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整合素连接激酶相关磷酸酶(ILKAP)抗体的制备及其特异性分析
1
作者 张应玖 亓晓艳 +2 位作者 周旺 郑宇 韩树海 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期356-360,共5页
以整合素连接激酶相关磷酸酶(ILKAP)全蛋白为抗原,采用腿部肌肉注射和耳缘静脉注射相结合的方法对新西兰大白兔进行免疫,共免疫6次,最终获得ILKAP抗血清.采用Protein A agrose柱纯化抗体,获得ILKAP的多克隆抗体.免疫印迹分析表明,所获得... 以整合素连接激酶相关磷酸酶(ILKAP)全蛋白为抗原,采用腿部肌肉注射和耳缘静脉注射相结合的方法对新西兰大白兔进行免疫,共免疫6次,最终获得ILKAP抗血清.采用Protein A agrose柱纯化抗体,获得ILKAP的多克隆抗体.免疫印迹分析表明,所获得的ILKAP多克隆抗体具有较高的特异性,间接ELISA方法测定ILKAP多克隆抗体的滴度为1∶1 600.免疫荧光分析表明,所获得的ILKAP多克隆抗体在细胞水平应用效果较好. 展开更多
关键词 整合素连接激酶相关磷酸酶(ilkap) 抗血清 抗体 滴度 特异性
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整合素连接激酶和Toll样受体-2在眼附属器黏膜相关淋巴组织淋巴瘤中的表达及其对预后的影响
2
作者 李宝华 刘平 王新 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2018年第2期164-167,共4页
目的研究整合素连接激酶(integrin linked kinase,ILK)与Toll样受体-2(Toll like receptors-2,TLR-2)在眼附属器黏膜相关淋巴组织(mucosa-associated lymphatic tissue,MALT)淋巴瘤中的表达及其对患者生存状况的影响。方法收集46例(46眼... 目的研究整合素连接激酶(integrin linked kinase,ILK)与Toll样受体-2(Toll like receptors-2,TLR-2)在眼附属器黏膜相关淋巴组织(mucosa-associated lymphatic tissue,MALT)淋巴瘤中的表达及其对患者生存状况的影响。方法收集46例(46眼)符合眼附属器MALT淋巴瘤诊断标准的患者病灶组织标本,运用免疫组织化学染色法测定其ILK与TLR-2的蛋白表达情况,分析ILK与TLR-2蛋白与患者临床病理特征的关系;同时探讨ILK与TLR-2蛋白表达情况与患者预后的关系。结果患者瘤组织中的ILK与TLR-2蛋白表达阳性率分别为67.4%(31/46)、71.7%(33/46)。患者瘤组织中ILK、TLR-2蛋白表达阳性率均与性别、年龄、病灶部位均无关(均为P>0.05),均与Ann Arbor临床分期相关(均为P<0.05)。ILK蛋白表达阳性患者的生存期(治疗结束至随访末期的时间)为(21.5±2.7)个月,低于ILK蛋白表达阴性患者的生存期(29.2±2.1)个月(P<0.05);TLR-2蛋白表达阳性患者的生存期为(20.4±1.7)个月,低于TLR-2蛋白表达阴性患者的生存期(27.6±2.3)个月(P<0.05)。结论 ILK、TLR-2与眼附属器MALT淋巴瘤的生物学行为密切相关;联合检测ILK、TLR-2对此类疾病诊断及患者预后具有一定的指导价值。 展开更多
关键词 整合素连接激酶 Toll样受体-2 眼附属器 黏膜相关淋巴组淋巴瘤
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ILKAP在肿瘤发生发展中的作用 被引量：1
3
作者 周旺 关可兴 +1 位作者 邹雪 张应玖 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期489-494,共6页
整合素连接激酶相关磷酸酶(ILKAP)是蛋白磷酸酶2C(PP2C)家族的新成员,初步的研究结果显示,这是一种与细胞凋亡信号通路密切相关的磷酸酶.ILKAP广泛表达于人体组织中,在骨骼肌、肾脏、肝脏中有高水平的表达.介导细胞凋亡是ILKAP的主要生... 整合素连接激酶相关磷酸酶(ILKAP)是蛋白磷酸酶2C(PP2C)家族的新成员,初步的研究结果显示,这是一种与细胞凋亡信号通路密切相关的磷酸酶.ILKAP广泛表达于人体组织中,在骨骼肌、肾脏、肝脏中有高水平的表达.介导细胞凋亡是ILKAP的主要生理功能,因而与肿瘤的发生、发展密切相关.ILKAP主要通过负调控整合素激酶信号通路,以及正调控c-Jun氨基末端激酶/促分裂原活化蛋白激酶(JNK/MAPK)信号通路而发挥作用.另外,在很多肿瘤细胞中,存在ILKAP基因的杂合性缺失或突变体,使ILKAP不能正确表达,从而不能介导肿瘤细胞的凋亡. 展开更多
关键词 整合素连接激酶相关磷酸酶 蛋白磷酸酶2C 肿瘤 细胞凋亡
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电针调控杏仁核神经信号通路对创伤后应激障碍大鼠恐惧消退的影响 被引量：1
4
作者 宋凯 张虹 《世界中医药》 北大核心 2024年第23期3619-3624,3631,共7页
目的:探究电针对创伤后应激障碍(PTSD)大鼠恐惧消退的干预作用,以及对杏仁核含WW结构域的E3泛素蛋白连接酶2(WWP2)/抑癌基因磷酸酶和张力蛋白同源蛋白(PTEN)/蛋白激酶B(AKT)信号通路关键蛋白及突触可塑性蛋白突触素(SYN)、生长相关蛋白-... 目的:探究电针对创伤后应激障碍(PTSD)大鼠恐惧消退的干预作用,以及对杏仁核含WW结构域的E3泛素蛋白连接酶2(WWP2)/抑癌基因磷酸酶和张力蛋白同源蛋白(PTEN)/蛋白激酶B(AKT)信号通路关键蛋白及突触可塑性蛋白突触素(SYN)、生长相关蛋白-43(GAP-43)表达的影响。方法:雄性斯泼累格·多雷(SD)大鼠被随机分为空白组、模型组、电针组,每组8只。采用增强的连续单一应激法构建PTSD模型,随后电针治疗21 d,通过旷场实验、场景化条件化恐惧反应实验、蛋白免疫印迹实验、免疫共沉淀实验、免疫组织化学实验评价电针的干预效应。结果:与空白组比较,模型组大鼠活动距离、穿越中央格数量及直立次数均少(P<0.05),造模成功;与模型组比较,电针组大鼠上述指标均改善(P<0.05)。与模型组比较,电针组大鼠在恐惧消退训练期和恐惧重建检测阶段大鼠的僵直时间百分比低(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠杏仁核WWP2、磷酸化AKT蛋白表达低(P<0.05),PTEN蛋白表达高(P<0.05)。电针组上述蛋白表达变化逆转(P<0.05),PTEN与WWP2的结合能力上升。与空白组比较,模型组大鼠杏仁核组织中SYN、GAP-43蛋白阳性表达低(P<0.05),电针组杏仁核组织中SYN、GAP-43蛋白阳性表达高(P<0.05)。结论:电针可有效改善PTSD大鼠的自主活动和探索行为,促进恐惧记忆的消退,以上作用与杏仁核WWP2/PTEN/AKT信号通路的调控及突触可塑性有关。 展开更多
关键词 创伤后应激障碍 恐惧记忆 杏仁核 电针 杏仁核含WW结构域的E3泛素蛋白连接酶2(WWP2)/抑癌基因磷酸酶和张力蛋白同源蛋白(PTEN)/蛋白激酶B(AKT)信号通路 突触可塑性 突触可塑性蛋白突触素 生长相关蛋白-43
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散发性大肠管状腺瘤癌变过程中NGX6 ILK和c-Jun的表达及意义
5
作者 吴文新 刘芳 +3 位作者 崔爱荣 王恒树 张杰英 张祥宏 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2011年第16期951-953,956,共4页
目的:探讨NGX6、ILK和c-Jun在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中的可能作用。方法:采用免疫组化法检测22例异型增生性畸变隐窝灶(ACF)、68例大肠管状腺瘤伴上皮不同程度异型增生、21例大肠管状腺瘤癌变和21例正常对照中NGX6、ILK和c-Jun的... 目的:探讨NGX6、ILK和c-Jun在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中的可能作用。方法:采用免疫组化法检测22例异型增生性畸变隐窝灶(ACF)、68例大肠管状腺瘤伴上皮不同程度异型增生、21例大肠管状腺瘤癌变和21例正常对照中NGX6、ILK和c-Jun的表达情况结果:NGX6蛋白在正常对照、异型增生性ACF、大肠管状腺瘤伴上皮异型增生及大肠管状腺瘤癌变组中阳性表达率逐步降低,而ILK蛋白和c-Jun蛋白的阳性表达率则明显升高(P<0.05)异型增生性ACF、大肠管状腺瘤伴上皮轻、中、重度异型增生组中NGX6蛋白的阳性表达率分别为77.27%、70.83%、37.50%、35.00%,其中,大肠管状腺瘤伴上皮中、重度异型增生组中NGX6蛋白的阳性表达率明显低于异型增生性ACF及腺瘤伴上皮轻度异型增生组(P<0.05)。异型增生性ACF、大肠管状腺瘤伴上皮轻、中度异型增生组中ILK蛋白的阳性表达率明显低于腺瘤伴上皮重度异型组(P<0.05);C-Jun蛋白阳性表达率在大肠管状腺瘤伴上皮轻、中、重度异型增生和大肠管状腺瘤癌变组明显高于异型增生性ACF(P<0.05)。在大肠管状腺瘤癌变过程中NGX6和ILK间呈负相关(r=-0.455,P<0.05);NGX6和c-Jun间呈负相关(r=-0.417,P<0.05);ILK和c-Jun之间呈正相关(r=0.390,P<0.05)。结论:NGX6低表达可能与ILK及c-Jun高表达有关,这可能在散发性大肠管状腺瘤形成及癌变过程中发挥一定作用。 展开更多
关键词 畸变隐窝灶 大肠管状腺瘤癌变 鼻咽癌细胞相关基因6 整合素连接激酶 c—Jun氨基端激酶
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ILK-siRNA-AAV对大鼠青光眼滤过术后滤过通道瘢痕形成的抑制作用 被引量：2
6
作者 邢瑶 王建明 +3 位作者 范雅稚 熊蕾 王文菁 崔丽珺 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期316-325,共10页
目的观察整合素连接激酶-小干扰RNA-特异性腺相关病毒(ILK-siRNA-AAV)对大鼠青光眼滤过术后滤过通道瘢痕形成的抑制作用。方法选取SPF级8~9周龄SD大鼠48只,采用随机数表法将其分为空白对照组、ILK-siRNA-AAV组、NC-siRNA-AAV组和丝裂霉... 目的观察整合素连接激酶-小干扰RNA-特异性腺相关病毒(ILK-siRNA-AAV)对大鼠青光眼滤过术后滤过通道瘢痕形成的抑制作用。方法选取SPF级8~9周龄SD大鼠48只,采用随机数表法将其分为空白对照组、ILK-siRNA-AAV组、NC-siRNA-AAV组和丝裂霉素C(MMC)组,每组12只。每只大鼠均取左眼为实验眼,右眼不做特殊处理。采用前房植入引流管法建立大鼠青光眼滤过术球结膜滤过泡模型,空白对照组、ILK-siRNA-AAV组和NC-siRNA-AAV组术后1 d滤过泡内分别注入磷酸盐缓冲液、ILK-siRNA-AAV和NC-siRNA-AAV各5μl,MMC组术中采用含0.4 mg/ml MMC的小棉片置于结膜瓣下5 min。术前及术后1、2、3、7、14、21、28 d,采用手持式眼压计测量术眼眼压;术后1、2、3、7、14、21、28 d,采用手术显微镜观察术眼滤过泡形成情况,采用Kaplan-Meier生存分析计算滤过泡生存天数;术后28 d,采用逆转录PCR及Western blot法检测术区结膜及结膜下组织中ILK的mRNA及蛋白表达,检测ILK基因沉默效应;采用苏木精-伊红染色观察ILK基因沉默对滤过通道组织形态的影响;采用Masson染色观察ILK基因沉默对球结膜滤过泡术区组织胶原纤维沉积作用,计算胶原纤维染色阳性面积占整个组织视野面积的百分比。结果各组大鼠手术前后不同时间点眼压总体比较,差异均有统计学意义(F_(分组)=76.84,P<0.001;F_(时间)=114.49,P<0.001),其中ILK-siRNA-AAV组术后第1、7、14和28天眼压均低于空白对照组,MMC组术后第2、3、7、14和28天眼压均低于空白对照组,ILK-siRNA-AAV组术后第7、14、21和28天眼压均低于NC-siRNA-AAV组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析结果显示,空白对照组、NC-siRNA-AAV组、ILK-siRNA-AAV组和MMC组滤过泡生存天数分别为(3.50±1.51)、(5.00±3.41)、(31.50±3.15)和(31.33±2.46)d,总体比较差异有统计学意义(F=395.83,P<0.05),其中ILK-siRNA-AAV组和MMC组滤过泡生存天数均多于空白对照组和NC-siRNA-AAV组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。各组ILK mRNA及蛋白相对表达量总体比较差异均有统计学意义(F=222.32、752.69,均P<0.05),其中ILK-siRNA-AAV组ILK mRNA及蛋白相对表达量明显低于空白对照组和NC-siRNA-AAV组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。苏木精-伊红染色结果显示,空白对照组和NC-siRNA-AAV组术区纤维结缔组织增生,细胞大量增生,成纤维细胞密度高,呈团块状生长;ILK-siRNA-AAV组球结膜较薄,纤维结缔组织排列疏松,少量成纤维细胞增生;MMC组结膜纤维层疏松、菲薄,形成空洞,细胞稀少。各组胶原纤维染色阳性面积百分比总体比较差异有统计学意义(F=741.66,P<0.05),其中与空白对照组比较,ILK-siRNA-AAV组和MMC组阳性染色百分比显著降低,ILK-siRNA-AAV组阳性染色百分比明显低于NC-siRNA-AAV组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论ILK-siRNA-AAV沉默ILK表达可抑制大鼠滤过术后滤过区组织瘢痕形成,降低眼压。 展开更多
关键词 青光眼 滤过手术 整合素连接激酶 基因沉默 小干扰RNA 腺相关病毒 瘢痕形成 SD大鼠
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TRAF-6、IRAK-1和NALP3炎症因子失调在痛风性关节炎患者体内的作用研究 被引量：12
7
作者 谢敏 范晓利 +1 位作者 赵一璟 王昆 《海南医学院学报》 CAS 2020年第12期925-931,937,共8页
目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)、白介素1受体关联激酶-1(IRAK-1)、嗜中性白细胞碱性磷酸酶-3(NALP3)等3种炎症因子失调在痛风性关节炎患者体内的作用。方法:选取本院收治的105例痛风性关节炎患者(急性发作期患者47例,缓... 目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)、白介素1受体关联激酶-1(IRAK-1)、嗜中性白细胞碱性磷酸酶-3(NALP3)等3种炎症因子失调在痛风性关节炎患者体内的作用。方法:选取本院收治的105例痛风性关节炎患者(急性发作期患者47例,缓解期患者58例,即A、B组)进行回顾性实验,同时选健康志愿者61例进行对照,即C组,3组纳入时间均为2017年5月~2018年5月,所有受试者TRAF-6、IRAK-1和NALP3检测均采用实时荧光定量发法(RT-PCR)完成,并比较这3种炎性因子与痛风性关节炎的相关性。结果:(1)A、B组治疗后的ESR、BUA及总补体均高于C组,其中A组上述3项指标均高于B组(P<0.05),而CRP均低于C组,且A组上述两项指标均低于B组(P<0.05)。(2)A、B组治疗前TRAF-6 mRNA相对表达量比较无明显差异(P<0.05),且低于C组(P<0.05);A、B组治疗后的上述指标均有所提升,但A组依旧低于B组(P<0.05),且A组提升幅度同样低于C组(P<0.05),而B组提升幅度较C组无明显差异(P<0.05)。(3)A、B组治疗前的IRAK-1mRNA相对表达量相比无显著差异(P>0.05),但均低于C组(P<0.05),A、B组治疗后的IRAK-1mRNA相对表达量均有所提升,A组明显低于C组(P<0.05),B组较C组则无明显差异(P>0.05)。(4)A、B组治疗前的NALP-3 mRNA相对表达量相比无明显差异(P>0.05),且高于C组(P<0.05);A组治疗后的NALP-3 mRNA相对表达量下降均不明显(P<0.05),而B组治疗后则明显下降,与A、C组相比均有显著差异(P<0.05)。(5)TRAF-6与ESR、CRP及总补体均无相关性(P>0.05);IRAK-1与CRP、BUA及总补体呈负相关(P<0.05);NALP-3与ESR、CRP呈正相关(P<0.05)。结论:在痛风性关节炎患者的患病过程中,TRAF-6、IRAK-1及NALP-3均呈异常表达状态,是促进患者病情发生、发展和转归的重要参与者,应采取措施进行干预。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子受体相关因子-6 炎症因子失调 泛素连接酶 白介素1受体关联激酶-1 嗜中性白细胞碱性磷酸酶-3 痛风性关节炎
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