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地中海拟无枝酸杆菌甲基丙二酰CoA转羧基酶的纯化及酶学特性
被引量:
1
1
作者
张蔚文
焦瑞身
《生物化学杂志》
CSCD
1996年第2期176-181,共6页
经硫酸铵沉淀,DEAE-纤维素吸附,磷酸纤维素吸附和Sepharose4B分子筛层析四步从地中海拟无枝酸杆菌纯化得到电泳纯MCT酶,酶比活力为3.21U/mg,纯化倍数178,酶活回收14.9%。酶反应的最适pH和温...
经硫酸铵沉淀,DEAE-纤维素吸附,磷酸纤维素吸附和Sepharose4B分子筛层析四步从地中海拟无枝酸杆菌纯化得到电泳纯MCT酶,酶比活力为3.21U/mg,纯化倍数178,酶活回收14.9%。酶反应的最适pH和温度分别为7.0和35℃。纯化MCT酶对底物丙酰CoA和草酰乙酸的米氏常数分别为0.027mmol/L0.03509mmol/L.经SephadexG-150测定酶分子量为200000,SDS-取丙烯酰胺电泳凝胶显示一条分子量68000的亚基蛋白带,说明该酶由三个等大小亚基组成.薄层等电聚焦测定酶等电点为pI6.0.二价金属离子Co ̄(2+)和Fe ̄(3+)促进酶活力.采用原生质体裂解的方法发现MCT酶是可能分布于胞浆和细胞膜上.
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关键词
地中海菌
拟无枝酸杆菌
甲基丙二酰
转羧基酶
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职称材料
题名
地中海拟无枝酸杆菌甲基丙二酰CoA转羧基酶的纯化及酶学特性
被引量:
1
1
作者
张蔚文
焦瑞身
机构
中国科学院上海植物生理研究所
出处
《生物化学杂志》
CSCD
1996年第2期176-181,共6页
文摘
经硫酸铵沉淀,DEAE-纤维素吸附,磷酸纤维素吸附和Sepharose4B分子筛层析四步从地中海拟无枝酸杆菌纯化得到电泳纯MCT酶,酶比活力为3.21U/mg,纯化倍数178,酶活回收14.9%。酶反应的最适pH和温度分别为7.0和35℃。纯化MCT酶对底物丙酰CoA和草酰乙酸的米氏常数分别为0.027mmol/L0.03509mmol/L.经SephadexG-150测定酶分子量为200000,SDS-取丙烯酰胺电泳凝胶显示一条分子量68000的亚基蛋白带,说明该酶由三个等大小亚基组成.薄层等电聚焦测定酶等电点为pI6.0.二价金属离子Co ̄(2+)和Fe ̄(3+)促进酶活力.采用原生质体裂解的方法发现MCT酶是可能分布于胞浆和细胞膜上.
关键词
地中海菌
拟无枝酸杆菌
甲基丙二酰
转羧基酶
Keywords
Methylmalonyl-CoA transcarboxylase, Purification, Characterization, Amycolatopsis.mediterranei U32
分类号
Q939.106 [生物学—微生物学]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
地中海拟无枝酸杆菌甲基丙二酰CoA转羧基酶的纯化及酶学特性
张蔚文
焦瑞身
《生物化学杂志》
CSCD
1996
1
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