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利用Cre-Loxp技术构建标记肝星状细胞的小鼠模型
被引量:
2
1
作者
黄紫薇
赵殿元
+1 位作者
徐龙
唐丽
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2023年第7期1065-1070,共6页
目的通过Cre-Loxp技术构建转基因小鼠,应用Lrat^(Cre)工具鼠示踪肝星状细胞分布。方法将Lrat^(Cre)小鼠与H11^(LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato)报告基因小鼠交配,通过PCR鉴定得Lrat^(Cre)H11^(LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato)报告...
目的通过Cre-Loxp技术构建转基因小鼠,应用Lrat^(Cre)工具鼠示踪肝星状细胞分布。方法将Lrat^(Cre)小鼠与H11^(LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato)报告基因小鼠交配,通过PCR鉴定得Lrat^(Cre)H11^(LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato)报告基因小鼠。固定小鼠肝脏切片,借助免疫荧光标记肝脏非实质细胞抗体,通过Imaris 3D还原分析肝星状细胞和其他肝脏非实质细胞间的表达与分布,以及进行肝星状细胞的自定位检验。结果Lrat^(Cre)介导的红色荧光蛋白tdTomato的表达可以特异性标记肝星状细胞,并通过肝星状细胞与肝脏巨噬细胞、肝窦内皮细胞的免疫荧光定位为细胞间相互作用分析提供了途径。结论Lrat^(Cre)可以介导tdTomato对肝星状细胞进行示踪,同时可用做肝星状细胞特异性的报告基因工具鼠。
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关键词
肝星状细胞
肝脏巨噬细胞
肝窦内皮细胞
报告基因小鼠
CRE-LOXP
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职称材料
Tnfrsf11a^(Cre)介导黄色荧光素蛋白有效标记脑小胶质细胞
被引量:
2
2
作者
杨凤娇
黄紫薇
+2 位作者
赵殿元
徐龙
唐丽
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2022年第9期1345-1349,共5页
目的构建Tnfrsf11a^(Cre)Rosa26^(yfp)报告基因小鼠,检测Tnfrsf11a^(Cre)介导黄色荧光素蛋白YFP标记组织巨噬细胞的效率。方法将Tnfrsf11a^(Cre)小鼠与Rosa26^(yfp)小鼠交配,通过PCR筛选出Tnfrsf11a^(Cre)Rosa26^(yfp)报告基因小鼠。分...
目的构建Tnfrsf11a^(Cre)Rosa26^(yfp)报告基因小鼠,检测Tnfrsf11a^(Cre)介导黄色荧光素蛋白YFP标记组织巨噬细胞的效率。方法将Tnfrsf11a^(Cre)小鼠与Rosa26^(yfp)小鼠交配,通过PCR筛选出Tnfrsf11a^(Cre)Rosa26^(yfp)报告基因小鼠。分离成年Tnfrsf11a^(Cre)Rosa26^(yfp)小鼠脑小胶质细胞、肝脏巨噬细胞、肾脏巨噬细胞、肺泡巨噬细胞、脾脏巨噬细胞,标记流式抗体,通过流式细胞术分析Tnfrsf11a^(Cre)介导荧光素蛋白YFP标记组织巨噬细胞的效率。结果Tnfrsf11a^(Cre)介导黄色荧光素蛋白YFP对脑小胶质细胞具有约91.27%的标记效率,但对肝脏、脾脏、肺泡巨噬细胞细胞的标记效率分别只有约63.60%、69.66%、32.76%。结论Tnfrsf11a^(Cre)可以介导YFP对脑小胶质细胞进行示踪。同时,Tnfrsf11a^(Cre)可用做脑小胶质细胞基因条件性敲除的工具鼠。
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关键词
Tnfrsf11a^(Cre)
Rosa26^(yfp)
组织巨噬细胞
脑小胶质细胞
CRE重组酶
报告基因小鼠
流式细胞术
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职称材料
题名
利用Cre-Loxp技术构建标记肝星状细胞的小鼠模型
被引量:
2
1
作者
黄紫薇
赵殿元
徐龙
唐丽
机构
安徽医科大学基础医学院免疫教研室
军事科学院军事医学研究院生命组学研究所
蛋白质组学国家重点实验室
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2023年第7期1065-1070,共6页
基金
国家自然科学基金杰出青年基金项目(编号:82225009)
国家自然科学基金面上项目(编号:32270941)。
文摘
目的通过Cre-Loxp技术构建转基因小鼠,应用Lrat^(Cre)工具鼠示踪肝星状细胞分布。方法将Lrat^(Cre)小鼠与H11^(LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato)报告基因小鼠交配,通过PCR鉴定得Lrat^(Cre)H11^(LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato)报告基因小鼠。固定小鼠肝脏切片,借助免疫荧光标记肝脏非实质细胞抗体,通过Imaris 3D还原分析肝星状细胞和其他肝脏非实质细胞间的表达与分布,以及进行肝星状细胞的自定位检验。结果Lrat^(Cre)介导的红色荧光蛋白tdTomato的表达可以特异性标记肝星状细胞,并通过肝星状细胞与肝脏巨噬细胞、肝窦内皮细胞的免疫荧光定位为细胞间相互作用分析提供了途径。结论Lrat^(Cre)可以介导tdTomato对肝星状细胞进行示踪,同时可用做肝星状细胞特异性的报告基因工具鼠。
关键词
肝星状细胞
肝脏巨噬细胞
肝窦内皮细胞
报告基因小鼠
CRE-LOXP
Keywords
hepatic stellate cells
Kupfer cells
hepatic sinusoidal endothelial cells
reporter mouse
Cre-LoxP
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
Tnfrsf11a^(Cre)介导黄色荧光素蛋白有效标记脑小胶质细胞
被引量:
2
2
作者
杨凤娇
黄紫薇
赵殿元
徐龙
唐丽
机构
安徽医科大学基础医学院免疫教研室
军事科学院军事医学研究院生命组学研究所
蛋白质组学国家重点实验室
出处
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2022年第9期1345-1349,共5页
基金
国家自然科学基金重大研究计划培育项目(编号:91842101)。
文摘
目的构建Tnfrsf11a^(Cre)Rosa26^(yfp)报告基因小鼠,检测Tnfrsf11a^(Cre)介导黄色荧光素蛋白YFP标记组织巨噬细胞的效率。方法将Tnfrsf11a^(Cre)小鼠与Rosa26^(yfp)小鼠交配,通过PCR筛选出Tnfrsf11a^(Cre)Rosa26^(yfp)报告基因小鼠。分离成年Tnfrsf11a^(Cre)Rosa26^(yfp)小鼠脑小胶质细胞、肝脏巨噬细胞、肾脏巨噬细胞、肺泡巨噬细胞、脾脏巨噬细胞,标记流式抗体,通过流式细胞术分析Tnfrsf11a^(Cre)介导荧光素蛋白YFP标记组织巨噬细胞的效率。结果Tnfrsf11a^(Cre)介导黄色荧光素蛋白YFP对脑小胶质细胞具有约91.27%的标记效率,但对肝脏、脾脏、肺泡巨噬细胞细胞的标记效率分别只有约63.60%、69.66%、32.76%。结论Tnfrsf11a^(Cre)可以介导YFP对脑小胶质细胞进行示踪。同时,Tnfrsf11a^(Cre)可用做脑小胶质细胞基因条件性敲除的工具鼠。
关键词
Tnfrsf11a^(Cre)
Rosa26^(yfp)
组织巨噬细胞
脑小胶质细胞
CRE重组酶
报告基因小鼠
流式细胞术
Keywords
Tnfrsf11a^(Cre)
Rosa26^(yfp)
tissue macrophages
brain microglia
cre recombinase
reporter mouse
flow cytometry
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用Cre-Loxp技术构建标记肝星状细胞的小鼠模型
黄紫薇
赵殿元
徐龙
唐丽
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2023
2
在线阅读
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职称材料
2
Tnfrsf11a^(Cre)介导黄色荧光素蛋白有效标记脑小胶质细胞
杨凤娇
黄紫薇
赵殿元
徐龙
唐丽
《安徽医科大学学报》
CAS
北大核心
2022
2
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