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基于恒温指数扩增反应高灵敏度检测端粒酶活性
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作者 周晓毓 张佳玉 +1 位作者 周曼 贾红霞 《河北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2016年第2期155-161,共7页
端粒酶延伸产物是具有(ggttag)n重复序列的DNA.设计1条与2个重复序列相匹配的特异性的DNA探针-(ctaacc)2使其与端粒酶延伸产物杂交,形成双链DNA.过量的DNA探针被磁性石墨烯吸附,通过磁分离去除.利用恒温指数扩增反应(IEXPAR)对端粒酶延... 端粒酶延伸产物是具有(ggttag)n重复序列的DNA.设计1条与2个重复序列相匹配的特异性的DNA探针-(ctaacc)2使其与端粒酶延伸产物杂交,形成双链DNA.过量的DNA探针被磁性石墨烯吸附,通过磁分离去除.利用恒温指数扩增反应(IEXPAR)对端粒酶延伸产物捕捉的DNA探针进行快速的扩增.用与双链DNA特异性结合的SYBR Green I染料对扩增产物进行实时荧光检测.在优化条件下,可以检测到低至50个癌细胞中的端粒酶活性.实现了恒温扩增条件下端粒酶活性的高灵敏度检测. 展开更多
关键词 端粒酶活性 恒温指数扩增反应 磁性石墨烯 实时荧光检测
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基于DNA“Y”型结构的指数型核酸恒温扩增策略检测microRNA
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作者 郑旭玲 殷文 +3 位作者 陈俊 李裕 戴宗 邹小勇 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期920-927,共8页
该文基于“Y”型DNA模板和恒温指数扩增反应(EXPAR)技术的信号放大功能,建立了一种快速低序列依赖性的miRNA检测方法(Y-EXPAR)。以let-7b为检测目标,设计两条部分互补的DNA模板,与目标miRNA共同构成“Y”型结构,能够同时进行双向扩增,... 该文基于“Y”型DNA模板和恒温指数扩增反应(EXPAR)技术的信号放大功能,建立了一种快速低序列依赖性的miRNA检测方法(Y-EXPAR)。以let-7b为检测目标,设计两条部分互补的DNA模板,与目标miRNA共同构成“Y”型结构,能够同时进行双向扩增,反应效率高,反应时间短,并降低了放大性能对模板序列的依赖。方法检出限低至0.3 amol/L(相当于10μL溶液中有1.8拷贝的let-7b),并能区分单碱基差异的let-7家族同源序列。应用于肿瘤细胞裂解液let-7b的检测,POI值与细胞数目对数值呈线性关系,说明Y-EXPAR在实际样品miRNA的检测中具有优势。得益于扩增的高特异性、抗干扰性和低序列依赖性,该方法为miRNA的快速检测提供了新思路,在miRNA相关的疾病研究和临床诊断方面具有良好应用前景。 展开更多
关键词 MIRNA 恒温指数扩增反应(EXPAR) 序列依赖性 疾病诊断
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基于DNA银纳米簇的金黄色葡萄球菌检测方法的构建
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作者 陆晓彤 李金昭 +1 位作者 杜欣军 康青 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第6期144-152,共9页
【目的】建立一种简单、灵敏的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)检测方法,用于食品中该致病菌的高效检测。【方法】以金黄色葡萄球菌为研究对象,基于指数扩增反应(exponential amplification reaction,EXPAR)结合DNA银纳米簇(P-Ag... 【目的】建立一种简单、灵敏的金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)检测方法,用于食品中该致病菌的高效检测。【方法】以金黄色葡萄球菌为研究对象,基于指数扩增反应(exponential amplification reaction,EXPAR)结合DNA银纳米簇(P-AgNCs)开发了一种简单、灵敏的金黄色葡萄球菌荧光检测方法EXPAR-P-AgNCs。通过设计识别探针,可在金黄色葡萄球菌存在的情况下触发EXPAR,生成大量的靶标DNA(T),T与发夹P结合,富G序列远离P-AgNCs,从而降低P-AgNCs的相对荧光强度,实现了对金黄色葡萄球菌的检测。【结果】金黄色葡萄球菌浓度在1×10^(2)~1×10^(6) CFU/mL时,相对荧光强度与其浓度呈线性相关,检测限达10 CFU/mL,且特异性明显,无交叉反应。在牛奶、猪肉样品中加入金黄色葡萄球菌,利用该方法测定金黄色葡萄球菌,回收率为94.5%~115.0%。【结论】所构建的检测方法灵敏度高、特异性好,为病原微生物及其他影响食品安全的污染物的检测提供了思路。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 适配体 银纳米簇 指数扩增反应
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microRNA定量检测方法的研究进展 被引量:9
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作者 祝申蓉 吴旭日 陈依军 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期40-49,共10页
随着对microRNA(miRNA)种类、结构和生物学功能研究的不断深入,其在生物发育、代谢调控、疾病发生与治疗干预等方面的重要性受到了广泛关注。由于miRNA稳定性差、表达量低和序列差异小等特征,建立快速简便、灵敏度高、特异性强的miRNA... 随着对microRNA(miRNA)种类、结构和生物学功能研究的不断深入,其在生物发育、代谢调控、疾病发生与治疗干预等方面的重要性受到了广泛关注。由于miRNA稳定性差、表达量低和序列差异小等特征,建立快速简便、灵敏度高、特异性强的miRNA定量检测方法对研究这类生物活性分子的功能至关重要。本文对miRNA的定量检测方法进行分析和比较,为选择合适的miRNA检测方法开展生物学功能研究提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 MICRORNA 定量检测 等温指数扩增反应 滚环 酶辅助microRNA检测法
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