原菌的致病能力及分类地位;采用菌丝生长速率法测定病原菌对6种化学杀菌剂和6种生物杀菌剂的敏感性。[结果]病原菌鉴定为斯高维尔炭疽菌Colletotrichum scovillei;室内药剂敏感性测定发现12种杀菌剂对C. scovillei均有一定的抑制作用,75%(w)肟菌·戊唑醇WDG、10%(w)苯醚甲环唑WDG和250 g/L吡唑醚菌酯SC的抑制效果最好,EC50分别为0.254、0.731、0.745 mg/L。其次是200 g/L异硫氰酸烯丙酯SL、3%(w)中生菌素WP、10 g/L申嗪霉素SC、80 g/L宁南霉素AS、200 g/L异硫氰酸烯丙酯EW和10 g/L蛇床子素ME,EC50分别为1.238、1.307、1.711、2.929、3.175和2.191 mg/L。将10%(w)苯醚甲环唑WDG和250 g/L吡唑醚菌酯SC按照1∶4、2∶3的体积比复配时,联合毒力测定和评价结果显示两者复配对该病菌具有协同增效作用。[结论]本研究可为辣椒生产中辣椒炭疽病的田间药剂防治提供参考。
关键词
辣椒
炭疽
病
多基因序列分析
联合毒力测定
斯高维尔炭疽菌
Keywords
Pepper anthracnose
Multi-gene phylogenetic analysis
Co-toxicity determination
Colletotrichum scovillei
分类号
Q939 [生物学—微生物学]
S431.16 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
吉林白城与内蒙古开鲁辣椒白皮病病原鉴定及生防菌筛选
3
作者
孙平平
范博文
付崇毅
王永
毕智君
李正男
机构
内蒙古农业大学园艺与植物保护学院
内蒙古自治区农牧业科学院蔬菜花卉研究所
呼和浩特市农畜产品质量安全中心
出处
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2023年第12期60-71,共12页
基金
内蒙古自治区科技重大专项(2021SZD0040)
内蒙古自治区高教项目(NJZY21458,NJZY22521)
“科技兴蒙”行动重点专项(211)。
文摘
【目的】明确吉林白城和内蒙古开鲁辣椒白皮病病原,并从辣椒根际土壤中筛选对该病原菌具有良好防效的生防菌,为辣椒白皮病的诊断和绿色防控提供参考。【方法】从吉林白城和内蒙古开鲁辣椒产区,采集表现“白皮”症状的辣椒果实及其根际土壤样品,采用组织分离法分离纯化病原菌,果实接种法验证分离病原菌的致病性,通过形态学结合ITS-ACT-TUB-CHS-GAPDH-HIS3多基因联合法对分离的致病菌进行鉴定。利用逐级稀释法分离辣椒根际土壤样品中的放线菌,用离体结合活体测定法筛选对分离病原菌有显著拮抗活性的生防菌,并采用形态学、培养特性和分子序列相结合的方法对筛选的生防菌株进行鉴定。【结果】从吉林白城和内蒙古开鲁辣椒样品中分离得到25株真菌,其中有6株真菌在致病性测定中表现出典型的白皮病症状,分别为LJ1、LJ2、LJ3、LJ4、LJ5和KLLJ9,形态学结合多基因联合确定分离的病原菌均为斯高维尔炭疽菌(Colletotrichum scovillei)。以斯高维尔炭疽菌LJ1为供试靶标菌,从辣椒根际土壤中分离到1株拮抗放线菌SLJ2-2,其能有效抑制斯高维尔炭疽菌LJ1的感染和扩展,喷施3次SLJ2-2发酵上清液后对斯高维尔炭疽菌LJ1的抑制率达到95.53%,结合形态学、培养特性和分子生物学方法将SLJ2-2鉴定为微黄白链霉菌(Streptomyces albidoflavus)。【结论】吉林白城和内蒙古开鲁地区辣椒白皮病主要由斯高维尔炭疽菌侵染引起,从辣椒根际土壤中筛选出的微黄白链霉菌能有效抑制该病原菌的感染及其在辣椒上的扩展。
关键词
辣椒白皮病
病原鉴定
生物防治
斯高维尔炭疽菌
微白黄链霉菌
Keywords
chilli white skin
pathogen identification
biological control
Colletotrichum scovillei
Streptomyces albidoflavus
分类号
S436.418.1 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于LAMP的果蔬斯高维尔炭疽菌可视化检测方法
罗跃
吴小毛
刘阿丽
姚小龙
李荣玉
耿广东
《浙江农业学报》
CSCD
北大核心
2022
3
在线阅读
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职称材料
2
辣椒炭疽病病原分离鉴定及对杀菌剂敏感性测定
周志成
孙海
肖仲久
莫维弟
程欢欢
彭丽娟
丁海霞
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2023
4
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下载PDF
职称材料
3
吉林白城与内蒙古开鲁辣椒白皮病病原鉴定及生防菌筛选
孙平平
范博文
付崇毅
王永
毕智君
李正男
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2023
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