抗CD3单抗和rIL-2共刺激诱生扩增人CD3AK的实验研究Ⅴ CD3AK介导的MHC非限制性溶瘤作用的机制分析 被引量：7

1

作者 施广霞 钱振超 +2 位作者 程一櫂 郭连英 王艳 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第4期269-269,共1页

MHC(Major histocompatibility complex，MHC)Ⅰ类抗原缺失是一些肿瘤细胞逃逸抗原特异性CTL攻击的重要机制。CTL能否通过MHC非限制性，MHC Ⅰ类非依赖性机制杀伤肿瘤细胞是值得深入探讨的。我们用抗CD3单抗和rIL-2共刺激法诱导的CD3AK... MHC(Major histocompatibility complex，MHC)Ⅰ类抗原缺失是一些肿瘤细胞逃逸抗原特异性CTL攻击的重要机制。CTL能否通过MHC非限制性，MHC Ⅰ类非依赖性机制杀伤肿瘤细胞是值得深入探讨的。我们用抗CD3单抗和rIL-2共刺激法诱导的CD3AK作为效应细胞，研究了CD3AK对两株MHC Ⅰ类阴性肿瘤细胞株K562和Daudi杀伤作用， 展开更多

关键词 MHC cd3AK RIL-2 共刺激 抗cd3单抗 CTL 介导 扩增 抗原特异性 K562

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可溶性卵巢癌抗原和抗CD3单抗共同激活的杀瘤性细胞的实验研究 被引量：4

2

作者 张庆波 李艳芬 +4 位作者 陈金栋 石卫 翟红 万云霞 陈毓仙 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第4期262-262,共1页

为了探讨在肿瘤的过继细胞免疫治疗过程中，如何诱导产生大量的对肿瘤细胞具有高杀伤活性的细胞，我们用可溶性卵巢癌抗原和抗CD3单克隆抗体共同诱导刺激外周血单个核细胞(PBMC)，在含IL-2的培养液中培养增殖，我们称这种细胞为肿瘤抗... 为了探讨在肿瘤的过继细胞免疫治疗过程中，如何诱导产生大量的对肿瘤细胞具有高杀伤活性的细胞，我们用可溶性卵巢癌抗原和抗CD3单克隆抗体共同诱导刺激外周血单个核细胞(PBMC)，在含IL-2的培养液中培养增殖，我们称这种细胞为肿瘤抗原共同激活的杀伤细胞（TAK细胞)。培养5—6天时， 展开更多

关键词 卵巢癌 抗原 抗cd3单抗 激活 肿瘤 诱导 可溶性 培养液

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抗CD3单抗和rIL-2共刺激诱生扩增人CD3AK的实验研究Ⅳ抗CD3单抗和rIL-2共刺激诱导的PBL增殖与凋亡共存现象 被引量：6

3

作者 施广霞 程一櫂 钱振超 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第4期268-269,共2页

抗CD3单抗TCR／CD3复合物中的CD3分子相互作用，通过信号传导系统引起T细胞功能的不同变化，如诱导T细胞活化增殖，诱导无反应性(unresponsiveness)和细胞凋亡。但抗CD3单抗这几种性质不同，看似矛盾的作用之间有何内在联系及规律是值... 抗CD3单抗TCR／CD3复合物中的CD3分子相互作用，通过信号传导系统引起T细胞功能的不同变化，如诱导T细胞活化增殖，诱导无反应性(unresponsiveness)和细胞凋亡。但抗CD3单抗这几种性质不同，看似矛盾的作用之间有何内在联系及规律是值得深入探讨的。 展开更多

关键词 抗cd3单抗 诱导 增殖 RIL-2 共刺激 cd3AK 凋亡 分子相互作用 扩增 共存

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抗CD3单抗和rIL-2共刺激诱生扩增人CD3AK的实验研究Ⅰ 抗CD3单抗和rIL-2共刺激对PBMC的激活作用 被引量：2

4

作者 施广霞 程一櫂 +2 位作者 郭连英 王艳 钱振超 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第4期267-267,共1页

本实验结果表明采用抗CD3单抗和rIL-2共刺激外周血单个核细胞(Peripheral blood mononueleacells，PBMC)可诱导其增殖、活化、分化为具有杀瘤活性的抗CD3单克隆抗体激活的杀伤细胞 (Anti CD3 monoclcnal anybody activated killer cells... 本实验结果表明采用抗CD3单抗和rIL-2共刺激外周血单个核细胞(Peripheral blood mononueleacells，PBMC)可诱导其增殖、活化、分化为具有杀瘤活性的抗CD3单克隆抗体激活的杀伤细胞 (Anti CD3 monoclcnal anybody activated killer cells．CD3AK)。(1)抗CD3单抗和rIL-2共刺激可诱导PBMC增殖， 展开更多

关键词 RIL-2 共刺激 PBMC 抗cd3单抗 cd3AK 增殖 诱导 激活作用 扩增 分化

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抗CD3单抗和rIL-2共刺激诱生扩增人CD3AK的实验研究Ⅱ CD3AK的免疫生物学特征 被引量：2

5

作者 施广霞 程一櫂 +3 位作者 郭连英 王艳 于丽华 钱振超 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第4期267-268,共2页

本实验采用倒置显微镜、光学显微镜、电子显微镜和荧光激活的细胞分类器(FACS)分析了抗CD3单抗和rIL-2共刺激诱生扩增的人CD3AK的免疫生物学特征。经抗CD3单抗和rIL-2共刺激后细胞形态学发生明显的变化，细胞异型性明显，有些体积增大... 本实验采用倒置显微镜、光学显微镜、电子显微镜和荧光激活的细胞分类器(FACS)分析了抗CD3单抗和rIL-2共刺激诱生扩增的人CD3AK的免疫生物学特征。经抗CD3单抗和rIL-2共刺激后细胞形态学发生明显的变化，细胞异型性明显，有些体积增大，呈圆形或不规则形，往往形成集落：有些细胞体积变小。 展开更多

关键词 RIL-2 共刺激 抗cd3单抗 cd3AK 免疫生物学 扩增 实验研究 细胞体积 异型 荧光

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抗CD3单抗和rIL-2共刺激诱生扩增人CD3AK的实验研究Ⅲ CD3AK与常规LAK细胞的比较 被引量：1

6

作者 施广霞 程一櫂 +2 位作者 郭连英 王艳 钱振超 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第4期268-268,共1页

抗CD3单抗激活的杀伤细胞(Anti-CD3 monoclonal antibody activated killer cells．CD3AK)是用抗CD3单抗(Anti-monoclonal antibody，Anti-CD3 mAb)激活的一类杀伤细胞，具有较强的增殖能力和细胞毒活性。在CD3AK诱生扩增过程中除抗CD3... 抗CD3单抗激活的杀伤细胞(Anti-CD3 monoclonal antibody activated killer cells．CD3AK)是用抗CD3单抗(Anti-monoclonal antibody，Anti-CD3 mAb)激活的一类杀伤细胞，具有较强的增殖能力和细胞毒活性。在CD3AK诱生扩增过程中除抗CD3单抗外也需要rIL-2作为生长因子，这就提出一个问题。 展开更多

关键词 抗cd3单抗 cd3AK RIL-2 共刺激 LAK细胞 扩增 杀伤细胞 增殖能力 生长因子 激活

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抗CD4单抗增强抗CD3单抗/IL-2活化的肿瘤特异性T细胞的抗瘤活性 被引量：9

7

作者 黄辉 俞红 +2 位作者 熊思东 林云璐 秦慧莲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期160-163,共4页

目的探讨抗CD4mAb增强抗CD3mAb刺激的肿瘤特异性T细胞增殖和杀瘤活性的作用。方法将肿瘤细胞免疫的小鼠脾细胞,采用4种不同的方案培养1单独加2×104U/LrIL2IL2组2单独加抗CD3mAb抗CD3组3加抗CD3mAb48h后,再加入抗CD3mAb和2×... 目的探讨抗CD4mAb增强抗CD3mAb刺激的肿瘤特异性T细胞增殖和杀瘤活性的作用。方法将肿瘤细胞免疫的小鼠脾细胞,采用4种不同的方案培养1单独加2×104U/LrIL2IL2组2单独加抗CD3mAb抗CD3组3加抗CD3mAb48h后,再加入抗CD3mAb和2×104U/LrIL2抗CD3+IL2组4同时加抗CD3mAb和抗CD4mAb48h后,再加入抗CD3mAb、抗CD4mAb和2×104U/LrIL2抗CD3+IL2+抗CD4组。然后分别检测4组效应细胞的增殖水平、杀瘤活性及表型。结果抗CD3+IL2组细胞的3HTdR掺入量在第6,12和20d分别为:22045、13986和1931;抗CD3+IL2+抗CD4组细胞的3HTdR掺入量在第6、12和20d,分别为46193、31047和7443,后者明显高于前者P0.05。在培养12d时,抗CD3+IL2组的细胞对FBL3细胞株的最大杀伤率为83.6%;抗CD3+IL2+抗CD4组细胞的最大杀伤率为91.7%。细胞表型:FACS分析表明,抗CD3+IL2+抗CD4组培养12d的细胞,99%以上为Thy1.2+细胞,且CD4+、CD25+细胞的百分率均高于抗CD3+IL2组。结论抗CD4mAb对抗CD3mAb刺激、IL2诱导的肿瘤特异性T细胞的增殖和杀瘤活性具有增强作用。 展开更多

关键词 抗cd4单抗 抗cd3单抗 肿瘤特异性T细胞 肿瘤过继疗法 免疫疗法

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抗CD3和抗CD28单抗对淋巴细胞产生RANTES的影响

8

作者 顾晓 唐孝达 +5 位作者 顾沈阳 杨尚琪 周佩军 徐达 王祥慧 谭建明 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第6期546-548,共3页

目的 探讨CD28共刺激通路活化对淋巴细胞产生RANTES的影响与意义,以及免疫抑制剂CsA对RANTES产生的抑制作用。方法 分离健康人外周静脉血中的淋巴细胞。实验分为4组:抗CD3mAb刺激组,抗CD28mAb刺激组,抗CD3mAb+抗CD28mAb共刺激组(CD28共... 目的 探讨CD28共刺激通路活化对淋巴细胞产生RANTES的影响与意义,以及免疫抑制剂CsA对RANTES产生的抑制作用。方法 分离健康人外周静脉血中的淋巴细胞。实验分为4组:抗CD3mAb刺激组,抗CD28mAb刺激组,抗CD3mAb+抗CD28mAb共刺激组(CD28共刺激组),未加任何刺激作为对照组。PDTC和CsA以不同终浓度干预CD28共刺激组。采用ELISA方法测定培养上清中RANTES含量,流式细胞术检测淋巴细胞CD25和CCR5表达率。结果 培养48h后,CD28共刺激组RANTES产生显著增加(P<0.05);不同剂量PDTC和CsA对CD28共刺激后淋巴细胞产生RANTES均具有抑制作用;CD28共刺激后淋巴细胞CD25表达率显著增高(P<0.05),而CCR5表达率显著降低(P<0.05)。结论 CD28通路共刺激后淋巴细胞产生RNATES显著增加,这一效应受到NF-κB信号通路的调控。淋巴细胞产生RANTES及其对RANTES的反应均受到CD28共刺激信号调控。抑制淋巴细胞产生RANTES可能是CsA发挥作用的重要分子免疫学机制。 展开更多

关键词 抗cd3单抗 抗cd28单抗 淋巴细胞 RANTES 免疫抑制剂 信号通路 趋化因子

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抗CD_3单抗增强激活骨髓抗白血病效应的研究

9

作者 刘子玲 王冠军 易永林 《白求恩医科大学学报》 CSCD 1999年第6期719-720,共2页

目的：为了研究增强ｒＩＬ－ ２ 激活的骨髓细胞（激活骨髓ＡＢＭ）的抗白血病效应。方法：应用抗ＣＤ３ 单抗与ｒＩＬ－ ２ 联合作用体外激活骨髓细胞，采用ＭＴＴ比色分析法测定不同条件下ＡＢＭ杀伤肿瘤细胞活性。结果：ｒＩＬ－ ２... 目的：为了研究增强ｒＩＬ－ ２ 激活的骨髓细胞（激活骨髓ＡＢＭ）的抗白血病效应。方法：应用抗ＣＤ３ 单抗与ｒＩＬ－ ２ 联合作用体外激活骨髓细胞，采用ＭＴＴ比色分析法测定不同条件下ＡＢＭ杀伤肿瘤细胞活性。结果：ｒＩＬ－ ２、抗ＣＤ３ 单抗＋ ｒＩＬ－ ２ 体外诱导３ ｄ 的ＡＢＭ 杀伤活性分别为５６．４％ ±９．０％ ，６５．８％ ±９．２％ ，两组相比差异显著（Ｐ＜ ０．０１）；体外诱导７ ｄ 细胞增殖倍数分别为３．７，６．０ 倍。结论：在合理的诱导条件下，能够增强ＡＢＭ 的杀伤活性，扩大ＡＢＭ 的增殖效应。 展开更多

关键词 激活骨髓 抗cd3单抗 白血病

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小剂量抗CD3单克隆抗体有效逆转新发的Ⅰ型糖尿病 被引量：2

10

作者 陈宇 陈国江 +2 位作者 韩根成 王建安 黎燕 《中国比较医学杂志》 2008年第4期47-50,F0003,共5页

目的验证抗CD3单克隆抗体治疗自身免疫病如Ⅰ型糖尿病的可行性,并对机理进行初步探讨。方法以Ⅰ型糖尿病动物模型-非肥胖性糖尿病(nonobese diabetic,NOD)小鼠为研究对象,将新发病的小鼠随机分为治疗组和对照组,分别给予抗CD3抗体和对... 目的验证抗CD3单克隆抗体治疗自身免疫病如Ⅰ型糖尿病的可行性,并对机理进行初步探讨。方法以Ⅰ型糖尿病动物模型-非肥胖性糖尿病(nonobese diabetic,NOD)小鼠为研究对象,将新发病的小鼠随机分为治疗组和对照组,分别给予抗CD3抗体和对照抗体,剂量均为5μg/d×5d,监测血糖观察糖尿病的逆转情况。结果经短期小剂量CD3单抗治疗,到第9周时,75%的小鼠的血糖恢复至正常。维持时间超过30周,胰岛形态亦得到了明显改善。CD3单抗的这种效应并不是由于清除T细胞引起免疫抑制所致,而是诱导产生了胰岛β细胞特异性的免疫耐受。结论小剂量抗CD3单克隆抗体治疗可有效逆转新发的Ⅰ型糖尿病。 展开更多

关键词 抗cd3单抗 Ⅰ型糖尿病 NOD小鼠 特异性免疫耐受

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抗人CD3人/鼠嵌合抗体基因的构建

11

作者 杨治华 李以莞 +6 位作者 沈德诚 田海梅 刘向阳 刘宝印 李洁 段世利 佘鸣 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第2期108-113,共6页

为了降低鼠源抗人CD3单抗的免疫原性,增加其在人体内的生物活性及治疗作用,使该抗体能更广泛更有效地长期多次用于人体治疗肿瘤、器官移植排斥反应及自身免疫性疾病.本文采用PCR技术从分泌抗CD3单抗的杂交瘤细胞HIT3a的mRNA中分离克隆... 为了降低鼠源抗人CD3单抗的免疫原性,增加其在人体内的生物活性及治疗作用,使该抗体能更广泛更有效地长期多次用于人体治疗肿瘤、器官移植排斥反应及自身免疫性疾病.本文采用PCR技术从分泌抗CD3单抗的杂交瘤细胞HIT3a的mRNA中分离克隆了抗体的轻重链可变区基因的cDNA.以此轻重链可变区cDNA为特异探针从HIT3a基因文库中分离带有调控序列的功能性轻重链可变区基因;并将其插入到含有人κ轻链及人γ1重链恒定区基因的哺乳动物表达载体中成功地构建了抗人CD3人/鼠轻重链嵌合抗体基因,为研制人抗CD3人/鼠嵌合抗体完成了关键性的第一步. 展开更多

关键词 抗人cd3 嵌合抗体 基因 肿瘤 治疗 抗cd3单抗 人体内 重链可变区 DNA 表达载体

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基因工程抗体的研究 被引量：2

12

作者 黄华梁 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第2期142-144,共3页

本文综述了本实验室近年来在基因工程抗体方面所做的工作:①从杂交瘤细胞基因组中筛选和鉴定出抗乙型脑炎病毒单克隆抗体的重链、轻链可变区基因,构建成人—鼠嵌合基因并在骨髓瘤细胞中表达出抗乙型脑炎病毒的人-鼠嵌合抗体;②根据文献... 本文综述了本实验室近年来在基因工程抗体方面所做的工作:①从杂交瘤细胞基因组中筛选和鉴定出抗乙型脑炎病毒单克隆抗体的重链、轻链可变区基因,构建成人—鼠嵌合基因并在骨髓瘤细胞中表达出抗乙型脑炎病毒的人-鼠嵌合抗体;②根据文献中抗CD3单抗的序列,进行了分子设计,设计出改形抗体的分子序列,用合成和PCR补齐的方法构建了改形的单域抗体(V_H)表达载体,并在大肠杆菌中表达;③构建了外分泌型-附着型的表达单链抗体的表达载体;④克隆和测序了抗人肺腺癌、膀胱癌、CD3的单抗重、轻链可变区基因,并正在构建鼠的抗体库. 展开更多

关键词 基因工程抗体 轻链可变区 乙型脑炎病毒 表达载体 人-鼠嵌合抗体 抗cd3单抗 人肺腺癌 分子序列 杂交瘤细胞 基因组

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不同刺激物对细胞因子诱导的杀伤细胞分泌细胞因子的影响 被引量：4

13

作者 李静 王菲 +5 位作者 刘艳芬 王丽萍 许钰杰 王盟 张斌 张毅 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第2期166-168,共3页

目的:探讨抗CD3单抗联合不同浓度的抗CD28单抗对细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞细胞因子分泌的影响。方法:取6例肿瘤患者的外周血,分离、诱导培养,获取CIK细胞。CIK细胞成熟后用1.0 mg/L抗CD3单抗分别联合0.5、1.0、2.5 mg/L抗CD28单抗进... 目的:探讨抗CD3单抗联合不同浓度的抗CD28单抗对细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞细胞因子分泌的影响。方法:取6例肿瘤患者的外周血,分离、诱导培养,获取CIK细胞。CIK细胞成熟后用1.0 mg/L抗CD3单抗分别联合0.5、1.0、2.5 mg/L抗CD28单抗进行活化,使用ELISA方法检测细胞因子IFN-γ、IL-10、IL-2、TNF-α的分泌水平,并用胞内细胞染色法检测CD3+CD8+T细胞中IFN-γ、穿孔素的表达水平。以50μg/L佛波酯联合750μg/L离子霉素共刺激的CIK细胞作对照。结果:抗CD3单抗联合不同浓度抗CD28单抗组CIK细胞IFN-γ、IL-10、IL-2、TNF-α分泌水平和胞内穿孔素表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:抗CD3单抗联合不同浓度抗CD28单抗共刺激对CIK细胞细胞因子的分泌无影响,临床上可选择1.0 mg/L抗CD3单抗联合0.5 mg/L抗CD28单抗活化淋巴细胞。 展开更多

关键词 抗cd3单抗 抗cd28单抗 细胞因子 细胞因子诱导的杀伤细胞

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一种人外周血NK细胞高效扩增的方法 被引量：2

14

作者 黄朝晖 王丰 +3 位作者 华东 刘志辉 李莉华 任金冬 《江南大学学报（自然科学版）》 CAS 2003年第3期324-326,共3页

目的 探索从人PBMC中高效扩增CD3^- CD56^+NK细胞的方法。方法 使用干细胞生长培养基,在抗CD3单抗和IL-2的作用下,从健康成人PBMC中诱导扩增CD3^- CD56^+NK细胞,并用流式细胞仪检测扩增细胞的免疫表型。结果 PBMC经抗CD3单抗、IL-2联合... 目的 探索从人PBMC中高效扩增CD3^- CD56^+NK细胞的方法。方法 使用干细胞生长培养基,在抗CD3单抗和IL-2的作用下,从健康成人PBMC中诱导扩增CD3^- CD56^+NK细胞,并用流式细胞仪检测扩增细胞的免疫表型。结果 PBMC经抗CD3单抗、IL-2联合作用获得大量增殖,在14d时扩增54.3±5.5倍,含有(52.4±7.9)％CD3^- CD56^+NK细胞。结论 可使用干细胞生长培养基,在抗CD3单抗和IL-2协同刺激下大量扩增NK细胞,为应用NK细胞进行肿瘤过继免疫治疗提供了一种简单有效的扩增NK细胞的方法。 展开更多

关键词 NK细胞 抗cd3单抗 白介素—Ⅱ 过继免疫治疗

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细胞因子诱导的自然杀伤细胞培养体系的评价

15

作者 王娟 桑圣刚 郝新宝 《海南医学院学报》 CAS 2011年第3期302-304,共3页

目的:评价采用γ-干扰素(IFNγ-)、白介素-2(IL-2)、抗CD3单抗3因子对外周血来源的CIK细胞培养的效果。方法:采集17例实体肿瘤患者的外周血,分离单个核细胞培养,于培养第1天加入重组人IFN-γ,第2天加入抗人CD3单抗、重组人IL-2,隔天半... 目的:评价采用γ-干扰素(IFNγ-)、白介素-2(IL-2)、抗CD3单抗3因子对外周血来源的CIK细胞培养的效果。方法:采集17例实体肿瘤患者的外周血,分离单个核细胞培养,于培养第1天加入重组人IFN-γ,第2天加入抗人CD3单抗、重组人IL-2,隔天半量换培养液并添加人重组IL-2以维持其浓度,培养21 d收获细胞。于培养第1、7、14、21天进行细胞计数,同时于培养第1、8、14、21天测定细胞免疫表型。结果:细胞因子共刺激2～3 d即出现细胞集落,14 d后CIK细胞总数达(6～17)×109/L,较培养前扩增47～150倍,细胞存活率大于95%;具有免疫表型CD3+、CD4+、CD8+和CD3+CD56+细胞的平均值分别从培养前的(65.1±1.9)%、(36.9±0.8)%、(28.5±3.1)%、(1.8±0.4)%增加到培养第21天的(89.6±2.1)%、(50.1±1.9)%、(57.2±2.5)%、(36.1±4.2)%。结论:按照上述方法培养的CIK细胞在体外扩增率高,方法可行,CIK细胞在体外培养到14～21 d,CD3+CD56+呈现高表达,此时期适宜应用于临床治疗,且患者自体外周血易获得、整个培养过程简便,值得临床应用推广。 展开更多

关键词 细胞因子诱导的自然杀伤细胞 细胞培养 Γ-干扰素 白介素-2 抗cd3单抗

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