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放射诱导启动子的合成与鉴定及质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK的构建
被引量:
4
1
作者
余东升
黄洪章
+2 位作者
潘朝斌
王安训
王建广
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期502-505,共4页
【目的】合成放射诱导启动子序列并构建其调控双自杀基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK。【方法】利用人工寡核苷酸片段合成放射诱导启动子,以绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因转染Tca8113细胞,经流式细胞仪鉴定其辐射诱导特性。将...
【目的】合成放射诱导启动子序列并构建其调控双自杀基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK。【方法】利用人工寡核苷酸片段合成放射诱导启动子,以绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因转染Tca8113细胞,经流式细胞仪鉴定其辐射诱导特性。将pCEA-CDglyTK中双自杀基因CDglyTK亚克隆到pcDNA3.1(+),然后把合成启动子插入到CDglyTK上游构建质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK并酶切鉴定,阳离子脂质体介导其转染舌鳞癌Tca8113细胞,RT-PCR观察CDglyTK表达及诱导放疗的增效作用。【结果】合成启动子序列分析与设计序列完全一致;低剂量放射线照射可诱导这种人工启动子增强GFP在Tca8113细胞中的表达;重组质粒的酶切图谱与预期一致;3Gy放疗显著增强CDglyTK在Tca8113细胞中的表达。【结论】成功合成放射诱导启动子并构建由其调控双自杀基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK,为进一步研究肿瘤放射-基因治疗奠定了基础。
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关键词
放射诱导启动子
自杀基因
基因表达
CDGLYTK
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职称材料
放射诱导启动子介导CDglyTK基因治疗Tca8113细胞的实验研究
2
作者
余东升
黄洪章
+3 位作者
谢谦
王安训
胡晓文
刘习强
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期269-272,共4页
目的观察人工放射诱导启动子介导CDglyTK双自杀融合基因治疗Tca8113细胞的疗效,为舌鳞癌治疗探索新的途径。方法构建人工放射诱导启动子调控双融合自杀基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK,用脂质体为载体转染Tca8113细胞后予以3G...
目的观察人工放射诱导启动子介导CDglyTK双自杀融合基因治疗Tca8113细胞的疗效,为舌鳞癌治疗探索新的途径。方法构建人工放射诱导启动子调控双融合自杀基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK,用脂质体为载体转染Tca8113细胞后予以3Gy诱导放疗,描绘细胞生长曲线,RT-PCR检测CDglyTK的表达,流式细胞仪检测细胞的凋亡和增殖。结果诱导放疗可显著增强双自杀基因CDglyTK对Tca8113细胞的毒性作用;RT-PCR半定量分析诱导放疗增强了CDglyTK基因的mRNA表达;流式细胞检测发现治疗组细胞的凋亡指数明显高于对照组,而增殖指数则低于对照组,诱导放疗显著提升了这种差距。结论人工合成放射诱导启动子可作为基因治疗中的分子开关调节CDglyTK基因在Tca8113细胞中靶向表达。低剂量放射性照射可显著提高放射诱导启动子调控的CDglyTK基因治疗Tca8113细胞的疗效。
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关键词
放射诱导启动子
放疗
舌鳞癌
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职称材料
题名
放射诱导启动子的合成与鉴定及质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK的构建
被引量:
4
1
作者
余东升
黄洪章
潘朝斌
王安训
王建广
机构
中山大学光华口腔医学院.附属口腔医院颌面外科
中山大学附属第二医院口腔科
中山大学附属第一医院口腔科
出处
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期502-505,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30271423)
广东省自然科学基金资助项目(021865)
文摘
【目的】合成放射诱导启动子序列并构建其调控双自杀基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK。【方法】利用人工寡核苷酸片段合成放射诱导启动子,以绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因转染Tca8113细胞,经流式细胞仪鉴定其辐射诱导特性。将pCEA-CDglyTK中双自杀基因CDglyTK亚克隆到pcDNA3.1(+),然后把合成启动子插入到CDglyTK上游构建质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK并酶切鉴定,阳离子脂质体介导其转染舌鳞癌Tca8113细胞,RT-PCR观察CDglyTK表达及诱导放疗的增效作用。【结果】合成启动子序列分析与设计序列完全一致;低剂量放射线照射可诱导这种人工启动子增强GFP在Tca8113细胞中的表达;重组质粒的酶切图谱与预期一致;3Gy放疗显著增强CDglyTK在Tca8113细胞中的表达。【结论】成功合成放射诱导启动子并构建由其调控双自杀基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK,为进一步研究肿瘤放射-基因治疗奠定了基础。
关键词
放射诱导启动子
自杀基因
基因表达
CDGLYTK
Keywords
radiation-inducible promoter
suicide gene
gene expression
CDglyTK
分类号
Q75 [生物学—分子生物学]
R738.05 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
放射诱导启动子介导CDglyTK基因治疗Tca8113细胞的实验研究
2
作者
余东升
黄洪章
谢谦
王安训
胡晓文
刘习强
机构
中山大学附属第二医院口腔颌面外科
中山大学附属第一医院口腔颌面外科
出处
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第3期269-272,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30271423)
广东省自然科学基金资助项目(21865)
文摘
目的观察人工放射诱导启动子介导CDglyTK双自杀融合基因治疗Tca8113细胞的疗效,为舌鳞癌治疗探索新的途径。方法构建人工放射诱导启动子调控双融合自杀基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK,用脂质体为载体转染Tca8113细胞后予以3Gy诱导放疗,描绘细胞生长曲线,RT-PCR检测CDglyTK的表达,流式细胞仪检测细胞的凋亡和增殖。结果诱导放疗可显著增强双自杀基因CDglyTK对Tca8113细胞的毒性作用;RT-PCR半定量分析诱导放疗增强了CDglyTK基因的mRNA表达;流式细胞检测发现治疗组细胞的凋亡指数明显高于对照组,而增殖指数则低于对照组,诱导放疗显著提升了这种差距。结论人工合成放射诱导启动子可作为基因治疗中的分子开关调节CDglyTK基因在Tca8113细胞中靶向表达。低剂量放射性照射可显著提高放射诱导启动子调控的CDglyTK基因治疗Tca8113细胞的疗效。
关键词
放射诱导启动子
放疗
舌鳞癌
Keywords
radiation-inducible promoter: radiation therapy
tongue squamous cell carcinoma
分类号
R739.8 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
放射诱导启动子的合成与鉴定及质粒pcDNA3.1(+)/E-CDglyTK的构建
余东升
黄洪章
潘朝斌
王安训
王建广
《中山大学学报(医学科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2005
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
放射诱导启动子介导CDglyTK基因治疗Tca8113细胞的实验研究
余东升
黄洪章
谢谦
王安训
胡晓文
刘习强
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
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