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放线共生放线杆菌菌毛重组蛋白的提取及纯化 被引量:1
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作者 李毅 郭学军 +2 位作者 杨涛 冯书章 孙宏晨 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期370-374,共5页
目的:对大肠杆菌表达的放线共生放线杆菌菌毛重组蛋白LTB-FAP进行提取和纯化,为其用于牙周病的治疗提供理论依据。方法:将重组质粒pET28a/LTB和pET28a/LTB-FAP分别转化到大肠杆菌中进行表达,通过超声裂解法获得以包涵体形式表达的重组... 目的:对大肠杆菌表达的放线共生放线杆菌菌毛重组蛋白LTB-FAP进行提取和纯化,为其用于牙周病的治疗提供理论依据。方法:将重组质粒pET28a/LTB和pET28a/LTB-FAP分别转化到大肠杆菌中进行表达,通过超声裂解法获得以包涵体形式表达的重组外源蛋白LTB-FAP;用2,4,6和8mol·L-1尿素缓冲液对重组蛋白进行洗涤、溶解;然后用阴离子交换和凝胶过滤柱层析对重组蛋白进行纯化,采用薄层扫描仪对蛋白纯度进行测定。结果:目的包涵体蛋白经过3次4mol·L-1尿素洗涤,6mol·L-1尿素溶解后,经薄层扫描可获得纯度为60%的目的蛋白;经离子交换层析纯化,蛋白纯度可达约75%;Sepharose 6B行凝胶过滤层析获得了纯度可达90%的重组蛋白LTB-FAP。结论:阴离子交换和凝胶过滤柱层析的方法可提取、纯化重组蛋白LTB-FAP,获得的LTB-FAP可以用于免疫机体。 展开更多
关键词 放线共生放线杆菌 LTB-FAP 提取 纯化
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放线共生放线杆菌的分离、鉴定及耐药谱的测定 被引量:1
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作者 李毅 杨涛 +3 位作者 孙延波 关显智 黄洋 孙宏晨 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期227-229,共3页
目的 :探讨放线共生放线杆菌 (A.a)分离、鉴定的方法 ,确定其耐药谱。方法 :采用选择性培养基、厌氧培养技术及生化鉴定的方法从临床青少年牙周炎、成人快速进展型牙周炎及青少年严重牙龈炎患者的牙周袋内分离出 A.a。在此基础上进行了 ... 目的 :探讨放线共生放线杆菌 (A.a)分离、鉴定的方法 ,确定其耐药谱。方法 :采用选择性培养基、厌氧培养技术及生化鉴定的方法从临床青少年牙周炎、成人快速进展型牙周炎及青少年严重牙龈炎患者的牙周袋内分离出 A.a。在此基础上进行了 1 0种抗生素对所分离的全部 A.a菌株及 1株标准菌株最低抑菌浓度的检测。结果 :共分离出 2 4株 A.a,其对庆大霉素、四环素、氨苄青霉素、丁氨卡那霉素及青霉素 G呈现出不同程度的耐药性 ,但对罗红霉素、甲硝唑、链霉素、红霉素及头孢唑啉钠敏感。结论 :罗红霉素、甲硝唑、链霉素、红霉素及头孢唑啉钠在治疗与 A.a相关的牙周病能够发挥作用 ,本研究为 A. 展开更多
关键词 放线共生放线杆菌 抑菌浓度
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放线共生放线杆菌培养上清对成骨细胞分化及间隙连接通讯的影响
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作者 陈允嘉 王豫蓉 +4 位作者 邹林洪 李闻颖 郑雷蕾 吴艳 李艳 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1059-1063,共5页
目的探讨放线共生放线杆菌(actinobacillus actinomycetemcom itans,A.a)培养上清对成骨细胞分化以及细胞间隙连接通讯的影响。方法在A.a培养上清中体外培养成骨细胞,中性红检测成骨细胞活性,RT-PCR检测成骨细胞分化标记,免疫组化观察... 目的探讨放线共生放线杆菌(actinobacillus actinomycetemcom itans,A.a)培养上清对成骨细胞分化以及细胞间隙连接通讯的影响。方法在A.a培养上清中体外培养成骨细胞,中性红检测成骨细胞活性,RT-PCR检测成骨细胞分化标记,免疫组化观察Ⅰ型胶原蛋白表达,利用划痕标记荧光染料示踪(SLDT)法与Westernblot检测Connexin43的表达,研究成骨细胞间隙连接通讯的变化。结果20%以下浓度的A.a培养上清对成骨细胞无明显致死性。RT-PCR结果显示A.a培养上清中成骨细胞分化标记的表达降低。免疫组化结果显示A.a培养上清中成骨细胞Ⅰ型胶原蛋白表达降低。SLDT法结果显示A.a培养上清中成骨细胞荧光染料扩散低于对照组。Western blot检测结果显示A.a培养上清中成骨细胞Connexin43表达降低。结论A.a培养上清对成骨细胞分化及细胞间隙连接通讯有抑制作用。 展开更多
关键词 放线共生放线杆菌 成骨细胞 分化 细胞间隙连接通讯
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放线共生放线杆菌与牙周疾病
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作者 孙靖临 孟焕新 《国外医学(口腔医学分册)》 2001年第4期231-234,共4页
放线共生放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)是牙周主要致病菌之一,近年对其研究较多,并取得不少进展,本文着重描述了放线共生放线杆菌的一些重要特性,包括其传播特征、分类、毒性特征、检测方法、与牙周炎的关系及对... 放线共生放线杆菌(Actinobacillus actinomycetemcomitans,Aa)是牙周主要致病菌之一,近年对其研究较多,并取得不少进展,本文着重描述了放线共生放线杆菌的一些重要特性,包括其传播特征、分类、毒性特征、检测方法、与牙周炎的关系及对临床治疗的指导作用。 展开更多
关键词 放线共生放线杆菌 白细胞毒素 牙周病 分类 检测 药物疗法
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