斑点金免疫渗滤测定法检测耕牛血吸虫病

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作者 段友刚 方兰勇 《畜牧兽医科技信息》 2007年第2期37-37,共1页

关键词 免疫胶体金 牛血吸虫病 测定法 斑点 渗滤 抗原抗体 检测 标记技术

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斑点金免疫渗滤测定法检测耕牛血吸虫病的效果观察

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作者 段友刚 《浙江畜牧兽医》 2007年第1期30-30,共1页

关键词 免疫胶体金 牛血吸虫病 测定法 斑点 检测 渗滤 抗原抗体 标记技术

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斑点免疫金渗滤法同时检测猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征抗体的研究 被引量：9

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作者 王荣 孔繁德 +1 位作者 吴德峰 徐淑菲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期107-111,共5页

在猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征单重斑点免疫金渗滤法的基础上,建立能同时检测HC和PRRS的双重斑点免疫金渗滤法。将提纯的HC和PRRS抗原同时包被在硝酸纤维膜上,利用胶体金标记SPA显色,当猪血清中含有HC、PRRS抗体时,则相应的点会显现红色(... 在猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征单重斑点免疫金渗滤法的基础上,建立能同时检测HC和PRRS的双重斑点免疫金渗滤法。将提纯的HC和PRRS抗原同时包被在硝酸纤维膜上,利用胶体金标记SPA显色,当猪血清中含有HC、PRRS抗体时,则相应的点会显现红色(呈红色斑点),结果易于判断。且操作简单,耗时短,与猪细小病毒、口蹄疫和猪伪狂犬病毒阳性血清不发生交叉反应。 展开更多

关键词 斑点免疫金渗滤法 猪瘟 蓝耳病 胶体金 检测

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斑点金免疫渗滤法快速检测禽肉中金霉素残留 被引量：6

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作者 武玉香 刘志国 +2 位作者 韩增飞 张露 孙田 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第7期348-351,共4页

研究斑点金免疫渗滤法快速检测禽肉中金霉素残留,将制备的金霉素多克隆抗体点在硝酸纤维素膜上,用以竞争捕获胶体金标记的金霉素-牛血清白蛋白结合物和样品中的游离金霉素,通过可见的颜色深浅判断结果。结果表明,本方法的检测限为0.4μg... 研究斑点金免疫渗滤法快速检测禽肉中金霉素残留,将制备的金霉素多克隆抗体点在硝酸纤维素膜上,用以竞争捕获胶体金标记的金霉素-牛血清白蛋白结合物和样品中的游离金霉素,通过可见的颜色深浅判断结果。结果表明,本方法的检测限为0.4μg/ml,在金霉素浓度为0.6～1μg/ml范围内可实现定量分析。结果与酶联免疫方法的测定结果一致(相关系数r为0.970)。该法可应用于禽肉中金霉素残留的快速检测。 展开更多

关键词 金霉素 胶体金 斑点金免疫渗滤法

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斑点免疫金渗滤法检测猪瘟抗体的研究 被引量：21

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作者 孔繁德 黄印尧 +2 位作者 赖清金 洪于准 陆承平 《中国动物检疫》 CAS 2003年第11期27-29,共3页

以猪瘟抗原包被硝酸纤维素膜,然后用胶体金标记SPA,建立检测猪瘟抗体水平的斑点免疫金渗滤法检测试纸盒。通过胶体金标记金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)直接显色,阳性者出现红色斑点,结果易于判断。整个试验过程仅需5min,操作简单,与猪兰耳... 以猪瘟抗原包被硝酸纤维素膜,然后用胶体金标记SPA,建立检测猪瘟抗体水平的斑点免疫金渗滤法检测试纸盒。通过胶体金标记金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)直接显色,阳性者出现红色斑点,结果易于判断。整个试验过程仅需5min,操作简单,与猪兰耳病、猪伪狂犬病、猪细小病毒、新城疫和禽流感等阳性血清不发生交叉反应。同时将该法与目前猪瘟的常规检测方法Dot-ELISA法和间接血凝试验同时对200份猪血清进行猪瘟抗体检测比较,符合率达98.4％和98.9％。说明该法微量、特异、敏感可靠,检测时间短,效果直观,非常适用于猪瘟的早期诊断和普查以及疫苗免疫效果后抗体水平的检测。 展开更多

关键词 斑点免疫金渗滤法 检测技术 猪瘟抗体 抗原 待检血清 阳性血清 阴性血清 胶体金 DIGFA法

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斑点免疫金渗滤法检测鸭肝炎病毒的研究 被引量：13

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作者 张小飞 陈毓川 +3 位作者 刘庆年 姚淮平 解启发 胡晓苗 《安徽农业科学》 CAS 1997年第4期373-376,共4页

用胶体金标记提纯后的兔抗鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）ＩｇＧ，建立了一种以微孔滤膜为固相载体，以红色胶体金为标记物的检测ＤＨＶ的斑点免疫金渗滤法（ＤＩＧＦＡ），并确定了最佳试验条件。该法既可定性，亦可定量，对纯化ＤＨＶ的最小检... 用胶体金标记提纯后的兔抗鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）ＩｇＧ，建立了一种以微孔滤膜为固相载体，以红色胶体金为标记物的检测ＤＨＶ的斑点免疫金渗滤法（ＤＩＧＦＡ），并确定了最佳试验条件。该法既可定性，亦可定量，对纯化ＤＨＶ的最小检测量为４．１２ｎｇ／点，其敏感性为抗原斑点试验（ＡＳＴ）的２倍。特异性阻断试验和交叉反应试验证明ＤＩＧＦＡ检测ＤＨＶ具有较高的特异性。对ＤＨＶ鸡胚尿囊液ＤＩＧＦＡ法检出率为１００％。ＤＩＧＦＡ和ＡＳＴ法对３６份临床样本检测阳性率分别为８３．３％和７５％，其阳性符合率为８６．７％。随机抽样的６份ＤＩＧＦＡ阳性肝脏样本经人工发病试验后电镜检查，均发现大量直径３０～４０ｎｍ的病毒粒子。实验结果表明，ＤＩＧＦＡ法是一种微量、敏感、特异、快速、简便的检测ＤＨＶ方法。 展开更多

关键词 鸭病 肝炎病毒 斑点免疫金渗滤 抗原斑点试验

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斑点金标免疫渗滤法诊断家畜血吸虫病的敏感性和特异性 被引量：6

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作者 张雪娟 卢福庄 +5 位作者 刘恩勇 方兰勇 阳爱国 何永强 付媛 项美华 《浙江农业学报》 CSCD 2006年第6期453-457,共5页

研制成家畜血吸虫病斑点金标免疫渗滤法（DIGFA）诊断试剂盒可测出人工感染血吸虫14—42d的病牛、猪和兔的血清及血纸抗体，比病原体检查法提早28d查出病畜，达到早期诊断的要求；同时亦能检出仅感染1对血吸虫病牛抗体，证实DIGFA具有... 研制成家畜血吸虫病斑点金标免疫渗滤法（DIGFA）诊断试剂盒可测出人工感染血吸虫14—42d的病牛、猪和兔的血清及血纸抗体，比病原体检查法提早28d查出病畜，达到早期诊断的要求；同时亦能检出仅感染1对血吸虫病牛抗体，证实DIGFA具有较高的敏感性。血吸虫与肝片吸虫、锥虫、蛔虫、囊虫和旋毛虫病之间未见交叉反应现象，说明本法具有较强的特异性。 展开更多

关键词 斑点金标免疫渗滤法 家畜 血吸虫抗体 敏感性 特异性

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斑点免疫金渗滤法快速检测沙门氏菌O_9抗原的研究 被引量：13

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作者 曹春梅 焦新安 +5 位作者 刘海侠 张晓明 潘志明 黄金林 张如宽 刘秀梵 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第3期210-212,共3页

目的　利用针对沙门氏菌O9抗原单克隆抗体 3- 4 7- 0和胶体金标记亲和纯化的羊抗鼠IgG ,建立一种以微孔滤膜为固相载体 ,快速检测沙门氏菌O9抗原的斑点免疫金渗滤法 (DIGFA)。方法与结果　以沙门氏菌点膜 ,加入单抗 3- 4 7- 0 ,洗涤后... 目的　利用针对沙门氏菌O9抗原单克隆抗体 3- 4 7- 0和胶体金标记亲和纯化的羊抗鼠IgG ,建立一种以微孔滤膜为固相载体 ,快速检测沙门氏菌O9抗原的斑点免疫金渗滤法 (DIGFA)。方法与结果　以沙门氏菌点膜 ,加入单抗 3- 4 7- 0 ,洗涤后再加入胶体金标记的羊抗鼠IgG ,阳性结果呈红色圆点 ,阴性结果无颜色 ,整个检测过程仅需 10min。肠炎沙门氏菌标准菌株测定该方法灵敏度为 6× 10 4CFU/点。该方法可检测所有已知含O9抗原的沙门氏菌 ,而不与其它沙门氏菌、肠杆菌科其他细菌和常见革兰氏阳性细菌反应。人工感染样品经前增菌和选择性增菌处理后即可进行瞬时检测。结论　建立了一种快速、简便、准确检测沙门氏菌O9抗原的斑点免疫金渗滤法 。 展开更多

关键词 沙门氏菌 O9抗原 免疫金渗滤法

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斑点免疫金渗滤法检测边虫病的研究 被引量：13

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作者 徐梅倩 陈克喜 +2 位作者 张北民 吴鉴三 张小正 《中国兽医寄生虫病》 CAS 1996年第3期10-12,共3页

应用自行制备的直径２５ｎｍ～３０ｎｍ的胶体金标记ＳＰＡ，建立了检测抗边虫抗体的斑点免疫金渗滤试验（ＤＩＧＦＡ），同时作与补体结合试验（ＣＦＴ）、团集凝集试验（ＣＡＴ）比较试验，结果表明ＤＩＧＦＡ是一种检测边虫病抗体的... 应用自行制备的直径２５ｎｍ～３０ｎｍ的胶体金标记ＳＰＡ，建立了检测抗边虫抗体的斑点免疫金渗滤试验（ＤＩＧＦＡ），同时作与补体结合试验（ＣＦＴ）、团集凝集试验（ＣＡＴ）比较试验，结果表明ＤＩＧＦＡ是一种检测边虫病抗体的敏感性高、特异性强、重复性好的快速、简便易行方法。 展开更多

关键词 边虫 胶体金探针 斑点免疫 金渗滤试验

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建立斑点金免疫渗滤法检测O_(157):H_7型肠出血性大肠杆菌 被引量：4

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作者 钟彦伟 汪力亚 +2 位作者 周继文 夏光明 杨守纯 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第1期83-84,共2页

关键词 O157:H7型 肠出血性 大肠杆菌 斑点金免疫渗滤

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斑点免疫金渗滤法诊断猪蛔虫病 被引量：3

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作者 何光志 田维毅 +4 位作者 王平 王文佳 韩洁 简昌友 安永如 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第21期11144-11145,11227,共3页

[目的]探讨斑点免疫金渗滤法诊断猪蛔虫病的可行性,为制备诊断猪蛔虫病试剂盒提供参考依据。[方法]采用猪蛔虫的重组蛋白AS16抗原和胶体金标记葡萄球菌蛋白A(SPA),根据免疫渗滤原理,建立抗猪蛔虫抗体的斑点金免疫渗滤检测法。[结果]斑... [目的]探讨斑点免疫金渗滤法诊断猪蛔虫病的可行性,为制备诊断猪蛔虫病试剂盒提供参考依据。[方法]采用猪蛔虫的重组蛋白AS16抗原和胶体金标记葡萄球菌蛋白A(SPA),根据免疫渗滤原理,建立抗猪蛔虫抗体的斑点金免疫渗滤检测法。[结果]斑点免疫金渗滤法检测1200份猪血清样本中猪蛔虫抗体,检出阳性率为25.00%,而琼脂扩散试验(AGP)阳性检出率为15.00%。[结论]斑点金免疫渗滤检测法具有操作简便,灵敏度高,特异性强的优点,可用于猪蛔虫病的快速检测。 展开更多

关键词 猪蛔虫病 斑点免疫金渗滤法 琼脂扩散试验 诊断

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斑点金免疫渗滤法检测不孕症患者血清抗子宫内膜抗体 被引量：3

12

作者 许国强 杜耀武 +3 位作者 马远方 张军 白慧玲 赵粤萍 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2002年第4期452-454,共3页

目的 :建立一种快速测定抗子宫内膜抗体 (antiendometrialantibody ,EMAb)的新方法。 方法 :采用经抗人血清抗体 Sepharose4B免疫吸附柱亲和层析纯化的人子宫内膜抗原 (endometriumantigen ,EMAg) ,以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗... 目的 :建立一种快速测定抗子宫内膜抗体 (antiendometrialantibody ,EMAb)的新方法。 方法 :采用经抗人血清抗体 Sepharose4B免疫吸附柱亲和层析纯化的人子宫内膜抗原 (endometriumantigen ,EMAg) ,以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗体 ,根据免疫渗滤原理 ,建立斑点金免疫渗滤法 (Dot immunogoldfiltrationassay ,DIG FA)检测人血清EMAb。共检测 5 86份不孕者血清并与酶联免疫吸附试验 (ELISA)作对比研究。结果 :纯化的人子宫内膜抗原与患者血清中特异性EMAb通过渗滤在硝酸纤维素膜上反应 ,8min内即可直接观察结果。在 5 86份血清的检测中 ,阳性率为 36 .8%,与ELISA的结果基本一致 (χ2 =3.45 ,P >0 .0 5 ) ,符合率 95 .0 %。特异性为94.7%,敏感性为 95 .6 %。交叉试验与重复试验结果显示DIGFA具有较好的特异性及稳定性。结论 :DIGFA可快速测定EMAb ,具有推广使用的价值。 展开更多

关键词 斑点金免疫渗滤试验 酶联免疫吸附试验 抗子宫膜抗体 不孕症

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新型猪囊尾蚴斑点免疫金渗滤法的建立及初步应用 被引量：10

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作者 杨湘越 兰小鹏 《实用医学杂志》 CAS 2008年第4期652-653,共2页

目的:建立一种简便快速的检测囊虫抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。方法:将毕赤酵母重组表达的猪囊尾蚴抗原cC1点于硝酸纤维素膜上,用来检测血清中囊虫抗体,通过胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白直接显色,阳性者出现红色斑点,结果易于... 目的:建立一种简便快速的检测囊虫抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。方法:将毕赤酵母重组表达的猪囊尾蚴抗原cC1点于硝酸纤维素膜上,用来检测血清中囊虫抗体,通过胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白直接显色,阳性者出现红色斑点,结果易于判断。结果:DIGFA检测40份囊虫病患者血清和40份正常人血清,敏感性为95%(38/40),特异性为100%(40/40)。检测20份包虫病患者血清,3例阳性,交叉反应率为15%(3/20);检测20份肝吸虫病患者血清,20份肺吸虫病患者血清,20份血吸虫病患者血清,均未出现交叉反应。与酶联免疫吸附试验对比,检测的总符合率为95%,差异无显著性(P﹥0.05)。结论:DIGFA简便、快速、准确,适于现场应用,可用于囊虫病的诊断及流行病学调查。 展开更多

关键词 囊虫病 抗体 斑点免疫金渗滤法

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斑点免疫金渗滤法检测抗乳铁蛋白多克隆抗体特异性研究 被引量：4

14

作者 李岩 李宏基 +2 位作者 韩立强 王静 杨国宇 《化学与生物工程》 CAS 2008年第2期32-34,共3页

采用斑点免疫金渗滤法对抗乳铁蛋白多克隆抗体特异性进行检测。结果表明金探针具有很强的选择性,斑点免疫金渗滤法能准确快速地检测出多克隆抗体的特异性。

关键词 斑点免疫金渗滤法 抗乳铁蛋白多克隆抗体 特异性 检测

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检测副溶血弧菌TDH斑点免疫胶体金渗滤法的研究 被引量：4

15

作者 杨靖亚 陆晓帆 王珍 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期733-736,751,共5页

目的:制备特异性检测副溶血弧菌TDH的斑点免疫胶体金渗滤测试盒(Dot immunogold filtration assay,DIG-FA)。方法:T6D4和T9H4两株抗体分别标记于金颗粒和点样于硝酸纤维素膜,通过双抗体夹心法来开发斑点免疫胶体金渗滤测试盒,并对测试... 目的:制备特异性检测副溶血弧菌TDH的斑点免疫胶体金渗滤测试盒(Dot immunogold filtration assay,DIG-FA)。方法:T6D4和T9H4两株抗体分别标记于金颗粒和点样于硝酸纤维素膜,通过双抗体夹心法来开发斑点免疫胶体金渗滤测试盒,并对测试盒的特异性、重复性、稳定性做了分析。结果:研制的斑点免疫胶体金渗滤测试盒能够特异性检测副溶血弧菌TDH,其最低检测限达到250 ng/ml TDH,该测试盒在4℃恒温条件下保存12周后仍表现出准确和稳定的检测结果。结论:成功制备了检测副溶血弧菌TDH的斑点免疫胶体金渗滤测试盒,对现场快速检测TDH提供了可靠的测试工具。 展开更多

关键词 副溶血弧菌 耐热直接溶血毒素 斑点免疫胶体金渗滤法 快速检测

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斑点免疫金测定法检测鸡传染性支气管炎病毒的研究 被引量：5

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作者 李新生 陈红英 +2 位作者 吴华 尹凤阁 崔宝安 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1996年第5期9-11,共3页

本文通过制备胶体金标记提纯后的兔抗IBV IgG,从而建立一种以微孔滤膜为固相载体,以红色胶体金为环记物,检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的斑点免疫金测定法(DIGFA)。该法对IBV的最小检测量为O.203μg,与鸡胚培养测定法比较,在10份自然... 本文通过制备胶体金标记提纯后的兔抗IBV IgG,从而建立一种以微孔滤膜为固相载体,以红色胶体金为环记物,检测鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的斑点免疫金测定法(DIGFA)。该法对IBV的最小检测量为O.203μg,与鸡胚培养测定法比较,在10份自然病例样品中DIGFA法检出8份,检出率为80%,而鸡胚培养测定法以盲传3～5代,出现侏儒胚者为阳性,其检出6份,检出率为60%。对接种IBV鸡胚尿囊液,DIG-FA法检出率为100%。实验结果表明,DIGFA法对鸡传染性支气管炎的早期诊断具备简便、灵敏、快速、特异性强和重复性好等优点。 展开更多

关键词 斑点免疫金测定法 鸡传染性支气管炎病毒

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斑点免疫金渗滤法检测抗荚膜组织胞浆菌抗体的研究 被引量：2

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作者 王璞 陈保文 +1 位作者 徐苗 王国治 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第20期1979-1981,共3页

目的研究快速检测荚膜组织胞浆菌抗体的方法。方法荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物(P-HTPM)为包被抗原,以葡萄球菌A蛋白(SPA)标记的免疫胶体金为检测标记物,采用斑点免疫金渗滤试验(DIGFA)检测荚膜组织胞浆菌(HC)免疫小鼠血清中抗HC抗体... 目的研究快速检测荚膜组织胞浆菌抗体的方法。方法荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物(P-HTPM)为包被抗原,以葡萄球菌A蛋白(SPA)标记的免疫胶体金为检测标记物,采用斑点免疫金渗滤试验(DIGFA)检测荚膜组织胞浆菌(HC)免疫小鼠血清中抗HC抗体以及其他真菌免疫血清中抗体。结果DIGFA检测20份HC小鼠免疫血清,结果全为阳性,与ELISA检测结果一致,敏感性为100%。检测8份正常小鼠血清出现1份假阳性,特异性为87.5%。检测其他真菌免疫血清结果为:念珠菌属和马尔尼菲青霉菌免疫血清结果全为阴性;8份皮炎芽生菌血清出现1份阳性,9份副球孢子菌血清出现2份阳性。结论斑点免疫金渗滤法检测抗HC抗体有较高的敏感性和特异性,快速简便。经临床标本扩大验证后将对荚膜组织胞浆菌病的快速诊断有应用价值。 展开更多

关键词 荚膜组织胞浆菌 斑点免疫金渗滤法 荚膜组织胞浆菌抗体

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血清旋毛虫p49抗原IgG抗体的斑点金免疫渗滤法检测 被引量：5

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作者 刘英杰 赵粤萍 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第6期533-534,518,共3页

目的 建立一种快速诊断人体旋毛虫感染的新途径。方法 以基因工程表达的猪旋毛虫融合蛋白p49/GST为抗原,将其结合于硝酸纤维素膜上,以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG作为标记抗体,建立斑点金免疫渗滤法(Dot-immunogoldfiltration assay,DIGF... 目的 建立一种快速诊断人体旋毛虫感染的新途径。方法 以基因工程表达的猪旋毛虫融合蛋白p49/GST为抗原,将其结合于硝酸纤维素膜上,以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG作为标记抗体,建立斑点金免疫渗滤法(Dot-immunogoldfiltration assay,DIGFA),检测人血清抗旋毛虫p49抗原IgG抗体。共检测76份旋毛虫患者血清并与酶联免疫吸附试验(ELISA)作对比研究。结果 抗原抗体通过渗滤在膜上反应,10min肉眼即可观察到结果,在76份患者血清的检测中,阳性率为98.68％,显著高于ELISA法的检出阳性率86.84％,(X2=7.94,P<0.01)。交叉试验与重复试验结果显示DIGFA具有较好的特异性及稳定性。结论 以纯化的融合蛋白p49/GST为抗原建立的DIGFA可快速准确检测旋毛虫病人血清特异性旋毛虫IgG抗体,具有推广应用的价值。 展开更多

关键词 斑点金免疫渗滤试验 酶联免疫吸附试验 旋毛虫抗体 融合蛋白p49/GST

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人自身抗原U1RNP 70K的酵母重组分泌表达及斑点免疫金渗滤检测法的建立 被引量：1

19

作者 杨湘越 张惠菊 +2 位作者 徐秀云 兰小鹏 朱忠勇 《医学研究生学报》 CAS 2011年第9期908-912,共5页

目的人自身抗原U1RNP 70K通常采用组织提取法或原核表达获得。文中用基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人U1RNP 70K自身抗原,并建立斑点免疫金渗滤检测法。方法 PCR扩增U1RNP 70K基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-U1RNP ... 目的人自身抗原U1RNP 70K通常采用组织提取法或原核表达获得。文中用基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人U1RNP 70K自身抗原,并建立斑点免疫金渗滤检测法。方法 PCR扩增U1RNP 70K基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-U1RNP 70K。用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清液用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western b lot)鉴定。用所表达的蛋白包被硝酸纤维素膜,建立检测U1RNP抗体的斑点免疫金渗滤法(dot immuogold filtrationassay,D IGFA)。结果 PCR产物约为1300 bp,接近于预期的1314 bp,pPIC9k-U1RNP 70K重组阳性克隆测序结果与Gen-Bank中的U1RNP 70K序列完全一致,双酶切鉴定正确,表达产物U1RNP 70K的相对分子质量约70 000。W estern b lot证实表达产物具有天然U1RNP 70K分子的免疫原性,阴性对照菌无目的条带表达。D IGFA的检测结果与欧蒙酶免疫斑点法的阳性符合率为94.74%(54/57),阴性符合率为98.00%(49/50),总符合率为96.26%(103/107)。2种方法检测结果无统计学显著差异(P=0.617)。结论在毕赤酵母中成功地高分泌表达了U1RNP 70K蛋白,并建立了简便、快速、准确检测U1RNP抗体的DIGFA方法。 展开更多

关键词 自身抗原 U1RNP70K 克隆 表达 巴斯德毕赤酵母 斑点免疫金渗滤法

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新型自身抗体联合检测斑点免疫金渗滤法的建立及应用评价 被引量：1

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作者 杨湘越 兰小鹏 +1 位作者 徐秀云 张惠菊 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第7期1147-1149,共3页

目的:建立一种简便快速的联合检测自身抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。方法:将多种人自身抗原SmD1、SSA、SSB、Jo-1,采用毕赤酵母重组表达后,纯化抗原点于硝酸纤维素膜上,用来检测血清中相应多种自身抗体,通过胶体金标记的金黄色葡萄球... 目的:建立一种简便快速的联合检测自身抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。方法:将多种人自身抗原SmD1、SSA、SSB、Jo-1,采用毕赤酵母重组表达后,纯化抗原点于硝酸纤维素膜上,用来检测血清中相应多种自身抗体,通过胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白直接显色,阳性者出现红色斑点。结果:DIGFA检测185份经欧蒙ENA酶斑点法检测为不同自身免疫病患者血清和50份正常人血清,阳性符合率分别为抗SmD191.2%,抗SSA92.8%,抗SSB96.9%,抗Jo-192.6%,阴性符合率为100%(50/50)。与欧蒙ENA酶斑点法对比检测的总符合率为93.0%(172/185),差异无显著性(P>0.05)。结论:DIGFA法简便、快速、准确,可用于临床自身免疫病的联合诊断。 展开更多

关键词 自身免疫疾病 自身抗体 斑点免疫金渗滤法 联合检测

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