斜纹夜蛾核多角体病毒诱导甜菜夜蛾细胞凋亡的研究 被引量：1

1

作者 余倩 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期79-83,共5页

斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura multiple nucleopolyhedrovirus,SpltMNPV)不能成功感染亲缘关系相近的甜菜夜蛾Spodoptera exigua,为了探究其中原因,取SpltMNPV感染甜菜夜蛾离体细胞Se301,利用光学显微镜,电子显微镜以及DAPI(... 斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura multiple nucleopolyhedrovirus,SpltMNPV)不能成功感染亲缘关系相近的甜菜夜蛾Spodoptera exigua,为了探究其中原因,取SpltMNPV感染甜菜夜蛾离体细胞Se301,利用光学显微镜,电子显微镜以及DAPI(4',6-Diamidine-2'-phenylindole dihydrochloride)荧光染色等方法对其进行检测。结果显示Se301细胞被SpltMNPV感染后出现早期凋亡特征,但未进行至细胞凋亡晚期形成凋亡小体;病毒感染受到阻碍,始终没有病毒多角体和有感染性的芽生型子代病毒产生;综合以上结果说明早期细胞凋亡仍然是限制病毒完成复制周期的重要因素。 展开更多

关键词 斜纹夜蛾多角体病毒 Se301 早期凋亡

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保幼激素类似物对斜纹夜蛾核多角体病毒增殖的影响 被引量：10

2

作者 刘永平 王方海 +2 位作者 苏志坚 李广宏 庞义 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期866-870,共5页

分别用5×106,1×107,5×107,1×108PIBs/mL4种浓度的斜纹夜蛾核多角体病毒(SpltNPV)感染斜纹夜蛾末龄幼虫(第6龄),并于同龄期以10μg/头的保幼激素类似物(JHA)methoprene分别对各感染组进行点滴处理,以研究JHA对SpltNP... 分别用5×106,1×107,5×107,1×108PIBs/mL4种浓度的斜纹夜蛾核多角体病毒(SpltNPV)感染斜纹夜蛾末龄幼虫(第6龄),并于同龄期以10μg/头的保幼激素类似物(JHA)methoprene分别对各感染组进行点滴处理,以研究JHA对SpltNPV增殖的影响。研究表明,与对照组相比各不同浓度处理组病毒总产量分别提高227.06%、128.71%、52.62%、33.15%,平均单头病毒含量分别提高49.15%、48.40%、36.40%和31.11%,病毒感染死亡率分别提高119.21%、52.72%、12.64%和1.12%。其中以1×107PIBs/mL感染再经JHA处理的病毒总产量和平均单头病毒含量最高,分别为1701.8×108PIBs和60.1×108PIBs。各处理组的病毒总产量和平均单头病毒含量均显著高于其对照组。在此基础上,进一步研究了JHA对染毒与未染毒宿主消化生理的影响。结果表明,JHA处理不仅延长了6龄幼虫的寿命,增加了其取食量,而且还显著提高了幼虫的食物转化率和病毒产量。 展开更多

关键词 斜纹夜蛾 保幼激素类似物 METHOPRENE 斜纹夜蛾核多角体病毒 增殖 消化生理

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斜纹夜蛾核多角体病毒gp37及其邻近序列的克隆及分析 被引量：6

3

作者 李充璧 李朝飞 +2 位作者 闫庆生 胡国栋 庞义 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第5期677-682,共6页

从斜纹夜蛾核多角体病毒 (Spodopteralituranucleopolyhedrovirus,SpltMNPV)基因组中克隆了 gp37基因 .分子生物学软件分析表明 ,在 gp37基因内部存在糖基化位点 .含有晚期表达基因的启动子序列(ATAAG) ,推测为晚期表达的病毒膜糖蛋白基... 从斜纹夜蛾核多角体病毒 (Spodopteralituranucleopolyhedrovirus,SpltMNPV)基因组中克隆了 gp37基因 .分子生物学软件分析表明 ,在 gp37基因内部存在糖基化位点 .含有晚期表达基因的启动子序列(ATAAG) ,推测为晚期表达的病毒膜糖蛋白基因 .通过GP37蛋白的同源性比较 ,绘制了以 gp37基因为基础的杆状病毒进化树 ,发现与以多角体蛋白基因 (polyhedrin)为基础所绘制的杆状病毒分子进化树有较大差异 .以polyhedrin基因为基础绘制的杆状病毒分子进化树将家蚕核多角体病毒 (Bombyxmorinucleopolyhedrovirus,BmNPV)与杆状病毒代表种———苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒 (Autographacalifornicamultinucleocapsidnucleopolyhedrovirus,AcMNPV)分开 ,根据 gp37基因分析则将二者归到同一分枝 。 展开更多

关键词 斜纹夜蛾核多角体病毒 gp37基因簇 克隆 序列分析

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斜纹夜蛾核型多角体病毒对宿主致死的时间和浓度效应 被引量：9

4

作者 蒋杰贤 王奎武 +1 位作者 游兰韶 陈永年 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期44-47,共4页

应用时间 -剂量 -死亡率模型研究了斜纹夜蛾核型多角体病毒对宿主种群致死的时间和浓度效应 .结果表明 ,斜纹夜蛾核型多角体病毒对斜纹夜蛾幼虫有很强的毒力 ,当饲毒在 1.12× 10 6 PIBs/ m L 以上时引起个体全部死亡 ;单独考察病... 应用时间 -剂量 -死亡率模型研究了斜纹夜蛾核型多角体病毒对宿主种群致死的时间和浓度效应 .结果表明 ,斜纹夜蛾核型多角体病毒对斜纹夜蛾幼虫有很强的毒力 ,当饲毒在 1.12× 10 6 PIBs/ m L 以上时引起个体全部死亡 ;单独考察病毒对宿主的时间和浓度效应 ,在饲毒后的第 3天至第 15天内 ,致死中浓度 L C5 0 为 2 .5 7× 10 4～2 .17× 10 8PIBs/ m L,第 8天的 L C5 0 为 5 .95× 10 5 PIBs/ m L,在试验的病毒浓度范围内 ,致死中时间 L T5 0 为 1.3795～ 9.30 3 9d. 展开更多

关键词 斜纹夜蛾核型多角体病毒 毒力 互补重对数模型 宿主 致死浓度 致死时间效应

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斜纹夜蛾核型多角体病毒研究进展 被引量：17

5

作者 邹金城 杨勇 +1 位作者 杨益众 苏宏华 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2016年第6期800-806,共7页

斜纹夜蛾Spodoptera litura(Fabricius)是一种世界性分布的杂食性害虫,经常暴发成灾,给农业生产带来巨大损失。斜纹夜蛾核型多角体病毒(SpltNPV)能有效控制斜纹夜蛾种群数量,是有效防治斜纹夜蛾的生物制剂,具有重要的经济、生态和环保... 斜纹夜蛾Spodoptera litura(Fabricius)是一种世界性分布的杂食性害虫,经常暴发成灾,给农业生产带来巨大损失。斜纹夜蛾核型多角体病毒(SpltNPV)能有效控制斜纹夜蛾种群数量,是有效防治斜纹夜蛾的生物制剂,具有重要的经济、生态和环保价值。本文从毒力、流行病学、分子生物学、复配剂及其田间应用和对斜纹夜蛾天敌的影响等方面综述了斜纹夜蛾核型多角体病毒的研究进展。 展开更多

关键词 斜纹夜蛾核型多角体病毒 毒力 分子生物学 研究进展

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保幼激素类似物对斜纹夜蛾核型多角体病毒在宿主血淋巴中增殖动态的影响 被引量：3

6

作者 刘永平 王方海 +2 位作者 苏志坚 李广宏 庞义 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期343-348,共6页

通过研究保幼激素类似物（juvenile hormone analogues，JHA）methoprene对斜纹夜蛾核型多角体病毒（Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus，SphNPV）在宿主血淋巴中增殖的影响，以探明JHA促进SphNPV增殖的初步机制，为阐明JHA促进... 通过研究保幼激素类似物（juvenile hormone analogues，JHA）methoprene对斜纹夜蛾核型多角体病毒（Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus，SphNPV）在宿主血淋巴中增殖的影响，以探明JHA促进SphNPV增殖的初步机制，为阐明JHA促进病毒增殖提供更全面的理论依据。应用SDS—PAGE及Western blot法，分析了methoprene对SphNPV多角体蛋白（polyhedron，POLH）在宿主斜纹夜蛾6龄幼虫血淋巴中合成的影响。结果表明：经methoprene处理后2～3天可明显促进幼虫血淋巴液中POLH的合成。在此基础上，通过荧光定量PCR检测，发现methoprene对SpltNPV在幼虫血淋巴液复制的影响主要发生在处理后的第4和第5天，该期间polh基因的拷贝数比对照显著增加，拷贝数的峰值达1．22×10^10／mL。 展开更多

关键词 斜纹夜蛾 保幼激素类似物 斜纹夜蛾核型多角体病毒 增殖 血淋巴

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C型斜纹夜蛾核型多角体病毒X_(17)病毒株部分基因的序列分析 被引量：4

7

作者 刘艳荷 郭慧芳 方继朝 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1010-1017,共8页

斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura multinucleocapsid nucleopolyhdrovirus,SpltMNPV)X17株是采用活体克隆法自SpltMNPV日本小笠原株分离的病毒克隆。为了揭示X17病毒株基因型,根据已发表的SpltMNPVⅡ基因组全序列(GenBank登录... 斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura multinucleocapsid nucleopolyhdrovirus,SpltMNPV)X17株是采用活体克隆法自SpltMNPV日本小笠原株分离的病毒克隆。为了揭示X17病毒株基因型,根据已发表的SpltMNPVⅡ基因组全序列(GenBank登录号:NC_011616)设计引物,PCR扩增多角体蛋白基因(polh),并与SpltMNPV不同基因型及37种其他核型多角体病毒(NPV)作分子进化比较。系统发育树显示:SpltMNPV分为SpliNPV(A)型、SpltMNPV(B)型和SeMNPV(C)型3种基因型,此结果与前人利用基因组酶切图谱的研究结果一致。X17与SpltMNPV-1和SpltMNPVⅡ处于一个分支,属于SeMNPV(C)基因型,与A型和B型相距较远。此外,扩增了X17病毒基因38.7kD,Lef-1,Lef-9,fp,p10和p74,并与SpltMNPV,SpltMNPVⅡ,SeMNPV和SfNPV的同种基因进行同源性比较。结果表明,基于这6个ORF,X17与SpltMNPV同源性最低,其中Lef-9的氨基酸序列一致性最高,也仅为69%,38.7kD的氨基酸序列一致性只为26%。多数基因X17与SpltMNPVⅡ和SeMNPV的同源性较高,其中fp25K的氨基酸序列一致性最高,分别达95%和96%;但也有些基因同源性较低,如38.7kD的氨基酸序列一致性均为64%。因此,X17应是SpltMNPVC基因型的一种新毒株,命名为SpltMNPVⅡ-1。该研究为X17病毒株的进一步研究利用奠定基础。 展开更多

关键词 斜纹夜蛾核型多角体病毒 C基因型 基因 同源性 系统发育

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核型多角体病毒对斜纹夜蛾酚氧化酶活性及血淋巴黑化的影响 被引量：4

8

作者 季香云 包杨滨 +2 位作者 万年峰 蒋杰贤 谭继才 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期47-50,共4页

以斜纹夜蛾核型多角体病毒（S1NPV）为免疫刺激因子，观察SlNPV对斜纹夜蛾幼虫酚氧化酶活性及其血淋巴黑化的影响。结果表明：斜纹夜蛾幼虫感毒后，其血淋巴黑化率在感毒1d后开始逐渐下降，随着感毒时间推移和幼虫日龄增大，病毒抑制其... 以斜纹夜蛾核型多角体病毒（S1NPV）为免疫刺激因子，观察SlNPV对斜纹夜蛾幼虫酚氧化酶活性及其血淋巴黑化的影响。结果表明：斜纹夜蛾幼虫感毒后，其血淋巴黑化率在感毒1d后开始逐渐下降，随着感毒时间推移和幼虫日龄增大，病毒抑制其黑化作用增强；在感毒后连续5d观察时间内，感毒幼虫血淋巴黑化率始终低于健康幼虫，且在感毒4～5d后达到显著水平；感毒幼虫体内及其血淋巴酚氧化酶活性在感毒后前3d都是逐渐上升而后逐渐下降；感毒幼虫体内酚氧化酶活性在感毒后前3d高于健康幼虫，在感毒4d后开始低于健康幼虫，且在感毒2、3、5d后均达到显著水平；与健康幼虫相比，感毒幼虫血淋巴酚氧化酶活性在感毒2d后开始明显增强，但感毒5d后急剧下降。 展开更多

关键词 斜纹夜蛾核型多角体病毒(SlNPV) 斜纹夜蛾 黑化反应 酚氧化酶 血淋巴

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斑痣悬茧蜂和斜纹夜蛾核多角体病毒的互作及氟啶脲对寄生蜂的影响 被引量：3

9

作者 王节萍 郭慧芳 +2 位作者 方继朝 钟万芳 刘宝生 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第6期1268-1272,共5页

探寻不同生物防治资源协同控制害虫的可行性，研究了斑痣悬茧蜂和斜纹夜蛾核多角体病毒（SIN．PV）联合作用于斜纹夜蛾时两者的相互影响，以及昆虫生长调节剂氟啶脲对斑痣悬茧蜂的影响。结果表明，住SIN—PV浓度为10^6PIB／ml、10^7PIB... 探寻不同生物防治资源协同控制害虫的可行性，研究了斑痣悬茧蜂和斜纹夜蛾核多角体病毒（SIN．PV）联合作用于斜纹夜蛾时两者的相互影响，以及昆虫生长调节剂氟啶脲对斑痣悬茧蜂的影响。结果表明，住SIN—PV浓度为10^6PIB／ml、10^7PIB／ml和10^8PIB／ml3个浓度下，无论是病毒和寄生蜂一同处理，还是先寄生蜂处胛1d后再病毒处理，斑痣悬茧蜂对S1NPV的侵染力和侵染速度均无显著影响。联合处理时病毒对寄生蜂也无不良影响，蜂后代结茧数与对照无差异，仅缩短了先寄生蜂后10^6PIB／mlSINPV处理组寄生蜂从卯到茧的发育历期。．从氟啶脲对斑痣悬茧蜂的影响来看，寄生蜂寄生经1．25mg／L氟啶脲处理后的甜菜夜蛾，其后代发育历期和结茧均未受影响，仅羽化受影响。寄生蜂成虫直接经10mg／L、20mg／L和40mg／L（田间推荐剂量）氟啶脲处理后，均对后代结茧和发育历期等无显著影响。表明斑痣悬茧蜂可较安全地与一定浓度范围斜纹夜蛾核多角体病毒或氟啶脲耳天合用于夜蛾类害虫的控制。 展开更多

关键词 斑痣悬茧蜂 斜纹夜蛾核多角体病毒 氟啶脲

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斜纹夜蛾核多角体病毒抑制苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒诱导的斜纹夜蛾细胞凋亡 被引量：2

10

作者 张萍 杨凯 +2 位作者 代小江 庞义 苏德明 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第5期702-707,共6页

野生型苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒 (Autographacalifornicamulticapsidnucleopolyhedrovirus,AcMNPV)感染斜纹夜蛾 (Spodopteralitura)细胞系Sl zsu 1,可引起典型的细胞凋亡 ;但可以在草地夜蛾 (Spodopterafrugiperda)细胞Sf 9中复制并... 野生型苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒 (Autographacalifornicamulticapsidnucleopolyhedrovirus,AcMNPV)感染斜纹夜蛾 (Spodopteralitura)细胞系Sl zsu 1,可引起典型的细胞凋亡 ;但可以在草地夜蛾 (Spodopterafrugiperda)细胞Sf 9中复制并形成多角体 .比较了AcMNPV p35基因在病毒感染两种细胞的复制和转录情况 ,认为 p35在非受纳细胞中及时有效的表达能阻止细胞发生凋亡 ;共感染实验结果表明 ,斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodopteralituramulticapsidnucleopolyhedrovirus,SpltMNPV)可以抑制AcMNPV诱导的细胞凋亡并可帮助病毒进行复制 ,推测SpltMNPV基因组中与 p35同源的 p4 展开更多

关键词 斜纹夜蛾核多角体病毒 抑制 苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒 诱导 斜纹夜蛾细胞凋亡 P35基因

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连续传代时感染斜纹夜蛾核多角体病毒不同分离株的毒力变化 被引量：2

11

作者 郭慧芳 方继朝 +2 位作者 王节萍 刘宝生 钟万芳 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2007年第1期71-73,共3页

关键词 感染斜纹夜蛾核多角体病毒 分离株 连续传代 毒力

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斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型分离株ORF63基因的序列特征及表达与启动子活性分析 被引量：2

12

作者 刘惠芬 高绘菊 +4 位作者 王石宝 江峰 李轶女 张志芳 牟志美 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期292-298,共7页

斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型(SpltMNPVⅡ)分离株是繁殖率和毒力极强的新型病毒株,ORF63是该病毒分离株的一个功能未知基因。从SpltMNPVⅡ分离株基因组中克隆了ORF63。序列分析表明,该基因读码框为1 071 bp,编码356个氨基酸,蛋白质分子... 斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型(SpltMNPVⅡ)分离株是繁殖率和毒力极强的新型病毒株,ORF63是该病毒分离株的一个功能未知基因。从SpltMNPVⅡ分离株基因组中克隆了ORF63。序列分析表明,该基因读码框为1 071 bp,编码356个氨基酸,蛋白质分子质量为41.3 kD;起始密码子ATG上游存在一个早期和晚期启动子基序,编码蛋白序列含有CNX、MutH等多种结构域。启动子活性和转录时相分析表明ORF63是一个早、晚期表达的基因,在病毒感染4 h和18 h时有2个转录峰,24 h以后转录水平略有下降,但总体趋于稳定。构建该基因的原核表达载体pET-28a-ORF63,并转化大肠杆菌BL21(DE3),表达并纯化融合蛋白后制备多克隆抗体,Western blot检测制备的多克隆抗体特异性较好,效价可达1∶3 200以上。由以上结果推测,SpltMNPVⅡ分离株的ORF63基因是一个早期和晚期均有表达的病毒基因,可能与SpltMNPVⅡ感染宿主细胞后自身DNA的复制有关,参与早期芽生病毒(BV)的发生和晚期包涵体衍生病毒(ODV)的成熟2个过程。 展开更多

关键词 斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型分离株 ORF63基因 序列特征 原核表达 多克隆抗体

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斜纹夜蛾核型多角体病毒不同分离株基因序列的同源性分析 被引量：3

13

作者 刘艳荷 方继朝 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期817-823,共7页

研究SpltMNPV不同分离株及SpltMNPV分离株与SpliNPV间基因序列的同源性,为SpltMNPV分离株的利用提供理论基础。根据已发表的斜纹夜蛾核型多角体病毒(SpltMNPV)中国株(Zh)基因组全序列(AF527603)和海灰翅夜蛾核型多角体病毒(SpliNPV)Not... 研究SpltMNPV不同分离株及SpltMNPV分离株与SpliNPV间基因序列的同源性,为SpltMNPV分离株的利用提供理论基础。根据已发表的斜纹夜蛾核型多角体病毒(SpltMNPV)中国株(Zh)基因组全序列(AF527603)和海灰翅夜蛾核型多角体病毒(SpliNPV)NotI-D片段序列(AF527603)设计引物,PCR方法扩增得到SpltMNPV日本福冈株(Fu)、埃及株(Eg)和小笠原株(Og)的ORF39～ORF42和ORF119～ORF124编码区全序列。SpltMNPV不同分离株及SpltMNPV分离株与SpliNPV间基因序列的相似性比较,Zh株和Og株,Eg株、Fu株和SpliNPV的相似性高,而Zh株和Eg株、Fu株或SpliNPV,Og株和Eg株、Fu株或SpliNPV的相似性都比较低。亦即SpltMNPV3种基因型,B型和C型的同源性高,A型与B型或C型的同源性比较低,但A型与SpliNPV的同源性高;同一基因型内不同分离株(Eg株和Fu株)的同源性高。ETG分子进化分析表明Eg株、Fu株和SpliNPV处于一个分支,而Eg株、Fu株和SpliNPV与Zh株和Og株则处于不同的分支。因此推断Eg株和Fu株为SpliNPV的分离株,而Og株为SpltMNPV的分离株。 展开更多

关键词 斜纹夜蛾核型多角体病毒 分离株 基因 序列分析 同源性 系统发育

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斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型同源重复区的增强子功能分析 被引量：1

14

作者 刘惠芬 刘文光 +3 位作者 衣葵花 张志芳 李云芝 郭光 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期537-541,共5页

斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型(SpltNPVⅡ)基因组DNA含有7个同源重复区(hr)。采用脂质体介导转染法和瞬时表达实验对7个hr在异源病毒感染的BmN和Sf21细胞中增强异源ie1启动子转录活性的功能进行分析。结果表明,除hr5外,SpltNPVⅡhr均能增... 斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型(SpltNPVⅡ)基因组DNA含有7个同源重复区(hr)。采用脂质体介导转染法和瞬时表达实验对7个hr在异源病毒感染的BmN和Sf21细胞中增强异源ie1启动子转录活性的功能进行分析。结果表明,除hr5外,SpltNPVⅡhr均能增强BmNPV ie1启动子的转录活性,其中hr1、hr4和hr7增强效率较高,为对照的30~40倍;7个hr均能显著增强AcMNPV ie1启动子的转录活性,其中hr7增强效率高达1 246倍,其余增强效率在17~538倍之间。另外,SpltNPVⅡhr增强异源ie1启动子转录活性的效率与其所含的正反向重复序列、回文序列以及与复制相关的基序等特征结构的数目存在显著的正相关。 展开更多

关键词 斜纹夜蛾核型多角体病毒 同源重复区 增强子

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斜纹夜蛾核型多角体病毒DNA诱导同源昆虫细胞的凋亡 被引量：1

15

作者 杜昌升 彭建新 洪华珠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期592-596,共5页

发现野生型斜纹夜蛾核型多角体病毒 (Spodopteralituranuclearpolyhedrosisvirus ,SpltNPV)DNA转染SL 1细胞能诱导细胞凋亡 .SpltNPV DNA转染其同源细胞系斜纹夜蛾核SL 1细胞 6h后 ,光镜下即可见细胞膜表面突出或形成小泡 ,细胞碎裂成... 发现野生型斜纹夜蛾核型多角体病毒 (Spodopteralituranuclearpolyhedrosisvirus ,SpltNPV)DNA转染SL 1细胞能诱导细胞凋亡 .SpltNPV DNA转染其同源细胞系斜纹夜蛾核SL 1细胞 6h后 ,光镜下即可见细胞膜表面突出或形成小泡 ,细胞碎裂成凋亡小体 ,18h后 ,细胞 10 0 %碎裂成凋亡小体 .DAPI荧光染色显示感染细胞核渐呈半月形 ,直至碎裂被凋亡小体包裹 .被转染的SL 1细胞DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型梯形谱带 .野生型SpltNPV病毒粒子感染的SL 1细胞既无多角体的出现 ,也无凋亡现象的发生 . 展开更多

关键词 斜纹夜蛾核多角体病毒 DNA 诱导 同源昆虫细胞 斜纹夜蛾细胞系 细胞凋亡

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斜纹夜蛾核型多角体病毒DNA解旋酶序列比较分析 被引量：2

16

作者 刘艳荷 方继朝 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第3期496-501,共6页

根据斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus,SpltNPV)基因组全序列设计引物,PCR扩增A6、X8、X15和X17的DNA解旋酶(Helicase)基因,并将得到的序列与SpltNPV及其他核型多角体病毒的helicase基因进行同源性比较... 根据斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus,SpltNPV)基因组全序列设计引物,PCR扩增A6、X8、X15和X17的DNA解旋酶(Helicase)基因,并将得到的序列与SpltNPV及其他核型多角体病毒的helicase基因进行同源性比较和分子进化分析。结果表明,A6、X8和X15与SpltNPV同源性较高,核苷酸序列相似性分别为89%、89%和91%,氨基酸序列相似性均为93%;X17与SpltNPV2和甜菜夜蛾核型多角体病毒(Spodopteraexguia NPV,SeNPV)同源性高,核苷酸序列相似性分别是90%和82%,氨基酸序列相似性分别为92%和83%;而SpltNPV、A6、X8、X15与X17、SpltNPV2、SeNPV的同源性较低,核苷酸序列相似性为52%～54%,氨基酸序列相似性为41%～43%。分子进化分析发现,供试斜纹夜蛾核型多角体病毒分为2组:X17、SpltNPV2、SeNPV处在一个分支,而A6、X8、X15、SpltNPV处在另外一个分支。 展开更多

关键词 斜纹夜蛾核型多角体病毒 DNA解旋酶基因 序列比较

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斜纹夜蛾核多角体病毒Splt119基因在大肠杆菌中的表达及抗体制备

17

作者 李赛男 李朝飞 +1 位作者 庞义 杨凯 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期160-164,共5页

用PCR的方法扩增得到斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura nucleopolyhedrovirns,SpltMNPV)ORF119全长基因(Splt119),将其克隆至5′端有6×His编码序列的原核表达载体pQE30上,转化大肠杆菌M15[pREP4],在1 mmol/LIPTG诱导下超量... 用PCR的方法扩增得到斜纹夜蛾核多角体病毒(Spodoptera litura nucleopolyhedrovirns,SpltMNPV)ORF119全长基因(Splt119),将其克隆至5′端有6×His编码序列的原核表达载体pQE30上,转化大肠杆菌M15[pREP4],在1 mmol/LIPTG诱导下超量表达了一个分子量约28 kD的融合蛋白。经聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化,免疫新西兰大白兔制备了特异的抗Splt119抗体。Western blotting免疫印迹分析表明,该抗体适合用作Spltl19蛋白功能的进一步研究。 展开更多

关键词 斜纹夜蛾核多角体病毒 Splt119基因 克隆 原核表达 抗血清

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斜纹夜蛾核型多角体病毒的研究与应用 被引量：5

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作者 毛建萍 浦冠勤 《中国蚕业》 2005年第2期6-9,共4页

斜纹夜蛾属鳞翅目夜蛾科,是世界性分布的暴食性害虫,为害十字花科、茄科、葫芦科、豆科及粮、棉等99科290多种农作物.斜纹夜蛾食性广,繁殖快,长江中下游地区在20世纪90年代以来几乎连年暴发成灾,已成为十字花科蔬菜、城市绿化地花草的... 斜纹夜蛾属鳞翅目夜蛾科,是世界性分布的暴食性害虫,为害十字花科、茄科、葫芦科、豆科及粮、棉等99科290多种农作物.斜纹夜蛾食性广,繁殖快,长江中下游地区在20世纪90年代以来几乎连年暴发成灾,已成为十字花科蔬菜、城市绿化地花草的最主要害虫之一.斜纹夜蛾在桑树上间歇暴发为害,严重影响蚕桑生产.长期以来化学药剂的大量使用,不仅使害虫的抗药性增强,而且对生态环境带来了很大影响.在桑树上应用农药防治,更易引起家蚕中毒,造成蚕茧减产. 展开更多

关键词 斜纹夜蛾核型多角体病毒 应用 20世纪90年代 长江中下游地区 十字花科蔬菜 暴发成灾 主要害虫 蚕桑生产 化学药剂 生态环境 农药防治 夜蛾科 鳞翅目 世界性 葫芦科 农作物 绿化地 抗药性 食性 为害 桑树 花草 中毒 家蚕

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斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型DNA复制原点的功能分析

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作者 刘惠芬 刘文光 +3 位作者 衣葵花 张志芳 李云芝 郭光 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期686-690,共5页

斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型(SpltNPVⅡ)基因组DNA含有7个同源重复区(hr)。采用脂质体介导转染法和实时荧光定量PCR对7个hr在异源病毒感染的BmN和Sf21细胞中的复制原点功能进行分析。结果表明,SpltNPVⅡhr在BmN和Sf21细胞中均具有复制... 斜纹夜蛾核型多角体病毒Ⅱ型(SpltNPVⅡ)基因组DNA含有7个同源重复区(hr)。采用脂质体介导转染法和实时荧光定量PCR对7个hr在异源病毒感染的BmN和Sf21细胞中的复制原点功能进行分析。结果表明,SpltNPVⅡhr在BmN和Sf21细胞中均具有复制原点功能,但其复制起始能力不同。BmNPV感染的BmN细胞中,hr4复制起始能力最强,每微克DNA中的拷贝数达405×10^5个,hr5复制起始能力最弱,仅为221×10^4个拷贝/μg;AcMNPV感染的Sf21细胞中hr1复制起始能力最强,可达592×10^6个拷贝/μg,hr5复制起始能力最弱,仅为191×10^4个拷贝/μg。另外,SpltNPVⅡhr在异源细胞中的复制起始能力与其所含回文序列及复制相关的基序等特征结构的数目存在显著的正相关。 展开更多

关键词 复制原点 同源重复区 斜纹夜蛾核型多角体病毒

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自然界斜纹夜蛾核型多角体病毒的基因型多态性(英文)

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作者 刘艳荷 王利华 方继朝 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期372-378,共7页

【目的】从基因组序列角度进一步揭示自然界斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus,SpltNPV)的基因型多态性。【方法】病毒克隆A5,F1,X3和X15分别以活体克隆法分离自SpltNPV埃及株、日本福冈株和日本小笠原株... 【目的】从基因组序列角度进一步揭示自然界斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus,SpltNPV)的基因型多态性。【方法】病毒克隆A5,F1,X3和X15分别以活体克隆法分离自SpltNPV埃及株、日本福冈株和日本小笠原株。根据SpltNPV基因组全序列(GenBank登录号:AF325155)和海灰翅夜蛾核型多角体病毒(S.littoralis NPV,SpliNPV)部分基因序列(GenBank登录号:X99377,X99376和X98924)设计引物,PCR扩增获得A5,F1,X3和X15的多角体蛋白(polyhedrin,polh)基因和ORF18～ORF23序列。【结果】根据多角体蛋白基因序列,X3和X15属于SpltNPV型,而A5和F1属于SpliNPV型。将A5,F1,X3和X15的ORF18～ORF23与SpltNPV和SpliNPV相应的基因序列进行同源性比较。结果发现,F1与SpliNPV以及X3与SpltNPV的核苷酸序列相似性高,但X3的ORF20在172～558nt处缺失387bp。尽管依据多角体蛋白基因序列X15属于SpltNPV型,但对于ORF18～ORF23序列,X15与SpliNPV的相似性高于与SpltNPV的相似性。同样,A5属于SpliNPV型,ORF18～ORF20与SpliNPV相应的核苷酸序列相似性高,但ORF21与SpltNPV相应的核苷酸序列一致性为100%,特别是ORF22,SpltNPV的特有序列出现在A5的基因组中,而且与SpltNPV的ORF22一致性为100%;反过来,ORF23又与SpliNPV相应的核苷酸序列相似性高。【结论】所有这些都表明,SpltNPV在自然界不仅存在基因型多态性,而且即使属于同一基因型,它们的基因组序列也有显著差异。可利用SpltNPV在自然界的这种异质性筛选适宜防治斜纹夜蛾幼虫的株系。 展开更多

关键词 斜纹夜蛾核型多角体病毒 病毒克隆 基因型 基因组 多态性

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