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放射性配体结合分析法测定鸡视网膜多巴胺D1受体 被引量:1
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作者 肖林 贺师鹏 +2 位作者 陈瑞英 郭静秋 黄天贵 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第2期169-172,共4页
用放射性配体[3H]SCH23390建立鸡视网膜多巴胺D1受体的放射性配体结合分析法,并测定不同试验组鸡视网膜多巴胺D1受体的Bmax值有显著性差异,KD值无明显差异.同时探讨了干,湿滤膜片对放射性测定结果的影响,以及影响试验结果的其它因... 用放射性配体[3H]SCH23390建立鸡视网膜多巴胺D1受体的放射性配体结合分析法,并测定不同试验组鸡视网膜多巴胺D1受体的Bmax值有显著性差异,KD值无明显差异.同时探讨了干,湿滤膜片对放射性测定结果的影响,以及影响试验结果的其它因素.实验表明湿滤膜片测量效果优于干滤膜片,膜受体即使贮存在-20℃条件下亦只能一周,否则影响受体的活性. 展开更多
关键词 近视 多巴胺D1受体 放射性 配体结合分析
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vMIP对细胞膜上趋化因子受体亲和力的结合特性研究 被引量:5
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作者 杨清玲 丁勇兴 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期389-392,共4页
目的通过病毒巨噬细胞炎性蛋白(vMIP)对外周血中单个核细胞(PBMC)膜上趋化因子受体结合的比较性研究,阐明vMIP与受体的结合能力。方法通过放射性配体受体结合实验,利用饱和实验、动力学实验和特异性分析,鉴定vMIP的受体结合能力。结果v... 目的通过病毒巨噬细胞炎性蛋白(vMIP)对外周血中单个核细胞(PBMC)膜上趋化因子受体结合的比较性研究,阐明vMIP与受体的结合能力。方法通过放射性配体受体结合实验,利用饱和实验、动力学实验和特异性分析,鉴定vMIP的受体结合能力。结果vMIP与人、食蟹猴PBMC膜上受体结合的Kd分别为11.1、14.3nmol/L,对趋化因子受体CCR5和CXCR4竞争结合的IC50分别为3.4、4.5nmol/L。结论提示了vMIP与膜上受体有较高的亲和力,并对CCR5和CXCR4具有高度特异性,可能对防治炎症及HIV1感染等具有重要意义。 展开更多
关键词 病毒巨噬细胞炎性蛋白 趋化因子受体 放射性配体受体结合实验
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VLDL-R中配体结合重复序列的结合特性及结构分析 被引量:3
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作者 刘志国 屈伸 +2 位作者 宗义强 邓耀祖 冯宗忱 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期526-530,共5页
目的 研究VLDL R中 8个配体结合重复序列 (ligand bindingrepeats ,LBR)在配体结合中的作用并探讨结合位点的结构。方法 采用基因缺失诱变方法 ,构建不同LBR缺失的VLDL R重组体。将其分别导入无LDL R功能性表达的ldl A7细胞。配体结... 目的 研究VLDL R中 8个配体结合重复序列 (ligand bindingrepeats ,LBR)在配体结合中的作用并探讨结合位点的结构。方法 采用基因缺失诱变方法 ,构建不同LBR缺失的VLDL R重组体。将其分别导入无LDL R功能性表达的ldl A7细胞。配体结合实验观察转染细胞与荧光标记的VLDL、β VLDL的结合能力 ,并采用同源建模的方法预测受体N 端 32 8个氨基酸的配体结合域的空间结构。结果 配体结合实验显示LBR1和LBR2对受体结合VLDL、β VLDL最为重要 ;LBR3对结合VLDL也有重要作用 ,但对结合 β VLDL无明显影响。模型显示受体N 端32 8个氨基酸的配体结合域呈现弧形口袋样结构 ,前 3个LBR结构紧凑 ,呈棒状 ,负电荷相对集中 ,与功能特性吻合 ,LBR5与LBR6之间的连接区赋予口袋结构一定的伸缩性 ,适应配体大小的变化。结论 受体N 端的前 3个LBR含有与配体结合的位点。该区域特定的空间结构与理化特性是结合功能的重要基础。 展开更多
关键词 VLDL 配体 LBR 受体结合 吻合 变方 实验观察 重复序列 同源建模 重组体
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^(125)I-VIP与小鼠肝癌H22细胞受体结合特性研究
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作者 李前伟 谭天秩 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1113-1116,共4页
目的 探讨放射性碘标记血管活性肠肽(VIP)与肝癌细胞的体内、外结合特性。方法 氯胺 T法标记、Seph adexG 5 0柱层析分离纯化制备1 2 5I VIP。通过饱和结合实验与竞争结合实验,评价1 2 5I VIP与鼠H2 2肝癌细胞受体的体外介导结合特性... 目的 探讨放射性碘标记血管活性肠肽(VIP)与肝癌细胞的体内、外结合特性。方法 氯胺 T法标记、Seph adexG 5 0柱层析分离纯化制备1 2 5I VIP。通过饱和结合实验与竞争结合实验,评价1 2 5I VIP与鼠H2 2肝癌细胞受体的体外介导结合特性;进行体内动态生物分布及非标记VIP竞争分布实验,观察1 2 5I VIP在荷H2 2小鼠体内尤其在移植瘤中的分布变化规律,评价其体内受体结合特性。结果 1 2 5I标记率为73 8% ,1 2 5I VIP比活度18 2TBq mmol,放射化学纯度(RCP)98%。1 2 5I VIP与H2 2细胞受体的结合具有饱和性,Scatchard作图显示为双位点系统,高、低亲和力结合位点的解离常数(Kd)分别为1 74nmol L与2 8 63nmol L ,最大结合容量(Bmax)分别为0 2 7pmol 10 6 细胞与5 75pmol 10 6 细胞,非标记VIP以剂量依赖方式抑制1 2 5I VIP与H2 2细胞结合。各时相肿瘤组织放射性均高于肌肉(P <0 0 5 ,P <0 0 0 1) ,2 0minT NT比值达最大为2 68,肺放射性高于血液与肝脏(P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,体内放射性主要经肾脏排泄;10 μg和40 μg非标记VIP对T NT比值的抑制率分别为2 6 87%与3 5 82 %。结论 1 2 5I VIP在体内、外与鼠H2 2肝癌细胞的结合由受体介导。此结果为进一步应用放射性核素标记VIP靶向诊治肝细胞癌研究提供了理论依据。 展开更多
关键词 H22细胞 特性研究 小鼠肝癌 H22肝癌细胞 放射性核素标记 mol/L 血管活性肠肽 放射性碘标记 饱和结合实验 受体结合特性 放射化学纯度 最大结合容量 细胞受体 0.05 氯胺-T法 H22小鼠 ^125I VIP 非标记 分离纯化 G-50
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IL-6受体在人白血病细胞膜上的表达及亲和力 被引量:2
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作者 刘爽 奚永志 +5 位作者 郭斯启 刘楠 屠敏 金荔 陈兴国 孔繁华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第4期255-260,共6页
目的 :研究各种白血病细胞膜IL 6R的表达、密度及亲和力 ,为深入探讨对IL 6 /IL 6R系统介导IL 6 PE40外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞的敏感性提供可靠依据。方法 :采用放射性配基结合实验 (RBA)并结合Scatchard作图法 ,系统分析IL 6... 目的 :研究各种白血病细胞膜IL 6R的表达、密度及亲和力 ,为深入探讨对IL 6 /IL 6R系统介导IL 6 PE40外毒素融合蛋白靶向杀伤白血病细胞的敏感性提供可靠依据。方法 :采用放射性配基结合实验 (RBA)并结合Scatchard作图法 ,系统分析IL 6R在 8种极具代表性的人类白血病细胞系U937,HL 6 0 ,KG1,TF1,K5 6 2 ,CEM ,HuT2 8和Raji上的表达密度及亲和力 ,同时应用流式细胞术 (FACS)检测IL 6R的α和 β亚单位蛋白在这些白血病细胞上的表达。结果 :RBA表明 ,粒、单、红白血病细胞系HL 6 0 ,U937,KG1和TF1表面存在着高亲和力IL 6R ,平均IL 6R密度 /细胞分别为 2 5 0 2个 ,2 874个 ,2 319个及 932 9个 ,而淋系白血病细胞系CEM ,HuT2 8和Raji以及慢粒K5 6 2细胞系则未测到IL 6R。FACS显示 ,HL 6 0 ,KG1,U937和TF1均高表达IL 6R的α亚单位蛋白 ,而CEM ,HuT2 8及K5 6 2则不表达IL 6Rα亚单位蛋白 ;IL 6Rβ亚单位蛋白在U937,KG1,TF1,HuT2 8及CEM中呈阳性表达 ,而在HL 6 0 ,Raji和K5 6 2细胞中则为阴性。结论 :鉴于粒、单、红白血病细胞异常高表达IL 6R ,而淋系和慢粒白血病呈阴性表达这一事实 ,提示急非淋白血病可能更适合用重组IL 6 PE40外毒素融合蛋白进行IL 6 /IL 6R介导的靶向治疗。 展开更多
关键词 白血病细胞 IL-6受体 放射配体结合实验 亲和力
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