CK20单克隆抗体研制及鉴定 被引量：3

1

作者 刘彦慧 罗春丽 +1 位作者 吴小候 蔡晓钟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期781-783,785,共4页

目的:研制CK20单克隆抗体.方法:采用CK20抗原免疫小鼠,用免疫的脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞通过PEG4000融合,以HT培养基选择培养,间接ELISA法筛选阳性孔和有限稀释法克隆细胞后,接种小鼠腹腔制备腹水抗体,抗体纯化采用以SPA-Sepharose CL-4... 目的:研制CK20单克隆抗体.方法:采用CK20抗原免疫小鼠,用免疫的脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞通过PEG4000融合,以HT培养基选择培养,间接ELISA法筛选阳性孔和有限稀释法克隆细胞后,接种小鼠腹腔制备腹水抗体,抗体纯化采用以SPA-Sepharose CL-4B为固定相的亲和层析法,最后用双向琼脂扩散法、Western blot和间接ELISA法鉴定抗体的特异性、Ig亚型和效价.结果:获得一株稳定分泌抗CK20单克隆抗体的杂交瘤细胞,染色体众数为101(99～103),其腹水抗体和纯化的抗体效价均为1:106,属IgG1亚型.结论:成功获得了CK20单克隆抗体,命名为L20031030,其特异性强,效价高. 展开更多

关键词 抗ck20单克隆抗体 SPA—Sepharose 杂交瘤技术 WESTERN BLOT ELISA

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抗CCL20单克隆抗体对血清淀粉样蛋白A相关的结节病中促炎性细胞因子的抑制作用

2

作者 魏佳 马成星 +2 位作者 郑颖 那雨琪 丁晶晶 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第1期1-6,共6页

目的探讨抗CCL20单克隆抗体是否可抑制高水平血清淀粉样蛋白A(SAA)相关的结节病外周血单个核细胞(PBMC)中促炎性细胞因子的表达。方法提取健康人和结节病患者的PBMC,并进行分组。除空白对照组(正常人PBMC)和结节病PBMC对照组(患者PBMC)... 目的探讨抗CCL20单克隆抗体是否可抑制高水平血清淀粉样蛋白A(SAA)相关的结节病外周血单个核细胞(PBMC)中促炎性细胞因子的表达。方法提取健康人和结节病患者的PBMC,并进行分组。除空白对照组(正常人PBMC)和结节病PBMC对照组(患者PBMC)外,另将结节病组PBMC中分别加入SAA、SAA+抗CCL20单克隆抗体、SAA+NF-κB抑制剂BAY11-7082或地塞米松,经培养48 h后收集各组细胞,分别作为PBMC+SAA刺激组、PBMC+SAA+NF-κB抑制剂BAY11-7082组、PBMC+SAA+抗CCL20单抗组、PBMC+地塞米松干预组,使用ELISA分别测定各组细胞上清液中细胞因子IL-17A、IL-23、IL-6、CCL20和TGF-β1的表达,使用RT-PCR测定各组细胞中CCR6、IL-17、ROR-γt和Foxp3的mRNA表达水平,使用Western blot检测各组细胞中p-NF-κB和NF-κB蛋白的表达水平。结果PBMC+SAA+抗CCL20单抗组与PBMC+SAA组相比,细胞上清液中的IL-17A、IL-23和IL-6的水平显著降低(P<0.01),而TGF-β1的含量显著升高(P<0.01)。PBMC+SAA+抗CCL20单抗组相较于PBMC+SAA组,细胞中CCR6、IL-17A、ROR-γtmRNA水平显著降低(P<0.01),而Foxp3 mRNA差异无统计学意义(P>0.05)。PBMC+SAA+抗CCL20单抗组中p-NF-κB蛋白表达水平较PBMC+SAA组明显降低(P<0.01)。结论抗CCL20单克隆抗体可抑制高水平SAA相关的结节病PBMC中促炎性细胞因子的表达。 展开更多

关键词 结节病 血清淀粉样蛋白A 核因子ΚB 抗CCL20单克隆抗体

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抗CD20单克隆抗体治疗难治性自身免疫性溶血性贫血 被引量：8

3

作者 王莉 徐卫 +2 位作者 李建勇 谢晓艳 盛瑞兰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第2期425-428,共4页

本研究初步观察抗CD20单克隆抗体利妥昔(rituximab)用于治疗难治性自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的疗效和安全性。对1例用糖皮质激素、脾切除治疗无效的AIHA患者,采用利妥昔单克隆抗体,375mg/m2,每周1次,共4次,观察溶血症状的改变并监测... 本研究初步观察抗CD20单克隆抗体利妥昔(rituximab)用于治疗难治性自身免疫性溶血性贫血(AIHA)的疗效和安全性。对1例用糖皮质激素、脾切除治疗无效的AIHA患者,采用利妥昔单克隆抗体,375mg/m2,每周1次,共4次,观察溶血症状的改变并监测血红蛋白(Hb)水平及其它检验指标,同时观察有无不良反应发生。结果表明,首次治疗后11天乳酸脱氢酶(LDH)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(IBIL)逐渐下降,第45天降至正常范围;首剂治疗25天后Hb水平比治疗之前升高到95-100g/L以上。治疗后已4月余,患者仍处于缓解状态。治疗过程中未发生明显不良反应。结论:抗CD20单克隆抗体利妥昔用于治疗难治性自身免疫性溶血性贫血是有效而且安全的。 展开更多

关键词 抗CD20单克隆抗体 利妥昔 溶血性贫血 难治性自身免疫性溶血性贫血

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抗CD20单克隆抗体在儿童原发性难治性肾病综合征的应用新进展 被引量：9

4

作者 方香 杨晓 +1 位作者 高春林 夏正坤 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2017年第3期315-318,共4页

原发性难治性肾病综合征(idiopathic refractory nephritic syndrome,IRNS)一直是临床治疗的棘手问题。抗CD20单克隆抗体是一种诱导B细胞溶解和凋亡的新型免疫抑制剂,其出现极大地改善了IRNS患者的预后。近年来,多数病例分析和临床试验... 原发性难治性肾病综合征(idiopathic refractory nephritic syndrome,IRNS)一直是临床治疗的棘手问题。抗CD20单克隆抗体是一种诱导B细胞溶解和凋亡的新型免疫抑制剂,其出现极大地改善了IRNS患者的预后。近年来,多数病例分析和临床试验对抗CD20单克隆抗体治疗儿童IRNS的有效性进行了报道。本文就抗CD20单克隆抗体的作用机制、在IRNS的临床应用、不良反应及研究中存在的问题进行综述。 展开更多

关键词 肾病综合征 抗CD20单克隆抗体 利妥昔单抗 免疫抑制剂 儿童

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抗CD20单克隆抗体诱导B淋巴瘤细胞株凋亡的实验研究

5

作者 张红雨 陈红涛 +3 位作者 管忠震 黄岩 张星 林桐榆 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期883-887,共5页

本研究探讨抗CD20单克隆抗体体外诱导B淋巴细胞株凋亡情况及其可能的作用机制。体外培养Daudi、Ramos、Namalwa和Raji细胞,采用XTT法测定细胞增殖抑制率;用流式细胞术测定细胞凋亡;Western blot测定Daudi、Ramos、Raji和Namalwa细胞经Ri... 本研究探讨抗CD20单克隆抗体体外诱导B淋巴细胞株凋亡情况及其可能的作用机制。体外培养Daudi、Ramos、Namalwa和Raji细胞,采用XTT法测定细胞增殖抑制率;用流式细胞术测定细胞凋亡;Western blot测定Daudi、Ramos、Raji和Namalwa细胞经Rituximab20μg/ml作用24小时后Bcl-2的表达情况。结果表明:抗CD20单克隆抗体对Daudi、Raji和Namalwa淋巴瘤细胞有轻度的抗增殖作用,对Ramos细胞无抗增殖作用,抗增殖作用与单克隆抗体作用浓度无关。抗CD20单克隆抗体对4株细胞无明显诱导凋亡作用,抑制率在3%-10%之间波动。Na-malwa和Raji细胞株经抗CD20单克隆抗体作用24小时后,Bcl-2蛋白表达下调。结论:单药抗CD20单克隆抗体对Daudi、Namalwa和Raji细胞株有轻度抗细胞增殖作用,但与作用浓度和作用时间无明显相关。单药抗CD20单克隆抗体对Daudi、Namalwa、Raji和Ramos细胞株有微弱的诱导凋亡作用。Namalwa和Raji细胞株经抗CD20单克隆抗体作用24小时后Bcl-2表达下调,这可能是抗CD20单克隆抗体增敏细胞毒药物作用的机制之一。 展开更多

关键词 抗CD20单克隆抗体 B淋巴细胞株 细胞凋亡

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抗CD20单克隆抗体提高淋巴瘤细胞对X射线的敏感性

6

作者 闵凤玲 刘芬菊 +2 位作者 文万信 翟丽佳 周玮 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期660-665,共6页

本研究观察抗CD20单克隆抗体制剂利妥昔(RTX)对X射线所致的人淋巴瘤细胞损伤的影响。用SRB法检测细胞存活,FITC-Annexin-V/PI试剂盒测定细胞凋亡,透射电子显微镜观察细胞形态,激光共聚焦显微镜检测胞质内钙离子浓度。结果显示,RTX可明... 本研究观察抗CD20单克隆抗体制剂利妥昔(RTX)对X射线所致的人淋巴瘤细胞损伤的影响。用SRB法检测细胞存活,FITC-Annexin-V/PI试剂盒测定细胞凋亡,透射电子显微镜观察细胞形态,激光共聚焦显微镜检测胞质内钙离子浓度。结果显示,RTX可明显增强X射线时的肿瘤细胞生长抑制作用(p<0.05);与单照射组比较,RTX可增加辐射诱导的细胞凋亡;透射电子显微镜下可见多种凋亡表现;细胞内[Ca2+]离子明显升高。结论:RTX可提高淋巴瘤细胞对X射线的辐射敏感性,诱导较多细胞的凋亡,并且与细胞内钙离子的变化有关。 展开更多

关键词 抗CD20单克隆抗体 利妥昔 淋巴瘤细胞 X射线敏感性

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人鼠嵌合型CD20单克隆抗体增强树突状细胞诱导抗淋巴瘤CTL免疫效应研究 被引量：2

7

作者 艾丽梅 任汉云 石永进 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第6期1247-1252,共6页

本研究利用人鼠嵌合型抗CD20单克隆抗体对B细胞淋巴瘤的靶向作用特点和其人源Fc段结合人树突状细胞(DC)的特点,探讨抗CD20单克隆抗体激发人DC呈递肿瘤抗原从而诱导抗淋巴瘤的细胞免疫效应。用人体外周血单个核细胞(MNC)体外诱导DC生成... 本研究利用人鼠嵌合型抗CD20单克隆抗体对B细胞淋巴瘤的靶向作用特点和其人源Fc段结合人树突状细胞(DC)的特点,探讨抗CD20单克隆抗体激发人DC呈递肿瘤抗原从而诱导抗淋巴瘤的细胞免疫效应。用人体外周血单个核细胞(MNC)体外诱导DC生成。对高表达CD20的人淋巴瘤细胞株(Raji)分别进行抗CD20单克隆抗体单独作用(R组)、加热诱导凋亡(A组)、诱导凋亡同时加用抗CD20单克隆抗体作用(R+A组)。经上述处理的肿瘤抗原分别负载于DC,应用透射电子显微镜观察DC对肿瘤抗原的吞噬作用,用抗原处理的DC进行自体混合淋巴细胞反应,应用ELISPOT分析效应细胞-干扰素产生和用MTT法分析效应细胞对Raji靶细胞的杀伤作用。结果表明:R组处理的DC无明显吞噬现象,A组中易见DC吞噬凋亡小体,而R+A组中DC吞噬较多的细胞碎片。流式细胞术检测显示,3个实验组DC上的CD80、CD86、HLA-DR表达高于对照组,差别显著(p<0.05),其中R+A组的CD86表达阳性率明显大于R组和A组(p<0.05)。淋巴细胞表面抗原检测结果显示,所有实验组CD8+细胞的比例均明显高于对照组(p<0.05),且应用抗CD20单克隆抗体的实验组(R组和R+A组)CD56+细胞数均有所增加,与不用抗CD20单克隆抗体组比较差别显著(p<0.05)。ELISPOT方法证明,各实验组产生γ-干扰素的细胞数均高于对照组,且当效靶比为1∶10时,R+A组斑点数明显高于其它组(p<0.05)。MTT法测定杀伤实验结果表明,各实验组对Raji细胞的杀伤率均较对照组增加,其中R+A组的杀伤率高于R组和A组,具有显著统计学差异(p<0.05)。结论:抗CD20单克隆抗体能够介导DC产生抗淋巴瘤效应,即激活并扩增肿瘤特异性细胞毒性淋巴细胞(CTL)和自然杀伤细胞(NK),抗CD20单克隆抗体同时加凋亡诱导处理肿瘤细胞作为抗原冲击树突状细胞,能进一步增强抗淋巴瘤的细胞免疫效应。 展开更多

关键词 抗CD20单克隆抗体 树突状细胞 淋巴瘤 CTL NK细胞

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氟哒拉滨联合抗CD单克隆抗体和氨磷汀治疗高龄慢性淋巴细胞白血病 被引量：6

8

作者 刘洋 朱宏丽 +1 位作者 卢学春 李素霞 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期989-992,共4页

慢性淋巴细胞白血病(CLL)是一种恶性淋巴细胞增生性疾病,老年人多发。目前CLL治疗的主要问题是:①治疗完全缓解率低;②CLL伴随免疫系统功能紊乱和治疗药物的骨髓抑制、感染等副作用,高龄患者难以耐受。本研究报告我科成功治疗1例74岁高... 慢性淋巴细胞白血病(CLL)是一种恶性淋巴细胞增生性疾病,老年人多发。目前CLL治疗的主要问题是:①治疗完全缓解率低;②CLL伴随免疫系统功能紊乱和治疗药物的骨髓抑制、感染等副作用,高龄患者难以耐受。本研究报告我科成功治疗1例74岁高龄B细胞性慢性淋巴细胞白血病患者。在治疗中采用核苷酸还原酶抑制剂即氟达拉滨,联合抗CD20单克隆抗体方案,按标准治疗剂量给药,并根据患者个体情况调整给药时间,运用泛细胞保护剂氨磷汀进行辅助治疗。结果表明:1个疗程治疗后患者达到完全缓解,外周血的细胞计数和分类恢复正常;继续应用氨磷汀辅助治疗20天,患者贫血得到纠正,血红蛋白量稳定在120g/L以上,化疗药物的副作用和并发症均得到了有效的控制。结论:老年CLL患者化疗过程中,采用氟哒拉滨联合抗CD20单克隆抗体方案,按标准剂量给药,同时根据患者自身情况调整给药次序和给药时间,体现个性化治疗,获得满意疗效;氨磷汀可以有效减轻或克服CLL伴随的免疫系统功能紊乱,以及氟哒拉滨、抗CD20单克隆抗体引起的骨髓抑制、感染、发热等副反应。 展开更多

关键词 慢性淋巴细胞白血病 氨磷汀 核苷酸还原酶抑制剂 抗CD20单克隆抗体

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CD20抗原及治疗性抗CD20抗体 被引量：10

9

作者 王玉刚 沈倍奋 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2005年第1期76-79,共4页

CD20是人类B淋巴细胞表面特有的标识。它高表达于所有正常B细胞和多数恶性B细胞表面,不会发生明显的内化和脱落,是治疗非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’slymphoma,NHL)理想的靶抗原。其胞外区由43个氨基酸残基组成,但组成的抗原表位却异常... CD20是人类B淋巴细胞表面特有的标识。它高表达于所有正常B细胞和多数恶性B细胞表面,不会发生明显的内化和脱落,是治疗非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’slymphoma,NHL)理想的靶抗原。其胞外区由43个氨基酸残基组成,但组成的抗原表位却异常多样。目前,已经有多种针对CD20抗原的抗体被FDA批准上市,用于B细胞非霍奇金淋巴瘤的治疗,都显示出良好的效果。 展开更多

关键词 CD20 抗原表位 抗CD20单克隆抗体

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恶性上皮性肿瘤中CK20的表达及其临床意义 被引量：2

10

作者 朱正 刘青 +1 位作者 赵勇 许欣 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2004年第3期332-334,共3页

目的　研究单克隆抗体CK2 0在恶性上皮性肿瘤和卵巢转移性腺癌组织中的表达及其意义。方法　应用S P法对鼻咽非角化性癌、乳腺浸润性导管癌、肺的鳞癌和腺癌、卵巢黏液性囊腺癌、胃腺癌和结肠直肠腺癌各组总计 6 7例和 4 1例分别进行了C... 目的　研究单克隆抗体CK2 0在恶性上皮性肿瘤和卵巢转移性腺癌组织中的表达及其意义。方法　应用S P法对鼻咽非角化性癌、乳腺浸润性导管癌、肺的鳞癌和腺癌、卵巢黏液性囊腺癌、胃腺癌和结肠直肠腺癌各组总计 6 7例和 4 1例分别进行了CK2 0和CK19检测。结果　CK2 0阳性率 :肺腺癌 1/ 7(14 3% ) ,卵巢浆液性和黏液性腺癌 3/ 12 (33 3% ) ,胃腺癌 3/ 9(33 3% ) ,结肠直肠腺癌组 2 1/ 2 2 (95 5 % ) ,其他癌组织均呈阴性。结肠直肠腺癌组组与其他各组间比较差异有显著性 (P <0 0 1)。CK19在上述 4 1例癌组织中均呈强阳性表达。结论　CK2 0表达对鉴别结肠腺癌和直肠腺癌与肺腺癌和乳腺浸润性导管癌具有高度特异性和较高的敏感性 ;CK2 展开更多

关键词 恶性上皮性肿瘤 ck20 卵巢转移性腺癌 单克隆抗体 检测 ck19 细胞角蛋白

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自体外周血干细胞移植联合抗CD20单抗治疗自身免疫性溶血性贫血的护理 被引量：4

11

作者 徐丽 万滢 张静 《护理学杂志》 2006年第17期69-70,共2页

对1例激素依赖的自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者进行自体外周血干细胞移植(autoPBSCT)联合抗CD20单克隆抗体(下称单抗)治疗及护理。治疗期间重点做好心理护理,抗CD20单抗的用药护理,造血干细胞回输的护理,同时积极预防并发症。结果患... 对1例激素依赖的自身免疫性溶血性贫血(AIHA)患者进行自体外周血干细胞移植(autoPBSCT)联合抗CD20单克隆抗体(下称单抗)治疗及护理。治疗期间重点做好心理护理,抗CD20单抗的用药护理,造血干细胞回输的护理,同时积极预防并发症。结果患者移植后造血功能恢复顺利,于+8d中性粒细胞绝对数(ANC)>0.5×109/L,+9dPLT>20×109/L,+16dHb升至90g/L,网织红细胞降至正常,胆红素恢复正常。提出autoPBSCT联合抗CD20单抗是治疗激素依赖的AIHA的有效方法之一,有效的护理干预能保证治疗的顺利进行。 展开更多

关键词 自身免疫性溶血性贫血 自体外周血干细胞移植 抗CD20单克隆抗体 护理

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嵌合抗CD20 Fab′诱导Raji细胞凋亡

12

作者 范冬梅 赖增祖 +3 位作者 熊冬生 许元富 彭晖 杨纯正 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第7期20-22,共3页

为了研究嵌合抗CD2 0基因工程抗体Fab′的抗肿瘤活性及其抗肿瘤机制 ,利用3H掺入法测定嵌合抗CD2 0Fab′对Raji细胞生长的影响 ,结果显示嵌合抗CD2 0Fab′对Raji细胞的生长具有抑制作用 ,利用流式细胞仪测定嵌合抗CD2 0Fab′诱导Raji细... 为了研究嵌合抗CD2 0基因工程抗体Fab′的抗肿瘤活性及其抗肿瘤机制 ,利用3H掺入法测定嵌合抗CD2 0Fab′对Raji细胞生长的影响 ,结果显示嵌合抗CD2 0Fab′对Raji细胞的生长具有抑制作用 ,利用流式细胞仪测定嵌合抗CD2 0Fab′诱导Raji细胞凋亡作用 ,结果显示嵌合抗CD2 0Fab′可诱导Raji细胞凋亡作用。这些实验结果证明嵌合抗CD2 0Fab′通过诱导Raji细胞凋亡的机制抑制Raji细胞生长。 展开更多

关键词 B淋巴细胞瘤 嵌合Fab' CD20 细胞凋亡 抗CD20Fab’ 临床 单克隆抗体 抗肿瘤活性

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美国《Emerging Infectious Diseases》2015年第7期有关人兽共患病论文摘译

13

作者 郑武雄 林春芳 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期F0003-F0004,共2页

P1101接受抗CD20和抗激酶抑制剂单克隆抗体治疗的非艾滋病病人弥漫性马尔尼菲踝节菌感染情况／／JasperF．W，Chan，ThomasS．Y．Chan，Har—inderGill，等非艾滋病病人鲜有感染马尔尼菲踝节真菌（旧称青霉菌）。我们报道了过去的2年中... P1101接受抗CD20和抗激酶抑制剂单克隆抗体治疗的非艾滋病病人弥漫性马尔尼菲踝节菌感染情况／／JasperF．W，Chan，ThomasS．Y．Chan，Har—inderGill，等非艾滋病病人鲜有感染马尔尼菲踝节真菌（旧称青霉菌）。我们报道了过去的2年中4例接受抗CD20或抗激酶抑制剂单克隆抗体靶向治疗的非艾滋病血液系统疾病患者感染弥漫性马尔尼菲踝节菌的病例。临床医生应注意这种新出现的并发症，特别是来自这种疾病流行地区的病人。 展开更多

关键词 Diseases 人兽共患病 论文摘译 单克隆抗体治疗 血液系统疾病 艾滋病病人 激酶抑制剂 抗CD20

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特发性血小板减少性紫癜的诊治进展 被引量：24

14

作者 赵永强 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期517-521,共5页

由于诊断特发性血小板减少性紫癜(ITP)的标准差异较大,使临床试验结果难以互比,也给临床实践带来不便。为解决此问题,ITP国际工作组于2007年召开会议,就ITP的命名、定义、分期以及严重度分级、预后和疗效标准等达成一些新共识。随着新... 由于诊断特发性血小板减少性紫癜(ITP)的标准差异较大,使临床试验结果难以互比,也给临床实践带来不便。为解决此问题,ITP国际工作组于2007年召开会议,就ITP的命名、定义、分期以及严重度分级、预后和疗效标准等达成一些新共识。随着新的治疗药物问世,ITP治疗也取得显著进步。利妥昔单抗是一种抗CD20单克隆抗体,可清除能产生自身抗体的B淋巴细胞,因其疗效高和安全性好,现已在ITP中广为应用。最近研究表明,血小板生成减少可能与ITP发生有关。因此,新的血小板生成刺激剂,如血小板生成素受体激动剂Rom iplostim和E ltrombopag已成为治疗ITP的新选择。 展开更多

关键词 特发性血小板减少性紫癜 诊断 治疗 抗CD20单克隆抗体 血小板生成刺激剂

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