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一种适用于动物与植物总DNA提取的方法——改良CTAB法 被引量:46
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作者 闫苗苗 魏光成 +2 位作者 潘效红 马怀雷 李伟振 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第20期8488-8488,8558,共2页
[目的]介绍一种简单、高效且能用于提取动物与植物的总DNA的方法。[方法]采用改良CTAB法,从24个花生品种嫩叶及小白鼠的肝、肺和肾中提取DNA,进行琼脂糖电泳和蛋白核酸分析仪检测及PCR扩增检验。[结果]所提取DNA电泳条带清晰,整齐均匀,O... [目的]介绍一种简单、高效且能用于提取动物与植物的总DNA的方法。[方法]采用改良CTAB法,从24个花生品种嫩叶及小白鼠的肝、肺和肾中提取DNA,进行琼脂糖电泳和蛋白核酸分析仪检测及PCR扩增检验。[结果]所提取DNA电泳条带清晰,整齐均匀,OD260/OD280值介于1.77~1.83,用于PCR扩增获得理想效果。[结论]该研究介绍的改良CTAB法提取动物和植物的总DNA,满足开展PCR扩增的要求。 展开更多
关键词 动物 植物 DNA 改良ctab法
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改良CTAB法提取高质量香蕉叶片总RNA 被引量:25
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作者 淦国英 漆艳香 +2 位作者 蒲金基 张欣 谢艺贤 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期192-195,共4页
以巴西香蕉叶片为试验材料,采用改良CTAB法提纯香蕉叶片总RNA。结果表明,改良CTAB法提取的香蕉叶片总RNA的28S、18SrDNA条带清晰、整齐,A260/A280值大于2.0,无需任何纯化处理即可用作香蕉MuACTIN基因的扩增模板,经RT-PCR扩增获得了带型... 以巴西香蕉叶片为试验材料,采用改良CTAB法提纯香蕉叶片总RNA。结果表明,改良CTAB法提取的香蕉叶片总RNA的28S、18SrDNA条带清晰、整齐,A260/A280值大于2.0,无需任何纯化处理即可用作香蕉MuACTIN基因的扩增模板,经RT-PCR扩增获得了带型清晰的目的条带,说明利用此法分离的RNA纯度和浓度符合RT-PCR的要求;而CTAB法提取的总RNA产量较低,且纯度不高。说明改良CTAB法能有效从富含多酚和多糖的香蕉叶片中提取高质量的总RNA。 展开更多
关键词 改良ctab法 香蕉叶片 总RNA 提取
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改良CTAB法提取野牡丹科7种植物DNA 被引量:16
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作者 何雪娇 郑涛 +1 位作者 苏金强 陈振东 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第18期120-122,共3页
以野牡丹科植物幼叶为材料,对影响野牡丹科植物DNA提取质量的主要因子进行研究,以期建立适宜野牡丹科植物DNA提取的优化反应体系。结果表明,当提取液中CTAB浓度为4%,沉淀时加入0.6体积的预冷异丙醇、1/2体积的5 mol/L氯化钠及2倍体积的... 以野牡丹科植物幼叶为材料,对影响野牡丹科植物DNA提取质量的主要因子进行研究,以期建立适宜野牡丹科植物DNA提取的优化反应体系。结果表明,当提取液中CTAB浓度为4%,沉淀时加入0.6体积的预冷异丙醇、1/2体积的5 mol/L氯化钠及2倍体积的无水乙醇时,所提取到的DNA纯度较高,电泳条带清晰。且在此条件下,能提取出野牡丹科7种植物的DNA。 展开更多
关键词 野牡丹 改良ctab法 DNA提取
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改良CTAB法提取核桃总RNA试验 被引量:36
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作者 刘晓菊 洪海波 +2 位作者 李敏 刘媛 杨克强 《山东农业科学》 2008年第1期97-99,共3页
从植物组织中提取高质量的RNA是进行基因克隆和基因表达分析的基础。不同植物的组织由于组成成分的差别,其RNA的提取有不同的难点。本试验针对核桃嫩叶内含物复杂的典型特点,在对比各种提取方法的特点及总结他人研究的基础上改良了CTAB... 从植物组织中提取高质量的RNA是进行基因克隆和基因表达分析的基础。不同植物的组织由于组成成分的差别,其RNA的提取有不同的难点。本试验针对核桃嫩叶内含物复杂的典型特点,在对比各种提取方法的特点及总结他人研究的基础上改良了CTAB法。此方法提取的核桃嫩叶总RNA的电泳结果可见清晰完整的条带,表明改良CTAB法能有效去除多糖和多酚以及色素等次生代谢物的污染,提取RNA纯度较高、完整性好,易于进行RT-PCR和cDNA文库的构建。此方法简单易行而且所用试剂成本较低。 展开更多
关键词 核桃嫩叶 RNA提取 次生代谢物 改良ctab法
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改良CTAB法提取薰衣草基因组DNA研究 被引量:9
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作者 任艳利 腊萍 +1 位作者 张相峰 尚天翠 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第22期13292-13293,13320,共3页
[目的]寻找高效、快速的薰衣草(Lavandula pedunculata)基因组DNA提取方法。[方法]通过改良CTAB法提取薰衣草3个品种的基因组DNA。[结果]经检测,所提样品OD260/OD280值在1.85左右,得率为454.50~1 093.35μg/ml,电泳条带清晰,无明显的... [目的]寻找高效、快速的薰衣草(Lavandula pedunculata)基因组DNA提取方法。[方法]通过改良CTAB法提取薰衣草3个品种的基因组DNA。[结果]经检测,所提样品OD260/OD280值在1.85左右,得率为454.50~1 093.35μg/ml,电泳条带清晰,无明显的拖尾现象;Eco RI酶切基因组DNA图谱表明,提取的DNA能被限制性内切酶完全酶切;以提取的DNA为模板,用1对随机引物进行RAPD-PCR,发现检测条带清晰,说明获得的DNA质量较高,可以满足相关的分子生物学研究需要。[结论]该研究可以为薰衣草分子生物学的后续试验的开展奠定理论基础。 展开更多
关键词 薰衣草 DNA提取 改良ctab法
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利用改良CTAB法提取淮山叶片高质量DNA 被引量:4
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作者 李月仙 黄东益 +3 位作者 黄小龙 周鑫 程文杰 罗欣 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第22期10413-10414,10419,共3页
[目的]为淮山的分子生物学研究奠定基础。[方法]以淮山嫩叶为试材,用改良CTAB法提取其中的DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳和ISSR-PCR扩增对所得DNA的质量和浓度进行检测,考察该方法对DNA的提取效果。[结果]所提取DNA的分子量与λDNA相近,各... [目的]为淮山的分子生物学研究奠定基础。[方法]以淮山嫩叶为试材,用改良CTAB法提取其中的DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳和ISSR-PCR扩增对所得DNA的质量和浓度进行检测,考察该方法对DNA的提取效果。[结果]所提取DNA的分子量与λDNA相近,各泳道均出现1条清晰的DNA条带,且条带的完整性较好,无蛋白质和RNA污染,无DNA降解现象;以所提DNA为模板进行ISSR-PCR扩增,可获得稳定的扩增条带。[结论]改良CTAB法简单高效,所得DNA质量较高,RNA消化彻底,DNA无明显降解,进行ISSR分析时,条带清晰,多态性较好。 展开更多
关键词 淮山 基因组DNA 改良ctab法
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改良CTAB法提取成熟肥城桃果实的总RNA 被引量:27
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作者 陈长宝 朱树华 周杰 《山东农业科学》 2009年第5期102-104,共3页
为了从成熟的肥城桃果实中提取纯净完整的RNA,本试验在原CTAB法的基础上进行了改进,并对RNA的完整性、产率和纯度等方面进行评价。结果表明,采用改良CTAB法所得RNA完整性好,条带清晰,无明显降解,28S和18S rRNA的亮度比约为2∶1,A260/A28... 为了从成熟的肥城桃果实中提取纯净完整的RNA,本试验在原CTAB法的基础上进行了改进,并对RNA的完整性、产率和纯度等方面进行评价。结果表明,采用改良CTAB法所得RNA完整性好,条带清晰,无明显降解,28S和18S rRNA的亮度比约为2∶1,A260/A280达1.89,且产率较高,为356.21μg/g,经RT-PCR后得到一特异条带,表明该RNA可用于后续分子生物学操作。 展开更多
关键词 肥城桃果实 总RNA 改良ctab法
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一种提取肉类总DNA的方法——改良CTAB法 被引量:2
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作者 周彤 李家鹏 +2 位作者 田寒友 杨君娜 乔晓玲 《肉类研究》 2011年第12期22-24,共3页
为了能够更加准确的进行动物源性成分定量检测,打击市场上的"掺杂使假"行为,本实验从初始取样量、裂解时间、沉淀时间和RNA酶作用四方面对CTAB法提取肉类DNA进行研究。综合考虑方法的快速、高效性,最终确定初始取样量应该小于... 为了能够更加准确的进行动物源性成分定量检测,打击市场上的"掺杂使假"行为,本实验从初始取样量、裂解时间、沉淀时间和RNA酶作用四方面对CTAB法提取肉类DNA进行研究。综合考虑方法的快速、高效性,最终确定初始取样量应该小于0.05g,裂解时间和沉淀时间均为0.5h,不需添加RNA酶。本方法具有良好的线性关系(R2=0.9972)和稳定性(标准差为0.18),是一种快速、准确、规范的肉类总DNA提取方法。 展开更多
关键词 DNA提取 改良ctab法 肉类
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适于植物愈伤组织DNA提取的改良CTAB法 被引量:1
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作者 黄永会 朱英 刘永翔 《农技服务》 2014年第9期46-47,共2页
本文介绍了一种提取植物愈伤组织DNA的改良CTAB方法。这种方法根据植物愈伤组织的特点,通过在提取液中加入PVP、将提取液加入样品中研磨、以氯仿/异戊醇代替酚/氯仿/异戊醇等措施获得质量较高的基因组DNA,以此为模板进行PCR扩增可检测... 本文介绍了一种提取植物愈伤组织DNA的改良CTAB方法。这种方法根据植物愈伤组织的特点,通过在提取液中加入PVP、将提取液加入样品中研磨、以氯仿/异戊醇代替酚/氯仿/异戊醇等措施获得质量较高的基因组DNA,以此为模板进行PCR扩增可检测到清晰的目的片段,说明提取的DNA可以用于一般的分子生物学实验。 展开更多
关键词 DNA提取 改良ctab法
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改良CTAB法提取鸢尾属植物DNA 被引量:9
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作者 李承哲 刘占林 +2 位作者 杨红超 黄安玲 刘芳 《现代农业科技》 2011年第8期31-31,34,共2页
鸢尾属植物中酚类、多糖含量较高,DNA提取较为困难。在前人工作基础上,改进了提取植物DNA的CTAB方法,通过延长水浴时间、氯仿/异戊醇(24∶1)2次抽提、适当延长氯仿/异戊醇与提取液接触时间等一系列改进,简化了提取步骤,大大缩短了提取... 鸢尾属植物中酚类、多糖含量较高,DNA提取较为困难。在前人工作基础上,改进了提取植物DNA的CTAB方法,通过延长水浴时间、氯仿/异戊醇(24∶1)2次抽提、适当延长氯仿/异戊醇与提取液接触时间等一系列改进,简化了提取步骤,大大缩短了提取时间。所提取的DNA纯度高,可满足以PCR扩增为基础的试验需要。 展开更多
关键词 鸢尾属 DNA提取 改良ctab法 PCR
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4种改良CTAB法提取石榴成熟叶片DNA的比较研究 被引量:11
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作者 谭小艳 马耀华 郝兆祥 《中国南方果树》 北大核心 2021年第3期122-125,共4页
为研究从成熟石榴叶片中提取高质量基因组DNA的方法,根据成熟石榴叶片组织中富含多酚、多糖的特点,以峄城中国石榴种质资源圃20种石榴成熟叶片为材料,分别采用改良CTAB法(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)4种方法提取成熟石榴基因组DNA,通过琼脂糖凝胶... 为研究从成熟石榴叶片中提取高质量基因组DNA的方法,根据成熟石榴叶片组织中富含多酚、多糖的特点,以峄城中国石榴种质资源圃20种石榴成熟叶片为材料,分别采用改良CTAB法(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)4种方法提取成熟石榴基因组DNA,通过琼脂糖凝胶、紫外分光光度计分析、ISSR扩增等方法检测所提取DNA的质量。结果表明,改良CTABⅣ法能从各个石榴品种的成熟叶片中提取出基因组DNA,琼脂糖电泳胶孔干净,无拖带,且DNA的纯度和完整性都较好,OD260 nm/OD280 nm的比值均为1.8~2.0,无降解现象,其质量、产量都高于其他改良CTAB法。ISSR-PCR扩增结果表明,此方法提取的基因组总DNA完全适于ISSR分析。其主要的步骤是:在石榴叶片的研磨中添加Vc、PVP等抗氧化物质,加入CTAB提取液后65℃水浴30 min后冷却至室温,离心条件为15℃、10 000 r/min、10 min, DNA粗提液用氯仿抽提3次,可获得高质量DNA。 展开更多
关键词 石榴 成熟叶片 改良ctab法 基因组DNA 提取
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改良CTAB法用于水环境中超微型浮游生物总DNA的提取 被引量:6
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作者 贺云彦 李诗 +3 位作者 刘科赛 侯建军 刘细霞 李运涛 《武汉纺织大学学报》 2016年第3期68-70,共3页
水环境中超微型浮游生物的研究要求有高质量的总DNA。通过对常规的CTAB法进行改良,对提取过程中的几个关键步骤进行优化,包括联合使用CTAB和SDS,利用5?CTAB去除杂质等,建立一种可以高效提取水环境中超微型浮游生物总DNA的方法,并与常规C... 水环境中超微型浮游生物的研究要求有高质量的总DNA。通过对常规的CTAB法进行改良,对提取过程中的几个关键步骤进行优化,包括联合使用CTAB和SDS,利用5?CTAB去除杂质等,建立一种可以高效提取水环境中超微型浮游生物总DNA的方法,并与常规CTAB法以及蛋白酶K法进行比较。改良后的CTAB法提取的DNA的产量、纯度均最高,也最适合后续的实验研究。 展开更多
关键词 水环境 超微型浮游生物 改良ctab法 DNA提取
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一种改良的CTAB法提取马尾松基因组DNA 被引量:9
13
作者 陈碧华 《广东林业科技》 2009年第2期26-29,共4页
以马尾松针叶为试验材料,利用改良的CTAB法抽提基因组DNA,其浓度和纯度符合PCR实验的要求,经凝胶电泳检测,DNA纯化效果好。
关键词 改良ctab法 马尾松 针叶 基因组DNA
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果树果实总RNA提取方法的改良研究 被引量:9
14
作者 朱晓琴 金晓磊 +1 位作者 冯永庆 沈元月 《北京农学院学报》 2008年第2期16-18,共3页
植物总RNA的提取尽管已成为一种常规的技术,但由于果树果实材料的特殊性,其RNA的提取至今没有一种比较理想的技术和方法。本研究在以往CTAB方法的基础上,对其进行改良以探讨一种适于果实总RNA提取的通用方法,从而为果实分子生物学研究... 植物总RNA的提取尽管已成为一种常规的技术,但由于果树果实材料的特殊性,其RNA的提取至今没有一种比较理想的技术和方法。本研究在以往CTAB方法的基础上,对其进行改良以探讨一种适于果实总RNA提取的通用方法,从而为果实分子生物学研究奠定基础。研究结果表明,在提取缓冲液中加入PVP和β-巯基乙醇,使其终浓度分别为16%和3%,在匀浆上清液中加入1/3体积5 mol/L KAC(pH4.8),可有效地提高RNA提取的质量。利用改良后的CTAB法成功地从苹果、桃、草莓和葡萄果实中提取出总RNA。经过紫外、电泳、反转录分析结果表明,该改良的CTAB法是一种适合果实总RNA提取的首选方法。 展开更多
关键词 果实 果肉 总RNA 改良ctab法
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2种CTAB法对干燥方法不同的平邑甜茶叶片DNA的提取 被引量:7
15
作者 赵海山 刘连芬 +2 位作者 李超 李晓伟 钱关泽 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第5期2244-2245,2273,共3页
分别采用S.Wilkie的CTAB提取方法及在此基础上进行了改良的CTAB法,以硅胶干燥、标本干燥和新鲜的平邑甜茶叶片为材料,提取出平邑甜茶基因组DNA,并进行DNA质量的检测。结果表明,利用改良的CTAB法能够获得较高质量的DNA,新鲜叶片中提取的... 分别采用S.Wilkie的CTAB提取方法及在此基础上进行了改良的CTAB法,以硅胶干燥、标本干燥和新鲜的平邑甜茶叶片为材料,提取出平邑甜茶基因组DNA,并进行DNA质量的检测。结果表明,利用改良的CTAB法能够获得较高质量的DNA,新鲜叶片中提取的DNA量最多,经过硅胶干燥的叶片提取的DNA比标本干燥的叶片多。 展开更多
关键词 平邑甜茶 改良ctab法 基因组DNA 硅胶干燥
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核桃子叶RNA提取方法的研究 被引量:9
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作者 董宁光 高英 裴东 《北京林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期98-101,共4页
针对核桃子叶富含酚类、色素、多糖、油脂等物质的特点,以常用的Trizol法、异硫氰酸胍法、SDS法和改良的CTAB法4种方法提取核桃子叶总RNA,通过RNA产率、纯度、电泳图谱来确定适于核桃子叶RNA提取的方法。结果表明:Trizol法和SDS法所提取... 针对核桃子叶富含酚类、色素、多糖、油脂等物质的特点,以常用的Trizol法、异硫氰酸胍法、SDS法和改良的CTAB法4种方法提取核桃子叶总RNA,通过RNA产率、纯度、电泳图谱来确定适于核桃子叶RNA提取的方法。结果表明:Trizol法和SDS法所提取的RNA纯度较低;异硫氰酸胍法所提取的RNA降解严重,RNA以小分子弥散状分布;改良CTAB法所提取的RNA呈现出28SrRNA、18SrRNA2条清晰的带,且28S条带宽度是18S条带宽度的2倍左右,其A260/A280比值为1.98,具有很高的纯度,得率为(100±5.31)μg/g。RT-PCR实验结果进一步表明,改良CTAB法提取的RNA完全能够用于后续的分子生物学研究。 展开更多
关键词 核桃 子叶 RNA提取 改良ctab法
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葡萄花序总RNA提取方法研究 被引量:7
17
作者 赵巍巍 宗成文 +2 位作者 曹后男 陈蕾 朴日子 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第32期16161-16162,16176,共3页
[目的]为筛选出提取葡萄花序总RNA的最佳方法。[方法]以藤稔葡萄花序为试材,针对葡萄花序中多酚、多糖类物质含量较高的特点,比较了CTAB法、SDS/酚法以及经改良的CTAB法对藤稔葡萄花序总RNA的提取效果。[结果]3种方法均能从葡萄花序中... [目的]为筛选出提取葡萄花序总RNA的最佳方法。[方法]以藤稔葡萄花序为试材,针对葡萄花序中多酚、多糖类物质含量较高的特点,比较了CTAB法、SDS/酚法以及经改良的CTAB法对藤稔葡萄花序总RNA的提取效果。[结果]3种方法均能从葡萄花序中提取到总RNA。其中,经改良的CTAB法能有效抑制酚类物质和多糖对总RNA提取的影响,获得纯度高、完整性好的总RNA,其28SrRNA亮度约为18SrRNA的2倍,RT-PCR分析表明:该方法提取的总RNA适合于下一步的研究。[结论]经过改良的CTAB法提取葡萄花序总RNA的效果最佳。 展开更多
关键词 葡萄花序 总RNA 提取 改良ctab法 RT—PCR
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4种滑叶铁线莲基因组DNA提取方法比较 被引量:7
18
作者 胡祎晨 孙正海 +3 位作者 王锦 李世峰 辛培尧 范萱 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第36期22215-22216,22363,共3页
[目的]对4种滑叶铁线莲基因组DNA提取方法进行比较研究,建立滑叶铁线莲最适DNA提取方法。[方法]以滑叶铁线莲叶片为材料,比较改良CTAB法Ⅰ、改良CTAB法Ⅱ、改良CTAB法Ⅲ、改良SDS法这4种基因组DNA提取法在提取DNA纯度、浓度和提取时间... [目的]对4种滑叶铁线莲基因组DNA提取方法进行比较研究,建立滑叶铁线莲最适DNA提取方法。[方法]以滑叶铁线莲叶片为材料,比较改良CTAB法Ⅰ、改良CTAB法Ⅱ、改良CTAB法Ⅲ、改良SDS法这4种基因组DNA提取法在提取DNA纯度、浓度和提取时间等方面的不同。[结果]4种方法都可提取滑叶铁线莲基因组DNA。改良CTAB法Ⅰ提取DNA纯度最高,但浓度最低且提取时间最长;改良SDS法提取DNA浓度最高,所需时间较短,但纯度较低;改良CTAB法Ⅲ提取所需时间最短。[结论]建立了铁线莲最适DNA提取方法,为运用分子生物学手段对其研究提供支持。 展开更多
关键词 滑叶铁线莲 基因组DNA提取 改良ctab法 改良SDS
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优化反向PCR法分离转基因油菜外源T-DNA侧翼序列的研究 被引量:9
19
作者 杨坤 吴学龙 +1 位作者 朗春秀 陈锦清 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第10期5002-5005,共4页
[目的]优化反向PCR(IPCR)条件分离油菜转基因外源T-DNA的侧翼序列。[方法]以单拷贝的转基因油菜FS4为研究材料,用改良CTAB法提取转基因油菜总DNA,并进行酶切、纯化、自连接,再通过两轮巢式PCR扩增,进行序列对比。[结果]两轮巢式PCR扩增... [目的]优化反向PCR(IPCR)条件分离油菜转基因外源T-DNA的侧翼序列。[方法]以单拷贝的转基因油菜FS4为研究材料,用改良CTAB法提取转基因油菜总DNA,并进行酶切、纯化、自连接,再通过两轮巢式PCR扩增,进行序列对比。[结果]两轮巢式PCR扩增得到1个大小为4.0kb的片段,其序列与油菜数据库中BH652424和BZ044084两序列同源性分别高达97.8%和63.4%。根据序列比对结果设计特异引物对进行PCR验证的结果,也证明了FS4转基因油菜中T-DNA的确插入在该位点。[结论]优化后的IPCR条件能成功分离油菜转基因外源T-DNA的侧翼序列。 展开更多
关键词 反向PCR 侧翼序列 改良ctab法 转基因油菜
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小球藻的分离及其DNA提取方法的研究 被引量:5
20
作者 任雪艳 孔庆军 +2 位作者 王恒强 占东霞 张海黎 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第32期13970-13971,共2页
[目的]从湖水中分离小球藻并提取其DNA。[方法]采用稀释法及水滴法分离小球藻,优化小球藻培养条件,并用改良CTAB法及SDS法提取其DNA。[结果]温度20~25℃、光照4.39~5.86W/m^2及转速100~150r/min的条件适于小球藻的培养;改良C... [目的]从湖水中分离小球藻并提取其DNA。[方法]采用稀释法及水滴法分离小球藻,优化小球藻培养条件,并用改良CTAB法及SDS法提取其DNA。[结果]温度20~25℃、光照4.39~5.86W/m^2及转速100~150r/min的条件适于小球藻的培养;改良CTAB法适于提取小球藻DNA。[结论]该研究将有助于在分子水平研究小球藻,促进小球藻的开发和利用。 展开更多
关键词 小球藻 分离方 DNA提取 改良ctab法
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