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利用Cre-Loxp技术构建标记肝星状细胞的小鼠模型 被引量:2
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作者 黄紫薇 赵殿元 +1 位作者 徐龙 唐丽 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第7期1065-1070,共6页
目的通过Cre-Loxp技术构建转基因小鼠,应用Lrat^(Cre)工具鼠示踪肝星状细胞分布。方法将Lrat^(Cre)小鼠与H11^(LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato)报告基因小鼠交配,通过PCR鉴定得Lrat^(Cre)H11^(LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato)报告... 目的通过Cre-Loxp技术构建转基因小鼠,应用Lrat^(Cre)工具鼠示踪肝星状细胞分布。方法将Lrat^(Cre)小鼠与H11^(LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato)报告基因小鼠交配,通过PCR鉴定得Lrat^(Cre)H11^(LoxP-ZsGreen-Stop-LoxP-tdTomato)报告基因小鼠。固定小鼠肝脏切片,借助免疫荧光标记肝脏非实质细胞抗体,通过Imaris 3D还原分析肝星状细胞和其他肝脏非实质细胞间的表达与分布,以及进行肝星状细胞的自定位检验。结果Lrat^(Cre)介导的红色荧光蛋白tdTomato的表达可以特异性标记肝星状细胞,并通过肝星状细胞与肝脏巨噬细胞、肝窦内皮细胞的免疫荧光定位为细胞间相互作用分析提供了途径。结论Lrat^(Cre)可以介导tdTomato对肝星状细胞进行示踪,同时可用做肝星状细胞特异性的报告基因工具鼠。 展开更多
关键词 肝星状细胞 肝脏巨噬细胞 肝窦内皮细胞 报告基因小鼠 CRE-LOXP
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Tnfrsf11a^(Cre)介导黄色荧光素蛋白有效标记脑小胶质细胞 被引量:2
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作者 杨凤娇 黄紫薇 +2 位作者 赵殿元 徐龙 唐丽 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2022年第9期1345-1349,共5页
目的构建Tnfrsf11a^(Cre)Rosa26^(yfp)报告基因小鼠,检测Tnfrsf11a^(Cre)介导黄色荧光素蛋白YFP标记组织巨噬细胞的效率。方法将Tnfrsf11a^(Cre)小鼠与Rosa26^(yfp)小鼠交配,通过PCR筛选出Tnfrsf11a^(Cre)Rosa26^(yfp)报告基因小鼠。分... 目的构建Tnfrsf11a^(Cre)Rosa26^(yfp)报告基因小鼠,检测Tnfrsf11a^(Cre)介导黄色荧光素蛋白YFP标记组织巨噬细胞的效率。方法将Tnfrsf11a^(Cre)小鼠与Rosa26^(yfp)小鼠交配,通过PCR筛选出Tnfrsf11a^(Cre)Rosa26^(yfp)报告基因小鼠。分离成年Tnfrsf11a^(Cre)Rosa26^(yfp)小鼠脑小胶质细胞、肝脏巨噬细胞、肾脏巨噬细胞、肺泡巨噬细胞、脾脏巨噬细胞,标记流式抗体,通过流式细胞术分析Tnfrsf11a^(Cre)介导荧光素蛋白YFP标记组织巨噬细胞的效率。结果Tnfrsf11a^(Cre)介导黄色荧光素蛋白YFP对脑小胶质细胞具有约91.27%的标记效率,但对肝脏、脾脏、肺泡巨噬细胞细胞的标记效率分别只有约63.60%、69.66%、32.76%。结论Tnfrsf11a^(Cre)可以介导YFP对脑小胶质细胞进行示踪。同时,Tnfrsf11a^(Cre)可用做脑小胶质细胞基因条件性敲除的工具鼠。 展开更多
关键词 Tnfrsf11a^(Cre) Rosa26^(yfp) 组织巨噬细胞 脑小胶质细胞 CRE重组酶 报告基因小鼠 流式细胞术
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