斑点免疫金渗滤法同时检测猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征抗体的研究 被引量：9

1

作者 王荣 孔繁德 +1 位作者 吴德峰 徐淑菲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期107-111,共5页

在猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征单重斑点免疫金渗滤法的基础上,建立能同时检测HC和PRRS的双重斑点免疫金渗滤法。将提纯的HC和PRRS抗原同时包被在硝酸纤维膜上,利用胶体金标记SPA显色,当猪血清中含有HC、PRRS抗体时,则相应的点会显现红色(... 在猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征单重斑点免疫金渗滤法的基础上,建立能同时检测HC和PRRS的双重斑点免疫金渗滤法。将提纯的HC和PRRS抗原同时包被在硝酸纤维膜上,利用胶体金标记SPA显色,当猪血清中含有HC、PRRS抗体时,则相应的点会显现红色(呈红色斑点),结果易于判断。且操作简单,耗时短,与猪细小病毒、口蹄疫和猪伪狂犬病毒阳性血清不发生交叉反应。 展开更多

关键词 斑点免疫金渗滤法 猪瘟 蓝耳病 胶体金 检测

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斑点免疫金渗滤法检测猪瘟抗体的研究 被引量：21

2

作者 孔繁德 黄印尧 +2 位作者 赖清金 洪于准 陆承平 《中国动物检疫》 CAS 2003年第11期27-29,共3页

以猪瘟抗原包被硝酸纤维素膜,然后用胶体金标记SPA,建立检测猪瘟抗体水平的斑点免疫金渗滤法检测试纸盒。通过胶体金标记金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)直接显色,阳性者出现红色斑点,结果易于判断。整个试验过程仅需5min,操作简单,与猪兰耳... 以猪瘟抗原包被硝酸纤维素膜,然后用胶体金标记SPA,建立检测猪瘟抗体水平的斑点免疫金渗滤法检测试纸盒。通过胶体金标记金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)直接显色,阳性者出现红色斑点,结果易于判断。整个试验过程仅需5min,操作简单,与猪兰耳病、猪伪狂犬病、猪细小病毒、新城疫和禽流感等阳性血清不发生交叉反应。同时将该法与目前猪瘟的常规检测方法Dot-ELISA法和间接血凝试验同时对200份猪血清进行猪瘟抗体检测比较,符合率达98.4％和98.9％。说明该法微量、特异、敏感可靠,检测时间短,效果直观,非常适用于猪瘟的早期诊断和普查以及疫苗免疫效果后抗体水平的检测。 展开更多

关键词 斑点免疫金渗滤法 检测技术 猪瘟抗体 抗原 待检血清 阳性血清 阴性血清 胶体金 DIGFA法

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斑点免疫金渗滤法检测鸭肝炎病毒的研究 被引量：13

3

作者 张小飞 陈毓川 +3 位作者 刘庆年 姚淮平 解启发 胡晓苗 《安徽农业科学》 CAS 1997年第4期373-376,共4页

用胶体金标记提纯后的兔抗鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）ＩｇＧ，建立了一种以微孔滤膜为固相载体，以红色胶体金为标记物的检测ＤＨＶ的斑点免疫金渗滤法（ＤＩＧＦＡ），并确定了最佳试验条件。该法既可定性，亦可定量，对纯化ＤＨＶ的最小检... 用胶体金标记提纯后的兔抗鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）ＩｇＧ，建立了一种以微孔滤膜为固相载体，以红色胶体金为标记物的检测ＤＨＶ的斑点免疫金渗滤法（ＤＩＧＦＡ），并确定了最佳试验条件。该法既可定性，亦可定量，对纯化ＤＨＶ的最小检测量为４．１２ｎｇ／点，其敏感性为抗原斑点试验（ＡＳＴ）的２倍。特异性阻断试验和交叉反应试验证明ＤＩＧＦＡ检测ＤＨＶ具有较高的特异性。对ＤＨＶ鸡胚尿囊液ＤＩＧＦＡ法检出率为１００％。ＤＩＧＦＡ和ＡＳＴ法对３６份临床样本检测阳性率分别为８３．３％和７５％，其阳性符合率为８６．７％。随机抽样的６份ＤＩＧＦＡ阳性肝脏样本经人工发病试验后电镜检查，均发现大量直径３０～４０ｎｍ的病毒粒子。实验结果表明，ＤＩＧＦＡ法是一种微量、敏感、特异、快速、简便的检测ＤＨＶ方法。 展开更多

关键词 鸭病 肝炎病毒 斑点免疫金渗滤 抗原斑点试验

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斑点免疫金渗滤法诊断猪蛔虫病 被引量：3

4

作者 何光志 田维毅 +4 位作者 王平 王文佳 韩洁 简昌友 安永如 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第21期11144-11145,11227,共3页

[目的]探讨斑点免疫金渗滤法诊断猪蛔虫病的可行性,为制备诊断猪蛔虫病试剂盒提供参考依据。[方法]采用猪蛔虫的重组蛋白AS16抗原和胶体金标记葡萄球菌蛋白A(SPA),根据免疫渗滤原理,建立抗猪蛔虫抗体的斑点金免疫渗滤检测法。[结果]斑... [目的]探讨斑点免疫金渗滤法诊断猪蛔虫病的可行性,为制备诊断猪蛔虫病试剂盒提供参考依据。[方法]采用猪蛔虫的重组蛋白AS16抗原和胶体金标记葡萄球菌蛋白A(SPA),根据免疫渗滤原理,建立抗猪蛔虫抗体的斑点金免疫渗滤检测法。[结果]斑点免疫金渗滤法检测1200份猪血清样本中猪蛔虫抗体,检出阳性率为25.00%,而琼脂扩散试验(AGP)阳性检出率为15.00%。[结论]斑点金免疫渗滤检测法具有操作简便,灵敏度高,特异性强的优点,可用于猪蛔虫病的快速检测。 展开更多

关键词 猪蛔虫病 斑点免疫金渗滤法 琼脂扩散试验 诊断

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斑点免疫金渗滤法检测抗乳铁蛋白多克隆抗体特异性研究 被引量：4

5

作者 李岩 李宏基 +2 位作者 韩立强 王静 杨国宇 《化学与生物工程》 CAS 2008年第2期32-34,共3页

采用斑点免疫金渗滤法对抗乳铁蛋白多克隆抗体特异性进行检测。结果表明金探针具有很强的选择性,斑点免疫金渗滤法能准确快速地检测出多克隆抗体的特异性。

关键词 斑点免疫金渗滤法 抗乳铁蛋白多克隆抗体 特异性 检测

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新型猪囊尾蚴斑点免疫金渗滤法的建立及初步应用 被引量：10

6

作者 杨湘越 兰小鹏 《实用医学杂志》 CAS 2008年第4期652-653,共2页

目的:建立一种简便快速的检测囊虫抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。方法:将毕赤酵母重组表达的猪囊尾蚴抗原cC1点于硝酸纤维素膜上,用来检测血清中囊虫抗体,通过胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白直接显色,阳性者出现红色斑点,结果易于... 目的:建立一种简便快速的检测囊虫抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。方法:将毕赤酵母重组表达的猪囊尾蚴抗原cC1点于硝酸纤维素膜上,用来检测血清中囊虫抗体,通过胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白直接显色,阳性者出现红色斑点,结果易于判断。结果:DIGFA检测40份囊虫病患者血清和40份正常人血清,敏感性为95%(38/40),特异性为100%(40/40)。检测20份包虫病患者血清,3例阳性,交叉反应率为15%(3/20);检测20份肝吸虫病患者血清,20份肺吸虫病患者血清,20份血吸虫病患者血清,均未出现交叉反应。与酶联免疫吸附试验对比,检测的总符合率为95%,差异无显著性(P﹥0.05)。结论:DIGFA简便、快速、准确,适于现场应用,可用于囊虫病的诊断及流行病学调查。 展开更多

关键词 囊虫病 抗体 斑点免疫金渗滤法

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斑点免疫金渗滤法检测抗荚膜组织胞浆菌抗体的研究 被引量：2

7

作者 王璞 陈保文 +1 位作者 徐苗 王国治 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第20期1979-1981,共3页

目的研究快速检测荚膜组织胞浆菌抗体的方法。方法荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物(P-HTPM)为包被抗原,以葡萄球菌A蛋白(SPA)标记的免疫胶体金为检测标记物,采用斑点免疫金渗滤试验(DIGFA)检测荚膜组织胞浆菌(HC)免疫小鼠血清中抗HC抗体... 目的研究快速检测荚膜组织胞浆菌抗体的方法。方法荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物(P-HTPM)为包被抗原,以葡萄球菌A蛋白(SPA)标记的免疫胶体金为检测标记物,采用斑点免疫金渗滤试验(DIGFA)检测荚膜组织胞浆菌(HC)免疫小鼠血清中抗HC抗体以及其他真菌免疫血清中抗体。结果DIGFA检测20份HC小鼠免疫血清,结果全为阳性,与ELISA检测结果一致,敏感性为100%。检测8份正常小鼠血清出现1份假阳性,特异性为87.5%。检测其他真菌免疫血清结果为:念珠菌属和马尔尼菲青霉菌免疫血清结果全为阴性;8份皮炎芽生菌血清出现1份阳性,9份副球孢子菌血清出现2份阳性。结论斑点免疫金渗滤法检测抗HC抗体有较高的敏感性和特异性,快速简便。经临床标本扩大验证后将对荚膜组织胞浆菌病的快速诊断有应用价值。 展开更多

关键词 荚膜组织胞浆菌 斑点免疫金渗滤法 荚膜组织胞浆菌抗体

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人自身抗原U1RNP 70K的酵母重组分泌表达及斑点免疫金渗滤检测法的建立 被引量：1

8

作者 杨湘越 张惠菊 +2 位作者 徐秀云 兰小鹏 朱忠勇 《医学研究生学报》 CAS 2011年第9期908-912,共5页

目的人自身抗原U1RNP 70K通常采用组织提取法或原核表达获得。文中用基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人U1RNP 70K自身抗原,并建立斑点免疫金渗滤检测法。方法 PCR扩增U1RNP 70K基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-U1RNP ... 目的人自身抗原U1RNP 70K通常采用组织提取法或原核表达获得。文中用基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人U1RNP 70K自身抗原,并建立斑点免疫金渗滤检测法。方法 PCR扩增U1RNP 70K基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-U1RNP 70K。用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清液用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western b lot)鉴定。用所表达的蛋白包被硝酸纤维素膜,建立检测U1RNP抗体的斑点免疫金渗滤法(dot immuogold filtrationassay,D IGFA)。结果 PCR产物约为1300 bp,接近于预期的1314 bp,pPIC9k-U1RNP 70K重组阳性克隆测序结果与Gen-Bank中的U1RNP 70K序列完全一致,双酶切鉴定正确,表达产物U1RNP 70K的相对分子质量约70 000。W estern b lot证实表达产物具有天然U1RNP 70K分子的免疫原性,阴性对照菌无目的条带表达。D IGFA的检测结果与欧蒙酶免疫斑点法的阳性符合率为94.74%(54/57),阴性符合率为98.00%(49/50),总符合率为96.26%(103/107)。2种方法检测结果无统计学显著差异(P=0.617)。结论在毕赤酵母中成功地高分泌表达了U1RNP 70K蛋白,并建立了简便、快速、准确检测U1RNP抗体的DIGFA方法。 展开更多

关键词 自身抗原 U1RNP70K 克隆 表达 巴斯德毕赤酵母 斑点免疫金渗滤法

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新型自身抗体联合检测斑点免疫金渗滤法的建立及应用评价 被引量：1

9

作者 杨湘越 兰小鹏 +1 位作者 徐秀云 张惠菊 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第7期1147-1149,共3页

目的:建立一种简便快速的联合检测自身抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。方法:将多种人自身抗原SmD1、SSA、SSB、Jo-1,采用毕赤酵母重组表达后,纯化抗原点于硝酸纤维素膜上,用来检测血清中相应多种自身抗体,通过胶体金标记的金黄色葡萄球... 目的:建立一种简便快速的联合检测自身抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。方法:将多种人自身抗原SmD1、SSA、SSB、Jo-1,采用毕赤酵母重组表达后,纯化抗原点于硝酸纤维素膜上,用来检测血清中相应多种自身抗体,通过胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白直接显色,阳性者出现红色斑点。结果:DIGFA检测185份经欧蒙ENA酶斑点法检测为不同自身免疫病患者血清和50份正常人血清,阳性符合率分别为抗SmD191.2%,抗SSA92.8%,抗SSB96.9%,抗Jo-192.6%,阴性符合率为100%(50/50)。与欧蒙ENA酶斑点法对比检测的总符合率为93.0%(172/185),差异无显著性(P>0.05)。结论:DIGFA法简便、快速、准确,可用于临床自身免疫病的联合诊断。 展开更多

关键词 自身免疫疾病 自身抗体 斑点免疫金渗滤法 联合检测

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人自身抗原SSA52的酵母重组分泌表达及其斑点免疫金渗滤法的建立 被引量：1

10

作者 杨湘越 宋涛 兰小鹏 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期176-180,共5页

人自身抗原SSA52通常采用组织提取法或原核表达获得,存在诸多问题。通过基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人自身抗原SSA52,并建立斑点免疫金渗滤法。采用RT-PCR扩增SSA52基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-SSA52。用电穿... 人自身抗原SSA52通常采用组织提取法或原核表达获得,存在诸多问题。通过基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人自身抗原SSA52,并建立斑点免疫金渗滤法。采用RT-PCR扩增SSA52基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-SSA52。用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清液用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blot)鉴定,并建立斑点免疫金渗滤法(dot immuogold filtration assay,DIGFA),进行初步临床应用对比研究。结果显示,RT-PCR产物约为1 400 bp,与预期1 428 bp接近,pPIC9k-SSA52重组阳性克隆测序结果与基因库核酸数据库报道完全一致,双酶切鉴定正确,表达产物SSA52的相对分子质量约52 kD。Western blot法证实表达产物具有天然SSA52分子的免疫原性,阴性对照菌未见目的表达条带。DIGFA与欧蒙酶免疫斑点法的阳性符合率为95.2%(120/126),阴性符合率为94.0%(47/50),总符合率为94.9%(167/176);两种方法检测结果无统计学显著差异(P>0.05)。说明SSA52在毕赤酵母中分泌表达成功,建立的DIGFA简便、快速、准确。 展开更多

关键词 自身抗原 SSA52 克隆 表达 巴斯德毕赤酵母 斑点免疫金渗滤法

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用斑点免疫金渗滤法检测上海地区奶牛肝片吸虫病的感染 被引量：3

11

作者 徐梅倩 何国声 +4 位作者 金笑敏 曹杰 朱顺海 顾越星 王永康 《中国兽医寄生虫病》 1999年第3期7-8,共2页

为了了解上海地区奶牛肝片吸虫病的感染情况，用斑点免疫金渗滤法检测了上海地区奶牛血清５７８份，结果阳性４５份，阳性率７．８％，与粪便检查结果相近。该方法操作简便，反应速度快，可作为检查和监测奶牛场奶牛肝片吸虫病的一种有... 为了了解上海地区奶牛肝片吸虫病的感染情况，用斑点免疫金渗滤法检测了上海地区奶牛血清５７８份，结果阳性４５份，阳性率７．８％，与粪便检查结果相近。该方法操作简便，反应速度快，可作为检查和监测奶牛场奶牛肝片吸虫病的一种有效和实用的方法。 展开更多

关键词 奶牛 肝片吸虫病 斑点免疫金渗滤 检测

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斑点免疫金渗滤法同时检测猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征抗体的研究 被引量：1

12

作者 王荣 孔繁德 +2 位作者 陈琼 吴德峰 徐淑菲 《福建畜牧兽医》 2008年第S1期12-16,共5页

在猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征单重斑点免疫金渗滤法的基础上,建立能同时检测HC和PRRS的双重斑点免疫金渗滤法。将提纯的HC和PRRS抗原同时包被在硝酸纤维膜上,利用胶体金标记SPA显色,当猪血清中含有HC、PRRS抗体时,则相应的点会显现红色(... 在猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征单重斑点免疫金渗滤法的基础上,建立能同时检测HC和PRRS的双重斑点免疫金渗滤法。将提纯的HC和PRRS抗原同时包被在硝酸纤维膜上,利用胶体金标记SPA显色,当猪血清中含有HC、PRRS抗体时,则相应的点会显现红色(呈红色斑点),结果易于判断。且操作简单,耗时短,与猪细小病毒、口蹄疫和猪伪狂犬病毒阳性血清不发生交叉反应。 展开更多

关键词 斑点免疫金渗滤法 猪瘟 蓝耳病 胶体金 检测

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应用斑点免疫金渗滤法诊断犬弓首蛔虫病

13

作者 何光志 田维毅 +2 位作者 钱宁 简昌友 安永如 《贵州畜牧兽医》 2010年第4期1-2,共2页

根据免疫渗滤原理,采用犬弓首蛔虫抗原蛋白和胶体金标记SPA,建立抗犬弓首蛔虫抗体的斑点免疫金渗滤法(D IGFA)检测200份犬血清样本。结果:阳性检出率为8.00%(16/200);血清样本对应犬粪便用饱和盐水漂浮法检查虫卵,阳性检出率为2.0%(4/2... 根据免疫渗滤原理,采用犬弓首蛔虫抗原蛋白和胶体金标记SPA,建立抗犬弓首蛔虫抗体的斑点免疫金渗滤法(D IGFA)检测200份犬血清样本。结果:阳性检出率为8.00%(16/200);血清样本对应犬粪便用饱和盐水漂浮法检查虫卵,阳性检出率为2.0%(4/200)。结论:斑点免疫金渗滤法具有操作简便、灵敏度高、特异性强的优点,可用于犬弓首蛔虫病的早期、快速检测。 展开更多

关键词 犬弓首蛔虫病 斑点免疫金渗滤法 诊断

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斑点免疫金渗滤法检测鸡白痢/鸡伤寒沙门氏菌抗体的应用研究 被引量：4

14

作者 曹春梅 焦新安 +3 位作者 欧卫军 曹志刚 潘志明 刘秀梵 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期577-580,共4页

将鸡伤寒沙门氏菌LPS抗原包被于渗滤盒检测区(T区),针对沙门氏菌O9抗原单克隆抗体3-47-0包被在质控区(C区),用胶体金标记鸡伤寒沙门氏菌LPS抗原,建立了一种抗原夹心法快速检测鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。DI... 将鸡伤寒沙门氏菌LPS抗原包被于渗滤盒检测区(T区),针对沙门氏菌O9抗原单克隆抗体3-47-0包被在质控区(C区),用胶体金标记鸡伤寒沙门氏菌LPS抗原,建立了一种抗原夹心法快速检测鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌抗体的斑点免疫金渗滤法(DIGFA)。DIGFA比玻板凝集试验(PAT)灵敏度高,人工感染鸡试验表明在感染后第7d即可从32只鸡中的7只检测到抗体,在时间上早于PAT。722份现场血清样品的检疫结果表明,DIGFA的阳性检出率稍高于PAT,阳性样品抗体几何平均滴度DIGFA大于PAT法(p<0.05〉。DIGFA的结果得到细菌分离试验的验证。这些结果表明DIGFA快速、灵敏、准确,为鸡伤寒和鸡白痢的检疫提供了一个新的有效手段。 展开更多

关键词 鸡白痢/鸡伤寒沙门氏菌 斑点免疫金渗滤法(DIGFA)

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生物素-亲合素斑点免疫金渗滤试验检测血清中登革病毒4型抗原

15

作者 姚海军 段馥琴 +1 位作者 曹虹 刘久来 《第一军医大学学报》 CSCD 1999年第2期163-164,共2页

目的建立用斑点免疫金渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）检测血请中登革病毒抗原的方法。方法一株ＤＶ４型特异性单克隆抗体点加于硝酸纤维膜上，以捕获血清中的ＤＶ４抗原。借助黄病毒组反应性单克隆抗体、生物素化革抗鼠ＩｇＧ抗体、金标ＳＰＡ... 目的建立用斑点免疫金渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）检测血请中登革病毒抗原的方法。方法一株ＤＶ４型特异性单克隆抗体点加于硝酸纤维膜上，以捕获血清中的ＤＶ４抗原。借助黄病毒组反应性单克隆抗体、生物素化革抗鼠ＩｇＧ抗体、金标ＳＰＡ和金标亲合素，建立用ＤＩＧＦＡ检测血清中登革病毒抗原的方法。结果常规ＤＩＧＦＡ检测的敏感性高于病毒分离，而生物素一亲合素ＤＩＧＦＡ（ＢＡ－ＤＩＧＦＡ）的敏感性又高于常规的ＤＩＧＦＡ。常规ＤＩＧＦＡ可检测到５、０ＴＣＩＤ５０的病毒抗原，ＢＡ－ＤＩＧＦＡ可检测到４３ＴＣＩＤ５０的病毒抗原。结论作者建立的ＢＡ－ＤＩＧＦＡ简便、快速、敏感、特异，可用于快速诊断登革病毒４型感染。 展开更多

关键词 登革病毒 斑点免疫金渗滤试验 DIGFA 病毒分离 生物素-亲合素 DV4抗原

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用斑点免疫金渗滤法检测奶牛肝片吸虫病

16

作者 魏民 《畜牧兽医科技信息》 1999年第16期5-6,共2页

中国农科院上海家畜寄生虫病研究所徐梅倩等,用斑点免疫金渗滤法检测了牛肝片吸虫病。将 待检血清(或标准参考血清)以含1％BSA pH7.4,0.01MPBS1:100稀释后,取10μL加在滤膜中央,数秒钟待检样渗滤后,再加1:50稀释(稀释液同上)的兔抗牛血... 中国农科院上海家畜寄生虫病研究所徐梅倩等,用斑点免疫金渗滤法检测了牛肝片吸虫病。将 待检血清(或标准参考血清)以含1％BSA pH7.4,0.01MPBS1:100稀释后,取10μL加在滤膜中央,数秒钟待检样渗滤后,再加1:50稀释(稀释液同上)的兔抗牛血清10μL渗滤后,加100SPA胶体探针。渗滤后,用200μL pH7.40.01M含0.1％吐温20的PBS洗去没结合的SPA胶体金。 展开更多

关键词 斑点免疫金渗滤法 肝片吸虫 片吸虫病 奶牛 寄生虫病研究所 牛血清 吐温20 SPA胶体金 参考血清 稀释液

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斑点金免疫渗滤法快速检测禽肉中金霉素残留 被引量：6

17

作者 武玉香 刘志国 +2 位作者 韩增飞 张露 孙田 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第7期348-351,共4页

研究斑点金免疫渗滤法快速检测禽肉中金霉素残留,将制备的金霉素多克隆抗体点在硝酸纤维素膜上,用以竞争捕获胶体金标记的金霉素-牛血清白蛋白结合物和样品中的游离金霉素,通过可见的颜色深浅判断结果。结果表明,本方法的检测限为0.4μg... 研究斑点金免疫渗滤法快速检测禽肉中金霉素残留,将制备的金霉素多克隆抗体点在硝酸纤维素膜上,用以竞争捕获胶体金标记的金霉素-牛血清白蛋白结合物和样品中的游离金霉素,通过可见的颜色深浅判断结果。结果表明,本方法的检测限为0.4μg/ml,在金霉素浓度为0.6～1μg/ml范围内可实现定量分析。结果与酶联免疫方法的测定结果一致(相关系数r为0.970)。该法可应用于禽肉中金霉素残留的快速检测。 展开更多

关键词 金霉素 胶体金 斑点金免疫渗滤法

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斑点金标免疫渗滤法诊断家畜血吸虫病的敏感性和特异性 被引量：6

18

作者 张雪娟 卢福庄 +5 位作者 刘恩勇 方兰勇 阳爱国 何永强 付媛 项美华 《浙江农业学报》 CSCD 2006年第6期453-457,共5页

研制成家畜血吸虫病斑点金标免疫渗滤法（DIGFA）诊断试剂盒可测出人工感染血吸虫14—42d的病牛、猪和兔的血清及血纸抗体，比病原体检查法提早28d查出病畜，达到早期诊断的要求；同时亦能检出仅感染1对血吸虫病牛抗体，证实DIGFA具有... 研制成家畜血吸虫病斑点金标免疫渗滤法（DIGFA）诊断试剂盒可测出人工感染血吸虫14—42d的病牛、猪和兔的血清及血纸抗体，比病原体检查法提早28d查出病畜，达到早期诊断的要求；同时亦能检出仅感染1对血吸虫病牛抗体，证实DIGFA具有较高的敏感性。血吸虫与肝片吸虫、锥虫、蛔虫、囊虫和旋毛虫病之间未见交叉反应现象，说明本法具有较强的特异性。 展开更多

关键词 斑点金标免疫渗滤法 家畜 血吸虫抗体 敏感性 特异性

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建立斑点金免疫渗滤法检测O_(157):H_7型肠出血性大肠杆菌 被引量：4

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作者 钟彦伟 汪力亚 +2 位作者 周继文 夏光明 杨守纯 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第1期83-84,共2页

关键词 O157:H7型 肠出血性 大肠杆菌 斑点金免疫渗滤

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斑点金免疫渗滤法检测不孕症患者血清抗子宫内膜抗体 被引量：3

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作者 许国强 杜耀武 +3 位作者 马远方 张军 白慧玲 赵粤萍 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2002年第4期452-454,共3页

目的 :建立一种快速测定抗子宫内膜抗体 (antiendometrialantibody ,EMAb)的新方法。 方法 :采用经抗人血清抗体 Sepharose4B免疫吸附柱亲和层析纯化的人子宫内膜抗原 (endometriumantigen ,EMAg) ,以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗... 目的 :建立一种快速测定抗子宫内膜抗体 (antiendometrialantibody ,EMAb)的新方法。 方法 :采用经抗人血清抗体 Sepharose4B免疫吸附柱亲和层析纯化的人子宫内膜抗原 (endometriumantigen ,EMAg) ,以胶体金颗粒结合的羊抗人IgG为标记抗体 ,根据免疫渗滤原理 ,建立斑点金免疫渗滤法 (Dot immunogoldfiltrationassay ,DIG FA)检测人血清EMAb。共检测 5 86份不孕者血清并与酶联免疫吸附试验 (ELISA)作对比研究。结果 :纯化的人子宫内膜抗原与患者血清中特异性EMAb通过渗滤在硝酸纤维素膜上反应 ,8min内即可直接观察结果。在 5 86份血清的检测中 ,阳性率为 36 .8%,与ELISA的结果基本一致 (χ2 =3.45 ,P >0 .0 5 ) ,符合率 95 .0 %。特异性为94.7%,敏感性为 95 .6 %。交叉试验与重复试验结果显示DIGFA具有较好的特异性及稳定性。结论 :DIGFA可快速测定EMAb ,具有推广使用的价值。 展开更多

关键词 斑点金免疫渗滤试验 酶联免疫吸附试验 抗子宫膜抗体 不孕症

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