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一种从马鹿粪便中提取DNA的改进方法 被引量：13
1
作者 日沙来提·吐尔地 艾斯卡尔·买买提 +2 位作者 日孜汗·阿布地艾尼 阿米拉·阿布来提 马合木提·哈力克 《安徽农业科学》 CAS 2012年第10期5739-5740,5754,共3页
[目的]介绍一种从马鹿粪便中提取DNA的改进方法。[方法]在传统的CTAB裂解法的基础下,根据马鹿粪便的特征进行改进所得的DNA提取方法。[结果]采用该方法从天山马鹿粪便中提取了高质量的粪便DNA并扩增出了天山马鹿线粒体细胞色素b基因片段... [目的]介绍一种从马鹿粪便中提取DNA的改进方法。[方法]在传统的CTAB裂解法的基础下,根据马鹿粪便的特征进行改进所得的DNA提取方法。[结果]采用该方法从天山马鹿粪便中提取了高质量的粪便DNA并扩增出了天山马鹿线粒体细胞色素b基因片段,通过测序检测,同时以提取的马鹿肌肉和皮毛样品DNA作为对照,进一步证实了提取的可靠性。[结论]该方法提取过程中无需使用蛋白酶K;所提取的DNA无需使用DNA纯化试剂盒纯化,可直接用于PCR扩增,因此,试验费用很低。 展开更多
关键词 马鹿 非损伤性取样 改进的dna提取方法 粪便dna
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“DNA粗提取和鉴定”实验设计与改进 被引量：1
2
作者 张晓娟 《生物学教学》 北大核心 2024年第2期40-42,共3页
对DNA粗提取与鉴定实验进行优化,探究植物组织的多种破碎方法对DNA粗提取的影响,并用氯仿等有机物对DNA粗提取物进一步纯化,分析DNA未纯化与纯化后的纯度差异。结果显示,相较于破壁机破碎、加液氮研钵研磨以及玻璃匀浆器研磨,不添加液... 对DNA粗提取与鉴定实验进行优化,探究植物组织的多种破碎方法对DNA粗提取的影响,并用氯仿等有机物对DNA粗提取物进一步纯化,分析DNA未纯化与纯化后的纯度差异。结果显示,相较于破壁机破碎、加液氮研钵研磨以及玻璃匀浆器研磨,不添加液氮用研钵研磨效果更好。DNA粗提液经纯化后纯度显著提高,蛋白质及盐类等污染明显减少。 展开更多
关键词 dna的粗提取 实验改进 dna纯化 高中生物学
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一种改进的昆虫基因组DNA的提取方法 被引量：39
3
作者 印红 刘晓丽 +2 位作者 王彦芳 张道川 赵晓瑜 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 2002年第1期80-82,共3页
就昆虫总DNA的提取 ,介绍了一种简便、快速的提取方法 ,此方法既可对新鲜标本进行DNA提取、也可对冷冻标本、干标本、酒精泡制标本进行DNA提取 ,均能得到较完整的大分子DNA片段 ,并且得率较高 .改进的昆虫总DNA提取方法简便、快速 ,对... 就昆虫总DNA的提取 ,介绍了一种简便、快速的提取方法 ,此方法既可对新鲜标本进行DNA提取、也可对冷冻标本、干标本、酒精泡制标本进行DNA提取 ,均能得到较完整的大分子DNA片段 ,并且得率较高 .改进的昆虫总DNA提取方法简便、快速 ,对设备和试剂的要求都不高 . 展开更多
关键词 昆虫分类 提取方法 基因组dna 分子生物物 随机扩增多态dna技术 纯度 得率
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小麦表面微生物总DNA提取方法的比较与改进 被引量：14
4
作者 吴坤 陈红歌 +1 位作者 刘娜 李慧敏 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第6期34-38,共5页
对小麦表面微生物总DNA提取方法进行了探讨 ,从液氮冻融 ,裂解剂 ,蛋白酶K的加入 ,缓冲液等方面对SDS与SDS/CTAB两种方法加以改进。结果表明 ,改进后SDS法提取的DNA降解现象与纯度有很大改善 ,量也有所增加 ;SDS/CTAB法改进后浓度与提... 对小麦表面微生物总DNA提取方法进行了探讨 ,从液氮冻融 ,裂解剂 ,蛋白酶K的加入 ,缓冲液等方面对SDS与SDS/CTAB两种方法加以改进。结果表明 ,改进后SDS法提取的DNA降解现象与纯度有很大改善 ,量也有所增加 ;SDS/CTAB法改进后浓度与提取率明显增加 ,纯度也较高。两种方法改进后提取的DNA分子量大小都集中在 2 3kb左右 ,且不经纯化可直接扩增出 展开更多
关键词 小麦 表面微生物 总dna 提取方法 SDS法 SDS/CTAB法
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长期直接冻存猪肉样中基因组DNA提取方法的改进与PCR分析 被引量：4
5
作者 王存芳 苑存忠 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2003年第2期43-46,共4页
以新鲜猪耳组织作为对照 ,比较了用经典方法从新鲜猪耳组织和长期直接冻存猪肉样中提取的DNA ,提出了从长期直接冻存肉样中提取高质量DNA的改进方法。结果表明 ,采用改进方法可得到大量的、较完整的基因组DNA ,即对于基因组DNA降解较严... 以新鲜猪耳组织作为对照 ,比较了用经典方法从新鲜猪耳组织和长期直接冻存猪肉样中提取的DNA ,提出了从长期直接冻存肉样中提取高质量DNA的改进方法。结果表明 ,采用改进方法可得到大量的、较完整的基因组DNA ,即对于基因组DNA降解较严重的样品是行之有效的方法。对提取到的DNA进行扩增 ,并分析了影响PCR反应的因素。 展开更多
关键词 基因组dna 提取方法 猪 长期冻存肉样 改进方法 PCR分析
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早食李基因组DNA提取方法的改进 被引量：3
6
作者 谢志亮 何业华 《中国南方果树》 北大核心 2013年第2期18-21,共4页
以改进的CTAB法对三华李品种群中的早食李叶片基因组DNA的提取进行了试验。结果表明,改进的CTAB法适于高质量三华李品种群基因组DNA的提取,提取的早食李基因组DNA完整性较好,无降解,OD260/OD280的比值在1.9～2.0之间,多糖类杂质去除较... 以改进的CTAB法对三华李品种群中的早食李叶片基因组DNA的提取进行了试验。结果表明,改进的CTAB法适于高质量三华李品种群基因组DNA的提取,提取的早食李基因组DNA完整性较好,无降解,OD260/OD280的比值在1.9～2.0之间,多糖类杂质去除较为干净。经SRAP检验,条带清晰,多态性良好,说明改良CTAB法提取的基因组DNA质量较好,适于三华李高质量基因组DNA的提取。不同时期的不同成熟度的叶片都可以提取到基因组DNA,但以各期的嫩叶(梢)产量最高,效率最好。 展开更多
关键词 早食李 dna提取方法 改进
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碱裂解法提取质粒DNA方法的改进 被引量：5
7
作者 张学民 王金生 《安徽大学学报（自然科学版）》 CAS 2000年第4期75-78,共4页
对碱裂解法提取质粒DNA的方法进行了一些改进 ,在室温下裂解菌体和变性DNA ;用NH4 Ac和LiCl同步沉淀除去样品中的蛋白质和RNA ,降低了对超螺旋质粒的剪切作用 ,得到高质量的质粒DNA。
关键词 碱裂解法 质粒dna 提取方法 裂解菌体 变性dna 同步沉淀 超螺旋结构
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基于教材比较的“DNA的粗提取与鉴定”实验改进 被引量：2
8
作者 葛千荟 谢群 《生物学教学》 北大核心 2024年第1期48-50,共3页
不同教材对“DNA的粗提取与鉴定”实验步骤的表述存在差异,留下了疑问。本研究进一步分析了实验原理,并进行了多组平行实验,探索实验步骤的优化。结果表明,比较合适的研磨液NaCl浓度为2 mol/L,三种去杂质方式对实验结果影响不大,不溶解... 不同教材对“DNA的粗提取与鉴定”实验步骤的表述存在差异,留下了疑问。本研究进一步分析了实验原理,并进行了多组平行实验,探索实验步骤的优化。结果表明,比较合适的研磨液NaCl浓度为2 mol/L,三种去杂质方式对实验结果影响不大,不溶解DNA沉淀物而直接用二苯胺鉴定的效果更明显。 展开更多
关键词 dna 粗提取 鉴定 实验改进
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板桥党参基因组DNA提取方法的改进及其18S rRNA基因序列分析 被引量：1
9
作者 罗洪斌 袁德培 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2010年第9期1778-1781,共4页
目的:为研究道地药材板桥党参Codonopsis tangshen Oliv.的遗传多样性、种类鉴定等,提取高质量的基因组DNA;探讨板桥党参18S rRNA基因的序列特征,为板桥党参分子鉴定提供分子依据。方法:以板桥党参鲜嫩叶片为材料,采用自行改进的CTAB法... 目的:为研究道地药材板桥党参Codonopsis tangshen Oliv.的遗传多样性、种类鉴定等,提取高质量的基因组DNA;探讨板桥党参18S rRNA基因的序列特征,为板桥党参分子鉴定提供分子依据。方法:以板桥党参鲜嫩叶片为材料,采用自行改进的CTAB法提取出基因组DNA;采用PCR直接测序技术测定板桥党参的18S rRNA基因序列,并分析其序列组成。结果:使用改进的CTAB法从鲜叶中提取板桥党参的基因组DNA浓度较高;以其基因组DNA为模板对18S rRNA基因进行PCR克隆并测序,获得了板桥党参18S rRNA基因序列特征。结论:改进的CTAB法提取板桥党参基因组DNA效果较好;DNA测序技术可作为板桥党参基原鉴定准确而有效的分子鉴定方法。 展开更多
关键词 板桥党参 dna提取 改进CTAB法 18S RRNA基因 序列分析
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基于改进层次斜率熵(IHSloE)的信号低频和高频故障特征提取方法 被引量：1
10
作者 许立学 刘鑫 +2 位作者 关文锦 陈然 邝素琴 《机电工程》 CAS 北大核心 2024年第7期1189-1197,1230,共10页
采用传统的基于粗粒化处理的多尺度特征提取方法,无法提取故障信号中的高频部分的故障信息,导致其提取到的故障特征难以准确地表征滚动轴承的故障状态和动态特性,无法保证故障诊断的可靠性和准确性。针对该缺陷,提出了一种基于改进层次... 采用传统的基于粗粒化处理的多尺度特征提取方法,无法提取故障信号中的高频部分的故障信息,导致其提取到的故障特征难以准确地表征滚动轴承的故障状态和动态特性,无法保证故障诊断的可靠性和准确性。针对该缺陷,提出了一种基于改进层次斜率熵(IHSloE)和随机森林(RF)的滚动轴承故障诊断方法。首先,利用改进层次化处理代替粗粒化处理,实现了信号的多尺度分析目的,基于斜率熵,提出了改进层次斜率熵的非线性动力学指标;随后,利用IHSloE方法提取了滚动轴承振动信号的故障特征,建立了表征滚动轴承故障特性的故障特征;最后,基于RF模型建立了多故障分类器,并将故障特征输入至RF分类器进行了训练和测试,以实现滚动轴承的故障识别目的;利用滚动轴承数据集进行了实验,并将其与其他的故障特征提取指标进行了对比。研究结果表明:IHSloE方法采用改进的层次化处理,能够快速有效地提取出振动信号中的高频故障特征,诊断准确率达到了99%,而特征提取时间仅为149.35 s;相较于采用粗粒化处理和层次处理的特征提取方法,其准确率至少提高了2%和1%,证明该方法适用于滚动轴承的故障诊断。 展开更多
关键词 故障信号高频部分特征 改进层次斜率熵 随机森林(RF)分类器 多尺度特征提取方法 改进层次化处理 故障诊断的可靠性
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大型真菌DNA提取方法的改进 被引量：14
11
作者 周玲玲 梁俊峰 《广东林业科技》 2011年第1期13-16,共4页
大型真菌中的一些类群的子实体由于含胶质和多糖较多,对提取高质量的DNA及随后的分子生物学实验有很大影响。针对这一现象,对过去大型真菌的DNA提取方法进行了改进,提出一种实用、高效的DNA提取方法。通过实验证明,此方法去除样品中胶... 大型真菌中的一些类群的子实体由于含胶质和多糖较多,对提取高质量的DNA及随后的分子生物学实验有很大影响。针对这一现象,对过去大型真菌的DNA提取方法进行了改进,提出一种实用、高效的DNA提取方法。通过实验证明,此方法去除样品中胶质和多糖的效果明显,可有效获得高质量的DNA,满足随后进行的分子生物学研究需要。 展开更多
关键词 大型真菌 dna 提取方法
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不同DNA提取方法对大曲基因组DNA提取效果及扩增子文库的影响 被引量：1
12
作者 叶光斌 幸洪静 +1 位作者 杨志阳 宗绪岩 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期118-126,共9页
大曲是中国传统白酒典型的“多酶多菌”的发酵剂。免培养的分子生物学方法已经成为大曲微生物群落研究的常规方法。通过评估不同DNA提取方法对大曲基因组DNA提取效果及扩增子文库的影响,选择适合用于大曲DNA提取的最佳方法。该研究选择4... 大曲是中国传统白酒典型的“多酶多菌”的发酵剂。免培养的分子生物学方法已经成为大曲微生物群落研究的常规方法。通过评估不同DNA提取方法对大曲基因组DNA提取效果及扩增子文库的影响,选择适合用于大曲DNA提取的最佳方法。该研究选择4种DNA提取方法分别对2种大曲进行大曲微生物DNA的提取,结合DNA提取质量、qPCR定量结果、细菌16S rRNA基因和真菌ITS基因扩增子文库的Illumina Miseq测序结果,评估大曲基因组DNA不同提取方法的效果。从DNA得率和生物量的综合分析表明,SDS-based提取法的DNA得率高于试剂盒提取法,其中原位SDS-based提取法DNA得率高达5.46×10^(4)ng/g,但DNA纯度较低;SDS-based提取法的qPCR定量结果比试剂盒提取法高10^(1)~10^(6)量级,其中洗脱加SDS-based提取法的微生物生物量最高,比原位SDS-based提取法的生物量高10^(1)~10^(3)量级;试剂盒提取法的微生物生物量最低,细菌和真菌的生物量只有10^(2)~10^(4)copies/g。扩增子文库间Shannon多样性指数的比较结果表明,不同DNA提取方法在真菌ITS扩增子文库间存在显著差异,而在细菌16S rDNA扩增子文库间差异不显著。洗脱处理样本的真菌扩增子文库Shannon指数要高于原位处理的样本。通过对扩增子文库间存在显著性差异操作分类单元(operational taxonomic units,OTU)的比较可以看出,在细菌16S rDNA扩增子文库中,多数OTUs存在丰度差异,但它们大多数能在不同DNA提取方法中检测到;然而在真菌ITS扩增子文库间,少数OTUs在不同DNA提取方法中检测不到,说明DNA提取方法对部分真菌微生物基因组的提取存在显著影响,且洗脱处理有利于真菌基因组DNA的提取。综合对比4种DNA提取方法,洗脱加SDS-based提取法最适合用于大曲微生物的定量和群落结构分析。 展开更多
关键词 dna提取方法 大曲 扩增子文库 微生物群落 qPCR Illumina Miseq测序
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食用植物油DNA提取方法比较及优化研究
13
作者 甘生睿 王进英 +2 位作者 王淑珍 杨芙蓉 董国鑫 《中国粮油学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期157-164,共8页
以油菜籽、芝麻和亚麻籽为原料,螺旋压榨法制油,采用乳化法、富集法、十六烷基三甲基溴化胺(CTAB)法、树脂试剂盒法和冷冻干燥法提取植物油DNA,并通过超微量可见分光光度计、实时聚合酶链式反应(PCR)、微卫星(SSR)分子标记评价DNA质量... 以油菜籽、芝麻和亚麻籽为原料,螺旋压榨法制油,采用乳化法、富集法、十六烷基三甲基溴化胺(CTAB)法、树脂试剂盒法和冷冻干燥法提取植物油DNA,并通过超微量可见分光光度计、实时聚合酶链式反应(PCR)、微卫星(SSR)分子标记评价DNA质量。结果表明CTAB法提取的DNA质量浓度高、纯度好、耗时短、起始油量低、费用低、适合分子分析。选择CTAB法,考察起始油量、有机化合物添加、裂解缓冲液组成、裂解和沉淀时间的提取效率。优化条件为最低起始油量100μL,有机化合物添加CTAB-氯仿∶异戊醇(CTAB-C∶I),裂解缓冲液组成为CTAB-β巯基乙醇-蛋白酶K(CTAB-βME-PK),裂解20 min,沉淀9 h。该方法在7种精炼植物油中提取到适合分子溯源的DNA,为植物油可追溯性和真实性检测提供了技术支撑。 展开更多
关键词 食用植物油 dna提取 方法优化 SSR分子标记
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入侵植物一年蓬基因组DNA提取方法优化
14
作者 王仕文 杨子琼 +5 位作者 魏淑雅 丁彤 顾婉如 陈雨蓓 屈利利 童跃伟 《安徽农学通报》 2024年第13期66-70,共5页
一年蓬为菊科飞蓬属植物,是分布较广、危害较重的一种外来入侵杂草。为优选该植物基因组DNA的提取方法,本研究采取四因素三水平正交试验设计,对一年蓬基因组DNA的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)提取方法进行优化,并与常规的植物基因组试剂... 一年蓬为菊科飞蓬属植物,是分布较广、危害较重的一种外来入侵杂草。为优选该植物基因组DNA的提取方法,本研究采取四因素三水平正交试验设计,对一年蓬基因组DNA的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)提取方法进行优化,并与常规的植物基因组试剂盒法进行对比。结果表明,一年蓬基因组DNA较优的提取方法为改良CTAB法,即一年蓬的干燥叶片经CTAB-free去除多糖,并加入β-巯基乙醇防止酚氧化,用氯仿∶异戊醇(24∶1)抽提3次。改良CTAB法提取的一年蓬基因组DNA质量较高,微量分光光度计检测的A_(260)/A_(280)数值接近1.8~2.0,且凝胶电泳DNA条带清晰,无明显拖带。该方法为该植物的遗传多样性和入侵机制等研究提供参考。 展开更多
关键词 菊科 一年蓬 dna提取方法 改良CTAB法 正交试验
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从木本果树中提取DNA方法的改进
15
作者 秦春圃 《生物技术通报》 CAS CSCD 2002年第4期53-54,共2页
关键词 木本果树 dna 改进 提取方法
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苔藓植物DNA提取方法研究 被引量：21
16
作者 侯义龙 曹同 +2 位作者 蔡丽娜 孙志刚 崔琳 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期425-428,435,共5页
提取高质量的 DNA是对苔藓植物遗传多样性进行研究的基础。该文以苔藓植物为试材 ,用 5种方法 ,即快速提取法、改良 CTAB法、CTAB法、SDS法及高盐法 (第一种为自行设计 ,第二种是对原有方法的改进 )对苔藓植物 DNA提取方法进行了比较研... 提取高质量的 DNA是对苔藓植物遗传多样性进行研究的基础。该文以苔藓植物为试材 ,用 5种方法 ,即快速提取法、改良 CTAB法、CTAB法、SDS法及高盐法 (第一种为自行设计 ,第二种是对原有方法的改进 )对苔藓植物 DNA提取方法进行了比较研究。结果表明 ,快速提取法和改良 CTAB法是 2种适合于苔藓植物 DNA提取的方法。这 2种方法提取的 DNA浓度和纯度均比较高 ,凝胶电泳显示无明显降解现象 ,适宜作为 PCR扩增的模板 ,并成功地进行了 RAPD扩增。 展开更多
关键词 苔藓植物 dna提取 RAPD扩增 提取方法
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一种优化的植物总DNA提取方法 被引量：39
17
作者 黄萱 高丽美 +1 位作者 张永彦 徐子勤 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第6期1103-1106,共4页
根据自己提取植物基因组DNA的实际经验,改进了Clark利用CTAB提取植物基因组DNA的方法.在试验过程中发现,通过在研磨材料时加入液氮、用剪去端部的吸头转移含有DNA的溶液,并且将加入RNaseA消化RNA的步骤改在最后进行等一系列改进,可以获... 根据自己提取植物基因组DNA的实际经验,改进了Clark利用CTAB提取植物基因组DNA的方法.在试验过程中发现,通过在研磨材料时加入液氮、用剪去端部的吸头转移含有DNA的溶液,并且将加入RNaseA消化RNA的步骤改在最后进行等一系列改进,可以获得高质量的DNA.本文同时就主要提取步骤进行了分析. 展开更多
关键词 植物总dna 提取 方法优化
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漾濞核桃叶片基因组DNA的两种提取方法效果比较 被引量：25
18
作者 杨恩 陈少瑜 +2 位作者 张雨 范志远 习学良 《西部林业科学》 CAS 2005年第4期72-75,共4页
以漾濞核桃不同生长期的叶片为材料,采用高盐低pH法和改良CTAB法作提取其基因组DNA的效果比较实验。通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计和RAPD扩增对所提取的DNA样品进行检测,比较所得DNA的产量、质量,认为从漾濞核桃不同发育时期叶片... 以漾濞核桃不同生长期的叶片为材料,采用高盐低pH法和改良CTAB法作提取其基因组DNA的效果比较实验。通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计和RAPD扩增对所提取的DNA样品进行检测,比较所得DNA的产量、质量,认为从漾濞核桃不同发育时期叶片中获得DNA的提取效果不同。4种叶样以冬芽和新叶的效果为好,老叶最差;用两种提取方法从叶片中得到的DNA产量和质量有所不同,高盐低pH法提取的DNA纯度高,但是产量较低;而改良CTAB法则相反,产量高,纯度低。 展开更多
关键词 漾濞核桃 叶片 基因组dna dna提取方法
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15种常见食(药)用菌的3种总DNA提取方法比较研究 被引量：14
19
作者 江树勋 邵碧英 +4 位作者 陈文炳 李寿崧 王泽生 朱晓南 廖剑华 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第5期36-40,共5页
本文研究了15种主要食(药)用菌共16个样品的3种总DNA提取方法之比较,它们分别是CTAB法、食品DNA提取试剂盒法和QIAGEN试剂盒法。提取结果分别经过核酸蛋白分析仪、电泳以及RAPD检测。紫外检测结果表明3种方法提取到的总DNA质量均不理想... 本文研究了15种主要食(药)用菌共16个样品的3种总DNA提取方法之比较,它们分别是CTAB法、食品DNA提取试剂盒法和QIAGEN试剂盒法。提取结果分别经过核酸蛋白分析仪、电泳以及RAPD检测。紫外检测结果表明3种方法提取到的总DNA质量均不理想,电泳结果表明3种方法均能提取出小平菇、红菇、香菇、双孢蘑菇、竹荪、黑木耳、姬松茸等7种食(药)用菌总DNA,RAPD检测结果表明CTAB法适用于所有15种食(药)用菌提取用于PCR的总DNA。根据以上结果,我们认为可以选用CTAB法作为在检测这些食(药)用菌的转基因成分时的总DNA提取方法。 展开更多
关键词 食用菌 药用菌 总dna 提取方法 比较研究 CTAB法 食品dna提取试剂盒法 QIAGEN试剂盒法
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一种快速简单高效提取植物DNA的方法 被引量：23
20
作者 汤文开 谭新 +3 位作者 张辉 黄耿青 许文亮 李学宝 《华中师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2007年第3期447-449,共3页
在综合分析多种提取植物DNA方法的基础上,改良发展了一种快速简便高效的DNA抽提方法.以多种植物的子叶、叶片以及愈伤组织为材料,采用本方法进行抽提纯化,得到的DNA质量好、得率高,且提取过程简单,适合于大批量快速提取植物DNA.
关键词 植物组织 dna提取 方法改良 多聚酶链反应
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