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黄褐毛忍冬提取物及其主要成分抗RNA病毒蛋白酶活性 被引量:1
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作者 杨欣 危英 +4 位作者 周英 潘博文 李星 魏鑫 郝永佳 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期1725-1729,共5页
目的研究黄褐毛忍冬抗HIV-1蛋白酶和组织蛋白酶L的活性。方法采用不同溶剂对黄褐毛忍冬进行提取,通过荧光法分析其提取物和主要成分抗RNA病毒活性。采用UPLC-HRMS法对黄褐毛忍冬化学成分进行定性分析。基于分子对接技术采用Surflex-Doc... 目的研究黄褐毛忍冬抗HIV-1蛋白酶和组织蛋白酶L的活性。方法采用不同溶剂对黄褐毛忍冬进行提取,通过荧光法分析其提取物和主要成分抗RNA病毒活性。采用UPLC-HRMS法对黄褐毛忍冬化学成分进行定性分析。基于分子对接技术采用Surflex-Dock模块及Ligplot1.4.5软件分析黄褐毛忍冬主要成分与HIV-1蛋白酶和组织蛋白酶L结合情况及相互作用。结果黄褐毛忍冬水提物以及30%、60%、85%甲醇提物对HIV-1蛋白酶有较好的抑制作用,IC_(50)值为0.079~0.21 mg/mL,其中水提物作用最强。水提物和60%醇提物抑制组织蛋白酶L浓度分别为0.6、0.91 mg/mL。绿原酸、木犀草素、咖啡酸等与相关受体分子结合较好。结论黄褐毛忍冬具有较好抗RNA病毒蛋白酶的优势,尤其是对HIV蛋白酶的抑制作用,具有一定的开发价值。 展开更多
关键词 黄褐毛忍冬 抗rna病毒蛋白酶 分子对接 UPLC-HRMS
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抗RNA病毒相关生物材料 被引量:1
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作者 姚康德 尹玉姬 +1 位作者 张宝连 赵立国 《中国工程科学》 2003年第7期17-23,共7页
在介绍RNA病毒结构、生殖、复制和转录的基础上 ,综述了抗病毒策略 ,其中包括抗SARS药物设计 ,RNA干扰 ,DNA疫苗释放系统 ,调控蛋白与糖胺聚糖衍生物或类似物相互作用 ,天然药物及肺泡组织工程等。这些实例涵盖了RNA病毒与蛋白质、DNA... 在介绍RNA病毒结构、生殖、复制和转录的基础上 ,综述了抗病毒策略 ,其中包括抗SARS药物设计 ,RNA干扰 ,DNA疫苗释放系统 ,调控蛋白与糖胺聚糖衍生物或类似物相互作用 ,天然药物及肺泡组织工程等。这些实例涵盖了RNA病毒与蛋白质、DNA及多糖等生物材料的相互作用。生物材料作为基质或载体正在向细胞或 /和基因活化的第三代生物材料发展 。 展开更多
关键词 抗rna病毒 蛋白质 DNA 多糖 生物材料
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基因沉默番木瓜环斑病毒复制酶基因(PRSV-Nib)获得抗病毒病番木瓜的研究
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作者 吴清铧 贾瑞宗 +5 位作者 郭静远 杨牧之 胡玉娟 郝志刚 赵辉 郭安平 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期837-846,共10页
番木瓜是重要的热带经济水果。番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)是番木瓜的重要病毒病,经常导致严重的产量损失和质量恶化。自从1998年第一例转基因番木瓜问世以来,使得基于“致病菌衍生的抗病性(pathogen-derived resistanc... 番木瓜是重要的热带经济水果。番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)是番木瓜的重要病毒病,经常导致严重的产量损失和质量恶化。自从1998年第一例转基因番木瓜问世以来,使得基于“致病菌衍生的抗病性(pathogen-derived resistance,PDR)”的抗病育种策略获得成功广泛应用。然而依赖于序列同源性的抗病性与病毒突变导致多样性增加之间的矛盾成为番木瓜育种科学家的新挑战。本研究拟采用RNAi策略针对复制酶(nuclear inclusion b.Nib)获得广谱抗PRSV番木瓜新种质。通过团队已建立的胚性愈伤诱导-农杆菌介导转化-再生苗诱导的番木瓜遗传转化体系,共获得经过抗性筛选的再生苗52株,通过特异性PCR进行筛选共计获得24株转基因阳性植株。通过对T0代田间自然发病试验中,转基因番木瓜株系抗病性明显高于非转基因对照,其中NibB5-2田间抗病性最优。通过hiTAIL-PCR方法确定NibB5-2插入位点位于第2号染色体supercontig_30的1976766的位置。T1代接种试验中,无病毒积累且无发病症状,初步确认具有良好的病毒抗性,为番木瓜抗病育种提供新思路。 展开更多
关键词 番木瓜 番木瓜环斑病毒 Nib基因 rna介导的病毒
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马铃薯X病毒25kD运动蛋白基因和外壳蛋白基因介导的抗病性研究 被引量:9
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作者 刘晓玲 宋云枝 +3 位作者 刘红梅 温孚江 朱常香 白庆荣 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期827-832,共6页
以马铃薯X病毒(potatovirusX,PVX)的RNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT PCR)方法分别扩增出长度为681bp的非翻译马铃薯X病毒25kD运动蛋白基因(PVX p25)和长度为714bp的非翻译马铃薯X病毒外壳蛋白基因(PVX CP)。并分别构建植物表达... 以马铃薯X病毒(potatovirusX,PVX)的RNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT PCR)方法分别扩增出长度为681bp的非翻译马铃薯X病毒25kD运动蛋白基因(PVX p25)和长度为714bp的非翻译马铃薯X病毒外壳蛋白基因(PVX CP)。并分别构建植物表达载体pROKⅡp25和pROKⅡCP。利用农杆菌介导方法转化烟草NC89。经卡那霉素筛选、PCR检测,共获得转非翻译PVX p25的转基因植株78株,转非翻译PVX CP的转基因植株83株。抗病性试验表明,转非翻译PVX p25的78株中有31株对PVX的侵染表现高度抗病,抗性比例为39.7%;转非翻译PVX CP的83株中有11株对PVX的侵染表现高度抗病,抗性比例为13.3%。分子生物学检测和抗病性分析表明,抗病性均为RNA介导的病毒抗性。研究结果初步证明,转非翻译PVX p25可以更有效地获得抗PVX转基因植株。 展开更多
关键词 马铃薯X病毒 运动蛋白 外壳蛋白 rna介导的病毒
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利用人工ta-siRNA策略培育抗PVY烟草 被引量:1
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作者 吴斌 姜珊珊 +3 位作者 张眉 徐德坤 辛志梅 王升吉 《山东农业科学》 2018年第12期86-90,共5页
人工ta-siRNA基因沉默技术具有同时表达多个ta-siRNA和产生ta-siRNA位置固定等特点,在精确性和高效性等方面有明显优势。本研究以马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)外壳蛋白(coat protein,CP)为靶基因,选取不同位置的3个siRNA为靶序列,烟... 人工ta-siRNA基因沉默技术具有同时表达多个ta-siRNA和产生ta-siRNA位置固定等特点,在精确性和高效性等方面有明显优势。本研究以马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)外壳蛋白(coat protein,CP)为靶基因,选取不同位置的3个siRNA为靶序列,烟草TAS3a作为ta-siRNA表达的骨架,分别构建植物表达载体PVY-CP5'、PVY-CPM和PVY-CP3',并利用叶盘法转化烟草NC89。瞬时表达检测结果显示,3个syn-tasiRNA植物表达载体均能在植物体内成功表达siRNA;抗病性鉴定发现,转PVY-CP5'、PVY-CPM和PVY-CP3'的转基因株系中抗病株系的比率分别为45. 08%、27. 21%、61. 90%;Northern杂交分析显示,目的片段转录产物(总RNA)的积累量与植株的抗病性呈负相关,转基因植株中均有siRNA存在,表明植株的病毒抗性是由RNA介导的。 展开更多
关键词 人工ta-sirna 马铃薯Y病毒(PVY) rna介导的病毒 转基因烟草
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