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敬钊缨毛蛛肽类毒素JZTX-V中JZ-VF3片段对巨噬细胞炎症反应的抑制作用及机制研究
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作者 刘欣悦 钱峰 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第5期614-620,共7页
目的探究敬钊缨毛蛛肽类毒素JZTX-V中的多肽片段对巨噬细胞炎症反应的抑制作用,并探究相关机制。方法通过免疫印迹法检测来自JZTX-V的3个多肽片段对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的RAW 264.7细胞中诱导型一氧化氮合酶(inducible n... 目的探究敬钊缨毛蛛肽类毒素JZTX-V中的多肽片段对巨噬细胞炎症反应的抑制作用,并探究相关机制。方法通过免疫印迹法检测来自JZTX-V的3个多肽片段对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的RAW 264.7细胞中诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的作用;通过Griess反应检测细胞上清液中一氧化氮(nitric oxide,NO)浓度,通过异鲁米诺化学发光检测超氧化物的产生量;通过实时荧光定量PCR检测细胞中促炎细胞因子mRNA的表达量;通过免疫印迹法检测JZ-VF3对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和核因子-κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路的影响,并用免疫荧光检测JZ-VF3对p65的核转位的影响。结果与LPS刺激组相比,用JZ-VF3处理RAW 264.7细胞可以显著抑制iNOS的激活及NO和超氧化物的产生,还可以抑制细胞中促炎细胞因子的产生。蛋白免疫印迹和免疫荧光实验揭示,JZ-VF3可以抑制MAPK和NF-κB信号通路的激活,以及p65的核转位。结论JZTX-V中的JZ-VF3多肽片段通过抑制MAPK和NF-κB信号通路的激活,从而抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞中的炎症反应,具有成为多肽抗炎药的潜力。 展开更多
关键词 敬钊缨毛蛛 炎症 巨噬细胞 MAPK信号通路 NF-ΚB信号通路
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两种蜘蛛多肽毒素的电喷雾电离质谱法序列分析 被引量:2
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作者 范春明 王贤纯 梁宋平 《质谱学报》 EI CAS CSCD 2005年第2期65-70,共6页
虎纹捕鸟蛛毒素-(HWTX-)和敬钊缨毛蛛毒素-(JZTX-)是两种蜘蛛多肽类神经毒素。它们的大部分氨基酸序列已由Edman降解法测出,但仍有部分序列由于某些原因未能确定。为了鉴定未知部分的序列,利用电喷雾电离-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Qq-TO... 虎纹捕鸟蛛毒素-(HWTX-)和敬钊缨毛蛛毒素-(JZTX-)是两种蜘蛛多肽类神经毒素。它们的大部分氨基酸序列已由Edman降解法测出,但仍有部分序列由于某些原因未能确定。为了鉴定未知部分的序列,利用电喷雾电离-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Qq-TOF-MS)对两种蜘蛛毒素的酶解产物进行分析,获得其酶解片段的一级(MS)和二级(MS/MS)图谱,在用软件和手工的方式对含有未知序列的肽段进行解析后,得到未知部分确切氨基酸序列。研究表明:利用质谱的从头测序(denovosequencing)方法获得HWTX-和JZTX-完整的氨基酸序列。该方法在蛋白质和多肽的结构分析和鉴定与传统方法相比具有高灵敏度和快速的优势,是对传统Edman化学降解法的一个很好的补充。 展开更多
关键词 多肽毒素 电喷雾电离-四极杆-飞行时间质谱(ESI—Qq—TOF—MS) 虎纹捕鸟毒素-Ⅵ 敬钊缨毛蛛毒素-Ⅷ 从头测序
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