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一种提取植物基因组DNA的方法--改良尿素法
被引量：
25
1
作者
曹文波
郑璐璐
谢文海
《华中师范大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
2008年第3期448-451,共4页
介绍了一种从玉米和水稻叶片中提取高质量基因组DNA的改良尿素法.与其他常用方法如CTAB法、SDS法等相比,这种改良方法具有产率高、快速省时、可常温操作、成本耗用低等优点.结果证明,采用这种改良方法获得的基因组DNA纯度高、浓度大,适...
介绍了一种从玉米和水稻叶片中提取高质量基因组DNA的改良尿素法.与其他常用方法如CTAB法、SDS法等相比,这种改良方法具有产率高、快速省时、可常温操作、成本耗用低等优点.结果证明,采用这种改良方法获得的基因组DNA纯度高、浓度大,适合用于限制性内切酶的酶切反应、基于PCR基础上的遗传多样性分析、基于传统的Southern杂交的遗传图谱分析以及其他下游分子生物学研究,是一种适于植物基因组DNA制备方法,值得推广的.并针对基因组制备过程中经常出现的难题,分析了产生的原因,提出了具体解决办法.
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关键词
基因组DNA提取
改良尿素法
浓度和纯度
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职称材料
云南栘[木衣]总DNA提取方法比较及SSR反应体系优化
被引量：
7
2
作者
张新洛
彭劲谕
+1 位作者
王玉昌
王大玮
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第6期1064-1070,共7页
【目的】从云南栘[木衣]叶片中提取高质量的总DNA,并建立稳定的SSR-PCR反应体系。【方法】以云南栘[木衣]幼嫩叶片为材料,采用尿素法、改良尿素法、SDS法、CTAB法、MAGEN试剂盒法和磁珠试剂盒法提取总DNA,从中筛选提取云南栘[木衣]总DN...
【目的】从云南栘[木衣]叶片中提取高质量的总DNA,并建立稳定的SSR-PCR反应体系。【方法】以云南栘[木衣]幼嫩叶片为材料,采用尿素法、改良尿素法、SDS法、CTAB法、MAGEN试剂盒法和磁珠试剂盒法提取总DNA,从中筛选提取云南栘[木衣]总DNA的最佳方法;利用L_(16)(4^(5))的正交设计试验优化影响云南栘[木衣]SSRPCR扩增体系的影响因子,建立云南栘[木衣]SSR-PCR反应体系。【结果】改良尿素法为云南栘[木衣]总DNA的最佳提取方法,提取的总DNA质量浓度、总量和A_(260)/A_(280)分别为382.64 ng/μL、38.26μg和1.87,且琼脂糖凝胶电泳的条带清晰明亮,说明DNA完整性好、质量浓度高。优化后的SSR-PCR扩增反应体系为:模板DNA 30 ng,Taq DNA聚合酶0.5 U,引物1.25μmol/L,Mg^(2+)2.0 mmol/L,dNTPs 2.5 mmol/L,10×PCR buffer 2.5μL,补水至25μL。【结论】改良尿素法能够从云南栘[木衣]中提取高质量的总DNA,所建立的SSR-PCR反应体系为云南栘[木衣]的遗传多样性分析和分子标记辅助育种等研究提供了技术支持。
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关键词
云南栘[木衣]
DNA提取
改良尿素法
SSR体系
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职称材料
题名
一种提取植物基因组DNA的方法--改良尿素法
被引量：
25
1
作者
曹文波
郑璐璐
谢文海
机构
华中师范大学生命科学学院
广西玉林师范学院
出处
《华中师范大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
2008年第3期448-451,共4页
基金
国家自然科学基金项目(30450002)
文摘
介绍了一种从玉米和水稻叶片中提取高质量基因组DNA的改良尿素法.与其他常用方法如CTAB法、SDS法等相比,这种改良方法具有产率高、快速省时、可常温操作、成本耗用低等优点.结果证明,采用这种改良方法获得的基因组DNA纯度高、浓度大,适合用于限制性内切酶的酶切反应、基于PCR基础上的遗传多样性分析、基于传统的Southern杂交的遗传图谱分析以及其他下游分子生物学研究,是一种适于植物基因组DNA制备方法,值得推广的.并针对基因组制备过程中经常出现的难题,分析了产生的原因,提出了具体解决办法.
关键词
基因组DNA提取
改良尿素法
浓度和纯度
Keywords
DNA extraction
improved urea protocol
the concentration and purity
分类号
Q813 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
云南栘[木衣]总DNA提取方法比较及SSR反应体系优化
被引量：
7
2
作者
张新洛
彭劲谕
王玉昌
王大玮
机构
西南林业大学林学院
中国农业大学农学院
出处
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第6期1064-1070,共7页
基金
国家自然科学基金项目(32060350)
云南省万人计划青年拔尖人才专项(YNWR-QNBJ-2020-230)。
文摘
【目的】从云南栘[木衣]叶片中提取高质量的总DNA,并建立稳定的SSR-PCR反应体系。【方法】以云南栘[木衣]幼嫩叶片为材料,采用尿素法、改良尿素法、SDS法、CTAB法、MAGEN试剂盒法和磁珠试剂盒法提取总DNA,从中筛选提取云南栘[木衣]总DNA的最佳方法;利用L_(16)(4^(5))的正交设计试验优化影响云南栘[木衣]SSRPCR扩增体系的影响因子,建立云南栘[木衣]SSR-PCR反应体系。【结果】改良尿素法为云南栘[木衣]总DNA的最佳提取方法,提取的总DNA质量浓度、总量和A_(260)/A_(280)分别为382.64 ng/μL、38.26μg和1.87,且琼脂糖凝胶电泳的条带清晰明亮,说明DNA完整性好、质量浓度高。优化后的SSR-PCR扩增反应体系为:模板DNA 30 ng,Taq DNA聚合酶0.5 U,引物1.25μmol/L,Mg^(2+)2.0 mmol/L,dNTPs 2.5 mmol/L,10×PCR buffer 2.5μL,补水至25μL。【结论】改良尿素法能够从云南栘[木衣]中提取高质量的总DNA,所建立的SSR-PCR反应体系为云南栘[木衣]的遗传多样性分析和分子标记辅助育种等研究提供了技术支持。
关键词
云南栘[木衣]
DNA提取
改良尿素法
SSR体系
Keywords
Docynia delavayi
DNA extraction
modified urea
SSR system
分类号
S792.990.8 [农业科学—林木遗传育种]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种提取植物基因组DNA的方法--改良尿素法
曹文波
郑璐璐
谢文海
《华中师范大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
2008
25
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职称材料
2
云南栘[木衣]总DNA提取方法比较及SSR反应体系优化
张新洛
彭劲谕
王玉昌
王大玮
《云南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2022
7
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职称材料
已选择
0
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参考文献
引证文献
统计分析
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