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长链非编码RNA-ROR介导上皮-间质转化对鼻咽癌细胞放疗抵抗作用的体外研究 被引量:1
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作者 薛晓成 张雪 +3 位作者 黄水仙 张燚 鲁丹 陈晓平 《海军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1218-1225,共8页
目的 探讨lncRNA-ROR介导上皮-间质转化在鼻咽癌细胞放疗抵抗中的作用。方法 将鼻咽癌细胞CNE2分为空白组、阴性对照组、lncRNA-ROR沉默组,进行相应的处理。将CNE2细胞分为空白组、放疗组、放疗+阴性对照组、放疗+lncRNA-ROR过表达组(... 目的 探讨lncRNA-ROR介导上皮-间质转化在鼻咽癌细胞放疗抵抗中的作用。方法 将鼻咽癌细胞CNE2分为空白组、阴性对照组、lncRNA-ROR沉默组,进行相应的处理。将CNE2细胞分为空白组、放疗组、放疗+阴性对照组、放疗+lncRNA-ROR过表达组(放疗处理为6 Gy射线照射24 h),进行相应的处理。用CCK-8法检测CNE2增殖能力,通过细胞划痕实验和Transwell 细胞迁移实验检测细胞迁移能力,用流式细胞术检测细胞凋亡的情况,用蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白和上皮-间质转化相关蛋白的表达。结果 与空白组、阴性对照组相比,抑制lncRNA-ROR表达48、72 h后鼻咽癌细胞CNE2的增殖能力均减弱(均P<0.05)。抑制lncRNA-ROR表达后鼻咽癌细胞CNE2的迁移率低于阴性对照组(P<0.05),而放疗+lncRNA-ROR过表达组CNE2细胞的迁移能力高于放疗组与放疗+阴性对照组(均P<0.05)。与放疗组、放疗+阴性对照组相比,放疗+lncRNA-ROR过表达组CNE2细胞的凋亡率均降低(均P<0.05)。抑制lncRNA-ROR后,活化的caspase 3、caspase 9蛋白表达均较空白组和阴性对照组升高(均P<0.05);而放疗+lncRNA-ROR过表达组活化的caspase 3、caspase 9蛋白表达均较放疗组和放疗+阴性对照组下降(均P<0.05)。抑制lncRNA-ROR可导致上皮标志蛋白(E-钙黏蛋白、β-联蛋白)表达升高,间质标志蛋白(N-钙黏蛋白、波形蛋白)表达下降(均P<0.05);而与放疗组和放疗+阴性对照组相比,放疗+lncRNA-ROR过表达组CNE2细胞的上皮标志蛋白表达下降、间质标志蛋白表达升高(均P<0.05)。结论 lncRNA-ROR可通过调控鼻咽癌细胞增殖、迁移、凋亡及上皮-间质转化影响其放疗抵抗,是逆转鼻咽癌细胞放疗抵抗的潜在靶点。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 放疗抵抗 上皮-间质转化 长链非编码RNA-ROR
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UBE2T通过调节性T细胞诱导肝细胞癌的放疗抵抗 被引量:1
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作者 何欣容 熊斯丽 +3 位作者 朱真如 孙景苑 曹传辉 王惠 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1149-1158,共10页
目的 探索泛素结合酶2T(UBE2T)对肝细胞癌放疗敏感性的影响及机制。方法 采用空白对照载体或过表达UBE2T慢病毒载体转染小鼠Hepa1-6肝癌细胞建立对照组(LV-Control)和过表达组(LV-UBE2T),qPCR以及Western blotting检测上述细胞UBE2T表... 目的 探索泛素结合酶2T(UBE2T)对肝细胞癌放疗敏感性的影响及机制。方法 采用空白对照载体或过表达UBE2T慢病毒载体转染小鼠Hepa1-6肝癌细胞建立对照组(LV-Control)和过表达组(LV-UBE2T),qPCR以及Western blotting检测上述细胞UBE2T表达情况;对两组细胞进行射线照射(IR)处理,克隆形成实验检测UBE2T过表达对Hepa1-6肝癌细胞放疗敏感性影响;分别在裸鼠和C57BL/6小鼠皮下注射上述细胞建立肝癌皮下荷瘤小鼠模型,对皮下瘤予IR处理,建立LV-Control组、LVControl+IR组、LV-UBE2T组和LV-UBE2T+IR组,5~6只/组,观察皮下瘤生长速度及体积。通过CIBERSORT算法分析肝癌免疫细胞浸润情况与UBE2T表达量的关系。流式细胞术检测上述4组小鼠的肝癌中CD4+T细胞以及调节性T细胞(Tregs)浸润情况。比色法测定细胞培养上清液中葡萄糖及乳酸的含量;癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)的公共数据分析肝癌UBE2T表达量与糖酵解水平和Tregs浸润关系。Western blotting检测UBE2T表达与糖酵解相关蛋白HK1、LDHA表达相关关系。体外共培养模型联合流式细胞术以及qPCR验证UBE2T过表达肝癌与Tregs关系。结果 qPCR、Western blotting结果显示过表达组中UBE2T表达显著升高(P<0.0001)。克隆形成实验、裸鼠肝癌皮下瘤实验显示UBE2T过表达导致肝细胞癌放疗抵抗(P<0.05),UBE2T导致的放疗抵抗在C57BL/6小鼠肝癌皮下瘤模型上更显著(P<0.01)。CIBERSORT分析提示UBE2T高表达组肝癌中树突状细胞(P<0.01)、滤泡辅助性T细胞(P<0.001)、M2型巨噬细胞(P<0.01)、单核细胞(P<0.05)、总体淋巴细胞(P<0.05)以及Tregs(P<0.0001)浸润比例上调。流式细胞术显示过表达UBE2T小鼠肝癌免疫微环境中Tregs数量上调(P<0.05),IR导致UBE2T组CD4+T细胞以及Tregs浸润增加(P<0.01或P<0.001)。与对照组细胞培养上清液相比,过表达UBE2T组的培养上清液葡萄糖浓度降低(P<0.05),乳酸浓度上调(P<0.01)。GSEA分析提示UBE2T高表达肝癌与糖酵解水平(P<0.001)、Tregs浸润水平呈正相关(P<0.001)。Western blotting显示糖酵解相关蛋白HK1、LDHA表达水平与UBE2T表达水平相关。体外共培养模型显示UBE2T过表达肝癌使Tregs细胞内乳酸含量上调(P<0.001),增殖能力增加(P<0.05)以及免疫抑制功能上调(Il-10,P<0.05;TGF-β,P<0.001)。结论 UBE2T介导的肝癌细胞放疗抵抗可能与肝癌细胞糖酵解水平提高介导的免疫微环境中Tregs富集相关。 展开更多
关键词 泛素结合酶2T 肝细胞癌 放疗抵抗 肿瘤免疫微环境 调节性T细胞
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miR-31-5p通过调控TNS1抑制乳腺癌细胞生物学行为及放疗抵抗的分子机制 被引量:3
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作者 余杰 王旸 +5 位作者 贾彦召 杨峥 张森 刘瀚文 饶石磊 张凯 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1013-1020,共8页
目的:探讨miR-31-5p/张力蛋白1基因(tension protein 1,TNS1)分子轴对乳腺癌细胞生物学行为的影响及其放疗抵抗的分子机制。方法:收集2017年7月至2017年12月南阳市中心医院肿瘤放疗科收治的、经手术切除的21例乳腺癌患者癌及癌旁组织标... 目的:探讨miR-31-5p/张力蛋白1基因(tension protein 1,TNS1)分子轴对乳腺癌细胞生物学行为的影响及其放疗抵抗的分子机制。方法:收集2017年7月至2017年12月南阳市中心医院肿瘤放疗科收治的、经手术切除的21例乳腺癌患者癌及癌旁组织标本,以及乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231和SKBR-3,采用qPCR法检测癌组织和癌细胞系中miR-31-5p的表达水平。通过6 MV-X射线照射MCF-7细胞,构建放疗抵抗细胞株MCF-7R。随后,采用克隆形成实验、Transwell小室法和Annexin V/PI染色流式细胞术检测过表达/敲降miR-31-5p对MCF-7和MCF-7R细胞放疗敏感性的影响;用双荧光素酶报告基因验证miR-31-5p与TNS1的靶向关系。结果:乳腺癌组织、细胞系和MCF-7R细胞中miR-31-5p表达水平显著低于癌旁组织、人正常乳腺上皮细胞MCF-10A和MCF-7细胞(均P<0.01)。过表达miR-31-5p显著抑制MCF-7R细胞的侵袭并促进细胞凋亡(均P<0.01),沉默miR-31-5p在MCF-7细胞中结果相反。双荧光素酶报告基因法证实TNS1是miR-31-5p靶基因。过表达miR-31-5p通过靶向下调TNS1显著抑制MCF-7R细胞侵袭能力并促进细胞凋亡(均P<0.01),沉默miR-31-5p通过上调TNS1显著促进MCF-7细胞侵袭和抑制细胞凋亡(均P<0.01),从而上调MCF-7R对放射治疗的敏感性。结论:miR-31-5p/TNS1分子轴与乳腺癌放疗抵抗存在调控关系,且过表达miR-31-5p可逆转MCF-7R细胞对放疗抵抗作用。 展开更多
关键词 乳腺癌miR-31-5p 张力蛋白l基因(TARSI) 放疗抵抗 侵袭 凋亡
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敲降miR-222-3p靶向PTEN对甲状腺癌^(131)Ⅰ放疗抵抗的影响及其机制 被引量:5
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作者 冯曜宇 张承磊 +3 位作者 侯丽娟 王益夫 吴秀玲 马云海 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期677-686,共10页
目的:探讨miR-222-3p通过人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白合同源基因(PTEN)对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响,阐明miR-222-3p在甲状腺癌131Ⅰ放疗抵抗中的作用及机制。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测人甲状腺癌细胞和人... 目的:探讨miR-222-3p通过人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白合同源基因(PTEN)对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响,阐明miR-222-3p在甲状腺癌131Ⅰ放疗抵抗中的作用及机制。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测人甲状腺癌细胞和人正常甲状腺滤泡上皮Nth-ori 3-1细胞中miR-222-3p表达水平。以人甲状腺癌K1细胞和放射抗性K1(K1R)细胞为研究对象,实验分为空白对照组、131Ⅰ处理组、131Ⅰ+miR-222-3p敲降组、131Ⅰ+PTEN过表达组和131Ⅰ+PTEN过表达+miR-222-3p过表达组。空白对照组K1和K1R细胞不经任何处理,131Ⅰ处理组K1和K1R细胞经1和3 Gy131Ⅰ处理,131Ⅰ+miR-222-3p敲降组K1和K1R细胞转染miR-222-3p inhibitor后再经1和3 Gy131Ⅰ处理,131Ⅰ+PTEN过表达组K1和K1R细胞转染PTEN过表达载体后再经1和3 Gy131Ⅰ处理,131Ⅰ+PTEN过表达+miR-222-3p过表达组K1和K1R细胞同时转染PTEN过表达载体和miR-222-3p mimic后再经1和3 Gy131Ⅰ处理。克隆形成实验检测K1和K1R细胞克隆形成数,CCK-8实验检测K1和K1R细胞增殖活性,AnnexinⅤ-FITC/PI双染法流式细胞术检测K1和K1R细胞凋亡率,Western blotting检测K1和K1R细胞中PTEN蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-222-3p与PTEN的靶向关系。结果:与Nth-ori 3-1细胞比较,甲状腺癌细胞中miR-222-3p表达水平升高(P<0.01);且甲状腺癌K1R细胞中miR-222-3p表达水平高于甲状腺癌K1细胞(P<0.01)。与131Ⅰ处理组比较,131Ⅰ+miR-222-3p敲降组K1和K1R细胞克隆形成数减少(P<0.01),细胞增殖活性降低(P<0.01),细胞凋亡率升高(P<0.01)。与miR-NC-PTEN-WT组比较,miR-222-3p-PTEN-WT组HEK-293细胞中荧光素酶活性降低(P<0.01)。与敲降前比较,敲降miR-222-3p后K1和K1R细胞中PTEN蛋白表达水平升高(P<0.01)。与131Ⅰ+PTEN过表达组比较,131Ⅰ+PTEN+miR-222-3p过表达组K1和K1R细胞克隆形成数增加(P<0.01),细胞增殖活性升高(P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01)。结论:敲降miR-222-3p靶向PTEN并上调其表达水平可以缓解甲状腺癌131Ⅰ的放疗抵抗。 展开更多
关键词 miR-222-3p 人第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白合同源基因 甲状腺肿瘤 ^(131)Ⅰ放疗抵抗
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miR-503靶向ERCC1抑制食管鳞状细胞癌放疗抵抗作用的机制 被引量:4
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作者 孔蕾 王俊杰 +5 位作者 王济东 于甬华 张颖东 崔迪 张永 付志雪 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期969-975,共7页
目的:探讨miR-503通过调控人切除修复交叉互补基因1(ERCC1)介导食管鳞状细胞癌(ESCC)放疗抵抗作用的分子机制。方法:采用qPCR法检测在放疗抵抗的ESCC肿瘤组织及KYSE140、KYSE140R细胞中miR-503的表达水平。将miR-503模拟物、miR-503抑... 目的:探讨miR-503通过调控人切除修复交叉互补基因1(ERCC1)介导食管鳞状细胞癌(ESCC)放疗抵抗作用的分子机制。方法:采用qPCR法检测在放疗抵抗的ESCC肿瘤组织及KYSE140、KYSE140R细胞中miR-503的表达水平。将miR-503模拟物、miR-503抑制物或si-ERCC1转染至KYSE140和KYSE140R细胞中,经射线照射后,克隆形成实验和CCK-8实验检测KYSE140R细胞的增殖活力,流式细胞仪检测KYSE140R细胞的凋亡情况,WB实验检测ERCC1蛋白表达水平的变化。双荧光素酶报告基因验证miR-503与ERCC1的靶向关系。结果:miR-503在ESCC放疗抵抗组织和细胞中均低表达(均P<0.01)。过表达miR-503可显著抑制KYSE140R细胞增殖并诱导细胞凋亡(均P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实ERCC1是miR-503的靶基因,且miR-503负调控ERCC1的表达。过表达miR-503显著下调KYSE140、KYSE140R细胞中ERCC1表达水平(均P<0.01),并显著抑制细胞增殖活力(均P<0.01)、显著提高细胞凋亡率(均P<0.01);敲降ERCC1有类似作用,而同时敲降ERCC1和miR-503则逆转以上影响。结论:过表达miR-503通过靶向ERCC1调控KYSE140R细胞对放疗的敏感性。 展开更多
关键词 食管鳞癌 miR-503 切除修复交叉互补基因 放疗抵抗
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肿瘤干细胞(CSCs)放疗抵抗机制的研究进展 被引量:3
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作者 燕丽 乔田奎 范卫 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期116-120,共5页
近年来越来越多的研究表明肿瘤治疗后复发的根源在于肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)的存在,它能抵抗各种治疗方法并最终导致治疗失败。CSCs在放疗中的作用和意义也成为研究热点之一,其特殊的DNA损伤修复机制、和周围小生境相互依... 近年来越来越多的研究表明肿瘤治疗后复发的根源在于肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)的存在,它能抵抗各种治疗方法并最终导致治疗失败。CSCs在放疗中的作用和意义也成为研究热点之一,其特殊的DNA损伤修复机制、和周围小生境相互依存的特殊关系及DNA损伤后其损伤修复信号通路的开放等都是肿瘤放疗抵抗和复发的根源。探明CSCs产生放疗抵抗的机制将为肿瘤治疗带来新的希望。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞(CSCs) 放射治疗 放疗抵抗
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铁死亡在结直肠癌再生细胞放疗抵抗中的作用及其可能的机制 被引量:3
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作者 常钰涵 戈雨桐 +2 位作者 哈文韬 魏晓为 龚涌灵 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期426-433,共8页
目的:探讨铁死亡在结直肠肿瘤再生细胞放疗抵抗中的功能和机制。方法:采用二维常规条件培养结肠癌HCT116细胞(Control细胞),同时通过机械力方法在三维纤维蛋白软胶中培养并筛选出具有高致瘤能力的肿瘤再生细胞(TRC);用不同剂量(2、4、6... 目的:探讨铁死亡在结直肠肿瘤再生细胞放疗抵抗中的功能和机制。方法:采用二维常规条件培养结肠癌HCT116细胞(Control细胞),同时通过机械力方法在三维纤维蛋白软胶中培养并筛选出具有高致瘤能力的肿瘤再生细胞(TRC);用不同剂量(2、4、6、8 Gy)的X-射线照射Control细胞和TRC,并通过MTS、细胞克隆实验分别检测各组细胞的存活率和增殖能力;Control细胞和TRC在采用铁死亡诱导剂(Erastin)和X-射线分别处理后,用C11-BODIPY试剂进行染色,通过共聚焦显微镜和流式细胞术观察并测定细胞的脂质过氧化水平。用qPCR法检测X-射线照射、Erastin处理对Control细胞和TRC中铁死亡相关基因谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)和酰基辅酶a合成酶长链家族成员4(ACSL4)表达的影响,用WB法检测对细胞中铁死亡相关蛋白GPX4、ACSL4表达的影响。结果:从纤维蛋白软胶中培养并筛选出高干性的TRC;用不同剂量(2、4、6、8 Gy)的X-射线照射后,Control细胞存活率较TRC显著降低(P<0.05),且Control细胞的克隆大小和数量较TRC显著降低(均P<0.05);Control细胞采用不同剂量X-射线(4、8 Gy)照射及用Erastin处理后,X-射线处理组细胞脂质过氧化水平较未处理组细胞显著升高(P<0.05),Erastin处理组细胞脂质过氧化水平较DMSO处理组细胞显著升高(P<0.05),而TRC各处理组间无显著差异(均P>0.05)。机制研究发现,TRC中GPX4和ACSL4在铁死亡诱导条件(X-射线照射或Erastin处理)下较Control细胞呈现出有助于抵抗的表达模式,即GPX4持续上调、ACSL4持续下调,且表现为Erastin剂量依赖性。结论:结直肠TRC可能通过高表达GPX4、低表达ACSL4来抵抗铁死亡,从而抵抗放疗。 展开更多
关键词 结直肠癌 肿瘤再生细胞 放疗抵抗 铁死亡 谷胱甘肽过氧化物酶4 酰基辅酶A合成酶长链家族成员4
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脑胶质瘤中长链非编码RNA TCONS_00008552促进放疗抵抗、侵袭转移的机制 被引量:13
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作者 郑杰灵 袁亚维 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期1748-1752,共5页
目的以人胶质瘤放疗抵抗株M059K与放疗敏感株M059J为实验模型,筛选出与放疗抵抗相关的LncRNA TCONS_00008552,并初步研究其对胶质瘤放疗抵抗、侵袭转移的影响。方法在M059K、M059J 细胞中分别干扰和过表达TCONS_00008552,通过MTT 实验... 目的以人胶质瘤放疗抵抗株M059K与放疗敏感株M059J为实验模型,筛选出与放疗抵抗相关的LncRNA TCONS_00008552,并初步研究其对胶质瘤放疗抵抗、侵袭转移的影响。方法在M059K、M059J 细胞中分别干扰和过表达TCONS_00008552,通过MTT 实验、平板克隆形成、划痕实验、Transwell 侵袭实验,检测其对胶质瘤细胞增殖、放疗敏感性以及侵袭转移的影响。结果MTT 实验显示TCONS_00008552可以增强胶质瘤细胞的增殖;划痕实验和Tanswell侵袭实验表明,该LncRNA增加胶质瘤细胞的迁移和侵袭能力;平板克隆形成实验和Western Blot结果显示,其可促进胶质瘤细胞的放疗抵抗,减轻放疗辐射诱导的细胞凋亡。结论LncRNA TCONS_00008552在胶质瘤放疗抵抗株中高表达,并促进肿瘤细胞的放疗抵抗、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 胶质瘤 长链非编码RNA 放疗抵抗 侵袭 TCONS_00008552
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p53及EGFR与头颈部鳞癌放疗抵抗的关系 被引量:2
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作者 代永杰 徐钢 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期596-600,共5页
头颈部恶性肿瘤是世界上第七大常见的癌症类型。超过90%的头颈部恶性肿瘤是鳞状细胞癌(HN⁃SCC)。放疗是HNSCC的重要治疗方法之一,肿瘤细胞对放疗的敏感性是放疗有效性的一个关键因素。p53是HN⁃SCC中最常见的突变基因之一,表皮生长因子受... 头颈部恶性肿瘤是世界上第七大常见的癌症类型。超过90%的头颈部恶性肿瘤是鳞状细胞癌(HN⁃SCC)。放疗是HNSCC的重要治疗方法之一,肿瘤细胞对放疗的敏感性是放疗有效性的一个关键因素。p53是HN⁃SCC中最常见的突变基因之一,表皮生长因子受体(EGFR)在许多的HNSCC中过度表达,这两者都能增强细胞DNA的修复,可能与HNSCC的放疗抵抗有关。本文就肿瘤细胞通过p53和EGFR介导的DNA修复来逃避辐射介导的凋亡机制作一综述。 展开更多
关键词 P53 表皮生长因子受体 放疗抵抗
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肿瘤相关成纤维细胞对宫颈癌预后及放疗抵抗的影响 被引量:1
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作者 刘炎申 赵迎超 伍钢 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期579-584,共6页
目的探讨肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)与宫颈癌的预后和放疗抵抗之间的关系。方法收集76例宫颈癌活检组织及其临床病理学资料,检测组织中CAFs含量,并分析其与患者临床病理特征及预后的关系。从宫颈癌组织中... 目的探讨肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)与宫颈癌的预后和放疗抵抗之间的关系。方法收集76例宫颈癌活检组织及其临床病理学资料,检测组织中CAFs含量,并分析其与患者临床病理特征及预后的关系。从宫颈癌组织中提取并培养CAFs,通过与宫颈癌细胞株混合接种于裸鼠的体内成瘤实验和体外细胞共培养实验,观察CAFs对宫颈癌放疗敏感性的影响。检测接受放射处理后CAFs分泌肝细胞生长因子(HGF)水平的变化,共培养后宫颈癌细胞表面HGF受体c-Met的活性变化,探究CAFs参与放疗抵抗的可能机制。结果宫颈癌组织中的CAFs含量存在差异,CAFs高含量是宫颈癌复发的独立危险因素(HR=3.521,P<0.05)。体内实验结果显示,在放射治疗后,混合接种移植瘤组裸鼠比单纯肿瘤接种组能更快地从放疗导致的生长抑制中恢复(P<0.05)。体外实验结果显示,与对照组相比,CAFs与宫颈癌细胞共培养组的放疗抵抗性明显增加(P<0.05)。此外,经过照射后,CAFs分泌的HGF增加,共培养后宫颈癌细胞表面c-Met活性上调。结论在宫颈癌组织中,CAFs高含量与宫颈癌不良预后相关,其机制可能与CAFs通过HGF/c-Met通路介导宫颈癌的放疗抵抗有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 肿瘤相关成纤维细胞 HGF 放疗抵抗
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二甲双胍缓解胰腺癌细胞衰老并增敏放疗的效果及机制
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作者 许文金 谢雨欣 +5 位作者 林心悦 王昕 姜伟 魏士杰 刘强 廖翔 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第7期1282-1290,共9页
目的研究二甲双胍增敏胰腺癌细胞放疗的效果,探讨胰腺癌细胞放疗抵抗的原因,初步探究PERK/P-eIF2/ATF4通路在上述过程中的调控作用。方法将胰腺癌细胞(PANC-1和PANC-2)分为对照组、放疗组和药物处理组,在经过对应的处理后,使用CCK-8法... 目的研究二甲双胍增敏胰腺癌细胞放疗的效果,探讨胰腺癌细胞放疗抵抗的原因,初步探究PERK/P-eIF2/ATF4通路在上述过程中的调控作用。方法将胰腺癌细胞(PANC-1和PANC-2)分为对照组、放疗组和药物处理组,在经过对应的处理后,使用CCK-8法、细胞克隆实验和细胞死活染色测定细胞增殖抑制率,β半乳糖苷酶染色检测细胞衰老程度,Western blot和免疫荧光实验检测细胞周期相关(P21、P16、γ-H2AX),凋亡相关(Bax、Bcl-2、Cleaved-caspase3)以及所探究通路相关(PERK、P-eIF2、ATF4)蛋白的表达水平。使用PERK抑制剂(GSK2606414)和PERK激动剂(MK-28)进一步验证PERK/P-eIF2/ATF4轴在二甲双胍抑制胰腺癌细胞衰老及增敏放疗中的作用。结果放疗显著上调胰腺癌细胞的衰老相关标志物表达(P21、P16、γ-H2AX和β-半乳糖苷酶活性),衰老细胞在体外和体内均表现出更强的增殖活性,并伴随更大的肿瘤体积。二甲双胍可抑制放疗诱导的细胞衰老,降低衰老标志物表达,联合治疗后进一步削弱细胞的克隆增殖能力和活性。机制研究表明,放疗激活PERK信号通路,促进PERK、P-eIF2和ATF4蛋白表达,诱导细胞进入衰老状态。PERK抑制剂降低细胞β-半乳糖苷酶活性,PERK激动剂则增加衰老相关蛋白表达,这一效应可被二甲双胍逆转。结论二甲双胍抑制放疗后胰腺癌细胞中激活的PERK/P-eIF2/ATF4通路,延缓肿瘤细胞衰老进程并降低衰老细胞的放疗抗性,起到增敏胰腺癌放疗的作用。 展开更多
关键词 二甲双胍 胰腺癌 放疗抵抗 细胞衰老 PERK抑制剂 PERK/P-eIF2/ATF4通路
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MiR-183抑制胶质母细胞瘤放射抵抗等恶性行为 被引量:4
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作者 曾宪一 陈嘉荣 +4 位作者 任陈 杜莎莎 谢国柱 郑榕 袁亚维 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第24期3999-4002,共4页
目的:探讨miR-183对胶质母细胞瘤放射抵抗等恶性行为的调控作用及其机制。方法:利用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测15例胶质母细胞瘤及瘤周正常脑组织及4株胶质母细胞瘤细胞株(U87、U251、M059J、M059K)中miR-183表达水平;采用... 目的:探讨miR-183对胶质母细胞瘤放射抵抗等恶性行为的调控作用及其机制。方法:利用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)方法检测15例胶质母细胞瘤及瘤周正常脑组织及4株胶质母细胞瘤细胞株(U87、U251、M059J、M059K)中miR-183表达水平;采用阳离子脂质体法瞬时转染构建miR-183过表达的细胞体系;应用MTT细胞增殖实验检测细胞增殖能力;利用平板克隆形成实验检测辐射敏感性;采用划痕实验和Transwell实验检测miR-183对胶质母细胞瘤细胞侵袭及迁移能力的调控作用;利用蛋白印迹(Western blot)实验检测miR-183对上皮间质转化(EMT)相关基因表达水平的调控作用。结果 :miR-183在胶质母细胞瘤及胶质母细胞瘤细胞株中低表达。随后通过构建过表达miR-183的细胞系,发现miR-183高表达状态的胶质母细胞瘤细胞对射线的敏感程度增加,增殖能力、迁移能力和侵袭能力都有所下降,而且上调了上皮细胞表型相关E-钙黏蛋白的表达,下调了间质细胞表型相关波形蛋白的表达。结论:miR-183可能通过抑制EMT过程从而影响胶质母细胞瘤的恶性行为。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 microRNA-183 放疗抵抗 侵袭 迁移 上皮间质转化
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骨肉瘤的缺氧微环境与放疗增敏进展 被引量:2
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作者 杜传超 贾斐 +2 位作者 梁辰 何观平 刘晓光 《材料导报》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第S02期97-103,共7页
放疗是恶性肿瘤重要的辅助治疗手段,但骨肉瘤对放疗不是十分敏感,存在一定的放疗抵抗。即相对于对放射线敏感的肿瘤(如视网膜母细胞瘤、鼻咽癌、卵巢癌中的无性细胞瘤、睾丸精原细胞瘤、肾胚胎瘤、恶性淋巴瘤等)来讲,同等或更大的放射... 放疗是恶性肿瘤重要的辅助治疗手段,但骨肉瘤对放疗不是十分敏感,存在一定的放疗抵抗。即相对于对放射线敏感的肿瘤(如视网膜母细胞瘤、鼻咽癌、卵巢癌中的无性细胞瘤、睾丸精原细胞瘤、肾胚胎瘤、恶性淋巴瘤等)来讲,同等或更大的放射剂量也难以达到敏感肿瘤所能有的局部控制率。许多研究表明,低剂量分次放疗(2 Gy/次,共60 Gy)的5年局部控制率为40%~68%,但5年的局部控制率和生存率并没有相关性。近几年,骨肉瘤具有固有的放疗抵抗性的概念已经受到多项研究的质疑,有的骨肉瘤的放疗效果要好于黑色素瘤,而黑色素瘤是公认的放疗抵抗肿瘤。此外,若采取大分割治疗(总量不变,提高每次的放疗剂量),虽然骨肉瘤对普通X射线不算敏感,但其对质子和重离子治疗应答率明显提高。因此选择适当的患者、采取合适的放疗方法可以提高放疗效果。放疗抵抗的直接原因是肿瘤细胞对DNA损伤的修复能力和耐受能力,这和肿瘤的异质性有关。许多研究表明低氧微环境是放疗抵抗最重要的环境因素。首先,缺氧微环境为肿瘤细胞产生放疗抵抗提供重要的发生条件,缺氧微环境刺激细胞产生低氧诱导因子(Hypoxia inducible factors,HIF),缺氧预处理可增加骨肉瘤细胞的放疗抵抗,缺氧诱导因子(HIF-1、HIF-2)、自噬相关因子(LC3-Ⅱ)在骨肉瘤组织中高表达,若敲除HIF基因后,细胞自噬水平和凋亡显著升高,但抑制自噬后,细胞凋亡并没有减少,说明细胞在缺氧微环境中主要通过HIF实现放化疗抵抗。放疗后DNA损伤的修复能力也是放疗抵抗的机制之一,通过长时间监测DNA损伤的修复蛋白γ-H2AX和53BP1,即可评估DNA损伤的修复情况。针对引起放疗抵抗的原因,改变肿瘤缺氧微环境是放疗增敏的有效手段,主要有增加氧供应和研究靶向缺氧细胞的化学增敏药物。高压氧舱可提供高压氧环境,直接增加肿瘤组织的含氧量,但患者依从性较差,增敏效果不确切。结合尼克酰胺(针对急性缺氧)与慢性缺氧改良剂(如O 2和CO 2气体的混合物)可明显改善肿瘤组织的急慢性缺氧环境,从而增强放疗的效果。此外,有人提出热疗是克服放疗抵抗、增加放疗敏感性的有效方法,研究证明放疗同时把瘤组织加热到43℃可显著提高放疗效果。未来,骨肉瘤的放疗将在放疗增敏研究的基础上,结合立体定向放疗、质子放疗和重离子放疗等先进技术手段,低剂量、高精准,和手术治疗及化疗有机结合,实现更好的治疗效果。 展开更多
关键词 骨肉瘤 缺氧微环境 放疗抵抗 放疗增敏
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